UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS PARA EL DESARROLLO
CARRERA DE INGENIERIA AGROPECUARIA
Proyecto de investigación
Previo a la obtención del Título de:
Ingeniero Agropecuario
Tema:
Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatógeno
(Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno
Autor:
Ramón David Piguave Bustamante
Tutor:
Dra. Consuelo Díaz Díaz
Vinces Los Ríos Ecuador
2016
I
UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS PARA EL DESARROLLO
CARRERA DE INGENIERIA AGROPECUARIA
Proyecto de investigación
Previo a la obtención del Título de:
Ingeniero Agropecuario
Tema:
Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno
(Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno
TRIBUNAL DE SUSTENTACION
APROBADO POR:
-------------------------------------Dr. Rafael Aspiazu Pimentel.
PRESIDENTE
-------------------------- -----------------------------------Dr. Omar Reyes Echeverría MSc Abel Mora Montes MSc
Primer VOCAL Segundo VOCAL
II
…………………………………………….. Ramón David Piguave Bustamante
I
La responsabilidad de los contenidos del
presente trabajo de titulación corresponde
exclusivamente a Ramón David Piguave
Bustamante el patrimonio intelectual del
mismo, a la Facultad de Ciencias para el
Desarrollo de la Universidad de Guayaquil.
DEDICATORIA
A mi madre, por todo el esfuerzo que ha hecho para llevarme adelante. A mi hermano,
por su compañía en todos momentos. Y a toda mi familia, a mis amigos, por su apoyo y
amistad durante estos años.
II
AGRADECIMIENTO
En especial a Dios por mantenerme con vida y a mi madrecita Sara Bustamante por
apoyarme en todo momento y darme todos mis estudios y por estar en las buenas y en
las malas y a toda mi familia.
Le agradezco en especial a mi tutora Dra. Consuelo Díaz Díaz por guiarme en este
trabajo de investigación que se pudo dar a cabo.
Agradezco al Ing. Milton León, Dr. Abel Mora por la ayuda durante el trabajo de campo
dando sus sabios consejos, al Dr. Omar Reyes por la ayuda en cada consejo y amistad,
Dr. Emilio Wong gracias por su amistad y por la enseñanza de cómo defenderme en el
campo laboral, Ing. Malavé por la ayuda en el laboratorio, Ing. Lauro Díaz por la ayuda
en el proceso de redacción y sobre todo por la enseñanza brindada y a todas esas
personas que me ayudaron a despejar algunas dudas del trabajo de investigación y
corroborar la información obtenida en el proyecto de titulación mil gracias a todas estas
personas.
Les agradezco a todos mis amigos(as) en especial Giannina Sánchez y Adriana Guerrero
por estar ahí en todos lados, a mi compadre Moisés Morales, a mis amigos casi
hermanos Juan José, José Nieves y hermanas Caballero.
III
Índice General
RESUMEN.........................................................................................................................1
SUMMARY........................................................................................................................2
I. INTRODUCCIÓN......................................................................................................3
1.1 Antecedentes.................................................................................................................4
1.2 Justificación..................................................................................................................4
1.3 Situación problematizadora...........................................................................................5
1.3.1 Descripción del problema....................................................................................5
1.3.2 Problema..............................................................................................................6
1.3.3 Preguntas de la investigación..............................................................................6
1.3.4 Delimitación del problema..................................................................................6
1.4 Objetivos:.......................................................................................................................7
1.4.1 General................................................................................................................7
1.4.2 Específicos...........................................................................................................7
II. MARCO TEORICO.....................................................................................................8
2.1 Garrapatas...............................................................................................................................8
2.2 Clasificación taxonómica de las garrapatas.............................................................................9
2.2.1 Morfología:..........................................................................................................9
2.2.2 La garrapata amblyomma cajennense................................................................................10
2.2.3 La garrapata Boophilus microplus.....................................................................10
2.3 Ciclo biológico........................................................................................................................11
2.4 Condiciones ambientales para el desarrollo de la garrapata.................................................11
2.5 Importancia de la garrapata a nivel mundial.........................................................................12
2.6 Perdidas económicas.............................................................................................................12
2.7 Efecto de la garrapata sobre los animales.............................................................................13
2.8 Acción patógena de la garrapata...........................................................................................13
2.8.1 Acción patógena expoliatriz..............................................................................13
2.8.2 Acción patógena traumática..............................................................................13
2.9 Principales métodos de control de la garrapata en los sistemas...........................................13
2.9.1 Control químico y resistencia............................................................................14
2.9.2 Control biológico...............................................................................................14
2.10. Hongos entomopatógenos.................................................................................................14
2.11 Modo de acción...................................................................................................................15
2.12 Toxinas de hongos entomopatógenos.................................................................................16
I
2.13 Efecto entomopatógenos....................................................................................................16
2.14 Experiencias investigativas..................................................................................................17
III. MARCO METODOLÓGICO.................................................................................19
3.1 Localización del experimento......................................................................................19
3.2 Factor en estudio..........................................................................................................19
3.3 Tamaño de la muestra..................................................................................................19
3.4 Materiales y equipos....................................................................................................20
3.4.1 Materiales e insumos de laboratorio..................................................................20
3.4.2 Materiales de campo..........................................................................................20
3.4.3 Equipos..............................................................................................................20
3.4.4 Biológico...........................................................................................................20
3.5 Diseño experimental y análisis estadístico..................................................................21
3.6 Manejo del ensayo.......................................................................................................21
3.6.1. Identificación de animales................................................................................21
3.6.2 Peso de las dosis del entomopatogeno...............................................................21
3.6.3 Evaluación de las regiones de los bovinos en estudio antes y después de aplicación de hongo entomopatogeno...............................................................22
3.6.4 Manejo del ensayo para el laboratorio...............................................................22
3.7 Datos evaluados....................................................................................................................23
3.7.1 Bioensayo en bovinos experimentalmente infestados con el hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii para determinar la mortalidad in vitro de las garrapatas expuestas a la acción del bioacaricida...................................23
3.7.2 Hongo entomopatógeno L. lecanii tiempo de acción acaricida en la garrapata in vitro...............................................................................................................24
IV RESULTADOS...........................................................................................................25
4.1 Determinación de la dosis optima del hongo entomopatogeno Lecanicillium lecanii para controlar garrapatas en el ganado vacuno..................................................................................25
4.2 Determinación de las especies de garrapatas existente en la zona de estudio.....................25
4.3 Elaboración de una propuesta de control biológico para el control de garrapatas en ganado bovino.............................................................................................................................25
4.3.1 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida Lecanicillium lecanii y después de la misma con la dosis de 1 g/l..........................................27
4.3.2 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida Lecanicillium lecanii con la dosis de 1,5 g/l............................................................................28
II
4.3.3 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida Lecanicillium lecanii de 2 g/l...................................................................................................29
4.3.4 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida Lecanicillium lecanii la dosis de 2.5 g/L..................................................................................30
4.4 Trabajo de laboratorio..................................................................................................31
4.4.1 Resultados de laboratorio comprobación de la hipótesis Ji cuadrado...............31
V. DISCUSIÓN...............................................................................................................37
VI. CONCLUSIONES.....................................................................................................39
VII.RECOMENDACIONES..........................................................................................40
VIII. BIBLIOGRAFÍA...............................................................................................41
ANEXOS...........................................................................................................................45
GRAFICOS......................................................................................................................49
FIGURAS.........................................................................................................................56
PROPUESTA ALTERNATIVA DE CONTROL BIOLOGICO................................57
III
Cuadro 1. Dosis de polvo donde estuvo disuelto el hongo entomopatogeno L. lecanii g/litro de agua, Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno...................19
Cuadro 2..........................................................................................................................22
Cuadro 3..........................................................................................................................22
Cuadro 4 Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno antes de la aplicación del bioacaricida con la dosis de 1 g/......................................................................................24
Cuadro 5 En la Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno antes de la aplicación del bioacaricida, con la dosis de 1,5 g/l.........................................................25
Cuadro 6 En la Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno antes de la aplicación del bioacaricida y después de tres y seis días, con la dosis de 2 g/l...............26
Cuadro 7 En la Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno antes de la aplicación del bioacaricida, con la dosis de 2,5 g/l.........................................................27
Cuadro 8 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) 48/horas, en la Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (L. lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno........................................................................................................28
Cuadro 9 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) 72/horas en la evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno.......................................................................................30
Cuadro 10 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) ji 96/horas en la evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatógeno (L. lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno.......................................................................................32
IV
Cuadro 11 Resultados en porcentages a nivel de campo.................................................50
Cuadro 12 Resultados en porcentages a nivel de laboratorio..........................................50
Cuadro 13 Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.................................................................................................50
Cuadro 14. Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.................................................................................................51
Cuadro 15. Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.................................................................................................51
Cuadro 16. Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.................................................................................................51
V
RESUMEN
El presente trabajo de investigación fue desarrollada en la parroquia Puerto Pechiche
cantón Puebloviejo en la finca de la familia Manobanda Rumiguano y en el laboratorio
en la Facultad de Ciencia para el Desarrollo; el objetivo de esta investigación fue
determinar la acción del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii como control
biológico en garrapatas del ganado bovino, Las dosis que se utilizaron para determinar
la acción del entomopatogeno fueron de T1(1g/L) -T2(1,5g/L) - T3(2g/L) -T4(2,5g/L);
utilizándose para ello animales bovinos infestados con garrapatas a los cuales se les
aplico el bioacaricida L. lecanii; a las 24 horas fueron desprendidas los ácaros de los
bovinos para ser llevadas al laboratorio y observar la acción del mismo en periodos de
48-72-96 horas. Se puede concluir que tuvo mayor efecto el T4 con 2,5 g del hongo/litro
de agua; donde se obtuvo el 81 % de mortalidad a las 96 horas. Se aplicó la estadística
no paramétrica Ji cuadrado (Ji²) siendo el valor calculado a las 96 horas de observación
de las garrapatas 9,02 valor de la tabla 7,82.
