Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida
experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Johann Ricardo Baquero Parrado
Universidad Nacional de Colombia Facultad de Medicina
Departamento de Ciencias Fisiológicas Bogotá, D.C., Colombia
2015
Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida
experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Johann Ricardo Baquero Parrado
Trabajo de investigación presentado como requisito parcial para optar al título de: Magíster en Fisiología
Director: MD, Esp, Luis Eduardo Cruz Martínez
Línea de Investigación: Fisiología de Sistemas
Grupo de Investigación:
Fisiología Aplicada al Cuidado Crítico
Universidad Nacional de Colombia Facultad de Medicina
Departamento de Ciencias Fisiológicas Bogotá DC, Colombia
2015
“Aun hoy estamos lejos de imaginar cuanto
dependemos del vasto mundo que ignoramos”
Gabriel García Márquez
La Proclama: por un país al alcance de los niños.
Informe de la misión de sabios: Colombia al filo de la oportunidad.
23 de julio de 1994
Agradecimientos
Esta sección es opcional, en ella el autor agradece a las personas o instituciones que
colaboraron en la realización del trabajo. Si se incluye esta sección, deben aparecer los
nombres completos, los cargos y su aporte al trabajo.
A continuación se presenta la tabla de contenido la cual se actualiza automáticamente.
Para los textos editados en Microsoft Word se debe hacer click en el botón derecho del
mouse sobre la tabla de contenido y aparecerá el icono Actualizar Campos ( ), luego
aparecerá una ventana en la cual debe seleccionar la opción Actualizar toda la tabla.
Resumen y Abstract IX
Resumen
Introducción: Durante la lactación del ternero puede alterarse el reflejo de cierre de la gotera esofágica conduciendo a acidosis ruminal por D-lactato con implicaciones fisiológicas importantes como alteraciones en el crecimiento, baja ganancia de peso y pérdidas económicas importantes. Objetivos: Evaluar el estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente. Hipótesis: La acidosis metabólica de origen ruminal, en terneros neonatos, puede ser diagnosticada igualmente por los métodos del modelo de Henderson-Hasselbalch y por los métodos del modelo de Iones Fuertes. Animales: 11 terneros neonatos, 2 controles y 9 casos con acidosis ruminal inducida experimentalmente. Métodos: T0 determinación de valores de base, T1 y T2 toma de muestras experimentales cada 5 horas (#2). Acidosis ruminal inducida experimentalmente simulando falla en el cierre de la gotera esofágica a través de aplicación de 2 Lts de lactorreemplazador via sonda oro-ruminal (Sprayfo Red® 1 kg + 8Lt de agua). Procesamiento de muestras de líquido ruminal y sangre. Determinación de pH en fluido ruminal y pH sanguíneo; HCO3
-, pCO2, Na+, K+, Cl-, L-lactato en muestras de sangre de vena yugular; Proteínas Plasmáticas Totales (PPT) por refractometría y D-lactato por espectrofotometría. La Diferencia de Iones Fuertes (DIF), Brecha Aniónica (AG), Brecha de Iones Fuertes (SIG) y la concentración total de ácidos débiles no volátiles [ATOT] fueron calculadas. Resultados: Todos los casos experimentales desarrollaron acidosis ruminal (pH < 6.5) y aumento del D-lactato sérico (> 3.96 mmol/L). Se presentó acidemia venosa en los casos solo en T2 (10 horas). El modelo Henderson-Hasselbalch (H-H) encontró 12 valores de acidosis metabólica (#2 HCO3
- <20 mmol/L, #4 BE< -2.5 mmol/L; #5 H+met (> +5 nM/L). El Anion Gap (AG) estuvo sobre el límite superior tanto en controles y casos en todos los tiempos (16.05 – 17.65 mEq/L). El modelo de Iones Fuertes Simplificado identificó 3 valores con DIF < 38.3 mEq/L, 17 valores con [ATOT] > 21mmol/L en casos y controles con mayor dispersión en los casos del T2 y un valor con [ATOT] <15.9 mmol/L.. La Brecha de Iones Fuertes (SIG) se mantuvo dentro de los rangos de referencia en controles y casos en todos los tiempos. Solo hubo correlación estadística significativa (p <0.01; r: -0.9048) entre pH venoso sanguíneo y [D-lactato]. En ninguna otra prueba hubo diferencias significativas. Conclusión y relevancia clínica: Las alteraciones de estado ácido-base continúan siendo un problema fisiológico de alta complejidad interpretativa por la variedad de interacciones fisiológicas y físico-químicas que lo produce. Las alteraciones ácido-base son difíciles de explicar en su curso y ajustes homeostáticos y no parece que un solo modelo deba ser utilizado en su abordaje e interpretación, siendo mejor interrelacionar los hallazgos de los diferentes abordajes para interpretar un estado clínico específico. Los dos abordajes de diagnóstico empleados en este estudio no son excluyentes. Palabras clave: Estado ácido-base; Acidosis D-láctica; Brecha de Iones Fuertes (SIG); Diferencia de Iones Fuertes (DIF); Hidrogenión Metabólico, Terneros.
X Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Abstract
Background: During lactation the calf can be altered the the oesophageal groove réflex leading to D-Lactic ruminal acidosis with important physiological implications as impaired growth, low weight gain and significant economic losses. Objective: To assess the acid-base status in calves with experimentally induced ruminal acidosis. Hypothesis: The metabolic acidosis ruminal origin, in neonatal calves, can be also diagnosed by the metods of the Henderson-Hasselbalch approach and by the metods of Strong ion model.. La acidosis metabólica de origen ruminal, en terneros neonatos, puede ser diagnosticada igualmente por los métodos del modelo de Henderson-Hasselbalch y por los métodos del modelo de Stewart. Animals: Eleven newborn calves, two controls and nine cases with experimentally induced ruminal acidosis. Methods: T0 determination of baseline values, T1 and T2 of experimental samples taken every 5 hours (# 2). Experimentally induced ruminal acidosis simulating failure of the oesophageal groove reflex through intraruminal application of 2 Lts of milk replacer via a ruminal tube (Sprayfo Red® 1 kg + 8Lt water). Processing samples of ruminal fluid and blood. Determination of ruminal and blood pH; HCO3
-, pCO2, Na+, K+, Cl-, L-lactate blood samples from jugular vein; Total Plasma Protein (TPP) by refractometry and D-lactate by spectrophotometry. The Strong Ion Difference (SID), Anion Gap (AG), Strong Ion Gap (SIG) and total plasma concentration of nonvolatile weak acids (ATOT) were calculated. Results: All experimental cases developed ruminal acidosis (pH <6.5) and increased serum D-lactate (> 3.96 mmol / L). Venous acidemia appears in the cases only in T2 (10 hours) The Henderson-Hasselbach approach (HH) found 12 values or metabolic acidosis (#2 HCO3
- <20 mmol/L, #4 BE< -2.5 mmol/L; and #5 H+met (> +5 nM/L) ). The AG was above the upper limit in both cases and controls all times (16.05 - 17.65 mEq / L). The Simplified Strong Ion approach identified 3 values with SID < 38.3 mEq/L, 17 values con [ATOT] > 21mmol/L in both cases and controls with dispersion higher in cases at T2, and 1 value [ATOT] <15.9 mmol/L. The values SIG remained within the reference ranges in controls and cases in all times. Just there was statistically significant correlation (p <0.01; r: -0.9048) between venous blood pH and D-lactate concentration. Another test showed no significant differences. Conclusion and Clinical Relevance: The acid-base alterations remains a physiological problem of highly complex interpretation by the variety of physiological and physicalchemical interactions physicochemical that produces.The acid-base alterations are difficult to explain in his course and homeostatic adjustments and it seems that a single model should be used in their approach and interpretation, being better interrelate the findings of different approaches to interpret a specific medical condition. The two diagnostic approaches used in this study are not exclusive Keywords: Acid-base status, calves, D-lactic Acidosis, Strong Ion Gap (SIG), Strong Ion Difference, metabolic hydrogen.
Contenido XI
Contenido
Pág.
