Genómica aplicada al diagnóstico de patologías periodontales
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Dra. Blanca Bermejo Barrera, Directora Desarrollo Área Molecular
FACTORES DEL HOSPEDADOR
-Genéticos: Polimorfismos IL-1-Inmunológicos
FACTORES DEL HOSPEDADOR
-Genéticos: Polimorfismos IL-1-Inmunológicos
PATÓGENOS PERIODONTALES :
Actinobacillus actinomycetemcomitansPorfyromona gingivalisPrevotella intermediaBacteroides forsythusTreponema dentícola
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Actinobacillus actinomycetemcomitansPorfyromona gingivalisPrevotella intermediaBacteroides forsythusTreponema dentícola
FACTORES AMBIENTALES :
- Enfermedades sistémicas:• Diabetes• Enfermedad
Cardiovascular-Tabaquismo- Higiene bucal
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Cardiovascular-Tabaquismo- Higiene bucal
PERIODONTITISPERIODONTITIS
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Patógenos periodontales
Protocolo para la detección de patógenos periodontales
Extracción de ácidos nucleicos
Preparación de la muestra
Amplificación de la secuencia diana por PCR
Análisis e interpretación de resultados
Detección del ADN
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Recogida de muestra
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Extracción de ácidos nucleicos
Preparación de la muestra
Amplificación de la secuencia diana por PCR
Análisis e interpretación de resultados
Detección del ADN
Protocolo para la detección de patógenos periodontales
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Extracción de ADN
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PCR(Polymerase Chain Reaction)
• ADN MOLDE
• CEBADORES ESPECÍFICOS
• Taq POLIMERASA
• 4 NUCLEÓTIDOS (A, C, G, T)
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Amplificación
Protocolo para la detección de patógenos periodontales
Extracción de ácidos nucleicos
Preparación de la muestra
Amplificación de la secuencia diana por PCR
Análisis e interpretación de resultados
Detección del ADN
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Detección: hibridación reversa
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Protocolo para la detección
de patógenos periodontales
Extracción de ácidos nucleicos
Preparación de la muestra
Amplificación de la secuencia diana por PCR
Análisis e interpretación de resultados
Detección del ADN
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Resultados
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Interpretación de resultados
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ANÁLISIS INICIALDESPUÉS TRATAMIENTO
Interpretación de resultados
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Nivel normal IL-1:NO predisposición
Nivel elevado IL-1:PREDISPOSICIÓN
Hueso sano
InflamaciónPérdida ósea
Bacteria
Respuesta inmune
Predisposición genética
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Predisposición genética
IL-1IL-1RN
INFLAMACIÓN
•Polimorfismo IL-1: aumento nivel IL-1•Polimorfismo IL-1RN: disminución nivel IL-1RN
Extracción de ácidos nucleicos
Preparación de la muestra
Amplificación de la secuencia diana por PCR
Análisis e interpretación de resultados
Detección del ADN
Protocolo para estudio de la predisposición genética
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Recogida de muestra
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Protocolo para estudio de la predisposición genética
Extracción de ácidos nucleicos
Preparación de la muestra
Amplificación de la secuencia diana por PCR
Análisis e interpretación de resultados
Detección del ADN
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Resultados
TIRA DEL INSERTPREDISPOSICION GENETICA
RIESGO Nivel IL-1TIPO D Elevado (+++)
TIPO C Elevado (++)
TIPO B Elevado (+)
TIPO A Normal
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IL-1 Normal Normal Polimorfismo
(Elevado)Polimorfismo
(Elevado)
IL-1RN Normal Polimorfismo
(Bajo)Normal Polimorfismo
(Bajo)
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Interpretación de resultados
Rea
cció
n in
flam
ator
ia
DCBA
DCBA