Palabras claves: entomopatogeno lecanicillium lecanii, bioacaricida
SUMMARY
This research was carried out in the Puerto Pechiche parish of Puebloviejo on the
Manobanda Rumiguano family farm and in the laboratory at the Faculty of Science for
Development; The objective of this research was to determine the action of the
entomopathogenic fungus lecanicillium lecanii as biological control in cattle ticks. The
doses used to determine the action of the entomopathogen were T1(1g / L) -T2(1.5g / L)
- T3(2g / L) -T4(2.5g / L); Using for this purpose cattle infected with ticks to which the
bioacaricide L. lecanii was applied; At 24 hours the mites were removed from the cattle
to be taken to the laboratory and observe the action of the same in periods of 48-72-96
hours. It can be concluded that T4 had a greater effect with 2.5 g of the fungus / liter of
water; Where 81% of mortality was obtained at 96 hours. The non-parametric statistic Ji
square (Ji²) was applied and the value was calculated at 96 hours of observation of the
ticks 9.02 value of table 7.82.
Key words: entomopatogeno lecanicillium lecanii, bioacaricide
2
I. INTRODUCCIÓN
El incremento de la producción de leche y carne en los bovinos ha sido siempre uno de
los objetivos de los programas de desarrollo agropecuario del país. En áreas tropicales
como la nuestra; el control de las garrapatas, se ha constituido en unas de las principales
prioridades de manejo sanitario de los hatos ganaderos a fin de evitar la anaplasmosis y
babesiosis que son enfermedades hematozoarias trasmitidas por estos ácaros.
El impacto económico que generan las enfermedades provocadas por las garrapatas
es trascendental, pues, su existencia en la industria ganadera provocan una alta
morbilidad, mortalidad, aborto pérdida en la producción de carne y leche
(J. Mosqueda, Ramírez, & Cantó, 2012).
Entre las estrategias utilizadas para el tratamiento de animales infestados con
garrapatas, ha sido la aplicación de acaricidas órganos fosforados, amidinas, piretroides
e ivermectinas, sin embargo el uso indiscriminado de estos productos acaricidas han
creado resistencia adquirida por las garrapatas, siendo este motivo para buscar
alternativas biológicas de manejo dentro de este grupo podemos mencionar el uso de
hongos entomopatogeno (Morales, 2011). El control biológico de diferentes plagas no
es una práctica nueva, cabe indicar que ha sido una medida efectiva, que ha permitido
mantener un umbral aceptable dentro de parámetros económicos y zoosanitarios
establecidos (Hogsette, 1999).
Díaz et al, (2011) indican que los hongos entomopatogeno tienen un gran potencial
como agentes controladores, señalan la existencia de alrededor de 750 especies, por lo
tanto, es importante reconocer el uso del hongo entomopatogeno Lecanicillium lecanii,
como un organismo de valor ecológico al desempeñar funciones de control sobre los
artrópodos, insectos, etc. Convirtiéndolo en una opción viable para la elaboración de
bioplaguicida, pues, al ser usado como garrapaticida permitirá el control de las
garrapatas sin contaminar y deteriorar el ambiente.
3
1.1 Antecedentes
Los hongos Entomopatógenos se conocen desde hace milenios, cuando los chinos
identificaron especies de Cordyceps e Isaria de especímenes del gusano de seda
especie de Cicadoidea (chicharra o cigarra). Agostino Bassi en 1836 relata un tratado
sobre la enfermedad del gusano de seda, el muscardino, como agente causal es
Beauveria bassiana. Este hecho marca el inicio de la patología de insectos. El
desarrollo y aplicabilidad de la patología de insectos inicia el 1879 con Hagen quien
estudia el posible uso de hongos para el control de insectos (Vivas Herrera, 2007)
En el mundo se estima una población de 1 200 millones de bovinos, de los cuales
aproximadamente la mitad están expuestos a babesiosis y anaplasmosis, donde
Boophilus microplus y Amblyomma cajennense es el principal vector (Tene, 2002). Las
infecciones transmitidas por garrapatas aparecen por todo el mundo y son bien
conocidas desde hace más de 100 años. Mientras que otras son extremadamente raras,
la anaplasmosis granulocítica humana fue rebautizada en 2003 a partir de la ehrliquiosis
granulocítica humana. (Ingomar Mutz , 2009).
Los hongos son únicos y sobresalientes entre los microorganismos
entomopatógeno porque infectan a los hospedantes a través del tubo germinativo que
tiene la capacidad de penetrar y ramificarse dentro del acaro y provocar su muerte
debido a las toxinas secretadas (Quesada, 2009).
1.2 Justificación
Los hongos entomopatógeno ejercen un control natural sobre un amplio rango de
artrópodos plagas en diversos cultivos y en muchas partes del mundo. También están
involucrados en la regulación de las poblaciones en ecosistemas no agrícolas y pueden
ayudar a mantener el balance ecológico, particularmente en los bosques tropicales.
(Evans 1982).
4
En la zona de Vinces hay un gran potencial de explotación para el ganado vacuno se
estima un numero de 17 000 reses promedio en el cantón, ocupando un lugar importante
dentro de sus rubros de producción pecuaria, lamentablemente esta actividad se halla
amenazada por la alta incidencia de Anaplasmosis, enfermedad causada por distintos
géneros de artrópodos en este caso las garrapatas. Las garrapatas poseen gran
importancia tanto en medicina veterinaria como humana, ya que son vectores de
hemoparasitos para sus hospederos tanto por acción directa, hematofagia, parálisis
(Guillén Zapata & Muñoz Corrales, 2013).
(Vera Quiñonez, 2014). ´´Estima que los bovinos contribuyen con un consumo per cápita
de 9 kg de carne/año para hombres, mujeres y niños de todo el Ecuador. ´´ de aquí la
importancia por proteger sanitariamente a esta especie de animales ya que son los que
proporcionan proteína animal a través de la carne y leche.
1.3 Situación problematizadora.
1.3.1 Descripción del problema.Las garrapatas provocan daños directos a sus hospedadores y son la vía de
transmisión de patógenos que causan graves enfermedades hematozoarias a las personas
y los animales, en algunos casos fatales; además el uso incorrecto de productos
garrapaticidas químicos ha permitido que adquieran resistencia a estos. Se considera
potencialmente importante el uso de agentes biocaricidas entomopatogeno como el
lecanicillium lecanii como alternativas amigables para el ambiente, en el control de las
garrapatas para el ganado bovino, para la generación de productos inocuos como leche y
carne bovina sin trazas de contaminantes (Quesada, 2009).
Las garrapatas causan serios problemas en las ganaderías bovinas, existiendo en
mayor porcentaje Boophilus microplus, que produce anaplasmosis, enfermedad
conocida como ranilla blanca o huequera que degenera en anemia, ocasionando la
muerte del animal. La piroplasma, llamada también babesiosis, fiebre de garrapatas o
ranilla roja, produciendo un 90 % de mortalidad (INIAP, 2008).
5
1.3.2 Problema.
La presencia de ectoparásitos como las garrapatas causan enfermedades y merma en la
producción bovina (carne, leche), lo que trae disminución de ingresos al productor
ganadero, a lo que se suma el costo de los tratamientos y además que pueden ocasionar
la muerte de los semovientes.
1.3.3 Preguntas de la investigación.
¿Cuál fue la dosis óptima para el uso del hongo entomopatogeno lecanicillium
lecanii en el control de garrapatas?
¿Cuál fue el género de garrapatas encontrado en la zona de investigación?
¿Con el uso del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii se controlarán las
garrapatas?
1.3.4 Delimitación del problema.
1.3.4.1 Temporal.
Louis Pasteur es considerado como el primer científico en proponer el uso de los hongos
entomopatógenos para el control de los artrópodos plagas, pero fue E. Metchnikoff, a
comienzos de 1870, quien llevó a cabo la primera evaluación práctica. Los registros
indican que el muscardino verde (Metarhizium anisopliae (Metch.) Sorokin) fue
producida masivamente y aplicada en el campo para el control de varios coleópteros
plagas en los cultivos anuales como papa, remolacha azucarera y trigo. (Evans, 1982).
Como (Petch, 1925) lo comenta, éstos hongos se conocen desde el comienzo de la
micología como ciencia en Europa en el siglo XIX. La difusión e importancia ecológica
de estos llegó a ser más ampliamente apreciada como un avance en micología en las
regiones tropicales los cuales define como hongos con la habilidad de invadir y matar
sus huéspedes.
6
1.3.4.2 Espacial.El trabajo se desarrolló en el hato bovino de la familia Manobanda Rumiguano ubicada
en la parroquia Pto. Pechiche del cantón Puebloviejo como trabajo de campo y como
complemento se lo realizo en el laboratorio de la Facultad de Ciencias para el
Desarrollo.
1.4 Objetivos:1.4.1 General.
Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium lecanii) en el
control de las garrapatas en el ganado vacuno.
1.4.2 Específicos.
Determinar la dosis optima de hongos entomopatogenos para controlar garrapatas
en el ganado vacuno.
Identificar las especies de garrapatas existentes en la zona de investigación.