Resumen y Abstract ....................................................................................................... IX
Lista de figuras ............................................................................................................. XIII
Lista de tablas ............................................................................................................. XIV
Lista de Símbolos y abreviaturas ................................................................................ XV
Introducción .................................................................................................................... 1
1. Planteamiento del problema .................................................................................... 5
2. Objetivos ................................................................................................................... 7 2.1 Objetivo general ................................................................................................. 7 2.2 Objetivos específicos ......................................................................................... 7
3. Marco teórico: Equilibrio ácido-base en terneros neonatos ................................. 9 3.1 Reseña histórica de la evaluación del pH y estado ácido-base: ......................... 9 3.2 Modelos para la evaluación del estado ácido-base: .............................................. 10
3.2.1 Modelo de Henderson-Hasselbach: ............................................................... 10 3.2.2 Modelo de Iones fuertes .................................................................................. 11 3.2.3 Modelo de Iones Fuertes Simplificado: .......................................................... 15
3.3 Otros parámetros de evaluación: .......................................................................... 16 3.3.1 Base exceso (EB): ........................................................................................... 16 3.3.2 Bicarbonato (HCO3
-) estándar: ........................................................................ 17 3.3.3 Brecha aniónica (Anion Gap -AG-) .................................................................. 17 3.3.4 Brecha de Iones Fuertes (Strong Ion Gap – SIG-) ........................................... 18 3.3.5 Hidrogeniones metabólicos (H+met): ............................................................... 19
3.4 Acidosis metabólica en terneros neonatos: .......................................................... 20 3.5 Disfunción de la gotera esofágica ......................................................................... 23 3.6 Ácido D-láctico: .................................................................................................... 25
3.6.1 Producción y absorción de D-lactato en terneros neonatos ............................ 26 3.6.2 Acidosis metabólica sin síndrome de deshidratación en terneros neonatos .... 26 3.6.3 Metabolismo del D- lactato en terneros neonatos ............................................ 27 3.6.4 Alteraciones del comportamiento del ternero con acidosis metabólica ........... 27 3.6.5 Métodos de medición del D-lactato: ................................................................. 28
4. Hipótesis ................................................................................................................. 29
XIV
XII Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
5. Metodología ................................................................................................................31
5.1 Tipo de estudio ...................................................................................................... 31 5.2 Análisis estadístico ................................................................................................ 31 5.3 Población............................................................................................................... 31 5.4 Criterios de inclusión y exclusión ........................................................................... 32 5.5 Consideraciones éticas .......................................................................................... 32 5.6 Protocolo del estudio ............................................................................................. 32 5.7 Flujograma del experimento .................................................................................. 39 5.8. Manejo de muestras ............................................................................................. 40
5.8.1 Fluido ruminal ..................................................................................................40 5.8.2 Sangre venosa: ................................................................................................40
5.9. Variables de medición: ......................................................................................... 41 5.10. Cálculos ácido-base ........................................................................................... 42 5.11 Clasificación de las alteraciones ácido-base ........................................................ 43
6. Resultados..................................................................................................................45
7. Discusión ....................................................................................................................57
Anexos ............................................................................................................................65
Bibliografía .....................................................................................................................77
Contenido XIII
Lista de figuras
Pág.
Figura 1: Desarrollo de los compartimientos del estómago de los rumiantes y recorrido de la leche por gotera esofágica.. ................................................................................... 24 Figura 2: Estimación de recorrido de la sonda desde la boca hasta el rumen……....34 Figura 3: Inserción de sonda oro-ruminal...................................... ................................. 34 Figura 4: Líquido ruminal obtenido mediante sonda oro-ruminal.................................... 35 Figura 5: Medición pH líquido ruminal obtenido mediante sonda oro-ruminal antes de administración de leche en rumen.. ................................................................................ 35 Figura 6: Obtención de muestra de sangre venosa (vena yugular externa)... ................ 36 Figura 7: Medición pH sanguíneo venoso. ..................................................................... 36 Figura 8: Administración de lacto-reemplazador vía oro-uminal…………………………. 37 Figura 9: Medición pH líquido ruminal obtenido mediante sonda oro-ruminal posterior a la administración de lactorreemplazador en rumen 2.. ....................................................... 37 Figura 10: Medición de D-lactato por espectrofotometría………….................................38 Figura 11: Gráfico de dispersión de valores de pH ruminal en grupos control y de casos en los tiempos 0, 1 y 2.......................................................................................................46 Figura 12: Gráfico de cajas y bigotes de valores de concentración de D-lactato sérico en grupos control y de casos en los tiempos 0, 1 y 2. …………………………………….…. 48 Figura 13: Gráfico de cajas y bigotes de valores de pH sanguíneo venoso obtenidos de vena yugular externa en grupos control y de casos en los tiempos 0, 1 y 2.. ...................49 Figura 14: Gráfico de cajas y bigotes de valores hidrogeniones metabólicos en grupos control y de casos en los tiempos 0, 1 y 2…………………………………………………... 51
Contenido XIV
Lista de tablas
Pág.
Tabla 1: Valores de pH sanguíneo según diferentes referencias bibliográficas ....... ¡Error! Marcador no definido.11
No se encuentran elementos de tabla de ilustraciones. Tabla 3: Clasificación de las alteraciones ácido-base según los modelos Henderson-Hasselbalch (H-H), Modelo Simplificado de Iones Fuertes e Hidrogeniones Metabólicos...….………………………………………………………………………………¡Error! Marcador no definido. 43 No se encuentran elementos de tabla de ilustraciones. Tabla 5: Valores (promedio y desviación estándar) de T°, FC y FR en animales de los grupos control y casos en tiempo cero (T0), tiempo uno (T1) y tiempo dos (T2).¡Error! Marcador no definido..............46 Tabla 6: Valores (promedio y desviación estándar) de pH ruminal, concentración sérica de L-lactato y D-lactato en animales de los grupos control y grupo de casos en T0, T1 y T2……………………………………………………………………....................47 Tabla 7: Valores (promedio y desviación estándar) de pH sanguíneo venoso, bicarbonato estándar, exceso de base, AG, DIF3 o medida, [ATOT] y Brecha de Iones Fuertes (SIG) en grupos control y casos en T0, T1 y T2…………………………….......................................50
Tabla 8: Resultados de alteraciones ácido-base según los modelos Henderson-Hasselbalch (H-H) y Modelo Simplificado de Iones Fuertes en el T0...............................53 Tabla 9: Resultados de alteraciones ácido-base según los modelos Henderson-Hasselbalch (H-H) y Modelo Simplificado de Iones Fuertes en el T1…………………......54 Tabla 10: Resultados de alteraciones ácido-base según los modelos Henderson-Hasselbalch (H-H) y Modelo Simplificado de Iones Fuertes en el T0...............................55 Tabla 11: Resultados de alteraciones ácido-base según los modelos Henderson-
Hasselbalch (H-H) y Modelo Simplificado de Iones Fuertes 0……………………..............55
Contenido XV
Lista de abreviaturas
Símbolo Término % Porcentaje ± mas o menos °C Grados centígrados o Celsius A- base AG Brecha aniónica (Anion Gap) ATOT Concentración de iones buffer no volátiles (Ácidos
débiles/proteínas) ATP Adenosin 5’-trifosfato BE Base exceso ß-OH Betahidroxibutirato C3H5O3 Lactato Ca++ Calcio Cl- Cloruro CO2 Dióxido de Carbono Gr Gramo g/L gramos por litro DIF+ Diferencia de Iones Fuertes DIFa Diferencia de iones fuertes aparente DIFe Diferencia de iones fuertes efectiva HA ácido débil h Hora H+ Ion hidrógeno (proton) H2CO3 Ácido Carbónico H2O Agua Hb Hemoglobina HCO3
- Bicarbonato mm Hg Milímetros de mercurio IM Intramuscular IV Intravenosa IU Unidades Internacionales K+ Potasio K’w Equilibrio de disociación del agua Ka [HA] Equilibrio de disociación de ácido débil Kc ×PCO2
Equilibrio Dióxido de Carbono-Bicarbonato
K3 Constante de disociación de equilibrio aparente del bicarbonato kg Kilogramo L Litro lpm Latidos por minuto m Metro Mg+2 Magnesio
XVI Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
msnm metros sobre el nivel del mar MCT-1 Tranportador Mono-carboxilico-1 Mg Milligramo mEq/L Miliequivalente por Litro min Minuto Ml Mililitro mol Mol mmol Millimol mmol/L millimol por litro Na+ Sodio NaCl Cloruro de sodio NAD Dinucleótido Adenin-Nicotinamida NADH Dinucleótido Adenin-Nicotinamida forma reducida NaHCO3 Bicarbonato de sodio Nm Nanómetro PaCO2 Presión arterial de dióxido de carbono PPT Proteínas plasmáticas totales PCO2 Presión Parcial de Dióxido de Carbono pH logaritmo negativo de iones hidrógeno en base 10 pK1 logaritmo de una constante de disociación PO2 Presión Parcial de Oxígeno Valor-P Probabilidad de significancia R Coeficiente de correlación Rpm Respiraciones por minuto
S factor de solubilidad del CO2 en el plasma (convierte PCO2 en moles/L)
Sd Desviación Estándar Se Error Estándar SIG Brecha de Ion (Fuerte Strong Ion Gap) T° Temperatura TCO2 Dióxido de Carbono Total T0 Tiempo 0 T1 Tiempo 1 T2 Tiempo 2 Μ Micro Μg Microgramo
Introducción
Arrhenius en 1887 prueba que las sales y ácidos disueltos están ionizados en solución.
Henderson en 1908 descubrió el poder amortiguador buffer (tampón) del CO2 y aplicó la
ley de acción de masas: K = [H+] [HCO3-] / [SCO2] donde SCO2 = CO2 disuelto). En 1909
Sorensen propuso la teminología pH (poder del hidrógeno) y además fabricó el electrodo
de hidrógeno para uso en ciencias biológicas. Posteriormente Hasselbach en 1916 usa
la terminología de Sorensen para expresar la ecuación de Henderson en la conocida
forma logarítmica: pH = pK + log(HCO3-/dCO2), conocida como ecuación de Henderson-
Hasselbalch (Henry y Zenozan, 2001).
Posteriormente en 1928 Van Slyke estudia la carga neta de las proteínas plasmáticas y
su papel para neutralizar o fijar cantidades de álcalis (comportamiento de ácido débil de
las proteínas) (Van Slyke, 1928) y dibuja un diagrama de titulación utilizando como ejes
pH y miliequivalentes de proteína, precursores de los conceptos de base buffer. Singer y
Hastings en 1948 advierten que la práctica de mirar solo el CO2 y el HCO3- podía llevar a
diagnósticos erróneos y sobre la base de diagramas iónicos del plasma humano,
eritrocitos y sangre completa proponen el término Base Buffer (BB+): BB+= HCO3- + (P-)
que involucra la cuantificación de la capacidad amortiguadora de las proteínas. En
resumen concluyen que se requieren por lo menos cinco factores para una descripción
adecuada del balance ácido-base: el hematocrito, la PCO2, el HCO3- , el pH plasmático,
la concentración de base buffer y la CO2 total.
