Germán Darío RonchiBioquímico - Especialista en Bacteriología ClínicaJefe de Trabajos Prácticos - Parasitología y MicologíaUniversidad Nacional de San Luis
La Toxoplasmosis es una zoonosis parasitaria de las aves y de diversas especies de mamíferos incluido el hombre, producida por el protozoo Toxoplasma gondii.
DEFINICIÓN
Subreino Protozoa (organismo de una sola célula eucariótica). Subphylum 2 Apicomplexa : Presenta un complejo apical
característico al microscopio electrónico sin flagelos, ni cilios excepto en los gametos. Los ciclos evolutivos generalmente involucran, estados vegetativos (trofozoítos), estados de multiplicación asexuada (merogonia), estados de multiplicación sexuada (gametogonia), y estados con formación de esporas y esporozoítos (esporogonia); todos los estados involucran formas parásitas.
Clase Esporozoea: Posee un complejo apical completo y estados infectantes esporozoíticos.
Subclase 1 Coccidia : Presenta trofozoítos y estados sexuados pequeños e intracelulares.
Orden Eucoccidia: merogonia presente, parásitos muy comunes de invertebrados y vertebrados.
Familia Sarcocystidiae: Presenta los géneros: Sarcocystis y Toxoplasma.
Género Toxoplasma Especie: Toxoplasma gondii.
CLASIFICACIÓN
Toxoplasma gondii
micrópila
CICLO BIOLÓGICO
Estados de multiplicación
Sexuada o esporogónica: se produce en el intestino del gato y otros felinos salvajes.
Asexuada o esquizogónica: se produce en los tejidos de una multitud de mamíferos incluido el hombre y en las aves.
El gato y otros felinos salvajes, son huéspedes completos ydefinitivos .
Los demás mamíferos, incluido el hombre, y las aves se consideran huéspedes incompletos e intermediarios.
El trofozoíto, divide su núcleo, cada porción nuclear se rodea con una parte de citoplasma, constituyendo el esquizonte inmaduro, madura y forma numerosos merozoítos. La célula huésped estalla y libera los merozoítos que vuelven a invadir nuevas células intestinales.
Al cabo de tres, cinco y más días, algunos merozoítos evolucionan hacia formas sexuadas. Macrogametocitos y Microgametocitos.
La fecundación del macrogametocito ocurre en la célula huésped y el cigoto resultante se rodea de una envoltura translúcida formando el ooquiste.
Se eliminan en estado inmaduro y, en condiciones adecuadas, continúan su desarrollo en el medio externo, formando una unidad llamado ooquiste esporulado que en su interior contiene, dos ooquistes con 4 esporozoítos cada uno.
El gato elimina ooquistes de 3 a 5 días después de haberse infectado con los quistes del Toxoplasma gondii, o los elimina dentro de las 2 a 3 semanas, si la infección se produce por los ooquistes del parásito.
CICLO INTESTINAL
CICLO INTESTINAL
Parasitología Médica. Antonio Atías
La multiplicación intracelular acelerada de toxoplasmas
(taquizoítos), concluye con la formación de pseudoquistes.
Liberación de nuevos zoítos, los cuales actúan localmente
invadiendo nuevas células del mismo tejido, o a distancia
invadiendo células de otros tejidos. La diseminación por todo
el organismo se produce por vía hemática o linfática.
Si el ritmo de reproducción es más atenuado, el proceso
terminará con la formación de quistes. Los parásitos de
multiplicación lenta, quistozoítos o bradizoítos, segregan
precipitados granulares que se adosan a la membrana
vacuolar circundante.
CICLO TISULAR
CICLO TISULAR
Parasitología Médica. Antonio Atías
CICLO DE VIDA
EPIDEMIOLOGÍA
La toxoplasmosis es la zoonosis parasitaria más difundida en la naturaleza.