Elaborar una propuesta de control biológico de garrapatas para los ganaderos de la
zona de Vinces.
7
II. MARCO TEORICO
2.1 Garrapatas
Las garrapatas del ganado vacuno (Boophilus micro plus y Amblyomma cajennense) son
un grupo de parásitos artrópodos hematófagos causantes de enfermedades parasitarias
que afectan a los bovinos, causándoles anemia que incide en la producción de leche y
carne (Reyes, 2007).
Para controlar la presencia de las garrapatas en el ganado bovino, los ganaderos han
empleado perennemente acaricidas, sin percatarse de los inconvenientes ambientales
que trae su uso, así como también la posibilidad de traer problemas de salud a los
consumidores al adquirir productos como son leche y carne proveniente de animales
tratados con esto insumos acaricidas (García, 2006).
Se corre el riesgo cuando no se hace rotación de productos garrapaticidas Además,
las garrapatas crean resistencia a las sustancias químicas con el tiempo, lo que conlleva
un problema mayor (Gutiérrez Osorio, 2006). Las pérdidas económicas reportadas son
cuantiosas, se estima que el costo de producción ganadera por el daño que producen las
garrapatas alcanza entre $ 100-150 millones por año a nivel mundial (García, 2006).
8
2.2 Clasificación taxonómica de las garrapatas.
El grupo de los artrópodos incluye cerca de 825 especies divididas en tres familias: la
Argasidae (garrapatas blandas), la Ixodidae (garrapatas duras), Nuttalliella que vive en
áfrica. (Klompen, Black, Keirans, & Norris, 2000).
Clasificación taxonómica
Nivel Ubicación
Reino Animal
Phylum Arthropoda
Subphylum Chelicerata
Clase Arachnida
Orden Parasitiformes
Grupo Ixodoidea
Suborden Ixodidae
Familia Argasidae, Nuttalliellidae
Genero Bophylus, Artricola
Fuente: (Tene, 2002).
Las garrapatas son artrópodos de importancia veterinaria, por su capacidad de
transmisión de agentes patógenos. Las infestaciones de estas en el ganado vacuno
dependen de la intensidad de la población de animales y la región, sistema de
explotación, razas, estado nutricional y fisiología de los bovinos
(Corpoica & Fao, 2007).
2.2.1 Morfología:
Las garrapatas son ácaros macroscópicos caracterizados por poseer cuatro pares de
patas y un cuerpo globoso, aplanado dorso-ventralmente y no segmentado, que las
diferencias de otros arácnidos, cuyo cuerpo está dividido en dos partes (el cefalotórax y
el abdomen). Las garrapatas son ectoparásitos obligados que se alimentan de la sangre
de sus hospederos (hematófagos). (Martínez, 2016).
2.2.2 La garrapata amblyomma cajennense.
La garrapata amblyomma cajennense es un ectoparásito que disminuye la producción de
carne y leche, además de actuar como transmisor de enfermedades. Esta garrapata es
9
considerada una peste del ganado silvestre, doméstico, es una garrapata cazadora
agresiva que frecuentemente ataca en grupos. Esta especie prefiere biomas tropicales o
subtropicales, porque carece de resistencia al frío, aunque tolera ambientes semiáridos.
Estas características limitan su distribución geográfica, que va desde el sur de Estados
Unidos hasta el norte de Argentina. En toda esta región se observa una abundancia
relativa de adultos en los meses más cálidos del año (aquellos de la época lluviosa), y de
larvas y ninfas durante los meses fríos.(Rodriguez, Manrrique, & Hdez, 2010).
2.2.3 La garrapata Boophilus microplusEl género Boophilus es conocido como la "garrapata común del ganado vacuno" o
"garrapata común con ojos". B. microplus es conocida como "garrapata tropical del
ganado vacuno". La garrapata Boophilus microplus se alimenta del animal por un
período de tres semanas, pasa por los estadios de larva, ninfa y adulto.
En las últimas 24 horas aumenta su tamaño más de cinco veces, se llena de sangre, se
desprende y cae al suelo, donde busca un sitio adecuado para desovar. Su ciclo
biológico está compuesto por cuatro estadíos: huevo, larva, ninfa y adulto. Las hembras
se alimentan siempre de sangre mientras que los machos raramente lo hacen.
En la superficie cutánea se produce el acoplamiento del macho con la hembra que
necesita succionar sangre para la buena maduración de los huevos. Los factores
climatológicos afectan especialmente a los delicados huevos y a las fases no parásitas de
la garrapata.
Los huevos son muy sensibles a sequías. Las larvas que salen de ellos también evitan
los ambientes secos y las altas temperaturas, ya que estos factores les perjudican. Las
ninfas y especialmente las garrapatas adultas son mucho más resistentes a estos factores
climatológicos. (Rodriguez, Manrrique, & Hdez, 2010).
2.3 Ciclo biológico.
Su ciclo biológico está compuesto por cuatro estadíos: huevo, larva, ninfa y adulto. Las
hembras se alimentan siempre de sangre mientras que los machos raramente lo hacen.
En la superficie cutánea se produce el acoplamiento del macho con la hembra que
necesita succionar sangre para la buena maduración de los huevos.
10
El tiempo promedio que ocurre desde la caída de las hembras repletas o teleogina
hasta la eclosión de las larvas es de aproximadamente 30 días, disponen cantidades
determinadas de huevos (Boophilus spp. entre 2 000-3 000; Amblyomma spp. Hasta
5 000). Es por esto que las condiciones de vegetación, temperatura y humedad relativa
del microclima del suelo son importantes para la supervivencia de la especie Los
factores climatológicos afectan a los huevos ya que son sensibles a las sequias y altas
temperaturas lo mismo sucede con la fase no parásita de la garrapata como son las
larvas. Las ninfas y las garrapatas adultas son mucho más resistentes a estos factores
climatológicos (Senasa, 2006).
Una vez que las larvas están en el ambiente, comienza lo que se denomina
maduración de la larva que no es más que la obtención del estado fisiológico óptimo
para parasitar al hospedador y que lo alcanza en unos 4-7 días después de la eclosión.
Las larvas comienzan a trepar las hojas de los pastos para esperar allí al hospedador.
Esta operación la hacen especialmente en horas de la mañana cuando aún la temperatura
está fresca y en menor grado por la tarde. Durante las horas de calor las larvas
descienden a lugares del pasto protegidos de la luz solar y con suficiente humedad. Las
larvas pueden permanecer en el medio ambiente esperando un hospedador durante un
tiempo promedio de 60-70 días (Calox, 2011).
2.4 Condiciones ambientales para el desarrollo de la garrapata
En las zonas tropicales, la presencia de lluvias regulares, alta humedad y clima cálido,
dan las condiciones óptimas para el desarrollo de varias generaciones de garrapatas. En
regiones subtropicales, caracterizadas por temporadas de lluvias y sequías, la intensidad
de la plaga es fluctuante. Hay un máximo de infestaciones cada temporada calurosa y
húmeda, en donde se produce una invasión masiva de larvas y ninfas de garrapatas.
Cuando el acaro no puede desarrollarse se dan casos de hipobiosis, (la interrupción
temporal del desarrollo de un parásito) de modo que el ciclo evolutivo completo puede
durar de 1-2 años. (Guajardo Cota, 2014).
11
2.5 Importancia de la garrapata a nivel mundial
Alrededor del 80 % del ganado bovino a nivel mundial está infestado con garrapatas,
por lo cual, se consideran como la ectoparasitosis del ganado de mayor repercusión
económica, las garrapatas más importantes desde este punto de vista pertenecen a los
siguientes géneros: Amblyomma, Dermacentor, Ixodes y Rhipicephalus, incluyendo en
este último el recientemente renombrado subgénero Boophilus.
Las garrapatas son consideradas como ectoparásitos que se alimentan
exclusivamente de sangre (hematófagos) ocasionando daños directos e indirectos de
grandes perjuicios a los bovinos. Los daños directos ejercen una acción traumática,
toxica, infecciosa en los animales, mientras que los indirectos, están representados por
las afecciones que ocasionan en la piel, disminución en la producción de carne,
producción de leche, atraso en el crecimiento, dificultan en la adaptación de razas
seleccionada y predisposición a contraer enfermedades (Guajardo Cota, 2014).
2.6 Perdidas económicas
Se indica que las garrapatas al estar en contacto con el hospedero provocan extracción
de 0,5-2,0 ml de sangre, y dado que una res puede estar parasitada por varios miles de
garrapatas, ésta sufrirá una pérdida considerable de sangre (Camacho, 2010).
El ataque de Boophilus microplus es uno de los principales problemas con
mayor impacto económico, se indica que a partir de 20 garrapatas/animal el daño
empieza a tener efectos negativos por merma del peso o baja producción de leche,
además efectos sobre la fertilidad (Junquera, 2015).
12
2.7 Efecto de la garrapata sobre los animales.
Las picaduras de garrapata provocan daños directos a sus hospedadores y sobre todo es
la vía de transmisión de importantes patógeno como babesia y anaplasma que causan
graves enfermedades en los animales vacunos como son la babesiosis y anaplasmosis,
siendo en algunos casos fatales.
En la actualidad hay muy pocos biológicos anti-garrapata para los animales, por lo
que resulta necesario desarrollar vacunas, de ser posible de amplio espectro, para
controlar sus poblaciones y evitar problemas de salud animal y por ende en el hombre
(Manzano, Díaz, & Pérez, 2012).
2.8 Acción patógena de la garrapata.
2.8.1 Acción patógena expoliatriz.
Todas las garrapatas son hematófagas desde su estado larval hasta su estado de imago,
por lo cual la anemia y las consecuencias de las mismas constituyen un síntoma casi
constante. (Barrera & Duarte, 2006).
