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S E N A , C e n t r o P a r a l a

F o r m a c i ó n C a f e t e r a

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Materiales y equipos de laboratorio

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MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO

Presentado Por: Luisa Fernanda Osorno

Diana Lorena Ochoa

José Alejandro Tunubala

Presentado a: Laura Patricia Bermeo

SENA, Regional Caldas

Manizales, Caldas

06/09/2015

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Tabla de contenido

1. ¿Qué es bioseguridad? ........................................................................................ 3

2. ¿Cuáles son las normas básicas de bioseguridad en un laboratorio de

microbiología? ............................................................................................................ 3

3. ¿Cuáles son los equipos utilizados en el laboratorio de microbiología?. ............. 7

4. Materiales de laboratorio e implementos. .......................................................... 11

5. Principales reactivos usados en el laboratorio usos y para qué sirven. ............. 18

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1. ¿Qué es bioseguridad?

La bioseguridad son las prácticas que tienen por objeto eliminar o minimizar el

factor de riesgo que puede llegar a afectar la salud o la vida de las personas o puede

contaminar el ambiente.

2. ¿Cuáles son las normas básicas de bioseguridad en un laboratorio de

microbiología?

Acceso

a) El símbolo y signo internacional de peligro biológico deberá colocarse en las

puertas de los locales donde se manipulen microorganismos del grupo de riesgo

2 o superior.

b) Sólo podrá entrar en las zonas de trabajo del laboratorio el personal autorizado.

c) Las puertas del laboratorio se mantendrán cerradas.

d) No se autorizará ni permitirá la entrada de niños en las zonas de trabajo del

laboratorio.

Protección personal

El personal y los usuarios de los laboratorios deben procurar en el laboratorio.

a) Usar en todo momento trajes, batas o uniformes especiales para el trabajo en el

laboratorio.

b) Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que

puedan causar contacto directo o accidental con sangre, líquidos corporales y

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otros materiales potencialmente infecciosos. Una vez utilizados, los guantes se

retirarán de forma aséptica y a continuación se lavarán las manos.

c) El personal deberá lavarse las manos después de manipular materiales

infecciosos, así como antes de abandonar las zonas de

trabajo del laboratorio.

d) Se usarán gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos

de protección cuando sea necesario proteger los ojos y el

rostro de salpicaduras, impactos y fuentes de radiación

ultravioleta artificial.

e) Estará prohibido usar las prendas protectoras fuera del

laboratorio, por ejemplo en cantinas, cafeterías, oficinas,

bibliotecas, salas para el personal y baños.

f) No se usará calzado sin puntera.

g) En las

zonas de trabajo estará prohibido comer,

beber, fumar, aplicar cosméticos o

manipular lentes de contacto.

h) Estará prohibido almacenar

alimentos o bebidas para consumo

humano en las zonas de trabajo del

laboratorio.

i) La ropa protectora de laboratorio no

se guardará en los mismos armarios o

taquillas que la ropa de calle.

Procedimientos

Por seguridad en los laboratorios todo el personal y los usuarios deben atender las

siguientes recomendaciones:

a) Estará estrictamente prohibido pipetear con la boca.

b) No se colocará ningún material en la

boca ni se pasará la lengua por las

etiquetas.

c) Todos los procedimientos técnicos se

practicarán de manera que se reduzca al

mínimo la formación de aerosoles y

gotículas.

d) Se limitará el uso de jeringuillas y

agujas hipodérmicas, que no se utilizarán en

lugar de dispositivos de pipeteo ni con

ningún fin distinto de las inyecciones por vía parenteral o la aspiración de líquidos

de los animales de laboratorio.

e) Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales

infecciosos se comunicarán al supervisor del laboratorio.

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f) Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de todos los

derrames.

g) Los líquidos contaminados deberán descontaminarse (por medios químicos o

físicos) antes de eliminarlos por el colector de saneamiento. Puede ser necesario

un sistema de tratamiento de efluentes, según lo que indique la evaluación de

riesgos del agente con el que se esté trabajando.

h) Los documentos escritos que hayan de salir del laboratorio se protegerán de la

contaminación mientras se encuentren en éste.