Las encuestas serológicas, efectuadas en diferentes países, indican una infección del 40 a 50 % de los adultos sanos entre 30 y 40 años de edad. Estas cifras varían de un lugar a otro y se atribuyen a:
Factores geográficos. Factores climáticos. Hábitos alimentarios. Tipo de trabajo. Higiene ambiental. Presencia de gatos infectados.
La tasa de prevalencia aumenta en forma paulatina con la edad. La tasa de incidencia para la Toxoplasmosis congénita es de 1 cada
10.000 nacimientos en Europa y EEUU, en Argentina es de 2,5 a 3,5 cada 10.000 nacimientos.
Un gato infectado elimina ooquistes durante 1 a 2 semanas y una sola deyección puede contener millones de ellos. Si estos elementos encuentran condiciones favorables en el ambiente externo como: • Agua. • Terreno húmedo. • Temperatura alrededor de 25 ºC. • Suficiente oxígeno. pueden alcanzar su estado infectante en un lapso de 1 a 3 días.
Los ooquistes esporulados son extremadamente resistentes a los desinfectantes comunes y pueden permanecer viables por períodos muy prolongados en un ambiente que les sea favorable. Se ha demostrado una supervivencia de hasta 2 años en el agua, y más de 6 meses en la tierra húmeda. Por lo tanto, el ooquiste constituye el eslabón más importante en la cadena epidemiológica del Toxoplasma.
MECANISMOS DE TRASMISION DE LA INFECCION
Los huéspedes intermediarios, pueden adquirir la infección por medio de:
Los ooquistes diseminados en los pastizales, establos, bodegas, y graneros.
Los quistes contenidos en carnes y vísceras. Ocasionalmente por taquizoítos al ingerir animales
enfermos. Transmisión congénita.
MECANISMOS DE TRANSMISIÓN DE LA INFECCIÓN
MECANISMOS DE TRASMISION DE LA INFECCION
La infección puede ocurrir: A través de la sangre: Por una transfusión única o por
transfusiones repetidas. Por vía placentaria. Contacto directo con animales intensamente infectados en
la fase aguda. Leche no pasteurizada.
La penetración del parásito se puede producir: A través de las mucosas. A través de la vía digestiva. A través de la vía respiratoria. Por la vía conjuntival. Por lesiones de la piel o mordeduras.
INMUNIDAD
Mecanismo de evasión parasitaria
Inmunidad innata
Inmunidad adapatativa celular
Inmunidad adapatativa humoral
EosinófilosBasófilosIgG, IgM, IgA, IgE
CINETICA DE ANTICUERPOS EN TOXOPLASMOSIS
SINTOMATOLOGÍA
TOXOPLASMOSIS EN INMUNOCOMPETENTES
Forma linfoadenopática o ganglionar
Toxoplasmosis ocular
TOXOPLASMOSIS EN INMUNOCOMPROMETIDOS
Encefalitis toxoplásmica
Toxoplasmosis diseminada
SINTOMATOLOGÍA
TOXOPLASMOSIS EN LA EMBARAZADA
Infección aguda generalmente asintomática
TOXOPLASMOSIS CONGENITA
•Coriorretinitis
•Ceguera
•Hidrocefalia
•Calcificaciones intracraneales
•Retraso mental o psicomotor
•EpilepsiaSEROLOGÍA
TOXOPLASMOSIS CONGENITA
1/3 de las madres con infección aguda darán a luz un hijo con toxoplasmosis, con desarrollo normal; el 4% puede morir, tener un daño neurológico permanente o compromiso visual en los primeros años de vida.
FORMAS DE PRESENTACIÓN
Enfermedad neonatal: RN gravemente afectado,
compromiso del SNC y secuelas.
Enfermedad que se manifiesta en los primeros meses de vida: El
diagnóstico del niño se efectúa meses después del nacimiento.
Enfermedad que se manifiesta tarde en la
vida: Se diagnostica por la presencia de una secuela o
la reactivaciónde una infección no
diagnosticada durante la infancia
Infección asintomática: El 90% de los niños infectados son clínicamente
normales y muestran IgG Persistenteso crecientes como única expresión de
su infección.