2.8.2 Acción patógena traumática.
Esta acción patógena también es originada por todas las garrapatas con su órgano de
fijación y sus uñas. Al abandonar al hospedero los ixodidos, dejan una lesión en la piel
la cual se cicatriza posteriormente dando lugar a una merma en el valor de los cueros
que puedan llegar a una depreciación de los mismos hasta de un 50 %.
(Barrera & Duarte, 2006).
2.9 Principales métodos de control de la garrapata en los sistemas
Mucho han sido los métodos de control que el hombre ha implementado para erradicar
esta problemática. Primero fueron los aceites y extractos de plantas, más tarde el
petróleo crudo y las soluciones arsenicales hasta llegar a las sustancias química
(FAO, 2003).
13
2.9.1 Control químico y resistencia.El método más eficiente para el control de garrapatas, es la utilización de productos
químicos a una frecuencia de tratamientos variables dependiendo del nivel de
infestación de los animales. Los productos químicos se agrupan en familias que
presentan similitud en su estructura química y sitio de acción.
El método químico es utilizado como herramienta de control, se puede aplicar
considerando varias estrategias de aplicación y formulación del producto, la selección
depende de la tecnología de manejo aplicada por los productores, recursos disponibles y
el impacto económico del sistema productivo (Rodriguez et al., 2006).
Campuzano y Almeida (2008) indican que el uso de productos químicos es el
método más empleado en distintos países del mundo, por la facilidad de aplicación y la
evolución de las sustancias utilizadas. Actualmente, existe una gran cantidad de
compuestos con características acaricidas; dentro de los cuales se encuentran los
organofosforados, los piretroides sintéticos, el amitraz, los inhibidores de quitina, el
fipronil y nuevos compuestos como el spinosad. Aplicándose en forma sistémica
(inyectables o pour on) o tópica externa (inmersión y aspersión).
2.9.2 Control biológico.
Campuzano y Almeida (2008) afirman que se emplean hongos entomopatogeno para
regular naturalmente poblaciones de artrópodos e insectos; entre ellos Metarhizium
anisoplae, Beauveria bassiana y lecanicillium lecanii han mostrado tener potencial en el
control de garrapatas con una efectividad superior al 70 %, aunque, la desventaja de este
tipo de control, es que los hongos mencionados pierden actividad al estar expuestos a
las condiciones climáticas y a la luz solar.
2.10. Hongos entomopatógenos
Los hongos entomopatogenos han demostrado tener potencialidad para el control de
plagas agrícolas, los mismos que pueden utilizarse en la agricultura orgánica y
convencional. Una de estas alternativas, es el uso de hongos como Metarhizium
14
anisopliae (Hypocreales: Clavicipitaceae) el cual ha demostrado ser eficiente, tanto en
estudios in vitro como in vivo, para el control de las diferentes fases evolutivas de la
garrapata R. microplus por que causa disminución en la tasa de ovoposición, incrementa
el período de incubación y de eclosión.
Además produce la muerte de larvas y garrapatas adultas con porcentajes de
eficiencia del 100 %, Lecanicillium spp, pertenecientes a la clase Zygomycetes e
Ascomicetes, son organismos heterótrofos (falta de fotosíntesis), que poseen células
quitinizadas, (Ojeda, Rodríguez, Galindo, Lezama, & Cruz, 2011).
El inicio de la infección, se realiza por germinación de las esporas del hongo sobre
el tegumento del hospedador. Los individuos enfermos no se alimentan, presentan
debilidad y desorientación y cambian de color, presentando manchas oscuras sobre el
tegumento, que se corresponden con las esporas germinadas del hongo.
Normalmente, los hongos suelen comercializarse en preparados a base de esporas
hidratadas, para su utilización, debe prepáraselo en solución con agua 24 horas antes de
su utilización, después de su aplicación generalmente tardan una semana como mínimo
en eliminar a la víctima o al menos en que esta deje de alimentarse (Giraldo, 2012).
2.11 Modo de acción
Los hongos entomopatógeno actúan principalmente por contacto, cuando el hongo es
capaz de penetrar el insecto e invadirlo, provocándole la muerte por micosis. La
mayoría de los autores abordan ampliamente el ciclo infectivo de estos hongos
dividiéndolo en dos fases: una parasítica y otra saprofítica.
La fase parasítica incluye la adhesión del conidio a la cutícula del insecto, la
germinación (estimulada por los lípidos cuticulares del hospedante), penetración
(complejos multienzimáticos con enzimas secretadas como lipasas, quitinasas y
proteasas activadas secuencialmente) y multiplicación del hongo (por blastosporas
fundamentalmente) (Bastidas, Constante , Cuellar, Monroy, & Perpiñán , 2013).
15
La fase saprofítica se caracteriza por una colonización total con melanización y
momificación del individuo, emergencia del hongo y su esporulación, cuando la
humedad relativa micro ambiental es alta. Estos conidios pueden diseminarse mediante
el viento, el agua, otros organismos y el hombre, para así iniciar un nuevo ciclo
infectivo (Bastidas, et al 2013).
2.12 Toxinas de hongos entomopatógenos
Las toxinas producidas por este hongo entomopatogeno son sustancias muy toxicas para
artrópodos, por lo que pueden causar su muerte debido a sus propiedades acaricidas;
además actúan como inhibidores de las reacciones de defensa del insecto. La
producción de toxinas, es una característica de todos los hongos y cepas. Las toxinas
producidas pueden ser de dos tipos:
a) Toxinas macromoléculas proteicas
b) Toxinas de bajo peso molecular.
Las primeras son enzimas secretadas en cantidades significativas tanto en medios
de cultivo como en el cuerpo del insecto como son la serilproteasa y la sulfidrilproteasa,
que han sido aisladas de metarhizium; otras enzimas encontradas son lipasas,
glucogenasas, amilasas y quitinasas. El segundo tipo corresponde a metabolitos
secundarios, cuya producción es una propiedad genética de los hongos, pero que puede
ser afectada por factores como nutrientes, pH, temperatura, etc. Las toxinas más
comunes de este tipo son principalmente las destruxinas, demetildextruxina y
protodextruxina (Monzon, 2003).
2.13 Efecto entomopatógenos
(Maribel, et al. 2011) Mencionan que la penetración del hongo en los órganos ocurre al
quinto día pos infección invadiendo también, los órganos reproductivo y digestivo, esta
se debe a las micotoxinas, cambios patológicos en el hemocele, acción histolítica y
bloqueo mecánico del aparato digestivo, secundario al crecimiento de las hifas.
16
La unidad infectiva es la espora (reproducción sexual) o el conidio (reproducción
asexual). La invasión al hospedero, se produce con la adherencia del conidio a la
cutícula del insecto, posteriormente este produce un tubo germinativo y un apresorio
(modificación de las hifas), como producto de la dilatación de la hifa. En la penetración
están presentes dos procesos principales: el físico, debido a la presión de la hifa, la cual
rompe las áreas membranosas esclerosadas y el químico, resultante de la acción
enzimática (proteasas, lipasas y quitinasas), lo cual facilita la penetración mecánica
(Giraldo, 2012)
En el área de la pro cutícula alrededor de la penetración, aparecen síntomas de
histólisis (descomposición del tejido par acción enzimática). A partir de la penetración
se inicia el proceso de colonización, en el cual la hifa sufre un engrosamiento y se
ramifica en la cavidad general del cuerpo. A partir de ese momento se forman pequeñas
colonias del hongo y otros cuerpos hifales (blastosporos), sin embargo no ocurre gran
crecimiento hifal antes de la muerte del insecto (Giraldo, 2012).
La cutícula está formada aproximadamente en un 70 % de proteínas, lo que explica
que sean las proteasas más importantes que las quitinasas. Después de la muerte del
insecto, el hongo crece dentro del cadáver y todos 1os tejidos internos son penetrados
por hifas filamentosas. La colonización del hongo en los órganos del artrópodo se
produce en la siguiente secuencia: cuerpos grasosos, sistema digestivo, sistema urinario,
hipodermis, sistema nervioso, músculo, sistema respiratorio. Después de la muerte del
insecto y cuando las condiciones de humedad relativa son adecuadas. La emergencia del
micelio se realiza a través del tegumento, éste crece en la superficie y espórtula después
de 48-60 h de la muerte del hospedero (Giraldo, 2012).
2.14 Experiencias investigativas
Según (Azate, Gutierrez, & Saldarriaga, 2008) en el trabajo de investigación
Patogenicidad de Lecanicillium lecanii (Fungi) sobre la garrapata Boophilus microplus
(Acari: Ixodidae) en laboratorio determinó la patogenicidad del hongo Lecanicillium
17
lecanii sobre la garrapata del ganado Boophilus micro plus obteniendo como resultados
de un 95 % de efectividad a los 12 días.
Según (Serrano, 2009) En el estudio realizado en México el hongo Verticillium lecanii
tuvo acción ovicida, elimino el 100 % de las larvas del parásito y además fue efectivo
contra el 40 % de los parásitos adultos tratados.
Según (Intriago Alcivar, 2014). Cuyo trabajo de investigación es Beneficios
ambientales generados con la utilización de hongos entomopatógenos para el control de
garrapata, en ganado vacuno. Año 2012. Indica que uno de los estudios biológico
realizado en los últimos años con resultados promisorios son los hongos
entomopatógeno como L. lecanii, que ha demostrado ser patogénicos para varias
especies de garrapatas una de las mejores dosis de las cepas L. lecanii para el control de
garrapata Amblyomma cajennense son: 1 mg/100 ml logrando controlar entre el 80 y 89
% de ácaros.