Zonas de trabajo del laboratorio

Para evitar incidentes o contaminación del personal, las zonas de trabajo deberán:

a) El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no

relacionados con el trabajo.

b) Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo derrame de

material potencialmente peligroso y al final de cada jornada de trabajo.

c) Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser

descontaminados antes de eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar.

d) El embalaje y el transporte de material deberán hacerse de forma cuidadosa y en

recipiente, embalajes adecuados.

e) Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que impidan el

paso de artrópodos.

Gestión de la bioseguridad

Debido a la particularidad que pueden presentar los laboratorios en cuanto los

microorganismos de trabajo, pruebas, equipos, barreras de contención y demás, es

necesario que:

a) El responsable del laboratorio deberá garantizar la elaboración y adopción de un

instructivo de seguridad, el cual debe estar disponible en el laboratorio.

b) El responsable del laboratorio o una persona designada deberá velar por que se

proporcione capacitación periódica en materia de seguridad en el laboratorio

especialmente al personal o usuarios nuevos.

c) Se informará al personal de los riesgos especiales y se le exigirá que lea el

instructivo de seguridad o de trabajo y siga las prácticas y los procedimientos

normalizados. El responsable debe asegurar que todo el personal los comprenda

debidamente.

d) Habrá un programa de lucha contra los artrópodos y los roedores.

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Material de laboratorio

Contar con material seguro en el laboratorio favorece la reducción del riesgo, cuando

se trabaje con agentes biológicos que entrañen peligro. Para elegir el material de

laboratorio habrá que cerciorarse de que responda a los siguientes principios

generales:

a) Que su diseño permita limitar o evitar los

contactos entre el trabajador y el material

infeccioso.

b) Que esté construido con materiales

impermeables a los líquidos, resistentes a la

corrosión y acordes con las normas de

resistencia estructural.

c) Que carezca de rebabas, bordes cortantes y

partes móviles sin proteger.

d) Que esté diseñado, construido e instalado con miras a simplificar su manejo y

conservación, así como a facilitar la limpieza, la descontaminación y las pruebas

de certificación; siempre que se pueda, se evitará el material de vidrio y otro

material rompible.

Material de bioseguridad indispensable

Algunos equipos o materiales son indispensables para el manejo de

microorganismo, dentro de estos materiales están:

a) Dispositivos de pipeteo para evitar que se pipetee con la boca.

b) Cámara de Seguridad Biológica CSB se utilizarán en los siguientes casos:

Siempre que se manipule material infeccioso; ese material puede ser

centrifugado en:

El laboratorio ordinario si se utilizan vasos de centrifugadora con tapas

herméticas de seguridad y si éstos se cargan y descargan en una CSB. Cuando

haya un alto riesgo de infección transmitida por vía aérea.

Cuando se utilicen procedimientos con grandes posibilidades de producir

aerosoles,

como la centrifugación, trituración, homogeneización, agitaciones o mezcla

vigorosa, desintegración ultrasónica, apertura de envases de materiales

infecciosos cuya presión interna pueda diferir de la presión ambiental, inoculación

intranasal a animales y recolección de tejidos infecciosos de animales y huevos.

c) Asas de siembra de plástico desechables. También pueden utilizarse

incineradores eléctricos de asas dentro de la CSB para reducir la formación de

aerosoles.

d) Frascos y tubos con tapón de rosca.

e) Autoclaves u otros medios apropiados para esterilizar el material contaminado

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f) Pipetas de Pasteur de plástico desechables, cuando estén disponibles, en

sustitución del vidrio.

g) Los aparatos como las autoclaves y las CSB deben ser validados con métodos

apropiados antes de usarlos. A intervalos periódicos deben ser nuevamente

verificados, de acuerdo con las instrucciones del fabricante

3. ¿Cuáles son los equipos utilizados en el laboratorio de microbiología?

hacer descripción y fotos.

Mechero de alcohol o ron

Sirve para calentar sustancias con alcohol o ron.

Mechero Bunsen

Todas las manipulaciones deben realizarse

en un radio de 10-15cm de la llama del

mechero (zona aséptica).

En caso de utilizar mechero nunca se debe

coger material por encima de la llama

Antes de comenzar a trabajar se procurará

disponer de todo el material necesario para

el procesamiento de la muestra

Tomar las medidas necesarias para evitar

la contaminación de las muestras o/ y

cultivo por microorganismos ambientales

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Estufa de incubación

Es una cámara de temperatura controlada

para cultivo de microorganismos.