Poul Astrup en 1952 derivó el HCO3- por interpolación sobre un gráfico de log (PCO2):pH.
Las mediciones del pH estaban elaboradas a niveles ya establecidos de PCO2. De esta
forma introduce el término el Bicarbonato Estándar como el nivel de bicarbonato a una
PCO2 = 40 mmHg a 37°C, indica que cualquier desviación de su valor normal
representaría solamente las alteraciones metabólicas del estado ácido-base (Astrup et al,
1961). Luego Astrup desarrolló el concepto de Exceso de Base calculando los
miliequivalentes de base o ácido necesarios para titular la sangre a un valor estándar de
2 Introducción
bicarbonato. Ole Siggaard-Andersen en 1962 publicó el nomograma ácido-baseutilizando
en su cálculo el eje log(PCO2): pH, y por interpolación calculó el PCO2, el bicarbonato
estandar y el Exceso de Base midiendo el pH a niveles conocidos de PCO2 (Siggard-
Andersen, 1966). En 1977 Emmet y Narins desarrollan el concepto del anion gap a partir
de la determinación de los aniones fuertes y cationes fuertes no medidos en el plasma y
asi discriminar las posibles causas de la acidosis metabólica en contextos clínicos
(Emmet y Narins, 1977).
A lo largo de cien años desde la mitad del siglo XIX hasta a mitad del siglo X los trabajos
en la química, bioquímica y biofísica de los seres vivos generaron un cuerpo conceptual
de naturaleza experimental que consolidó un modelo empírico de naturaleza matemática
que dio una explicación científica a un conjunto relacionado de observaciones y
experimentos y es lo que representa como modelo de comprensión ácido-base la teoría
o modelo de Henderson–Hasselbalch. Esta a su vez contiene varios métodos que
describen, interpretan e intentan explicar los cambios ácido-base, particularmente el
componente metabólico, a través de la Base Exceso y los Hidrogeniones metabólicos, lo
cual es el objeto de comparación en el presente trabajo.
Para principios de los años ochentas Peter Stewart desarrolló un modelo diferente que
intenta explicar de manera cuantitativa y analítica el comportamiento de la concentración
del ión hidrógeno en los líquidos corporales basado en la fisicoquímica de las soluciones
iónicas. Más precisamente se basa sobre la ley de conservación de masas, la
electroneutralidad y la disociación de electrolitos sosteniendo que el pH es dependiente
de tres variables; la DIF, la PCO2 y la concentración de ácidos débiles no volátiles (ATOT).
Según este modelo son estas tres variables las que ejercen efecto sobre la disociación
del agua cambiando la concentración de [OH-] o [H+] (Kellum y Elbers, 2009). En 1997
Peter Constable modifica la ecuación de Stewart, a ésta se denomina ―Modelo
Simplificado de Iones Fuertes y propone que los fosfatos, grupo α-amino de las
proteínas, grupo imidazol de las proteínas y el citrato son los principales componentes de
ATOT de Stewart (Constable, 1997).
Las enfermedades gastrointestinales en terneros neonatos tienen una alta tasa de
mortalidad, su estudio ha permitido identificar la influencia del ácido D-láctico como
producto importante durante la enfermedad. Este estudio utiliza el modelo experimental
de acidosis ruminal para comparar los dos métodos derivados del modelo de
Introducción 3
Henderson-Hasselbalch (Exceso de Base e Hidrogeniones metabólicos) frente a los dos
métodos derivados del Modelo Simplificado de Iones Fuertes (DIF y ATOT) utilizados para
diagnosticar el componente metabólico del estado ácido-base. Adicionalmente se midió
la concentración de ácido D-láctico, se evaluó la brecha aniónica (anion gap; AG por sus
siglas en inglés) y la brecha de iones fuertes (Strong Ion Gap: SIG por sus siglas en
inglés) buscando una regresión linear para estimar la concentración de ácido D-láctico.
1. Planteamiento del problema
Los capítulos son las principales divisiones del documento. En estos, se desarrolla el
Algunos terneros durante las horas iniciales postnatales experimentan disturbios del
estado ácido-base producto principalmente en casos de distocia (Szenci et al., 1982;
Szenci y Taverne, 1988; Besser et al., 1990), diarrea neonatal indiferenciada (Groutides y
Michell, 1990) y en la ―ingestión ruminal de leche‖ que conducen a acidosis metabólica
(Gentile et al, 2004). Dirr en 1988 (Dirr 1988 citado por Lorenz y Gentile, 2014) descubrió
que la falla en el reflejo de la gotera esofágica puede ocurrir como una complicación de
varias enfermedades primarias particularmente en terneros de lechería con diarrea
neonatal alimentados artificialmente. Tal estudio encontró que el 17% de 408 animales
en total que habían sido hospitalizados por diferentes enfermedades mostraban signos
clínicos y cambios en el fluido ruminal indicando falla en el reflejo de la gotera esofágica.
Las alteraciones de la alimentación en terneros alteran las tasas de crecimiento y
ganancia de peso. En 1988 se demuestra la falla en el ―Reflejo de la Gotera Esofágica‖.
17% de los terneros hospitalizados mostraban signos clínicos y acidosis ruminal (Dirr,
1988). En Colombia, Betancur-Yordan-Cruz en 2015 reportan acidosis metabólica en
terneros diarreicos (Montería). Así mismo se reporta que acá en En Colombia se reporta
que el timpanismo y diarrea presentan morbilidad de 7% y 45% respectivamente en
terneros < 4 semanas de edad con mortalidad del 21% y 17% respectivamente (Mejía y
Oliver, 2004). Entre los factores predisponentes a la presentación de ―ingestión ruminal
de leche‖ se encuentran: los cambios bruscos en las prácticas de manejo del ternero,
sustituto lácteo de inapropiada calidad, el suministro de la leche desde un balde y la
diarrea neonatal. Tal patología conduce a pérdidas económicas debido a disminución en
la tasa de ganancia de peso y retraso en el crecimiento (Dirksen, 2005). Se produce
acidosis láctica (D-lactato) por la acidosis ruminal ante la falla en el reflejo de la gotera
esofágica. Al parecer es la microflora (bacterias, protozoarios) la que produce ácido L-
láctico y D-láctico en enfermedades gastrointestinales en terneros neonatos.
6 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
La identificación de las alteraciones electrolíticas y ácido-base se puede realizar a través
de diferentes modelos de diagnóstico. El mas antiguo y utilizado es el modelo de
Henderson-Hasselbalch (HH), basado en los principios físico-químicos que utilizan los
sistemas buffers y principalmente el de CO2/HCO3-. Una mejora en este modelo involucró
el análisis de los electrolitos séricos denominado brecha aniónica (Anion Gap = AG). A
partir de los años 1980s Peter Stewart planteó un modelo basado en el equilibrio iónico y
físicoquímico de las soluciones electrolíticas que se denomina teoría de la diferencia de
iones fuertes (DIF). De este último se han derivado análisis que introducen la brecha de
ion fuerte (Strong Ion Gap= SIG) y el papel de las proteínas como explicativas del estado
ácido-base.
La observación y el análisis del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal
inducida experimentalmente, utilizando los diferentes modelos diagnósticos pudieran
orientar la comprensión de los disturbios ácido-base.
Esta investigación se propone responder la pregunta: cuál abordaje del estado ácido-
base puede diagnosticar más acidosis metabólicas de origen ruminal?.
2. Objetivos
2.1 Objetivo general
Comparar dos modelos de análisis ácido-base en su capacidad de diagnosticar acidosis
metabólica en terneros neonatos por acidosis ruminal inducida experimentalmente.
2.2 Objetivos específicos
Diagnosticar las alteraciones acido-base en terneros con acidosis acidosis ruminal
inducida experimentalmente usando el modelo de Henderson-Hasselbalch y el
Modelo Simplificado de Iones Fuertes.
Diagnosticar las alteraciones acido-base en terneros con acidosis acidosis ruminal
inducida experimentalmente usando el modelo de Henderson-Hasselbalch y el
Modelo Simplificado de Iones Fuertes.
Determinar la brecha aniónica y la brecha de ion fuerte en terneros con acidosis
acidosis ruminal.
Determinar la corelación entre la concentración sérica de D-lactato y la brecha
aniónica y la brecha de ion fuerte en terneros con acidosis acidosis ruminal.
Cuantificar la concentración plasmática de D-lactato en terneros con acidosis ruminal.
3. Marco teórico: Equilibrio ácido-base en terneros neonatos
3.1 Reseña histórica de la evaluación del pH y estado ácido-base:
El sueco Svante August Arrenius (físico y luego químico) en 1887 definió como ácido: la
sustancia que al agregarla en una solución aumenta la concentración de iones hidrógeno.