Se ha visto que las cepas de V. lecanii para el control de garrapatas alcanzan
efectividades técnicas entre 75-80 % en condiciones de campo. El costo de producción
es bajo, siendo atractivo para los productores (Intriago Alcivar, 2014).
Mientras que (Rijo Camacho, 2015). Cuyo trabajo de investigación es control de
garrapata del ganado, boophilus microplus (canestrini) con hongos entomopatógenos.
Afirma que las cepas de V. lecanii para el control de garrapatas alcanzan efectividades
técnicas entre 75-80 % en condiciones de campo.
18
III. MARCO METODOLÓGICO
3.1 Localización del experimento.
El trabajo experimental se lo desarrolló en el hato bovino de la familia Manobanda
Rumiguano ubicada en la Parroquia Puerto Pechiche del cantón Puebloviejo, cuyas
condiciones meteorológicas son temperatura promedio 25,5 ºC, Humedad relativa 80 %
- 90 %, Precipitación 1 492 mm/año, Longitud 1̊ 31′ 5″ S, Latitud 79 ̊ 32′ 30″ Altitud
41msnm,1 y en laboratorio de la Facultad de Ciencias para el Desarrollo en el cantón
Vinces.
3.2 Factor en estudio
El hongo Lecanicillium lecanii como bioacaricida en el control de garrapatas en ganado
bovino en la zona de Puebloviejo, y observación de genero predominante en la zona de
estudio.
3.3 Tamaño de la muestraPara el trabajo de campo se utilizaron 25 bovinos de raza mestizos (Brown Swiss con
Holstein), del hato ganadero de la familia Manobanda Rumiguano de la parroquia
Puerto Pechiche del cantón Puebloviejo y el trabajo de laboratorio se realizó en la
Facultad de Ciencias para el Desarrollo en Vinces.
1 http://www.serviciometeorologico.gob.ec/ (INAMHI)
19
3.4 Materiales y equipos
Los materiales y equipo que se utilizaron en el presente estudio de investigación
fueron los siguientes:
3.4.1 Materiales e insumos de laboratorio Probeta
Agua y jabón
Mascarilla
Mandil
Guantes
Vasos de precipitación de 500cc
Alcohol
Porta objetos
Papel toalla
mascarillas
Marcadores
Cinta adhesiva
Ficha de registro de animales.
3.4.2 Materiales de campo
Bomba de mochila cp3
Esferos
Botas
Soga
3.4.3 Equipos Agitador
Computador
Cámara fotográfica
Balanza
Estereoscopio
3.4.4 Biológico Bovinos
Hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii (polvo mojable –
lecaniceb10WP).
20
3.5 Diseño experimental y análisis estadístico
Para nivel de campo se utilizó el estadígrafo de desviación estándar, coeficiente de
variación y para establecer el nivel de significancia se aplicará la prueba de t (Student).
Para nivel de laboratorio se utilizó estadística no paramétrica donde los resultados se
muestran en tablas y prueba de Ji cuadro (Ji²) para la comprobación de hipótesis
planteadas.
3.6 Manejo del ensayo
3.6.1. Identificación de animales.En el presente ensayo se lo efectuó en el hato bovino de la familia Manobanda
Rumiguano en la parroquia Puerto Pechiche del cantón Puebloviejo, donde se
seleccionaron 25 animales con la respectiva identificación.
3.6.2 Peso de las dosis del entomopatogeno.Con la ayuda de una balanza electrónica se realizó en el laboratorio entomológico de la
Facultad de Ciencias para el Desarrollo (FACDE) del cantón Vinces, el pesaje del polvo
mojable que contiene el hongo entomopatógeno L. lecanii, que comercialmente se lo
conoce como (lecaniceb 10wb 3x109 UFC) de laboratorio Equabiologica-Quito-
Ecuador. Las dosis pesadas fueron T1 (1g)- T2 (1,5g)- T3 (2g)- T4 (2,5g) del hongo
entomopatogeno lecanicillium lecanii.
Una vez obtenidas las dosis a utilizar, se disolvieron en medio litro de agua; en
recipientes de plástico y se las dejo reposar por 24 horas; para que se multipliquen los
conidios y de esta manera poder realizar la aplicación.
Para proceder a los baños de las diferentes unidades experimentales es importante
indicar que fueron utilizadas las siguientes dosis preparadas o concentraciones de
conidios/gramos/litro:
21
3.6.2.1 Estudio de la aplicación del hongo L. lecanii en bovinos infestadas por el parasito (garrapata) en campo.
Para la evaluación de la acción del hongo sobre las garrapatas se realizó la técnica de
baño del bioacaricida en los animales de acuerdo a dosis por tratamiento en estudio;
para lo cual se realizó baños de aspersión en relación de 5 litros por animal por medio
de bomba de mochila, conforme lo hacen los productores ganaderos
Cuadro 1. Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium
lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno, de acuerdo a
dosis de polvo hongo entomopatogeno L. lecanii g/litro de agua
Dosis (g/L)
volumen de agua para baño garrapaticida litros (L)
Cantidad en g. de L. lecanii
Conidias aplicadas en disoluciones (millones de conidias)
T1 (1g) 5 5 5 00
T2 (1,5g) 5 7,5 7 50
T3 (2g) 5 10 10 00
T4 (2,5g) 5 12,5 12 50
* fuente www.equabiologica.com
1 g= 100 millones de conidios
3.6.3 Evaluación de las regiones de los bovinos en estudio antes y después de aplicación de hongo entomopatogeno.Se llenaron hojas de registros con la observación directa y evaluación de la cantidad de
garrapatas existente en las unidades experimentales en las diferentes regiones como
fueron: ubre, oreja, testículo, cola, entre piernas y tabla del cuello. Luego se efectuó la
aplicación del hongo entomopatógeno y se volvió a tomar datos en las mismas regiones
a las 72h00 y 96h00; lo que permitió evaluar la mortalidad.
3.6.4 Manejo del ensayo para el laboratorio.3.6.4.1 Recolección de las garrapatas.
Para el manejo del ensayo de laboratorio se realizaron tres recolecciones de garrapatas a
partir de la aspersión del hongo entomopatogenos en los bovinos y de acuerdo a las
22
regiones en estudio. La primera colección se realizó a las 48 horas; la segunda
recolección de garrapatas a las 72h00 y una tercera a las 96h00. En todas se procedió a
recolectar manualmente las garrapatas de cada uno de los tratamientos, para colocarlas
en cajas petri, debidamente identificadas y rotuladas; las cuales fueron trasladadas al
laboratorio entomológico de la Facultad de Ciencias para el Desarrollo (FACDE); para
observar los cambios morfológicos de las garrapatas provocado por el entomopatogeno.
3.6.4.2 Evaluación de garrapatas expuestas al hongo entomopatogeno, en las cajas Petri.
En cada una de las recolectas de cada tratamiento se realizó las observaciones de las
garrapatas en las cajas Petri cada 24 horas, pudiendo observar la acción del bioacaricida
como iba afectando la garrapata ocasionando daños en la dermis, se observó la
esporulación del hongo entomopatogeno y se pudo verificar la muerte de la garrapata
mediante la observación de cada uno de los tratamiento y muertes de estos ácaros se
determinaba que tratamiento era el más eficiente.
3.7 Datos evaluados
Este trabajo de investigación estuvo compuesto en dos etapas una en campo y otra en
laboratorio, donde se evaluaron garrapatas desprendidas en las regiones evaluadas y
mortalidad de garrapatas en cajas Petri, a diferente tiempo.
3.7.1 Bioensayo en bovinos experimentalmente infestados con el hongo
entomopatógeno Lecanicillium lecanii para determinar la mortalidad in
vitro de las garrapatas expuestas a la acción del bioacaricida.
Se evaluó la acción acaricida de las diferentes dosis in vitro del hongo entomopatógeno
sobre las garrapatas.
a) Porcentaje de mortalidad de las garrapatas previa inspección de su presencia antes
de la aplicación del biocontrolador (hongo Lecanicillium lecanii).
b) Para determinar mortalidad se utilizó la siguiente formula:
Porcentaje de control = ((Pf – Pi) / Pi) × 100. (Tondelli, 2006).
Pf = Población final.
Pi = Población inicial.
23
c) Cuantificar el tiempo y/o etapa en la que el biocontrolador (hongo Lecanicillium
lecanii) de acuerdo a las dosis utilizadas tuvo mayor efecto sobre las garrapatas a
fin de evaluar su acción en el artrópodo.
3.7.2 Hongo entomopatógeno L. lecanii tiempo de acción acaricida en la
garrapata in vitro.
El objetivo de esta evaluación fue conocer la acción del hongo L. lecanii después de
estar expuesto a las garrapatas en diferentes periodos, se considera el tiempo de
germinación de los conidios en las garrapatas y determinar en qué tiempo el hongo
entomopatógeno comienza a desarrollarse sobre el acaro provocando mortalidad de las
garrapatas, por entero toxemia y debido a la proliferación de millones de conidias.
24
IV RESULTADOS
4.1 Determinación de la dosis optima del hongo entomopatogeno Lecanicillium
lecanii para controlar garrapatas en el ganado vacuno.
Según los resultados obtenidos, se determinó que la dosis óptima para el uso del hongo
entomopatogeno lecanicillium lecanii como bioacaricida fue el tratamiento T4 (2,5g/L)
obteniendo un 89.26 % de mortalidad en campo y 81.25 % en laboratorio.