Se utiliza para facilitar el desarrollo de los

microorganismos a su temperatura óptima de

crecimiento (generalmente 35-37º).

Frigorífico o cámaras refrigeradas

Se utilizan para conservar tanto materiales (medios de

cultivo, reactivos) como microorganismos.

Generalmente están a una temperatura fija de 4ºC.

Congeladores

Se utilizan para la conservación de

reactivos y microorganismos a

temperaturas inferiores a 0ºC, llegando a -

80ºC (los más frecuentes son -20º, -40º y -

80º).

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Microscopio óptico

El microscopio se emplea para aumentar o

ampliar las imágenes de objetos y organismos

no visibles a simple vista. Se trata de un

instrumento óptico que contiene una o varias

lentes que permiten obtener una imagen

aumentada del objeto y que funciona por

refracción.

Centrífuga

Aparato que aplica sobre los tubos una fuerza

centrífuga lo que permite la separación de los distintos

componentes de la muestra mediante la precipitación

en el fondo del tubo de las partículas en suspensión.

Cámaras de flujo con sistema de filtros.

Las cabinas de flujo laminar son ampliamente

utilizadas en laboratorios y se utilizan

generalmente para trabajar con cultivos y otras

muestras que requieran un entorno limpio y estéril,

presenta filtros de esta forma el área de trabajo es

barrida constantemente, evitando que se

depositen partículas.

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Balanzas

La balanza es un instrumento que sirve para

medir la masa de los objetos, muestras,

colorantes, componentes de medios de

cultivo etc.

Agitador/ mezclador

Un agitador, a veces llamado mezclador,

es un dispositivo que se utiliza en los

laboratorios a para mezclar líquidos o

preparar disoluciones y suspensiones.

PH-metros

El pH-metro es un sensor utilizado en el método

electroquímico para medir el pH de una disolución.

Autoclave

Es el equipo más utilizado.

Es un procedimiento de esterilización

mediante calor húmedo. Se realiza en al

autoclave durante 15 ó 20 min, según el

volumen, a 115°C ó 121°C, según la

naturaleza del material que se desee

esterilizar.

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Horno de Pasteur

Emplea altas temperaturas (160-180º C) durante

un tiempo prolongado (1.5 a 3 horas). Debido a su

poca capacidad de penetración se usa para

esterilizar vidrio y metales. Actúa principalmente

desnaturalizando las proteínas y secundariamente

oxidando los compuestos celulares.

Contador de colonias

Es un aparato que mediante la iluminación de la placa

y una lupa, nos permite observar con mayor nitidez

las colonias y por tanto facilita su recuento.

4. Materiales de laboratorio e implementos.

Placas de Petri

Recipientes para la preparación de medios de cultivo

sólidos

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Matraz erlenmeyer

Se utiliza para mezclar disoluciones que, durante a mezcla,

hay que agitar para que reaccionen más rápidamente.

Beaker

Son utensilios que permiten calentar sustancias hasta

obtener precipitados.

Balon

Se usa principalmente en los procesos de destilación para

calentar uniformemente muestras.

Fiolas

Es un recipiente de vidrio que se utiliza sobre todo para

contener y medir líquidos, se emplean en operaciones de

análisis químico cuantitativo, para preparar soluciones de

concentraciones definidas.

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Buretas con llave de paso

Es una tuvo largo de vidrio, abierto por su extremo

superior y cuyo extremo inferior, terminado en punta,

está provisto de una llave. Al cerrar o abrir la llave se

impide o se permite, incluso gota a gota, el paso del

liquido. El tubo esta graduado, generalmente, en

decimas de centímetro cubico.

Tubos de ensayo

Los tubos de ensayo son muy indispensables en el

laboratorio, ya que nos permite las preparaciones, como

guardado de cultivos, y podemos encontrar en diversos

modelos.

Pipetas

Son instrumentos para graduar o medir la cantidad de

reactivo para una determinada muestra, existen variedades

de pipetas, y son exactas y confiables para medir.

Laminas porta objetos

Estas láminas, nos permiten utilizarlas para poder

apreciar cultivos, en el microscopio, existen de

diversos tipos, planos, de arrastre, extremo

esmerilado, ondulado para ver muestras o cultivos

vivos.

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Laminas cubre objetos

Estas láminas, cubren a las láminas porta objetos, para

que los cultivos, no puedan ser llevados por animalitos

y causar daño.