Lawrence Henderson desarrolló en 1908 a partir de la reacción de ionización de un ácido
débil y de la ley de acción de masas la relevancia de la relación ácido carbónico (H2CO3)
y del bicarbonato de sodio (NaHCO3-) frente a la neutralidad en la sangre. Luego, Sören
Peter Lauritz Sörensen en 1909 introdujo el término de pH (del latin ―Pondus
hydrogennii‖) = poder, el poder del hidrógeno) y expresa la concentración de iones
hidrógeno como el logaritmo negativo en base 10. Hasselbach transformó la ecuación de
Henderson en su expresión logarítmica surgiendo así la ecuación de Henderson-
Hasselbach (1916). Después en 1923 Johannes Nicolaus Bronstead y Thomas Martin
Lowry proponen otra nueva definición de ácido sugiriendo que es una sustancia que dona
iones hidrógeno en solución (teoría de Bronstead-Lowry).
Luego en 1948 Singer y Hastings postulan el concepto de base buffer para definir a la
suma del HCO3- más los amortiguadores ácidos débiles no volátiles teniendo en cuenta
la electroneutralidad y que los aniones se comportan como ácidos (Singer y Hastings,
1948). En 1960 Paul Astrup y Ole Siggaard-Andersen proponen la definición de ―base
exceso‖ como la cantidad de ácido ó base fuerte necesaria para titular la sangre a un
valor de pH de 7,40 a una temperatura de 37ºC y a una pCO2 de 40 mmHg. En 1970 se
usa el concepto de anion gap intentando identificar la etiología de la acidosis metabólica.
Peter Stewart en 1982 propone un modelo físico-químico basado en la electroneutralidad
y la ley de la conservación de la masa. Este abordaje sostiene que el pH plasmático está
determinado por tres variables independientes: la Diferencia de iones fuertes; la PCO2 y
10 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
la concentración total plasmática de iones buffer no volátiles (albúmina, globulina y
fosfato inorgánico). Luego Figge y colaboradores en 1991 determinan que los fosfatos y
las proteínas tienen un efecto sobre el pH sanguíneo que el modelo de Henderson-
Hasselbach no tiene en cuenta en su ecuación. Por último, existe una adecuación del
enfoque fisicoquímico de Stewart (1983) denominado modelo de iones fuertes
simplificado (Constable, 1997a) el cual sostiene que todos los componentes plasmáticos
actúan como iones fuertes (DIF+), iones buffer volátiles (HCO3-) o iones buffer no volátiles
(A-).
3.2 Modelos para la evaluación del estado ácido-base:
3.2.1 Modelo de Henderson-Hasselbach:
Este modelo considera según su ecuación al equilibrio ácido-base en términos de pH
(Siggaard-Andersen y Fogh-Andersen, 1995) y asume que los cambios en la
concentración de bicarbonato conducen directamente a cambios en el pH. Dado que el
pH es el logaritmo negativo de [H+], la ecuación de Henderson – Hasselbach (H-H) es
expresada como: pH= Pk1+log [HCO3-]/S x PCO2, donde (pK1) es el logaritmo de una
constante de disociación, y (S) es un factor de solubilidad que convierte la PCO2 en
moles/L en la ecuación 1 (Michell et al., 1991). La Ecuación de Henderson – Hasselbalch
usa: el pH como parámetro general del estado ácido-base, la PCO2 como medición
independiente del componente respiratorio del balance ácido-base y el bicarbonato como
medición independiente del componente no respiratorio (metabólico) del estado ácido-
base. De esta forma el modelo de Henderson-Hasselbalch caracteriza 4 disturbios
primarios del estado ácido-base:
Acidosis respiratoria (pH disminuido, PaCO2 incrementada),
Alcalosis respiratoria (pH aumentado, PaCO2 reducida),
Acidosis metabólica (Base Exceso ↓, Hidrogeniones metabólicos ↑)
Alcalosis metabólica (Base Exceso ↑, Hidrogeniones metabólicos ↓)
Este modelo asume que matemáticamente existe una relación causa-efecto entre el
bicarbonato y el hidrógeno (H+). Desde esta perspectiva la causa de la acidosis
metabólica estaría en una reducción de la capacidad tampón del bicarbonato con lo que
el H+ libre (no tamponado) reduce el pH. Sin embargo, este modelo no explica el efecto
Marco teórico: Equilibrio ácido-base en terneros neonatos 11
de la concentración de las proteínas plasmáticas totales sobre el equilibrio ácido-base
(Wilkes, 1998) pues en terneros diarreicos se ha evidenciado que la pérdida de agua y la
deshidratación contribuyen a la acidemia por incremento total de la concentración de
proteínas plasmáticas totales [PPT] (Constable et al., 2005). En medicina humana se ha
reportado que el exceso de base disminuye 2,9 mEq/L por cada incremento de 1 gr por
decilitro en la [PPT] (Figge et al. 1991). Se encuentra en la literatura diferentes valores de
pH sanguíneo los cuales van a depender de la edad, dieta, aptitud (carne, leche) entre
otros según diferentes referencias (Tabla 1):
Tabla 1: Valores de pH sanguíneo según diferentes referencias bibliográficas.
Valor pH Referencia
7.31-7.53 Kaneko et al, 2008
7.35 – 7.50 Radostitis et al, 2007
7.274 – 7.438 Roussel et al, 1998.
7.36 – 7.44 Fürll 2005
7.35 – 7.50 Benjamin 1991
3.2.2 Modelo de Iones fuertes
El segundo modelo, de iones fuertes de Stewart, se basa en la ley de conservación de
masas, la electroneutralidad y la disociación de electrolitos. Supone que las
concentraciones de H+ y HCO3- son dependientes de las concentraciones de las variables
independientes o primarias; es decir: PCO2, ácidos débiles totales o proteínas y iones
fuertes (Stewart, 1983) dado que en los fluidos biológicos los electrolitos fuertes como el
sodio (Na+), el potasio (K+) y el cloro (Cl-) están completamente disociados y su constante
de disociación (K) es ignorada por estar completamente disociados; mientras que los
electrolitos débiles como las proteínas, agua y dióxido de carbono (CO2) se disocian ó
ionizan parcialmente (Stewart, 1983).
3.2.2.1 Variables dependientes:
Las variables dependientes corresponden a: pH, Bicarbonato, [CO32–] y Iones débiles.
Así, la DIF influye de forma independiente la disociación del agua vía electroneutralidad y
la conservación de masa (si los otros factores como PCO2, albumina y fosfato
permanecen constantes).
12 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
3.2.2.2 Variables independientes:
3.2.2.2.1 PCO2: H2O + CO2 ↔H2CO3 ↔ H+ + HCO3-
La presión arterial de dióxido de carbono (PaCO2) expresa la concentración de CO2 en el
aire alveolar requerida para el equilibrio entre la producción de CO2 (metabolismo) y la
eliminación de CO2 (ventilación). Los terneros recién nacidos (una hora de edad)
muestran valores en gases arteriales asi: pH entre 7,25 y 7,35; pCO2 entre 45,13 y 55,67
mmHg y entre 20,74 y 26,30 mEq/L de HCO3- (Adams et al, 1991). Para realizar
interpretaciones válidas de las alteraciones ácido-base de posible origen metabólico es
apropiada la sangre venosa (Carlson 1989), mientras que la sangre arterial es adecuada
para valorar los parámetros respiratorios (PaO2, PaCO2, ó CO2 total) (Kasari, 1999; Bleul
et al, 2007).
3.2.2.2.2 Concentración de iones buffer no volátiles (Ácidos
débiles/proteínas):
[ATOT] ↔ A- + AH. Un ácido débil es una sustancia que está parcialmente disociada en el
agua. [ATOT] es igual a la suma de todos los ácidos débiles en el plasma. La reacción de
disociación general para un par conjugado de un ácido débil (HA) y una base (A-) es: HA
↔ H+ + A- .Y en estado de equilibrio es posible calcular una constante de disociación (Ka)
para ácido a partir de la ley de acción de masa: Ka= [H+] + [A-].
3.2.2.2.3 Diferencia de iones Fuertes
(DIF): La diferencia de cargas entre cationes fuertes y aniones fuertes completamente
disociados en el plasma es estimada así: ([Na+] + [K+] + [Ca+2] + [Mg+2]) - ([Cl-] + [otros
aniones fuertes: A]) = 44 mEq/l en plasma en terneros (Constable y Staempfli, 2004), y
40 mEq/L aproximadamente en rumiantes adultos (Staempfli, 2005). Este exceso de
cargas positivas es denominado Diferencia de Iones Fuertes (DIF) (Stewart, 1983) y está
siempre balanceado por una cantidad igual de ―base buffer‖, principalmente, fosfato,
albúmina y HCO3-. Así la suma de todos los cationes fuertes y todos los aniones fuertes
determina la diferencia de iones fuertes aparente (DIFa) y este resultado arrojaría un
valor positivo, basándose en el principio de electroneutralidad. El faltante de cargas
negativas proviene del PCO2 y de los ácidos débiles, Esto arroja el DIF efectivo (DIFe) y
así al restar el DIF efectivo (DIFe) del DIF aparente (DIFa) se obtiene la brecha de iones
Marco teórico: Equilibrio ácido-base en terneros neonatos 13
fuertes (Strong Ion Gap).
DIF aparente (DIFa) = (Na + Mg + Ca + K) - (Cl + lactato)
DIF efectivo (DIFe) = HCO3 + ATOT
Brecha de iones fuertes (SIG) = DIFa -DIFe = 0.