Cuadro 2 Dosis optima del hongos entomopatogeno Lecanicillium lecanii para controlar garrapatas en el ganado vacuno.
% nivel campo % nivel laboratorio
tratamientos antes de aplicar
96 horas % # de ácaros
recolectados96
horas %
T1 1g/L 142 39 72,54 32 14 56,25T2 1,5g/L 109 25 77,06 32 15 59,37T3 2g/L 146 20 86,3 32 11 65,62
T4 2,5g/L 121 13 89,26 32 6 81,25
4.2 Determinación de las especies de garrapatas existente en la zona de estudio.
Se estableció que, de 656 garrapatas observadas, el 100% correspondía a la especie
Boophilus microplus como se lo indica en el cuadro # 3.
Cuadro 3. Identificación de la especie de garrapatas existente en la zona de investigación
Área de investigación
total de garrapatas en estudio
Amblyomma cajennense
Boophilus microplus
Campo 528 0% 100%Laboratorio 128 0% 100%total 656 0% 100%
4.3 Elaboración de una propuesta de control biológico para el control de
garrapatas en ganado bovino.
Una vez concluido este trabajo de investigación, basado en los resultados obtenidos en
campo y laboratorio se realizó una propuesta de control biológico para que se llegue a
dar a conocer la preparación y uso del entomopatogeno, recomendando como mejor
25
dosis para baños garrapaticidas el T4 (2,5 g/L), y conociendo la especie de garrapata
predominante como lo es la Boophilus microplus cuyo ciclo biológico es: ver figura (1)
(Figura 1)
Así obtener un control eficiente de esta especie de garrapata se recomienda realizar los
baños con el bioacaricida (hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii) cada 15 días
para así cortar el ciclo evolutivo de la misma, e ir disminuyendo el uso de sustancias
químicas como son los órganos fosforados e ivermectinas que se las podría utilizar para
el control de estos parásitos una vez por mes. Se realizó un plan de trabajo sobre dicha
propuesta cuyos objetivos son:
Ejecutar actividades de capacitación dirigidas a pequeños y mediados ganaderos
de la asociación Carlos Montiel del cantón Vinces.
Involucrar a organizaciones gubernamentales y no gubernamentales en la
implementación del programa de control biológico de garrapatas.
(Ver anexo pág. 54)
26
4.3.1 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del
cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida
Lecanicillium lecanii y después de la misma con la dosis de 1 g/l.
En el cuadro a continuación podremos observar los resultados en las siguientes
regiones: orejas, pecho, ubre, testículo, y cola antes de la aplicación del bioacaricida
encontramos un promedio (ẋ) de garrapatas de 26-38-38-y 40 respectivamente. A las
96h00 de la evaluación se obtuvo un promedio de 9–8–9–y 13 ácaros. Los Coeficientes
de Variación (C.V) obtenido antes y después de las aplicaciones fueron 18,04 %– 14,87
% y 22,74 % Para la prueba de (t) se obtuvieron valores altamente significativos
después de las aplicaciones (96h00 de observación), para las siguientes regiones orejas,
pecho y ubre, y significativo para la región de la cola.
Cuadro 4 Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno antes de la aplicación del bioacaricida con la dosis de 1 g/.
27
T1 (1g)
Regiones antes 72h00 después 96h00 después
Cantidad % Cantidad % Cantidad %Oreja 26 18,31 24 16,90 9 6,34Ubre 38 26,76 34 23,94 9 6,34Cola 38 26,76 33 23,24 13 9,15
Pecho 40 28,17 30 21,13 8 5,63Total 142 121 39
cv 18,04 14,87 22,74T Student 11,09 13,44 8,79
4.3.2 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del
cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida
Lecanicillium lecanii con la dosis de 1,5 g/l.
En el siguiente cuadro podremos observar los resultados de las regiones: orejas, pecho,
ubre, testículo y cola antes de la aplicación del bioacaricida encontramos un promedio (ẋ)
de garrapatas de 15–32–28–y 34 respectivamente. A las 96h00 de evaluación se obtuvo un
promedio de 5–4–8–y 8. (C.V) obteniendo antes y después de las aplicaciones fueron 31,34
%– 27,81 % y 32,98 %. Para la prueba de (t) se obtuvieron a las 96h00 de observación
valores significativos para todas las regiones en estudios.
Cuadro 5 Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno, con la dosis de 1,5 g/l.
T 2(1,5g)
Regionesantes 72h00 después 96h00 después
Cantidad % Cantidad % Cantidad %Oreja 15 13,76 13 11,93 8 7,34Ubre 28 25,69 26 23,85 4 3,67Cola 34 31,19 25 22,94 8 7,34
Pecho 32 29,36 21 19,27 5 4,59Total 109 85 25
cv 31,34 27,81 32,98T Student 6,38 7,19 6,06
28
4.3.3 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del
cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida
Lecanicillium lecanii de 2 g/l.
Cómo se puede observar en el siguiente cuadro los resultados en las siguientes regiones:
orejas, pecho, ubre, testículo y cola antes de la aplicación del bioacaricida se encontró
un promedio (ẋ) de garrapatas de 15–29–5–y 47 respectivamente. A las 96h00 de la
evaluación se obtuvo un promedio de 1–1–8–y 3 (C.V) obteniendo antes y después de
las aplicaciones fueron 49,29 %– 57,13 % y 101,66 %. Para la prueba de (t) se
obtuvieron valores altamente significantes después de las aplicaciones (96h00 de
observación), para las regiones ubre y cola. Significativo para las demás regiones.
Cuadro 6 Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno con la dosis de 2 g/l.
T 3(2 g)Regiones antes
72h00 después 96h00 despuésCantidad % Cantidad % Cantidad %
Oreja 15 10,27 13 8,90 1 0,68Ubre 55 37,67 43 29,45 15 10,3Cola 47 32,19 25 17,12 3 2,05
Pecho 29 19,86 15 10,27 1 0,68Total 146 96 20
cv 49,29 57,13 101,66T Student 4,06 3,5 1,97
29
4.3.4 Cantidad de garrapatas encontradas en las regiones, orejas, tabla del
cuello, ubre, testículos y cola antes de la aplicación del bioacaricida
Lecanicillium lecanii la dosis de 2.5 g/L.
Los resultados del efecto de las aplicaciones en las regiones: orejas, pecho, ubre y cola
antes de la aplicación del bioacaricida encontramos un promedio (ẋ) de garrapatas de
22–41–38–y 20 respectivamente. A las 96h00 de la evaluación se obtuvo un promedio
de 1–2–8–1 y 2. (C.V) obtenidos antes y después de las aplicaciones fueron 35,64 %–
49,61 %– y 98,51 %. Para la prueba de (t) se obtuvieron valores altamente
significativos después de las aplicaciones (96h00 de observación) en las regiones ubre,
cola y significativo para las demás regiones.
Cuadro 7 Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (Lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno, con la dosis de 2,5 g/l.
T 4(2,5 g)Regiones antes 72h00 después 96h00 después
Cantidad % Cantidad % Cantidad %
Oreja 22 18,18 13 10,74 1 0,83Ubre 38 31,40 28 23,14 8 6,61Cola 20 16,53 9 7,44 2 1,65Pecho 41 33,88 16 13,22 2 1,65Total 121 66 13cv 35,64 49,61 98,51T Student 5,61 4,03 2,03
30
4.4 Trabajo de laboratorio
4.4.1 Resultados de laboratorio comprobación de la hipótesis Ji
cuadrado
En los muestreos regulares realizados en las garrapatas recolectadas a las 24 horas no se
obtuvo resultados con la aplicación del bioacaricida compuesto del hongo entomopatogeno
Lecanicillium lecanii.
Cuadro 8 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) 48/horas, en la Evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (L. lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno.
Garrapatas vivas Garrapatas muertas
Total de garrapatas
analizadas
7 1 8
7 1 8
7 1 8
7 1 8
28 4 32
Formulación de la hipótesis alternativa
Hipótesis: H0: El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii tiene efecto acaricida sobre
las garrapatas en el ganado bovino.
Hipótesis H1: El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii no tiene efecto acaricida
sobre las garrapatas en el ganado bovino.
Nivel de significancia: se supone un nivel del 0,05
Distribución de muestra: grados de libertad (f-1) (e-1) = (4-1) (r-1) = (3) (1) = 3 la
distribución queda para tres grados de libertad y un nivel de significancia de 0,05 en la
tabla de x² se obtiene un valor de 7,82
Región de rechazo: la región de rechazo queda comprendida para todos los valores
mayores a 7,82
31
Cálculo matemático: para determinar matemáticamente si se acepta o rechaza la hipótesis
nos valemos de la siguiente tabla de prueba de Ji cuadro (Ji²)
Tabla ji (X²)
Grados de control al 5% =7,82 valor de la tabla a las 48h00 en la evaluación del efecto
acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas
en el ganado vacuno.
Tratamientos Garrapatasvivas muertas TOTAL o e o-e (o-e)²/e
T 1 7 1 8 7 7 0 0
T 2 7 1 8 7 7 0 0
T 3 7 1 8 7 7 0 0
T 4 7 1 8 7 7 0 0
TOTAL 28 4 32 1 1 0 0
1 1 0 0
7 1 1 1 0 0
1 1 0 0
0
Decisión: dado el valor de X² es igual (0,3333) y es menor al rango de rechazo de 7,82 la
decisión es aceptar la H0: El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii tiene efecto
acaricida sobre las garrapatas en el ganado bovino.