Remington et. al. 2006
TOXOPLASMOSIS CONGENITA
THE LANCET • Vol 363 • June 12, 2004
DIAGNOSTICO
El diagnóstico definitivo de la infección aguda se determina por el aislamiento de toxoplasmas en sangre, líquidos corporales, líquidos de lavado o por la demostración de quistes en cortes histológicos de tejido, feto o neonato.
DIAGNÓSTICO DE
LABORATORIO
MÉTODOS DIRECTOS
MÉTODOS INDIRECTOS
METODOS DIRECTOS
Aislamiento delMicroorganismo
Inoculación en ratones
Cultivo de tejidos
Biología MolecularPCR
Hibridización
HistologíaDemostración del parásito o sus Ag.
Coloraciones
PCR
TOXOPLASMOSIS CONGENITA LIQUIDO AMNIOTICO
TOXOPLASMOSIS OCULAR HUMOR VITREO
TOXOPLASMOSIS EN EL INMUNOCOMPROMETIDO
LCR, BAL, LIQUIDO PLEURAL, SANGRE ENTERA
GEN B1
TAQUIZOÍTOS
QUISTE
Taquizoítos: ME de barrido Quiste en cerebro
MÉTODOS INDIRECTOS
LOS QUE UTILIZAN COMO ANTÍGENOS TOXOPLASMAS
ENTEROS
LOS QUE UTILIZAN COMO ANTÍGENOS PRODUCTOS DE LISIS DE LOS
TOXOPLASMAS
IgM falsos positivos !!!!
Serología
Antígenos: Toxoplasmas enteros
Ag Enteros
Sabín - Feldman (Dye test)
Aglutinación directa
Inmunofluorescencia Indirecta (IFI)
Inmunocaptura (ISAGA)
Aglutinación diferencial (AC/HS)
REACCIÓN DE SABIN - FELDMAN
ALTA SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD METODO DE REFERENCIA
Toxoplasmas teñidos con azul de metileno
Lisis de Toxoplasmas en presencia de Ac y complemento y visualización con Azul de metileno
IgG
AGLUTINACIÓN DIRECTA
AGLUTINACIÓN DIFERENCIAL
(AC/HS)
Antígeno fijado con formol (HS)
Antígeno fijado con acetona (AC)
Etapa aguda
Etapa aguda y crónica
VARIANTES DE AGLUTINACIONES
IgG + IgM
INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA
IgG
IgM
IgA
Ausencia de Anticuerpos Presencia de anticuerpos
PRUEBAS DE INMUNOCAPTURA
IMMUNOADSORBENT AGLUTINATION ASSAY (ISAGA) ALTA SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD
NEGATIVO
POSITIVO
Reacción de aglutinación específica previa absorción inmunológica de las Igs de clase deseadas
1) Absorción con anti μ, anti γ, anti ε o anti α según sea ISAGA IgM, IgG, IgE o IgA respectivamente
2) Reacción de aglutinación
IgG, IgM, IgA, IgE
Ag Lisados
Hemaglutinación Indirecta (HAI)
Test de avidezEnzimoinmunoensayo (ELISA)
Latex
Antígenos: Productos de lisis
Total
P 30
NO EMBARAZADAS, Se positiviza tardíamente
Poco uso
HEMAGLUTINACION INDIRECTA
25µl de diluyente a cada pocillo 25µl de sueros y controles al primer pocillo Diluciones seriadas de las muestras y controles 25 µl de GR no sensibilizados al primer y segundo pocillo 25µl de GR sensibilizados al resto de los pocillos Agitar la placa, dejar reposar 90 minutos e interpretar
Ag soluble: 80%
citoplasmático y 20%
membrana
C+ C- M1 M2
1/2
1/4
1/8
1/16
1/32
1/64
HEMAGLUTINACION INDIRECTA INTERPRETACION
ENZIMOINMUNOENSAYO
IgG
IgM
IgA
TEST DE AVIDEZ
Las IgG de infecciones recientes (agudas) tienen baja avidez por el Ag y se desprenden de su unión cuando se tratan con una solución de urea
IgG sin urea