En consecuencia una disminución en la DIF incrementa la liberación del ion hidrógeno
causando acidosis; y un incremento en la DIF aumentará la liberación del ion hidroxilo y
causa alcalosis. Así se explica el origen del ion hidrógeno (H+) y en consecuencia del pH
mediante la disociación del agua (H2O) producida por el aumento de la DIF y de esta
forma entonces, cualquier entrada de un ion sea positivo o negativo alterará la carga
eléctrica del agua obligándola a disociarse y por ende a producir iones H+ o iones OH-
clasificando tales alteraciones así:
Acidosis respiratoria (↑ PCO2),
Alcalosis respiratoria (↓ PCO2 ),
Acidosis por iones fuertes (↓ DIF)
Alcalosis por iones fuertes (↑ DIF)
Acidosis por iones buffer no volátiles (↑ [Alb] ó ↑ [PO4-2])
Alcalosis por iones buffer no volátiles (↓ [Alb] ó ↓ [PO4-2]).
Desde este punto de vista la acidosis resulta de un incremento en la PCO2 y en las
concentraciones de iones buffer no volátiles (albumina, globulina, fosfato); ó una baja DIF
(disminución en [Na+] o un aumento en [Cl-] o aniones no identificados) resulta en acidosis
(incremento en [H+]); mientras que la alcalosis resulta de una disminución en la PCO2,
disminución de la concentraciones de iones buffer no volátiles o de una DIF aumentada
(aumento en [Na+] o una disminución en [Cl-]) . De esta forma los cambios en el pH solo se
producirían como consecuencia de la modificación de una o varias de las variables
independientes. En efecto, el cambio en la concentración de H+ se debe a cambios en la
disociación del agua, ocasionados por modificaciones en las variables independientes; siendo
la concentración de ión H+ una variable dependiente. El efecto de las variables independientes
sobre la [H+] se predice a partir de las siguientes ecuaciones:
• Equilibrio de disociación del agua: [H+] × [OH–] = K’w
• Equilibrio de disociación de ácido débil: [HA] + [A–] = KA [HA]
• Conservación de masa de ácidos débiles (proteínas y fosfato inorgánico):
[HA] + [A–] = [ATOT]
14 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
• Equilibrio Carbonato-Bicarbonato: [CO3
2–] + [H+] = [HCO3–]
• Equilibrio Dióxido de Carbono-Bicarbonato: [HCO3–] + [H+] = Kc × PCO2
• Electroneutralidad: DIF + [H+] = [HCO3–] + [A–] + [CO3
2–] + [OH–] = 0
Estas ecuaciones demuestran la interacción de cargas en plasma que sirve como
mecanismos de control independiente (variables independientes) para la determinación
del pH (PCO2, la suma de ácidos débiles y proteínas en plasma [ATOT] y DIF. Stewart
combinó 2 ecuaciones de conservación (de masa y de carga) y cuatro ecuaciones de
equilibrio de disociación (para ácido carbónico, bicarbonato, agua y ácidos débiles
plasmáticos totales). Entonces Stewart desarrolló una ecuación polinomial del cuarto
orden que correlaciona la concentración plasmática del ion hidrógeno [H+] con tres
variables independientes ([DIF+], [ATOT] y PCO2) y cinco constantes (Ka, Kw, K1, K3, S):
A[H+]4 + B[H+]3 + C[H+]2 + D[H+] + E = 0
ax4 + bx3 + cx2 + dx + e = 0.
Donde:
A = 1
B = KA + [DIF]
C = (KA [DIF] - [ATOT]) - (Kc · PCO2 + Kw`)
D = [KA (KC · PCO2 + Kw`) + (K3 · KC · PCO2)] y
E = KA · K3 · KC · PCO2.
De esta forma resulta la ecuación:
[H+]4 + ([DIF+] + Ka) ([H+]3 + (Ka [DIF+] - [ATOT]) - Kw - Kc S PCO2) [H
+]2 – (Ka (Kw+KcS
PCO2) - (K3+Kc S PCO2) [H+] - (Ka K3 Kc S PCO2) = 0
Donde: Ka: constante de disociación efectivo para los ácidos no viables en el plasma (0.3
x 10-7 (eq/L)); Kw: producto iónico del agua (4,4 x 10-14 (eq/l); K1 o Kc: constante de
equilibrio aparente para el ácido carbónico (2,46 x 10-11 (eq/l)2/ mmHg); K3 o Kd:
Constante de disociación de equilibrio aparente del bicarbonato (6,0 x 10-11 (eq/l) y S:
solubilidad del CO2 en el plasma (0.03). Otra suposición del modelo de iones fuertes es
que HA (ácido débil) y A- (base) no participan en reacciones plasmáticas que conllevan a
la destrucción o creación neta de HA y A- .
Marco teórico: Equilibrio ácido-base en terneros neonatos 15
Esto ocurre porque cuando un HA se disocia, deja de ser un HA (lo cual reduce la [HA]
plasmática) y se convierte en A- (lo cual incrementa la [A-] plasmática). As+i, la suma de
[HA] más [A-] (conocida como ATOT) se mantiene constante debido a conservación de la
masa: [ATOT] = [HA] + [A-] (Constable, 1999). Por ejemplo: [Ácido láctico] + [lactato] =
[ATOT ácido láctico]. Los valores para ATOT (0.343 x [proteínas totales, g/l] ó 0.622 x
[albumina, g/l]; Ka (0.8 x 10-7; pKa= 7.08) ya han sido determinados experimentalmente
(Constable, 2002).
Este modelo cuantitativo (diferencia de iones fuertes) ha sido utilizado con éxito para la
elaboración de soluciones orales electrolíticas rehidratantes (Staempfli et al, 1996;
Grove-White y Michell, 2001; Muller et al, 2012; Staempfli et al, 2012) y sirve por ejemplo
para el entendimiento del efecto alcalinizante del bicarbonato de sodio 1.3% sobre el pH
sanguíneo (Wilkes, 1998; Muller et al., 2012) debido a su alta DIF efectiva (155 mEq/L)
con respecto a la DIF normal del bovino (40 mEq/L aproximadamente). Este modelo
también explica la acidosis hiperclorémica causada por la administración NaCl 0.9% (DIF
efectiva: 0 mEq/L) como una acidosis por iones fuertes debida a la disminución en la DIF
plasmática ya que ambos (el sodio y el cloro) son iones fuertes (Constable, 2003 a) y
también resalta la importancia de los aniones no medidos sobre el comportamiento
(depresión) en los terneros con diarrea neonatal (Gómez et al, 2013). El uso del modelo
de iones fuertes es más explicativo para la evaluación del estado ácido-base y de esta
forma mejora la opción de tratamiento calculando los concentraciones de los
constituyentes que conforman los fluidos a administrar (Elkhair et al, 2009). En síntesis,
la premisa más revolucionaria del modelo de Stewart es la idea de que las
concentraciones H+ y HCO3- son dependientes de las concentraciones de las variables
independientes o primarias: PCO2, iones buffer no volátiles y iones fuertes (Stewart,
1983). Sin embargo cabe anotar que los modelos de evaluación del estado ácido-base no
son excluyentes (Matousek et al, 2011, Constable 2014).
3.2.3 Modelo de Iones Fuertes Simplificado:
La necesidad de mantener la electroneutralidad determina que en todo momento la
concentración de iones fuertes [DIF+] iguala a la suma de la concentración del ion buffer
bicarbonato [HCO3- ] más la concentración del ion buffer no volátil [A-] de manera que:
[DIF+] - [HCO3- ] - [A-] = 0 (Constable, 1997 a):
16 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
De esta forma el pH plasmático está determinado por tres variables independientes: la
PCO2, la [DIF+], la concentración de buffers plasmáticos no volátiles individuales (como
albúmina, globulina y fosfato); y por tres constantes (Ka, K1 y S) en lugar de las 5
constantes que requiere Stewart. Según Constable (1997) no todos los factores de la
última ecuación ejercen un efecto sobre el pH plasmático porque las constantes de
disociación aparente Ka y K1 dependen de la temperatura y fuerza iónica. S depende de
la temperatura, la fuerza iónica y la concentración de proteínas y [ATOT] y Ka dependen de
las contribuciones relativas de buffers plasmáticos no volátiles individuales (albúmina,
globulina y fosfato). El modelo de iones fuertes simplificado predice el pH plasmático así:
Dónde: pK1´: ion producto del agua; Ka: igual a la constante de disociación de equilibrio
efectiva para ácidos débiles no volátiles del plasma; S: Solubilidad del CO2 en el plasma.
SID+: Diferencia de Iones Fuertes; [ATOT]: Concentración de ácidos débiles no volátiles
del plasma; PCO2: Presión parcial de PCO2 en plasma. De acuerdo al modelo de Iones
Fuertes Simplificado las alteraciones del estado ácido-base pueden clasificarse en las
siguientes categorías: Acidosis respiratoria: PCO2 > 45 mm Hg, Alcalosis
respiratoria: PCO2 < 35 mm Hg, Acidosis por iones fuertes: DIF < 38 mEq/L,
Alcalosis por iones fuertes: DIF > 46 mEq/L, Acidosis por iones buffer no volátiles
(ATOT): > 19 mEq/L, Alcalosis por iones buffer no volátiles (ATOT): < 11 mEq/L
(Constable, 1999).
3.3 Otros parámetros de evaluación:
3.3.1 Base exceso (EB):
Es la cantidad de ácido requerido para restaurar 1 litro de sangre a su pH normal a PCO2
40 mmHg y se expresa en mEq/L.