32
Cuadro 9 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) 72/horas en la evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (lecanicillium lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno.
Formulación de la hipótesis alternativa
Hipótesis: H0: El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii tiene efecto acaricida sobre
las garrapatas en el ganado bovino.
Hipótesis H1: El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii no tiene efecto acaricida
sobre las garrapatas en el ganado bovino.
Nivel de significáis: se supone un nivel del 0,05
Distribución de la muestra: grados de libertad (f-1) (e-1) = (4-1) (r-1) = (3) (1) = 3 la
distribución queda para tres grados de libertad y un nivel de significancia de 0,05 en la
tabla de X² se obtiene un valor de 7,82
Región de rechazo: la región de rechazo queda comprendida para todos los valores
mayores a 7,82
Cálculo matemático: para determinar matemáticamente si se acepta o rechaza la hipótesis
nos valemos de la siguiente tabla de prueba de Ji cuadro (Ji²).
Tabla ji X²
33
Garrapatas vivas Garrapatas
muertas
Total de garrapatas
analizadas
0 8 8
0 8 8
0 8 8
1 7 8
1 31 32
Grados de control al 5 % = 7,82 valor de la tabla a las 72h00 de observación en
la evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatogeno (L. lecanii) en el
control de las garrapatas en el ganado vacuno.
Garrapatas vivas
Garrapatas muertas
Total de garrapatas analizadas
o E o-e (o-e)² (o-e)²/e
0 8 8 0 0,25 -0,25 0,06 0,250 8 8 0 0,25 -0,25 0,06 0,250 8 8 0 0,25 -0,25 0,06 0,251 7 8 1 0,25 0,75 0,56 2,251 31 32 8 7,75 0,25 0,06 0,0081
8 7,75 0,25 0,06 0,00818 7,75 0,25 0,06 0,00817 7,75 -0,75 0,56 0,0726
3,0968
Cálculo matemático: para determinar matemáticamente si se acepta o rechaza la hipótesis
nos valemos de la siguiente tabla de prueba de Ji cuadro (Ji²).
Decisión: dado que el valor de X² es igual (3,09) y es menor rango de rechazo de 7,82 la
decisión es aceptar la H0, El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii tiene efecto
acaricida sobre las garrapatas en el ganado bovino.
34
Cuadro 10 Comprobación de la hipótesis Ji cuadrado (Ji²) ji 96/horas en la evaluación del efecto acaricida del hongo entomopatógeno (L. lecanii) en el control de las garrapatas en el ganado vacuno.
Garrapatas
vivas
garrapatas
muertas
total de
garrapatas
analizadas
2 6 8
0 8 8
4 4 8
0 8 8
6 26 32
Formulación de la hipótesis alternativa
Hipótesis: H0: El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii tiene efecto acaricida sobre
las garrapatas en el ganado bovino.
Hipótesis H1: El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii no tiene efecto acaricida
sobre las garrapatas en el ganado bovino.
Nivel de significáis: se supone un nivel del 0,05
Distribución muestral: grados de libertad (f-1) (e-1) = (4-1) (r-1) = (3) (1) = 3 la
distribución queda para tres grados de libertad y un nivel de significancia de 0,05 en la
tabla de X² se obtiene un valor de 7,82
Región de rechazo: la región de rechazo queda comprendida para todos los valores
mayores a 7,82.
35
Cálculo matemático: para determinar matemáticamente si se acepta o rechaza la hipótesis
nos valemos de la siguiente tabla de prueba de Ji cuadro (Ji²).
Tabla ji X²
Grados de control al 5 % = 7,82 valor a las 96h00 de observación evaluación del efecto
acaricida del hongo entomopatógeno (L. lecanii) en el control de las garrapatas en el
ganado vacuno.
tratamientos
Garrapatas
Vivas
Garrapatas
Muertas
Total de
garrapatas
analizadas
o e o-e (o-e)² (o-e)²/e
T 1 2 6 8 2 1,5 0,5 0,25 0,166
T 2 0 8 8 0 1,5 -1,5 2,25 1,5
T 3 4 4 8 4 1,5 2,5 6,25 4,166
T 4 0 8 8 0 1,5 -1,5 2,25 1,5
total 6 26 32 6 6,5 -0,5 0,25 0,038
8 6,5 1,5 2,25 0,346
1,5 6,5 4 6,5 -2,5 6,25 0,961
8 6,5 1,5 2,25 0,346
9,025
Decisión: dado que el valor de X² es igual (9,02) y es mayor rango de aceptación de 7,82 la
decisión es rechazada la H0 El hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii tiene efecto
acaricida sobre las garrapatas en el ganado bovino y se acepta la H1.
36
V. DISCUSIÓN
De acuerdo a los resultados logrados y comparándolos con otras investigaciones
similares se llegó a lo siguiente:
A nivel de campo con la aplicación bioacaricida L. lecanii se obtuvo una
mortalidad de garrapatas del 89,2 % por lo cual el uso del bioacaricida con la dosis
2,5 g/L (T4) mantuvo su acción entomopatógena en todas las unidades
experimentales, este resultado son mayor a los obtenidos por (Intriago, 2014) quien
en su investigación menciona que la dosis empleada para el control de garrapatas
con la utilización del hongo entomopatógeno L. lecanii es de 1g/L a 1,5g/L, el
mismo que obtuvo una mortalidad entre el 75 % y el 80 %, se presume que los
resultados obtenidos por Intriago en investigación fueron mejores de acuerdo en
dosis utilizadas, aunque este autor no determina en cuantos días obtuvo esos
resultados.
Respecto al tiempo de evaluación del grado de acción del hongo entomopatógeno
en el laboratorio, los resultados obtenido de este trabajo de investigación en la
acción del bioacaricida sobre las garrapatas, siendo el tratamiento T4 (2,5g/L) el que
presentó a las 96h00 un 81.25 % de mortalidad, Los resultados obtenidos del
trabajo de investigación difieren a los mencionado por (Azate, Gutierrez, &
Saldarriaga, 2008) quien en su estudio demostró la acción de los aislamientos del
hongo entomopatógeno L. lecanii en condiciones controladas a los 15 días, obtuvo
una mortalidad del 95 %, en todos los tratamientos de estudios, lo que se
demuestra que a mayor dosis mayor efectividad.
El haber observado la acción del hongo como bioacaricida in vitro, en el presente
trabajo de investigación a las 96H00 se obtuvo un promedio de 81.25 % de
mortalidad para el T4 (2,5g/L), mientras que (Intriago, 2014) tuvo resultados
similares con una mortalidad de las garrapatas de 80 % con dosis de 1,5 g/L.
Las disminuciones logradas en los diferentes tiempos de evaluación sobre la
mortalidad in vitro de las garrapatas expuestas al hongo L. lecanii post baño en los
37
animales bovinos no difirió numéricamente con los obtenidos en el presente
estudio; se logró mortalidades de 89.26 % a las 96h00 para el tratamiento T4
(2,5g/L), los mismos que concuerda con lo mencionado por (Azate, Gutierrez, &
Saldarriaga, 2008) ya que los autores mostraron mortalidades de garrapatas
expuesta al hongo L. lecanii de 95 % en periodos de 4-12 días.
Las especies de garrapatas encontradas en las zonas de estudios y que mayormente
se encontraron en la parroquia Puerto Pechiche fue la Boophilus micro plus en una
totalidad del 100 % y basado en los resultados se realizó una propuesta de control
biológico, la que permite dar a conocer a los ganaderos de dicha zona de estudios y
recintos aledaños de las bondades y beneficios de este hongo.
38
VI. CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados se llegó a las siguientes conclusiones:
La dosis óptima del hongo entomopatógeno para control de las garrapatas en campo fue
el tratamiento T4 (2,5 g/L) con el 89.26 % y en laboratorio un 81.25 % a las 96 horas.
La especie de garrapata encontrada en la parroquia Puerto Pechiche del cantón
Puebloviejo fue la Boophilus microplus.
El razonamiento estadístico al comparar el efecto de las dosis utilizadas sobre las
garrapatas expuestas al biocontrolador, hace que los resultados cuantitativos constatados
en los diferentes grupos de ácaros analizados nos lleven a indicar que el hongo
entomopatógeno Lecanicillium lecanii provoca la muerte de las garrapatas en el ganado
bovino.
Se realizó una propuesta de control biológico enfocada en el control de garrapatas en
bovinos, pertenecientes a las asociaciones del cantón Vinces.
En base a los resultados obtenidos se acepta la hipótesis nula: El hongo entomopatógeno
Lecanicillium lecanii tiene efecto acaricida sobre las garrapatas en el ganado bovino.
39
VII. RECOMENDACIONES
Hacer un estudio de tipificación de garrapatas existentes en la zona para tener un
conocimiento más claro de la familia y género de garrapatas que están afectando a los hatos
ganaderos de la zona, pues de esa forma se haría un control más adecuado.
Dar a conocer y aplicar la propuesta alternativa de control biológico anexada en el presente
trabajo de investigación, a los ganaderos del cantón Vinces y poner en marcha como trabajo
de campo.
Realizar los baños garrapaticidas con el hongo entomopatógeno cada 15 días y utilizar los
productos químicos por los menos una vez por mes.
Socializar las bondades obtenidas al usar el hongo entomopatógeno Lecanicillium lecanii
como baño garrapaticidas para el control de estos ácaros que afectan negativamente la salud
del ganado bovino.
40
VIII. BIBLIOGRAFÍA
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44
45
ANEXOSANEXOS
Tabla 1. Prueba de (t) Tratamiento uno antes de la aplicación del bioacaricida.
