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BIOLOGÍA MOLECULARBIOLOGÍA MOLECULAR
Romina MartinelliRomina MartinelliMédica - T.S. en GenéticaMédica - T.S. en Genética
Mg. Biología Molecular MédicaMg. Biología Molecular Médica
Biología MolecularBiología Molecular
¿A qué se denominan ¿A qué se denominan técnicas de biología moleculartécnicas de biología molecular??Técnicas de laboratorio que se usan para extraer Técnicas de laboratorio que se usan para extraer ADNADN (ARN o (ARN o proteínas), proteínas), visualizarlovisualizarlo para ver su estado, para ver su estado, cortarlo y pegarlocortarlo y pegarlo (Ingeniería (Ingeniería genética), genética), amplificar una regiónamplificar una región en una enorme cantidad de moléculas en una enorme cantidad de moléculas (PCR - clonación), (PCR - clonación), corte de una determinada región con enzimas de corte de una determinada región con enzimas de restricciónrestricción para ver si por una mutación se gana o se pierde un sitio de para ver si por una mutación se gana o se pierde un sitio de restricción (análisis de mutaciones por RFLP o Restriction fragment restricción (análisis de mutaciones por RFLP o Restriction fragment lengt polymorphism) o lengt polymorphism) o secuenciarlosecuenciarlo..
Rama de la biología que está centrada en el Rama de la biología que está centrada en el análisis de los fenómenos biológicos a partir de análisis de los fenómenos biológicos a partir de la perspectiva de la estructura de las la perspectiva de la estructura de las moléculasmoléculas..
Biología MolecularBiología Molecular
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Amplificación: Amplificación: reacción en cadena de la polimerasareacción en cadena de la polimerasa
Amplificación: Amplificación: reacción en cadena de la polimerasareacción en cadena de la polimerasa
Amplificación: Amplificación: reacción en cadena de la polimerasareacción en cadena de la polimerasa
TermocicladorTermociclador
Amplificación: Amplificación: reacción en cadena de la polimerasareacción en cadena de la polimerasa
RT-PCRRT-PCR
Extracción de ácidos nucleicos de cortes histológicosExtracción de ácidos nucleicos de cortes histológicos
Por qué es importante?Por qué es importante?
La técnica mantiene la estructura del tejido e impide la putrefacción durante añosLa técnica mantiene la estructura del tejido e impide la putrefacción durante años
Es la técnica más usada para el guardado de tejidosEs la técnica más usada para el guardado de tejidos
Permite conservar el tejido a la espera de nuevas técnicas diagnósticasPermite conservar el tejido a la espera de nuevas técnicas diagnósticas
Existe gran cantidad de cortes que pueden ser utilizados en investigaciónExiste gran cantidad de cortes que pueden ser utilizados en investigación
Extracción de ácidos nucleicos de cortes histológicosExtracción de ácidos nucleicos de cortes histológicos
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Pero...Pero...
El formaldehído puede producir cross-linking que interfiera en los estudios a realizarse luego El formaldehído puede producir cross-linking que interfiera en los estudios a realizarse luego de la extracciónde la extracción
Los protocolos de rutina pueden aumentar la degradación y/o fragmentación de los ácidos Los protocolos de rutina pueden aumentar la degradación y/o fragmentación de los ácidos nucleicos nucleicos
El guardado de los tacos en malas condiciones condiciones puede llevar a la degradación de El guardado de los tacos en malas condiciones condiciones puede llevar a la degradación de los ácidos nucleicos los ácidos nucleicos
Extracción de ácidos nucleicosExtracción de ácidos nucleicos
Algunas soluciones...Algunas soluciones...
Desparafinización: es uno de los pasos más críticos ya que restos de parafina reducen Desparafinización: es uno de los pasos más críticos ya que restos de parafina reducen la calidad de la muestrala calidad de la muestra
Utilización de kits comercialesUtilización de kits comerciales
Utilización de amplicones más pequeños para RT-PCRUtilización de amplicones más pequeños para RT-PCR
Ajustar los protocolos para muestras de tamaño más pequeñoAjustar los protocolos para muestras de tamaño más pequeño