Marco teórico: Equilibrio ácido-base en terneros neonatos 17
Un exceso de base positivo indicaría una Alcalosis metabólica (ácido adicional necesario
para retornar la sangre al pH normal). Un exceso de base negativo indicaría Acidosis
metabólica (ácido que necesita ser removido para retornar la sangre al pH normal). Como
el exceso de base se mide titulando la sangre con un ácido fuerte, este enfoque tiene en
cuenta la contribución de los buffers no volátiles en los cambios de la neutralización del
pH y por lo tanto obtiene una estimación más exacta del componente metabólico (no
respiratorio) de una alteración ácido-base que la concentración de bicarbonato real ó
estándar (Constable, 1999). No obstante, el valor medido para el exceso de base
depende de: la concentración de hemoglobina en sangre, la concentración plasmática de
proteínas y fosfato; y la concentración iónica (Constable, 1999). Si se tiene en cuenta que
el exceso de base disminuye 2,9 mEq/l por cada incremento de 1 g/dl en la [PPT]; una
hipoproteinemia marcada (4,4 g/dl) incrementaría a 8,7 mEq el exceso de base. Es decir:
el valor de exceso de base calculado supone una concentración sérica de proteínas
constante y normal (7,2 g/dl) (Constable, 1999).
3.3.2 Bicarbonato (HCO3-) estándar:
Es la concentración de carbonato de hidrógeno en el plasma de sangre equilibrada con
una mezcla de gases con una PCO2 de 40 mmHg y una PO2 mayor o igual a 100 mmHg.
Un bicarbonato estandar bajo indicaría una acidosis metabólica y si por el contrario fuera
alto, sería indicativo de una alcalosis metabólica.
3.3.3 Brecha aniónica (Anion Gap -AG-)
El anion gap (AG) o brecha aniónica se calcula de la diferencia entre la sumatoria de los
principales cationes medidos, menos la sumatoria de los principales aniones medidos en
el plasma sanguíneo ([Na+]+[K+])-([Cl-]+[HCO3-]) expresado en unidades de mEq/l
(Gabow et al. 1980) y se usa para detectar la presencia de aniones y cationes no
medidos en el plasma, (SO4-2, Ca+2, Mg+2), iones buffer no volátiles (proteínas y fosfatos)
y ácidos orgánicos (lactato-, ß-OH butirato-, acetoacetato-) (Feldman & Rosenberg, 1981;
Ewaschuk et al. 2003) como fuentes de la acidosis.
18 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Cabe aclarar que el AG puede estar enmascarado por cambios en las concentraciones
séricas de proteínas (en especial albúmina) y fosfato pues en su cálculo no contempla el
aporte de cargas de las [PPT] (Gabow, 1985; Kraut & Madias, 2007). No obstante, si la
[PPT] se encuentra en los valores dentro de los límites de referencia (considerados
normales) el cálculo del AG es clínicamente útil para estimar si la acidosis metabólica se
debe a la presencia de aniones fuertes no medidos metabolizables tales como el L-
lactato; o un resultado de cambios en la concentración de cationes (sodio) o aniones
(cloruro) medidos. Un incremento de 10g/l en las PPT aumenta el valor del AG por 2.3
mEq/l; mientras que un incremento de 10 g/l en la concentración de albúmina aumenta el
valor del AG por 4.4 mEq/l (Constable et al., 1997a). Un aumento del valor del AG podría
alertar sobre la presencia de aniones urémicos mientras que un AG disminuido es
menos común y puede ser causado por hipoalbuminemia y acidosis metabólica
hipoclorémica (Roussel et al., 1997). Un AG con valor igual 30 mEq/L o superior en
ganado bovino adulto con vólvulo abomasal se asocia a un pronóstico pobre de
supervivencia (Garry et al., 1985; Roussel et al., 1997).
3.3.4 Brecha de Iones Fuertes (Strong Ion Gap – SIG-)
La brecha de iones fuertes (SIG por sus siglas en inglés: Strong Ion Gap) también busca
estimar los aniones fuertes no medidos en el plasma y tiene en cuenta la carga aniónica
neta de las proteínas proporcionando mayor exactitud cuantificando la carga de iones
fuertes no medidos en pacientes (Kellum et al, 1995; Treftz et al, 2015a). En
consecuencia, provee un estimativo para la diferencia entre la carga neta de iones
fuertes de los buffers no volátiles del plasma (albúmina, globulina y fosfato), la
concentración de aniones fuertes no medidos (L-lactato, D-lactato, sulfato, ácidos grasos
no esterificados, cetoácidos, carga de fosfato pH-independiente y otros aniones fuertes
(calcio, magnesio) (Gómez et al., 2013). En terneros la brecha de iones fuertes es igual
a cero (SIG = 0 mEq/l) al aplicar los valores de referencia para plasma de sangre venosa
yugular de terneros machos holstein (pH = 7.38, [proteínas totales] = 54.1 g/l), AG = 12
mEq/l). Una brecha de iones fuertes > 0 mEq/l indica un aumento en los cationes fuertes
no medidos (evento poco común); mientras que SIG < 0 mEq/l indica un incremento en
los aniones fuertes no medidos tales como el D-Lactato (Constable 2008, Constable,
2014). La concentración de aniones fuertes no medidos (como el D-lactato) en el plasma
del ternero puede ser estimada por el cálculo del Ion Fuerte restante (SIG en mEq/L) del
Marco teórico: Equilibrio ácido-base en terneros neonatos 19
anion gap ([Na] + [K] - [Cl] - [HCO3] en mEq/l) y una carga neta de los iones buffer no
volátiles donde:
SIG = [proteínas totales] x (0.343/{1+107.08-pH}) – AG (Constable et al., 2005)
SIG = [albúmina] x (0.622/{1+107.08-pH}) – AG
Se ha reportado que la concentración de aniones fuertes no medidos en el plasma bovino
se predice con mayor exactitud en bovinos mediante el cálculo del Ion Fuerte Restante
comparado con el método de Exceso de base de Fencl y el anión restante (Constable
2002) ya que el método de H-H tiene sus limitaciones en animales con concentraciones
de albúmina y fosfato por fuera de los rangos considerados normales o de referencia
(Bednarski et al, 2015; Trefz et al, 2015a).
3.3.5 Hidrogeniones metabólicos (H+met):
En el 2009 Cruz y colaboradores compararon diferentes modelos fisiológicos para la
evaluación del estado ácido-base en pacientes críticamente enfermos incluyendo un
nuevo concepto centrado en los hidrogeniones metabólicos partiendo de la premisa de
que el CO2 y el metabolismo de las proteínas (entre otros) constituyen fuentes de H+; en
consecuencia podría estimarse que: H+ totales = H+ del CO2 + H+ metabólicos. De esta
forma los hidrogeniones productos del metabolismo (metabólicos) podrían calcularse: H+
metabólicos = H+ totales – H+ del CO2. Los H+ totales son los obtenidos como el
antilogaritmo del valor negativo del pH obtenido por la máquina de gases sanguíneos y
expresados en las unidades de nanomoles/litro, ejemplo: si pH= 7,4 el antilogaritmo (-pH)
= 3,98 x10-8, que es igual a decir 39,8 nanomoles/litro o simplemente 40 nanoMolar.
- Hidrogeniones metabólicos = H+ totales – H+ del CO2.
- Hidrogeniones totales = Antilog (-pH)
- Hidrogeniones del CO2 = 0,75 x PaCO2 + 10 asumidos para situaciones agudas (Cruz
et al, 2009).
- Para los cambios crónicos: H+ del CO2 = 0,24 * PCO2 + 27 = nanoMolar
De esta manera se le denominó ―delta de H+‖ a la diferencia entre H+ totales y H+ del CO2
buscando siempre significar el cálculo de los H+ metabólicos, el ―valor normal‖ deducido a
partir de las bandas de significancia fue de - 3 a + 5 nanoMolar (Cruz et al., 2009).
20 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
3.4 Acidosis metabólica en terneros neonatos:
La mayoría de la producción diaria de ion hidrógeno tiene origen en el metabolismo
celular de compuestos que contienen carbono a CO2 y agua. Prácticamente todo este
ácido se excreta por medio de los pulmones y por eso no se produce una retención neta
de ácido. El equilibrio se mantiene gracias a una reacción del CO2 para formar ion
hidrógeno: CO2 + H2O ↔ H2CO3 ↔ H+ + HCO3-. Posteriormente se invierte el proceso
para formar el CO2 que se excreta por los pulmones. Mientras el sistema respiratorio
pueda mantener una PCO2 estable y, de este modo, una concentración de H2CO3
constante, los índices de liberación y fijación de ion hidrógeno serán constantes y no
habrá un cambio neto en el equilibrio ácido-base. Dado que la mayoría de los
compuestos orgánicos son metabolizados a CO2 y agua, dicho metabolismo no altera el
estado ácido-base. No obstante, si el metabolismo de un compuesto es incompleto, para
producir CO2 y agua, puede acumularse ion hidrógeno en exceso.
a. Una vía metabólica podría llevar a la producción de un ácido orgánico, por ejemplo el
ácido láctico, pero en estados de hipoxemia tendería a acumularse, aunque en estado
normal pueda ser metabolizado por completo a CO2 y agua. Bajo estas circunstancias, la
producción de ácido láctico, el metabolismo final del compuesto orgánico a CO2 y agua
puede restablecer el equilibrio del ion hidrógeno.
b. Como parte de un proceso metabólico, un ácido orgánico formado puede ser
amortiguado por el bicarbonato de sodio, consumiendo bicarbonato y produciendo la sal
sódica del anión ácido. Si el anión del ácido se pierde por la orina o las heces - antes de
poder ser metabolizada por una vía que consumiría un ion hidrógeno - , el resultado neto
será igual a la retención de un ión hidrógeno. En estados patológicos, la pérdida del
anión de ácidos orgánicos incompletamente metabolizados ó la falta del metabolismo
completo de compuestos a CO2 y agua, pueden producir excesos de ion hidrógeno.
