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Integrantes:• Aulestia Carla• Cadena
Sandra• Galeas Paúl• Guerrero Carol• Ocaña Eder• Pazmiño
Estéfani• Pita Gabriela
Curso: Séptimo semestre
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Aislamiento e Identificación de microorganismos patógenos en la elaboración de Queso fresco en una EMPRESA ARTESANAL
Proyecto de Microbiología de los Alimentos
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Microorganismo Características Contaminación
Staphylococcus
Aureus
Gram (+), anaerobio facultativo, ubicua,
presente en animales sanos (piel) y
enfermos (ubres), termoresistente.
Exógena
Bacillus Céreus
Bacilo Gram (+), anaerobio facultativo,
móvil, formador de esporas, catalasa (+),
ubicuo.
Exógena
Salmonella
Bacilo Gram (-), anaerobio facultativo,
oxidasa (-), catalasa (+), lactosa y
sacarosa (+), glucosa (+) con producción
de gas.
Endógena y
Exógena
(zoonosis)
Escherichia Coli
Bacilo Gram (-), anaerobio facultativo.
Habitante gastrointestinal.Serotipos
distintos. portadores sintomáticos y
asintomáticos.
Endógena y
Exógena
(zoonosis)
Listeria
Monocytogenes
Bacilos o coco – bacilos Gram (+),
anaerobio facultativo y no esporulado.Endógena (Zoonosis)
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Proceso Patógenos
1. Recepción de Materia Prima
Listeria Monocytogenes Salmonella
Bacillus cereus Campylobacter jejuni
Staphilococcus AureusYersinia Enterocolìtica
Escherichia coli
2. Pruebas de ANDEN
Listeria monocytogenes Salmonella spp Bacillus cereus
Staphylococcus aureusYersinia enterocolitica
Escherichia coli
3. Filtración
Listeria Monocytogenes Salmonella spp Bacillus cereus
Yersinia enterocolitica Staphylococcus aureus
Escherichia coli
INICIO
1. Recepción MP
2. Pruebasde ANDEN
3. Filtración impurezas
2 a 6 ºC
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4. Pasteurización
Listeria MonocytogenesSalmonella spp
Bacillus cereus (espora)Campilobacter jejuni
Staphilococcus aureusYersinia enterocolitica
Escherichia coli
5. Inoculación
Listeria MonocytogenesSalmonella sppEscherichia coli
Staphylococcus aureusBacillus cereus (espora)
6. Coagulación enzimática
Listeria MonocytogenesSalmonella sppEscherichia coli
Staphylococcus aureusBacillus cereus (espora)
4. Pasteurización
Cultivo láctico 1%
6. Coagulaciónenzimática
20-25 g/100L CaCl2 y cuajo (de acuerdo a las especificaciones
del producto)
72 º C por 15 seg enfriar hasta 20 ºC (Pasteurización rápida)
25 a 30 ºC (20min)
33-34° C (30-40 min)
5. Inoculación
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7. Corte
Listeria MonocytogenesSalmonella sppEscherichia coli
Staphylococcus aureusBacillus cereus (espora)
8. Reposo Listeria MonocytogenesSalmonella sppEscherichia coli
Staphylococcus aureusBacillus cereus (espora)
9. Agitación ListeriaMonocytogenesSalmonella sppEscherichia coli
Staphylococcus aureusBacillus cereus (espora
10. Desuerado ListeriaMonocytogenesSalmonella sppEscherichia coli
Staphylococcus aureusBacillus cereus (espora)
7. Corte
8. Reposo
9. Agitación
suero
1 cm
5 min
5 a 10 min
33-34 º C (45 min)
10. Desuerado
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11. Moldeado
ListeriaMonocytogenesSalmonella sppEscherichia coli
Staphylococcus aureusBacillus cereus (espora)
12. Prensado
ListeriaMonocytogenesSalmonella sppEscherichia coli
Staphylococcus aureusBacillus cereus (espora)
13. Salado
ListeriaMonocytogenesSalmonella sppEscherichia coli
Staphylococcus aureusBacillus cereus (espora)
11. Moldeado
16-20 % NaCl3 a 5 horas
33 a 34 ºCprensados a 100 PSI en una prensa hidráulica por un periodo de 48 horas
suero12. Prensado
suero12. Prensado
13. Salado
20 ºC
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14.Empacado
ListeriaMonocytogenesSalmonella sppEscherichia coli
Staphylococcus aureusBacillus cereus (espora)
15. Almacenado
ListeriaMonocytogenesSalmonella sppEscherichia coli
Staphylococcus aureusBacillus cereus (espora)
14. Empacado al vacío
15. Almacenado
FIN
4 a 8 ºC
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Contaminación endógena
Contaminación exógena
Muere en el proceso
Sobrevive
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Microorganismo Patógeno Técnica Justificación
Listeria monocytogenesMétodo oficial ambiental de
la AOAC
La composición del medio Oxford es selectiva para aislamiento e identificación de Listeria en productos lácteos.