Valor del Parámetro Probado: 0Variable n Media DE T p(Bilateral)Antes de aplicación 4 35,5 6,4 11,09 0,0016
Tabla 2. Prueba de (t) Tratamiento uno tres días después de la aplicación.
Valor del Parámetro Probado: 0Variable n Media DE T p(Bilateral)
tres días después de la
aplicación 4 30,25 4,5 13,44 0,0009
Tabla 3. Prueba de (t) Tratamiento uno seis días después de la aplicación.
Valor del Parametro
Probado: 0
Variable n Media DE T p(Bilateral)
seis días después de la
aplicación 4 9,75 2,22 8,79 0,0031
Tabla 4. Prueba de (t) Tratamiento 2 antes de la aplicación del bioacaricida.
Valor del Parámetro
Probado: 0
Variable n Media DE T p(Bilateral)
Antes de la aplicación 4 27,25 8,54 6,38 0,007846
47
Tabla 5. Prueba de (t) Tratamiento (2) tres días después de la aplicación del bioacaricida
Valor del Parámetro
Probado: 0
Variable n Media DE T p(Bilateral)
tres días después de la
aplicación 4 21,25 5,91 7,19 0,0055
Tabla 6. Prueba de (t) Tratamiento (2) seis días después de la aplicación del bioacaricida.
Valor del Parámetro
Probado: 0
Variable n Media DE T p(Bilateral)
seis días después de la
aplicación 4 6,25 2,06 6,06 0,009
Tabla 7. Prueba de (t) Tratamiento (3) antes de la aplicación del bioacaricida.
Valor del Parámetro
Probado: 0
Variable n Media DE T
p(Bilateral
)
Antes de la aplicación 4 36,5 17,99 4,06 0,027
Tabla 8. Prueba de (t) Tratamiento (3) tres días después de la aplicación del bioacaricida.
Valor del Parámetro
Probado: 0
Variable n Media DE T p(Bilateral)
tres días después de la
aplicación 4 24 13,71 3,5 0,0395
48
Tabla 9. Prueba de (t) Tratamiento (3) seis días después de la aplicación del bioacaricida.
Valor del Parámetro Probado: 0Variable n Media DE T p(Bilateral)seis días después de la aplicación 4 3,25 3,3 1,97 0,1438
Tabla 10. Prueba de (t) Tratamiento (4) antes de la aplicación del bioacaricida.
Valor del
Parámetro
Probado: 0
Variable n
Medi
a DE T
p(Bilateral
)
antes 4 30,25 10,78 5,61 0,0112
Tabla 11: Prueba de (t) Tratamiento (4) tres días después de la aplicación del bioacaricida
Valor del Parámetro
Probado: 0
Variable n Media DE T p(Bilateral)
tres días después de la
aplicación 4 16,5 8,19 4,03 0,0274
Tabla 12. Prueba de (t) Tratamiento (4) seis días después de la aplicación del
bioacaricida.
49
Valor del Parámetro
Probado: 0
Variable n Media DE T p(Bilateral)
seis días después 4 3,25 3,2 2,03 0,1353
GRAFICOS
Gráficos 1 Dosis de 1 g del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii en la regiones de las orejas, pecho, ubres, y cola en el tratamiento 1
Oreja Ubre Cola Pecho Total cv T studen
26
38 38 40
142
18.0
3696
9682
909
4
11.0
9
18.3
1
26.7
6
26.7
6
28.1
7
24
34 33 30
121
14.8
7
13.4
4
16.9
0
23.9
4
23.2
4
21.1
3
9 9 13 8
39
22.7
4
8.79
6.34
6.34 9.15
5.63
tratamiento 1(1g)
T1 (1g) antes Cantidad T1 (1g) antes %T1 (1g) tres dias despues Cantidad T1 (1g) tres dias despues %T1 (1g) seis dias despues Cantidad T1 (1g) seis dias despues %
Gráficos 2 Dosis de 2 g del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii en la regiones
de las orejas, pecho, ubres, testículos y cola en el tratamiento 2
Oreja Ubre Cola Pecho Total cv T studen
15
28 34 32
109
31.3
4
6.3813
.76
25.6
9
31.1
9
29.3
6
13
26 25 21
85
27.8
1
7.1911
.93
23.8
5
22.9
4
19.2
7
8 4 8 5
25 32.9
8
6.06
7.34
3.67 7.34
4.59
tratamiento 2(1,5g)
Cantidad antes %Cantidad 3 dias despues %Cantidad 6 dias despues %
50
Gráficos 3 Dosis de 3 g del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii en la región de
las orejas, pecho, ubres, testículos y cola en el tratamiento 3.
Oreja Ubre Cola Pecho Total cv T studen
15
55
47
29
146
49.2
9
4.0610
.27 37
.67
32.1
9
19.8
6
13
43
25
15
96
57.1
3
3.58.90
29.4
5
17.1
2
10.2
7
1 8 3 1
13
101.
66
1.97
0.68 5.48
2.05
0.68
tratamiento 3 (2g)
Cantidad antes de aplicar %Cantidad 3 dias despues %Cantidad 6 dias despues %
Gráficos 4 Dosis de 4 g del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii en la regiones de las orejas, pecho, ubres, testículos y cola en el tratamiento 4.
Oreja Ubre Cola Pecho Total cv T studen
22
38
20
41
121
35.6
4
5.6118
.18
31.4
0
16.5
3
33.8
8
13
28
9 16
66
49.6
1
4.0310
.74
23.1
4
7.44 13
.22
1 8 1 2 12
98.5
1
2.03
0.83 6.61
0.83
1.65
tratamiento 4 (2,5g)
Cantidad antes de aplicación %Cantidad 3 dias despues %Cantidad 6 dias despues %
51
Grafico 5. Porcentajes de garrapatas vivas y muertas en las observaciones in vitro
t1 t2 t3 t4012345678 7 7 7
6
8 8 8 8observacion a las 48 horas
garrapatas vivasgarrapatas muertastotal
Grafico 6. Porcentajes de garrapatas vivas y muertas
t1 t2 t3 t405
101520253035
6 4 3 22 4 5 68 8 8 8
32observacion a las 72 horas
garrapatas vivasgarrapatas muertastotal
52
Grafico 7. Porcentajes de garrapatas vivas y muertas
t1 t2 t3 t40
5
10
15
20
25
30
35
42
0 04
68 88 8 8 8
32observacion a las 96 horas
garrapatas vivasgarrapatas muertastotal
53
Cuadro 11
Determinar dosis optima del hongo entomopatogeno Lecanicillium lecanii en las garrapatas a través de baños garrapaticidas a nivel de campo. El tiempo de observación 96 horas
tratamientos Total de garrapatas
Garrapatas muertas
Garrapatas vivas %
T1 1g/L 142 103 39 72,54T2 1,5g/L 109 84 25 77,06T3 2g/L 146 126 20 86,30T4 2,5g/L 121 108 13 89,26
Cuadro 12
Determinar el grado de acción por contacto que tiene el hongo entomopatogeno Lecanicillium lecanii a nivel de laboratorio
A las 96h00Tratamientos Total
garrapatasGarrapatas
vivasGarrapatas
muertas%
T1 1g/L 32 14 18 56,25T2 1,5g/L 32 15 19 59,37T3 2g/L 32 11 21 65,62T4 2,5g/L 32 6 26 81,25
Cuadro 13 Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.
Aplicación del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii en regiones a 24 horas
DOSIS
Regiones garrapatas 1 g 1,5 g 2 g 2,5 gG.M G.V
orejas 8 1 0 0 1 2 6cuello 8 0 1 0 2 3 5entre piernas 8 1 2 1 1 5 3cola 8 0 1 1 2 4 4
32 2 4 2 6 14 19
54
Cuadro 14. Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.
observación de la aplicación del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii 48 horas en las garrapatas
DOSIS
Regionesgarrapatas 1 g 1,5 g 2 g 2,5 g
G.M G.V
orejas 8 2 1 1 0 4 4cuello 8 1 1 1 1 4 4entre piernas 8 2 0 1 2 7 1cola 8 0 2 2 1 5 3
32 5 4 5 4 20 12
Cuadro 15. Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.
observación de la aplicación del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii 72 horas en las garrapatas
DOSIS
Regiones garrapatas 1 g 1,5 g 2 g 2,5 gG.M G.V
orejas 8 2 1 1 1 5 3cuello 8 1 1 1 2 5 3entre piernas 8 2 2 1 2 7 1cola 8 0 2 2 1 5 3
32 5 6 5 4 22 10
Cuadro 16. Total de garrapatas vivas y muertas observadas en las diferentes horas de estudios en el laboratorio.
observación de la aplicación del hongo entomopatogeno lecanicillium lecanii 96 horas en las garrapatas
Regiones garrapatas 1 g 1,5 g 2 g 2,5 g G.M G.Vorejas 8 2 1 1 2 6 2cuello 8 2 2 2 1 7 1entre piernas 8 2 2 1 2 7 1cola 8 1 2 2 2 7 1
32 7 7 6 7 27 5
55
Universidad de Guayaquil
Facultad de Ciencias para el Desarrollo
Ficha de registro de bovinos
56
Identificaci
ón del
animal
Códig
o
Hor
aColor
Identificación del
animalRegiones ah evaluar
Sex
oEda
dPeso
Raz
a
Orej
as
Ubr
e
Testículo
sCola
Cuell
oM H
FIGURAS
57
58
PROPUESTA ALTERNATIVA DE CONTROL BIOLOGICO
59