Existen tres fuentes principales de iones hidrógeno de ácido fijo: 1. El metabolismo
incompleto de precursores inorgánicos neutros del CO2 y agua; 2. El catabolismo
oxidativo de aminoácidos que contiene azufre, como la metionina y la cisteína, a ácido
sulfúrico; 3. La hidrólisis de uniones fosfato de las proteínas a ácido fosfórico. Los
terneros con diarrea presentan acidosis metabólica por pérdida de bicarbonato a través
Marco teórico: Equilibrio ácido-base en terneros neonatos 21
de las heces, tasa de remoción de hidrogeniones reducida por pobre perfusión renal
debida a hipovolemia (Groutides y Michell, 1990) y acumulación de ácido D-láctico
producida por la fermentación de carbohidratos en el rumen e intestino el cual tiene
efectos sobre la habilidad mental y comportamiento de los terneros (Kasary y Naylor
1986; Naylor et al, 2002; Lorenz, 2002). La acidosis metabólica puede deprimir la
contractilidad cardíaca, reducir el gasto cardíaco y limitar la perfusión tisular (un bajo pH
sanguíneo disminuye la afinidad del oxígeno a la hemoglobina). La acidosis inactiva los
canales de calcio e inhibe la liberación de norepinefrina de las fibras nerviosas simpáticas
resultando en vasodilatación y maldistribución del flujo sanguíneo que junto con la
hipovolemia (en casos de diarrea neonatal) comprometerán la perfusión tisular que
puede generar acidosis láctica. De esta forma, la acidemia en terneros con diarrea
neonatal ha sido atribuida a acidosis por iones fuertes debida a hiponatremia
acompañada con normocloremia o hipercloremia y a un incremento de aniones fuertes no
medidos tales como el D-lactato (Constable et al., 2005).
La acidosis metabólica puede presentarse por: retención de aniones en el plasma (alto anion
gap plasmático, bajo bicarbonato, cloro normal, potasio normal) en casos de endotoxemia
(Constable et al, 1991), acidosis ruminal en terneros que ocasiona la elevación de ácidos
orgánicos desde el tracto gastrointestinal (Gentile et al., 2004) mientras que la Hiper D-
lactatemia en terneros diarreicos (< 21 días de edad) no necesariamente está asociada con
hiperkalemia (Trefz et al, 2013b). También se presenta en casos de anaplasmosis (Coelho et
al, 2008), babesiosis (Sherlock et al, 2003), coccidiosis (Bangoura y Daugschies, 2007) entre
otras patologías (Roussel et al, 1998). Un estudio reveló que los terneros menores de una
semana de edad con diarrea aguda espontánea muestran tendencia a presentar acidosis
láctica (Binding et al, 2000) mientras que otro estudio mostró que los terneros menores de
una semana de edad fueron más sensibles a la acidosis metabólica inducida
experimentalmente (1.0 ml/Kg de NH4Cl 5M) (Elkhair et al, 2009). Además puede
presentarse con pérdida de bicarbonato (bajo bicarbonato, cloro normal o elevado, a veces
hiponatremia, tendencia a hiperkalemia, anion gap normal) como en algunos casos de
diarrea neonatal (Groutides y Michell, 1990; Grove-White y White, 1999), íleo, fístula,
acidosis tubular renal (Hardefelt et al, 2011).
La acidosis metabólica puede contribuir a arritmias cardiacas o a la muerte por falla
cardiaca debida a la disminución de potasio miocárdico, elevación del potasio
22 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
extracelular y cambio en el potencial de membrana (Vaughan-Jones et al, 2009).
Tradicionalmente se ha postulado que el bajo pH intracelular ocasionado por la acidemia
disminuye la actividad de la ATPasa Na-K causando fuga de iones potasio del espacio
intracelular al espacio extracelular (Naylor et al, 2006; Trefz et al, 2013 a; Trefz et al,
2015 b). La reducida actividad de la ATP Na-K (dependiente de la disponibilidad de ATP)
y la actividad disminuida de la fosfofructoquinasa, presenta otra vía potencial para la
hiperkalemia inducida por la acidemia (Trefz et al., 2013a). Sin embargo, la azotemia pre-
renal y la hiperfosfatemia han sido identificados como los principales factores de riesgo
para el desarrollo de hiperkalemia en terneros con diarrea neonatal teniendo en cuenta
que la hipovolemia debida a deshidratación reduce la secreción de potasio tubular distal
(Treftz et al, 2013 b). No obstante se ha reportado que la administración de solución de
HCO3- hipertónico en terneros neonatales con diarrea y acidosis metabólica (por iones
fuertes) ejerce un inmediato y efecto sostenido de disminución de potasio que parece ser
causado por su habilidad alcalinizante (Treftz et al, 2015 c).
Los terneros neonatos presentan un cambio hacia el estado de acidosis metabólica y
respiratoria durante las horas postnatales iniciales (Szenci et al, 1982; Szenci y Taverne,
1988) asi como los terneros nacidos con distocia severa los cuales demuestran acidosis
metabólica severa, altas concentraciones de lactato y otros parámetros clinicopatológicos
que indican asfixia neonatal (Szenci, 1983) mientras que terneros nacidos
espontáneamente sin asistencia pueden también mostrar concentraciones de lactato y
cortisol elevadas, mientras que los parámetros ácido-base de las vacas fluctúan dentro
de los parámetros fisiológicos normales (Szenci, 1985). El estado ácido-base fetal se
regula indirectamente, a través de la placenta, por funciones respiratorias y renales
maternas (Szenci et al, 1982). La acidosis desarrollada en el organismo materno podría
afectar al feto por dos vías: primero, bajo tales circunstancias los iones hidrógeno podrían
ser transferidos en exceso de la sangre materna al feto. Debido a la carga acidótica, una
eliminación incrementada de iones hidrógeno es necesaria por los procesos
compensatorios fetales. Esta situación es más adelante agravada por el parto, el cual
involucra la acumulación de dióxido de carbono y ácido láctico en el organismo fetal,
causando por eso un cambio en el estado ácido-base hacia un rango acidótico también
en condiciones normales. Segundo, la acidosis maternal podría afectar la transferencia
de oxígeno y dióxido de carbono a través de la placenta. La reducción del suministro de
oxígeno crea condiciones de asfixia en el feto el cual puede obtener energía
Marco teórico: Equilibrio ácido-base en terneros neonatos 23
principalmente por glucólisis anaeróbica, a expensas de convertir carbohidratos en ácido
láctico. La acumulación de ácido láctico resulta en acidosis metabólica en la sangre fetal.
En resumen, los disturbios ácido-base maternales, afectan al feto en menor grado que
los trastornos en el intercambio gaseoso feto materno (Szenci et al, 1982). El sistema
buffer hemoglobina del eritrocito se adapta especialmente para el manejo del CO2 dado
que los eritrocitos son muy permeables al mismo y contienen altas concentraciones de
anhidrasa carbónica, de la cual los eritrocitos bovinos contienen dos formas (A y B). Esta
enzima hidrata el CO2 a H2CO3 y está disminuida en terneros acidóticos y sus madres
(Szenci et al., 1984).
3.5 Disfunción de la gotera esofágica
La gotera esofágica: ―estructura muscular que se extiende hacia abajo desde el cardias al
omaso en la pared media del retículo‖ se forma de dos pliegues de tejido muscular que
se cierran en respuesta a la estimulación nerviosa, formando un ―tubo‖ que dirige la leche
directamente, pasando el retículo y el rumen, hacia el abomaso (Figura 1) Dirr y Dirksen
(1989) reportaron disfunción del reflejo de la gotera esofágica (ruminal drinking) como
complicación de varias enfermedades, en especial de la diarrea neonatal en terneros de
leche (17% de 408 terneros).
Algunos terneros presentan disfunción del reflejo de la gotera esofágica lo cual conduce
la leche al rumen en lugar del abomaso, ocasionando fermentaciones indeseadas por
parte de las bacterias ruminales (Streptococcus bovis) (Figura 1). Un estudio
retrospectivo (Gentile et al, 1998) con población de 293 terneros menores de 4 semanas
de edad con evidencia de deglución ruminal (ruminal drinking) desarrollan acidosis
metabólica y alto anion gap en animales con severa acidosis ruminal (pH < 5.0). No
obstante, la distensión abdominal en terneros diarreicos no necesariamente ocasiona
concentraciones elevadas de L-Lactato (Grove-White y White, 1999). La administración
de 3 L de leche al día por vía intrarruminal ocasiona en terneros severa acidosis
sistémica D-láctica (Gentile et al, 2004).La patología denominada ―ingestión ruminal de
leche‖ debido a la disfunción del reflejo de la gotera esofágica conduce la leche al rumen
en lugar del abomaso, ocasionando fermentaciones indeseadas por parte de las
bacterias ruminales (Streptococcus bovis y Lactobacillus).
24 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Figura 1. Desarrollo de los compartimientos del estómago de los rumiantes y recorrido de la
leche por gotera esofágica (fisiológicamente – flecha azul - y con disfunción – flecha roja-).