IgG con urea=Test de Avidez
IgM
NEGATIVA POSITIVA
Infección pasada
IgG
TSP
SF, ELISA-IgM, ELISA IgA, ELISA IgE y AC/HS
SEROLOGÍA EN LA EMBARAZADA
The Journal of Infectious Diseases 2002;185(Suppl 1):S73–82
ALGORITMO PARA DIAGNOSTICO DE TOXOPLASMOSIS EN EL ADULTO
Manual of Clinical Microbiology. Murray et al
Consenso Argentino de Zoonosis
ALGORITMO TOXOPLASMOSIS EN LA EMBARAZADA
Consenso Argentino de Zoonosis
ALGORITMO TOXOPLASMOSIS CONGENITA
ALGORITMO TOXOPLASMOSISCONGENITA - ISAGA
Consenso Argentino de Zoonosis
TRATAMIENTO
Infección aguda asintomática: NO
Toxoplasmosis aguda en embarazada: Espiramicina
Infección fetal documentada (luego de semana 12 a 18): Pirimetamina + Sulfadiazina + Leucovorina (Acido folínico)
Toxoplasmosis congénita: Pirimetamina + Sulfadiazina + Leucovorina + Corticosteroides (Prednisona)
Encefalitis toxoplásmica en SIDA: idem congénita + macrólidos, ver respuesta
Prevención de la infección por Toxoplasma
- Cocinar la carne muy bien y hasta que ya no se vea rojiza.
- Lavar los cuchillos y las tablas de cortar que se usan para cortar carne, con agua caliente y con jabón.
- Lavar las verduras y quitarles toda la tierra antes de comerlas.
- Evitar tomar agua de los ríos y arroyos
- Lavarse bien las manos después de trabajar en el jardín y quitarse bien toda la tierra de las uñas.
- Usar guantes si trabaja con tierra o si va a limpiar o cambiar el arena de la caja del gato.
- Lavarse las manos con agua caliente y con jabón después de limpiar la caja del gato.
- Limpiar la caja del gato todos los días – toma aproximadamente 24 horas para que los ooquistes en el excremento de los gatos puedan infectar a las personas.
- No permitir que el gato caze animales salvajes y pájaros, mantenerlo dentro de la casa.
-Dar al gato comida seca o enlatada, o cocinar carne fresca poco antes de darle de comer a su gato.
RESUMIENDO……
QUE LINDO GATITO…..PERO OJO CON EL GATO… ESTE SEÑOR PUEDE ESTAR PRESENTE……
MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIÓN !!!
BIBLIOGRAFIA
Recent Development for Diagnosis of Toxoplasmosis. Remington. JCM, 2004, 941-945
Consenso Argentino de Toxoplasmosis Congénita. Medicina. 2008 Consenso Argentino de zoonosis. 2008 Toxolasmosis. J.G.Montoya. Lancet 2004; 363:1965-76 Laboratory Diagnosis of Toxoplasa gondii Infection and Toxoplasmosis.
Montoya JID, 2002 Diagnostic Medical Parasitology. García 4° Edición. ASM PRESS. 2001 Manual of Clinical Parasitology. Murray. 7° Edición ASM PRESS.1999 Parasitología Médica. Antonio Atías. Meditarráneo. 1998 Proeco. Cursos a distancia. Fundación Bioquímica Argentina Departamento de Microbiología y Parasitología. Facultad de Medicina.
UNAM. México Toxoplasmosis Congénita. Rev Cubana Obstet Ginecol. 1997 Toxoplasma gondii Infection in Pregnancy. Lopes Fabiana. BJID 2007;
11(5): 496-506 Laboratory Diagnosis of Toxoplasma gondii Infection and Toxoplasmosis.
Montoya JG. The Journal of Infectious Diseases 2002;185(Suppl 1):S73–82