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Histología Veterinaria Aplicada - Willan J. Banks
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La HISTOLOGÍA (histós "tejido" y logía, ‘’tratado, estudio, ciencia’’)es la ciencia que estudia todo lo relacionado con los tejidosorgánicos: su estructura microscópica, su desarrollo y sus funciones.
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La histología moderna (anatomía microscópica) es una cienciarefinada dirigida al estudio de la estructura y función de los tejidosdesde los mas diversos enfoques multidisciplinarios.
• Anatomía• Fisiología• Química• Bioquímica • Física• Microscopia• Histoquímica• Citoquímica
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• Relación con el avance tecnológico de otras disciplinas.
• La histología se basa en la implementación de métodos o técnicasque permiten estudiar tanto células vivas como muertas yresolver problemas.
• Microscopia Ej: contraste de fase o campo oscuro• Cámaras transparentes de observación• Colorantes vitales y supravitales• Cultivos celulares
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TÉCNICAS DE INCLUSIÓN EN PARAFINA: es el método máscomún de endurecer el tejido y consiste en infiltrar la muestra consustancias líquidas que tras un proceso de polimerización oenfriamiento se solidifican, sin afectar a las características del tejido.
• Obtención de muestras• Fijación• Deshidratación y aclarado• Inclusión • Obtención de cortes• Tinción y montaje
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La tinción tiene como objetivo mostrar las estructuras de la célula,según el colorante se tiene un estructura diferente
• Colorantes ácidos y básicos• Hematoxilina y eosina• Tinción de romanowsky• Tinción de acido peryodico
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Son muchos los enfoques técnicos que se deben cumplir paraobtener la información. La información que se obtiene es limitadapor el tipo por el enfoque técnico que se escoja.
• Técnicas Citológicas (estructuras de poca importancia)• Técnicas de congelación (alteración morfología y función)• Histoquímica y citoquímica (identificación de sustancias en las
células y tejidos)• Técnicas de metacrilato• Autorradiografia• Inmunohistoquímica ( Ag - isotiocianato de fluorescencia)• Microscopia electrónica (trancision – barrido)• Microscopia óptica (campo oscuro, contraste, fluorecencia)• Congelado y fractura (replicas metálicas de los tejidos)
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• Técnicas Citológicas: citologia la rama de la biología que estudia las células enlo que concierne a su estructura, sus funciones y su importancia en lacomplejidad de los seres vivos. (estructuras de poca importancia)
Técnicas de congelación (alteración morfología y función)- técnica de liofilizacion(La liofilización es un proceso en el que se congela el producto -170°C yposteriormente se introduce en una cámara de vacío para realizar la separacióndel agua por sublimación)
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• Histoquímica y citoquímica (identificación de sustancias en las células ytejidos)
Citoquímica: rama de la biologíacelular enfocada en el estudio de lacomposición química de las células ysus procesos biológicos molecularesmediante análisis químicos yquimicofísicos que permitan suobservación.
Histoquímica: "Conjunto de técnicasque permiten la identificación ,localización y cuantificación de unasustancia en un tejido o en unacélula".
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• Autorradiografia: Imagen obtenida sobre una placafotográfica por la aplicación de un corte de tejidoquecontiene un cuerpo radiactivo: éste, por su radiación,impresiona la placa y revela así sudistribución en el tejido
• Inmunohistoquímica (Ag - isotiocianato de fluorescencia);procedimiento histopatológico que se basa en la utilizaciónde un anticuerpo específico, marcado mediante un enlacequímico con una enzima aplicado a una muestra de tejidoorgánico, correctamente fijada e incluida en parafina.
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Congelación - fractura Autorradiografia
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Es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacervisible los objetos de estudio que por su pequeñez estánfuera del rango de resolución del ojo normal.
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El tamaño de las células implica el uso de aparatos quepermitan aumentar al imagen de las muestras paradiscriminar estructuras tisulares diminutas como son lascélulas o sus compartimentos. Estos aparatos se llamanmicroscopios.
• Hay dos tipos de microscopios: los ópticos y los electrónicos.
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Los microscopios ópticos, o de campo claro, ultilizan la luz visible y lentes de cristal que permiten un aumento de las muestras de unas 1000 veces, con un poder de resolución de unos 0,2 micrómetros.
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Los microscopios ópticos ; Modificaciones
Contraste de fase. necesita de objetivos especiales y se basa en ligero retraso que sufre la luz cuando pasa por unas estructuras tisulares en función de la densidad. Se emplea para ver muestras sin teñir o acuosas, así como células vivas, por ejemplo en tejidos celulares.
Campo oscuro. Consiste en la incorporación de un objeto opaco bajo el condensador, entre la fuente luminosa y la sección de tejido. Este objeto sólo deja pasar la luz más lateral que incidirá sobre la muestra de forma oblicua, allí donde no haya tejido aparecerá obscuro.
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FLUORESCENCIA
El microscopio de fluorescencia se usa para observar sustancias fluorescentesdenominadas fluoróforos.
• Los fluoróforos se utilizan como marcadores para la detección de otras moléculas tisulares
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Los MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS se basan en la alta frecuencia de los
electrones para conseguir un poder de resolución de 1 nanometro. Se usan paraobservar la ultraestructura de la célula y los tejidos, es decir, para estudiar el nivelsubcelular, como orgánulos, membranas u organizaciones moleculares (porejemplo, se pueden observar los ribosomas).
Hay dos tipos de microscopios electrónicos: losde transmisión, que se usan para estudiar laultraestructura membranosa y molecular de lacelula, y el de barrido, que permite estudiarsuperficies.
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Microscopio electrónico de transmisión
En este tipo de microscopio se produce el haz de electrones en un filamento detungsteno, que funciona como cátodo. Los electrones se condensan medianteelectroimanes y se focalizan sobre una sección de tejido.
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Microscopio electrónico de barrido.
Los microscopios electrónicos de barrido sirven para observar superficies tisulares. Elloes posible porque los electrones no atraviesan la muestra sino que interaccionan con susuperficie.
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• Exámenes de especímenes (observación macroscópica de órganos)
• Color y morfología (importancia de la morfología)
• Cortado y morfología
• Artefactos histológicos (manejo)
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• Banks, J. (1996). Histología veterinaria aplicada.
El manual moderno S.A; México D.F.
• http://webs.uvigo.es/mmegias/inicio.html
• http://es.wikipedia.org/wiki/Histolog%C3%ADa
BIBLIOGRAFÍA
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