Estiletes

Son usados para poner los cultivos a las láminas y ser

observados en el microscopio.

Buretas

Se utilizan para medir a grandes cantidades, y son muy

exactas y confiables para medir líquidos.

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Pipetas automáticas (micropipetas) y puntas de pipeta

Se utilizan para

pipetear pequeñas

cantidades de líquidos.

Se utilizan con puntas

desechables de distinto

tamaño y color según la

micropipeta. Existen cuatro tamaños: de 0,5-2µm; de 2-20 µm; de 20-200 µm y de

200-1000 µm.

Asas acodadas o Asas de Digralsky:

Se utilizan para la extensión de microorganismos sobre la

superficie de un medio de cultivo en placa Petri.

Asas de siembra

Se utilizan para sembrar. Pueden ser metálicas o de

plástico, curvas o rectas (para la siembra por picadura).

Cucharas y espátulas

Se utilizan para pesar muestras o medios de cultivo.

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Pinzas para tubo de ensayo

Permite sujetar tubos de ensayo y si estos se necesitan

calentar, siempre se hace sujetándolos con estas pinzas,

esto evita accidentes como quemaduras.

Gradillas

Una gradilla es una herramienta que forma parte del

material de laboratorio (principalmente en

laboratorios de biología molecular, genética y

química) y es utilizada para sostener y almacenar

gran cantidad de tubos de ensayo.

Tubos de centrifuga

Es un pequeño contenedor cilíndrico de plástico, con un

fondo cónico y típicamente una tapa unida al cuerpo del

tubo para evitar su desprendimiento. Son empleados

profusamente en biología molecular y bioquímica no solo

para la centrifugación, si no que, dado su bajo costo, se

emplean a menudo como simples viales contendores de

sustancias químicas.

Frasco Gotero

Permite contener sustancias, posee un gotero y por esa razón

permite dosificar las sustancias en pequeñas cantidades.

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Soporte universal

Es un utensilio de hierro que permite sostener varios

recipientes

Trípode

Se utilizan para sostener materiales que van a ser sometidos a

calentamiento.

Espátula

Es un utensilio que permite tomar sustancias químicas

evitando que los reactivos se contaminen.

Rejilla

Se utiliza para sostener utensilios que van a someter a

calentamiento ayudando a tener un calentamiento uniforme.

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Papel Kraft

Es un tipo de papel basto y grueso de color marrón, se

suele usar como envoltura.

5. Principales reactivos usados en el laboratorio usos y para qué sirven.

Alcohol acido: El alcohol ácido se emplea para decolorar la fucsina fenicada en las

bacterias:

Gram negativa

Gram positivas

BAAR positivas

BAAR negativas

Alcohol Etílico: obtenido de la destilación de jugo de la caña de azúcar. Se usa

para preparación de colorantes y como desinfectante de áreas de laboratorio

Alcohol Para Mechero: Liquido incoloro sin presencia de partículas suspendidas ni

precipitadas. Muy volátil e inflamable. Se usa en Mecheros de alcohol utilizados en

laboratorio

Fucsina fenicada: Solución Fenicada de fucsina empleada como colorante

primario en la coloración de Ziehl Neelsen. Liquido color fucsia translucido sin

presencia de partículas suspendidas, ni precipitadas.

Fucsina de Gram: Solución de Fucsina básica en metanol y agua con fenol, para la coloración de Gram.

Violeta de Genciana: Solución de Cristal violeta en agua alcohol para la coloración de Gram.

Nigrosina: (Tinción negativa). Se trata de un colorante aniónico, que no penetra en

el interior celular. Proporciona una visión de la forma y el tamaño celulares al

observarse los microorganismos brillantes sobre un fondo oscuro.

Alcohol cetona: El alcohol cetona se emplea para decolorar el cristal violeta en las:

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Gram negativa

Gram positivas

BAAR positivas

BAAR negativas

Rojo de metilo: es un indicador de pH. Actúa entre pH 4,2 y 6,3 variando desde rojo (pH 4,2) a amarillo (pH 6,3). Por lo tanto, permite determinar la formación de ácidos que se producen durante la fermentación de un carbohidrato. Para usos de laboratorio, análisis, investigación y química fina

Lugol de Gram: Solución de yodo yoduro en agua para la coloración de Gram

Azul de Lactofenol: Liquido acuoso de color azul claro traslucido, ligeramente

viscoso. La tinción de Azul de lactofenol se emplea para observar hongos. Es una

tinción simple (un sólo colorante) y como tal está basada en la afinidad del colorante

por componentes de las células, en este caso por las estructuras fúngicas. El azul de

lactofenol tiene tres características que lo hacen especial para observar dichas

estructuras en los hongos del tipo moho obtenidos en los cultivos por aislamiento.

