Tinción NegativaObjetivo:
◦Realizar una tinción negativa.Principios:
◦ Una tinción negativa requiere el uso de un tinte ácido como lo es el India ink o nigrosina.
◦ La tinción acídica con el cromógeno cargado negativamente, no podría penetrar a la célula debido a la carga negativa en la superficie de la bacteria.
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Tinción NegativaPrincipios:
◦ Por lo tanto, las células no teñidas son fácilmente detectadas contra el fondo de color.
◦ La aplicación parcial de la tinción negativa es doble. Ya que no se requiere la fijación de calor y la célula no están sujetos a los efectos distorsionadores de los productos químicos y el calor, su tamaño natural y la forma pueden ser vistos.
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Tinción Negativa
Principios:- Además, es
posible observar bacterias que son difíciles de teñir , tales como algunos espirilos.
• Materiales:◦ Cultivo de 24 horas◦ Tinte ácidico
(nigrosina)◦ Mechero◦ “Loop” de
inoculación ◦ Bandeja de tinción ◦ Microscopio◦ Papel de lente◦ Porta objeto
Tinción Negativa
Procedimiento:◦Vierta una gota del tinte ácidico
cerca de uno de los extremos del lado limpio de la laminilla.
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Tinción Negativa
Procedimiento:◦Utilizando técnicas estériles, colocar
con el loop parte del cultivo de la bacteria en la gota del tinte y mezclar.
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Tinción Negativa◦Con el borde de la segunda laminilla
mantenga a un ángulo de 45 grados y colocado delante de la suspensión bacteriana, empujar la mezcla para formar una capa delgada.
◦Séquelo al aire (NO caliente)◦Examine en microscopio. 6
Tinción Negativa
7Bacillis
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Tinción de Cápsula
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Objetivos
• Conceptos básicos sobre la base química de la tinción de la cápsula.
• El procedimiento para distinguir el material cápsular de la célula bacteriana.
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Tinción de Cápsula
• Cápsula:• Es una capa gelatinosa externa que es secretada por
la célula que rodea y se adhiere a la pared celular.
• No es común en todos los organismos.
• Células con cápsula fuerte suelen ser más virulentos.
• Causan enfermedades.
• Están protegidos de la fagocitosis.
• cápsula:
• Se componen de azúcares y proteínas.
• No es vital, pueden tenerla como no pueden tenerla.
• La tinción de cápsula se denomina como una tinción negativa.
• Ya que se tiñe el fondo de la preparación y no el organismo.
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Tinción de Cápsula
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Tinción de Cápsula
• La tinción es muchos más difícil:
• El material de la cápsula es soluble en agua.
• El tinte puede ser removido por los lavados vigorosos.
• Se utilizan dos tintes:• Cristal Violeta: Célula y cápsula cogen el color oscuro.• Sulfato de Cobre: Sirve como agente de lavado,
despinta la cápsula y se fija a la cápsula. Se verá azul en contraste con el color violeta oscuro de la célula.
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Tinción de Cápsula
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Tinción de Cápsula
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Tinción de Cápsula
• Materiales:• Cultivo de 48 horas• Cristal violeta• Sulfato de Cobre 20%• Laminilla
• Procedimientos:
• En una laminilla limpia, coloque varias
gotas de cristal violeta.
◦ Mechero◦ Loop” de
inoculación ◦ Microscopio◦ Papel de lente◦ Porta objeto
• Procedimiento:• Utilizando técnicas asépticas
añada con el loop parte del
cultivo al tinte.
• Regar la muestra de forma
uniforme hasta quedar una
capa fina y déjelo de 5-7 min.
• Dejar secar al aire. NO FIJAR
POR CALOR
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Tinción de Cápsula (Método Antoni)
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Tinción de Cápsula (Método Antoni)
Lavar con sulfato de cobre al 20 %.
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Tinción de Cápsula (Método Antoni)
• Dejar secar el extendido al aire.
• Observar al microscopio bajo objetivo de
inmersión.
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Tinción de Cápsula (Método Antoni)
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