Staphylococcus aureus Técnica del BAM
La composición del agar usado Baird Parker inhibe la flora acompañante favoreciendo selectivamente el crecimiento S. aureus.
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Microorganismo Patógeno Técnica Justificación
Escherichia Coli
Determinación cualitativa (técnica de Mossel)
Determinación Cuantitativa (placas petrifilm)
La utilización de placas de petrifilm asegura el crecimiento de colonias de E.coli y coliformes. La composición del medio contiene indicadores selectivos que permite diferenciar entre E. coli y coliformes permitiendo a su vez un correcto contaje.
Bacillus cereus
FDA/BAM Bacteriological Analytical Manual, On lineMétodo horizontal para el
recuento de Bacillus cereusRecuento en placa
Cuantitativo
Debido a que la técnica utiliza el medio selectivo lo que nos proporciona resultados más
confiables.
Salmonella sppTécnica del BAM
La inexistencia de un método específico para salmonella en productos lácteos nos lleva a
utilizar esta técnica
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PATÓGENOSMateria prima (leche cruda)
Leche pasteurizada
Producto final-queso
Staphylococus aureus 103ufc/g AusenciaINEN 1529
Queso 100 ufc/g
Listeria Monocytogenes ausencia Ausencia Ausencia
Eschericha coliINEN 1529 Leche cruda 1000ufc/g
AusenciaINEN 1529
Queso 100 – 500 ufc/g
SalmonellaINEN 1529 Leche cruda 0 ufc/25g
Ausencia Ausencia
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![Page 33: Presentacion de analisis de riesgo en un queso fresco](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022050904/546b419faf795953298b4a52/html5/thumbnails/33.jpg)
BACTERIA MEDIO RESULTADOS
Estafilococos aureus
Agar Baird ParkerColonias negras, convexas, diámetro de 1-5mm, con borde blanquecino ( presencia de halo)
Hubo poca cantidad de estafilococos aureus pero de las posibles colonias se confirmo mediante la prueba de coagulasa la cual salió positiva
Escherichia coliPetrifilm: Colonias azules o violetas con presencia de gas
Se confirmo crecimiento de E. coli
Salmonella
Agar XLD Colonias negras sin centro negro.Colonias ligeramente amarillas
La presencia de colonias negras da positivo a salmonellaEl crecimiento de las colonias amarillas es posiblemente aeromonas, serratia y otras enterobacterias que crecen en el mismo medio.
Listeria monocytogenes
Agar OxfordColonias gris azuladas con presencia de precipitación de color negro y el medio se torna un poco negro
Presencia positiva de listeria monocytogenes
Estafilococos epidermis
Agar Baird Parker: Colonias grandes negras, forma irregular.
Se realizo la misma prueba de coagulasa dando negativo.
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![Page 35: Presentacion de analisis de riesgo en un queso fresco](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022050904/546b419faf795953298b4a52/html5/thumbnails/35.jpg)
![Page 36: Presentacion de analisis de riesgo en un queso fresco](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022050904/546b419faf795953298b4a52/html5/thumbnails/36.jpg)
![Page 37: Presentacion de analisis de riesgo en un queso fresco](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022050904/546b419faf795953298b4a52/html5/thumbnails/37.jpg)
![Page 38: Presentacion de analisis de riesgo en un queso fresco](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022050904/546b419faf795953298b4a52/html5/thumbnails/38.jpg)
![Page 39: Presentacion de analisis de riesgo en un queso fresco](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022050904/546b419faf795953298b4a52/html5/thumbnails/39.jpg)
![Page 40: Presentacion de analisis de riesgo en un queso fresco](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022050904/546b419faf795953298b4a52/html5/thumbnails/40.jpg)
![Page 41: Presentacion de analisis de riesgo en un queso fresco](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022050904/546b419faf795953298b4a52/html5/thumbnails/41.jpg)
Tuvimos crecimiento de Estafilococos de dos especias Aureus y epidermidis
* Los que están en envueltos en rojo son Aureus
![Page 42: Presentacion de analisis de riesgo en un queso fresco](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022050904/546b419faf795953298b4a52/html5/thumbnails/42.jpg)
* Tomada de las colonias mas identificadas en las cajas de Agar Baird Parker
![Page 43: Presentacion de analisis de riesgo en un queso fresco](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022050904/546b419faf795953298b4a52/html5/thumbnails/43.jpg)
* Lo que esta señalado en celeste:Colonias negras crecidas a las 48 horas en Agar XLD
![Page 44: Presentacion de analisis de riesgo en un queso fresco](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022050904/546b419faf795953298b4a52/html5/thumbnails/44.jpg)
•Lo que esta señalado: Colonias Azules crecidas a las 48 horas en petrifilm para E.coliEl resto son colonias rojas de coliformes totales
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Colonias negras que crecen a las 48 hrs