Azul de metileno (Tinción positiva). Permite teñir el interior celular. Tiñe

microorganismos procarióticos (vivos o muertos). Los eucarióticos sólo se tiñen si

están muertos. Algunas estructuras, como los corpúsculos metacromáticos, se tiñen

más intensamente con este colorante que el resto de la célula.

Hidróxido de potasio al 20%: Solución de Hidróxido de Potasio en agua, para el

reconocimiento de hongos

Hidróxido de sodio al 10%: Solución de Hidróxido de Sodio en agua,

para el reconocimiento de hongos.

Buffer de Giordano: Solución amortiguadora del pH para la coloración de Wright.

Liquido incoloro sin presencia de partículas suspendidas, ni precipitadas.

Safranina de Gram: Solución acuosa de Safranina, empleada como colorante

alternativo en la coloración de Gram. Liquido Color rojo sangre sin presencia de

partículas suspendidas, ni precipitadas.

Decolorante de Gram: Mezcla de alcohol acetona en proporción 3:1 para la

coloración de Gram. Líquido inflamable y muy volátil, manéjese con precaución y

utilizando los elementos de seguridad en el laboratorio

Xilol: Mezcla comercial de tres isómeros orto, meta y para xilenos, Se utiliza ampliamente como disolvente.

Agua Amortiguada o Sales Amortiguadoras: Agua tamponada usada en la

coloración de FIELD. El pH de la solución puede variar dentro del rango de 6,7 a 6,9.

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Aplicar dos o tres mililitros a la lámina previamente fijada con la coloración de Gota

Gruesa.

Agua desionizada: Agua desionizada libre de minerales para uso en equipos de

laboratorio o disolvente de reactivos se usa De acuerdo a la técnica de aplicación

propia de cada laboratorio

Azul de Metileno Fosfatado: Solución de Azul de Metileno con pH regulado para la

tinción e identificación de hemoparasitos en una muestra biológica.

Deterlab Alcalino: Detergente líquido biodegradable alcalino para lavado de

material de vidrio de laboratorio. Ph 10 ± 1,0.

Deterlab Neutro: Detergente líquido biodegradable y neutro para lavado de material

de laboratorio con un pH de 7± 0.5.

Solución “A: Solución de Azul de Metileno-Azure B con pH regulado para la

determinación de hemoparasitos. Líquido de color azul intenso.

Solución “B”: Solución de Eosina amarilla hidrosoluble con pH regulado para la

determinación de hemoparasitos. Líquido transparente de color naranja-rojizo.

Bibliografía

BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO, universidad del valle, (Julio 2014)

disponible en:

http://gicuv.univalle.edu.co/documentos/documentos_laboratorios/lab_SI_hacen_ens

ayos/material_consulta/Bioseguridad_Laboratorios_Julio.pdf

Normas de seguridad en el laboratorio de microbiología, acceso (6 de septiembre del

2015), disponible en:

http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_normas

_de_bioseguridad.pdf

Microbiología General y Bucal, (6 de septiembre del 2015), disponible en: http://campus.usal.es/~micromed/Practicas_odontologia/unidades/labv/LabMicro/practica1.html

Conocimiento de equipos y materiales de uso frecuente en el laboratorio de microbiología, (6 de septiembre del 2015), disponible en: http://es.slideshare.net/ELVISCHAVARRICHOLAN/conocimiento-de-equipos-y-materiales-de-uso-frecuente-en-el-laboratorio-de-microbiologia

Microbiología y parasitología, universidad católica sato Toribio de Mogrovejo, abril del 2009, disponible en: http://es.slideshare.net/jcustodio91/guia-ii

Laboratorios SAR LTDA, LABSAR, (6 de septiembre del 2015), disponible en: http://www.labsar.com/index.php?option=com_content&view=article&id=62&Itemid=26


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