Gentile y Baur (1995) han provocado acidosis ruminal en terneros jóvenes por
administración de varias soluciones rehidratantes orales. Un estudio reportó (Gentile et
al., 1998) que 293 terneros menores a 4 semanas de edad con evidencia de deglución
ruminal (ruminal drinking) encontró animales con acidosis metabólica y alto anion gap en
animales con severa acidosis ruminal (pH< 5.0) similares a los hallados por El-Ashker y
colaboradores en 2012. Aun en terneros normales el cierre de la gotera esofágica es
incompleto. Cerca de 10% de leche ingerida llega al rumen (Braun y Gautschi, 2013).
Esto no tiene efectos adversos si la leche es dirigida hacia el abomaso dentro de las 3
horas siguientes (Braun y Gautschi, 2013). Existen algunos factores predisponentes para
que los terneros presenten ingestión ruminal causada por la falla del cierre del surco
ABOMASO
O CUAJAR OMASO
RETÍCULO
GOTERA
ESOFÁGICA
(CERRADA)
Marco teórico: Equilibrio ácido-base en terneros neonatos 25
esofágico. Estos factores incluyen (Gentile et al., 2004): diarrea neonatal, tiempos
irregulares de alimentación, sustituto de leche de baja calidad, alimentación con leche o
sustituto de leche a temperatura muy fría, beber de un balde abierto y alimentación con
sonda. Algunos síntomas de acidosis ruminal causada por ingestión ruminal de leche
podrían ser la aparición de dolor, patadas en la pared del flanco, inquietud incluyendo el
cambio de peso de una pata trasera a la otra, rechinar de dientes, vocalizaciones,
espalda arqueada, deshidratación por diarrea y pérdida de agua, hinchazón causada por
la acumulación de ácido y gas en el rumen, crecimiento deficiente, depresión, pérdida de
pelaje, heces pegajosas y blancas como arcilla o masilla (Quigley, 2005).
Se sugiere que el color, el pH, el olor, la consistencia y presencia de coágulos de caseína
son indicadores de ingestión ruminal mientras que el fluido de la ingestión ruminal será
de un color claro o blanco con bajo pH (5.0 a 4.0) y con olor a leche agria. A la inversa, el
fluido ruminal normal será de color más oscuro con un pH entre 6.5 y 7.5 (Dirksen y
Garry, 1987). El olor será de fermentación mas no a leche agria (Dirksen y Garry, 1987).
Cuando los becerros presentan falla de la gotera esofágica se presentan una serie de
efectos en el tracto intestinal y también sistémico tales como: Inflamación de los tejidos
que cubren el estómago (incluyendo el rumen, retículo, omaso y abomaso), inflamación
de la mucosa del rumen y del retículo que puede causar la falla permanente del cierre del
surco, empeorando la situación con evidencia de enfisema mural, vesiculación epitelial
(Panciera et al, 2007), paraqueratosis debida a las altas concentraciones de ácidos
grasos volátiles (AGV) en el rumen afectando la absorción de AGV desde el rumen hacia
el torrente sanguíneo, disminuyendo aún más el pH en el rumen y dar como resultado
concentraciones extremadamente altas de AGV del rumen; acidosis láctica entre otras
consecuencias (Dirksen 2005).
3.6 Ácido D-láctico:
Existen 2 enantiómeros del ácido láctico y ambos tienen pK de 3.86. A pH fisiológico
(7.40) el ácido D y L-láctico están casi completamente disociados en isómeros de lactato
y protones. El ácido L-láctico es la forma producida en tejidos corporales bajo
condiciones de hipoxia o por fermentación bacterial en el cuerpo y tracto gastrointestinal
mientras que el ácido D-láctico es principalmente adquirido de fuentes exógenas. El
metabolismo del Ácido D-láctico en mamíferos requiere D-2 (∝) hidroxiácido
26 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
deshidrogenasa que convierte el D-lactato en piruvato siendo una conversión más lenta
que la del ácido L-láctico a piruvato (Ewaschuk et al., 2005).
3.6.1 Producción y absorción de D-lactato en terneros neonatos
Se postula que en principio hay sobrecrecimiento microbiano con subsecuente
producción de ácido D-láctico en tracto gastrointestinal que luego será absorbido (como
D-lactato o ácido D-láctico) desde intestinos (o rumen) en la circulación causando
elevación de niveles de D-lactato sérico. Luego empieza la sintomatología clínica en
relación al ácido D-láctico o D-lactato e incapacidad metabólica en eliminación
(Ewaschuk et al., 2005). Algunos terneros con diarrea (dependiendo del agente
etiológico) presentan lesiones en sus vellosidades intestinales y por ende no hay una
adecuada digestión de los alimentos. En consecuencia tales alimentos pueden servir de
sustrato para que las bacterias intestinales mediante fermentación de carbohidratos
generen tanto L-lactato como D-lactato (Omole et al., 2001). En terneros búfalos se ha
aplicado monensina para inhibir las bacterias Streptococcus bovis y Lactobacillus spp.
como mayores productoras de ácido láctico y asi controlar la acidosis láctica sub-aguda
(Ahuja et al, 1990).
Las altas concentraciones de D y L-lactato en terneros diarreicos apoyan la hipótesis que
la fermentación bacteriana de nutrientes malabsorbidos se desarrolla en el intestino de
los terneros diarreicos (Omole et al., 2001; Ewaschuk et al., 2004 a, Shimomura y Sato.,
2006) y es absorbido por las células del intestino delgado, células intestinales colónicas y
por el rumen (Preston y Noller, 1973) siendo más importante el colon como fuente de D-
lactato que el rumen (Ewaschuk et al., 2004 a). Un estudio (Omole et al, 2001) demostró
que los terneros diarreicos presentaron una concentración de ácidos orgánicos medidos
(ácido pirúvico, láctico, acético) fue significativamente mayor indicando que tales ácidos
contribuyen un menor pH y anión gap elevado en terneros con diarrea (19.7 ± 8.6) frente
a los valores hallados en terneros saludables (5.6 ± 3.5).
3.6.2 Acidosis metabólica sin síndrome de deshidratación en terneros neonatos
Kasari y Naylor (1984) reportaron un nuevo síndrome de acidosis sin síntomas clínicos
obvios de deshidratación que respondió al tratamiento con bicarbonato de sodio
Marco teórico: Equilibrio ácido-base en terneros neonatos 27
isotónico. Posteriormente (Kasari y Naylor, 1986) reportan en terneros un inusual
síndrome de acidosis metabólica de origen desconocido no asociado con signos obvios
de deshidratación o diarrea, con un anion gap elevado sugiriendo que una alta carga de
ácidos orgánicos puede ser (parcialmente) responsable. Luego en 1997 Navetat y
colaboradores reportan hiper D-lactatemia en terneros enfermos (terneros afectados
valores medios de hasta 13 mmol/L, con valores de 1.27 ± 1.14 y 2.31 ± mmol/L,
respectivamente en controles saludables en 2 años consecutivos), lo cual confirma que la
acidosis metabólica, con un alto anion gap puede originarse debido a un aumento en la
concentración de aniones fuertes (ácidos orgánicos) como el D-Lactato proveniente de
fermentación ruminal o intestinal de la leche (Schelcher et al, 1998) en terneros con
diarrea (Grude et al, 1999).
3.6.3 Metabolismo del D- lactato en terneros neonatos
Según Dunlop y Hammond (1965) el D-isómero de lactato es metabolizado más
lentamente que el L-lactato lo cual indica que el isómero D-lactato es excretado
principalmente por vía urinaria (Ewaschuk et al, 2005). El L-Lactato es formado
normalmente por las células durante la respiración anaeróbica y su concentración es un
indicador de severidad de shock. El L-lactato es metabolizado rápidamente a piruvato por
el L-lactato deshidrogenasa en el hígado, pero los mamíferos son deficientes en D-lactato
deshidrogenasa. Cabe anotar que la presencia de butirato disminuye la conversión de L-
lactato a glucosa en los hepatocitos del ternero (Reynolds et al., 1992). Sin embargo, la
deficiencia de D-lactato deshidrogenasa (Tubbs 1965 citado por Lorenz et al., 2005),
sumado a la disminución de su actividad como consecuencia del bajo pH sanguíneo en la
acidosis metabólica debido a la pérdida de bicarbonato, podría contribuir a la ocurrencia
de hiper D-lactatemia en estos animales (Lorenz et al., 2005), teniendo en cuenta que el
D-lactato altera el metabolismo mitocondrial en el cerebro de ratones (Ling et al., 2012).
Ademas se le atribuye al ácido D-láctico la alteración del factor activador de plaquetas
sobre los neutrófilos bovinos (Alarcón et al, 2011).
3.6.4 Alteraciones del comportamiento del ternero con acidosis metabólica
Al parecer las variaciones en el comportamiento y postura del ternero con diarrea y acidosis
metabólica (-10 y -25 mmol/L de exceso de base en este estudio de regresión logística)
28 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
pueden explicarse mejor por el aumento en la concentración de D-lactato que por el
incremento en el exceso de base (Lorenz., 2004 a) así como la disminución en el reflejo de
succión parece estar más asociado con el exceso de base, la deshidratación marcada
(Lorenz., 2004 b), el pH y el bicarbonato del fluido extracelular (Abeysekara et al., 2007). La
hiper D-lactatemia puede detectarse también en terneros no acidóticos (Gentile et al., 2004)
y podría explicar mejor la disminución del reflejo palpebral sin que necesariamente se
presente acidosis (Lorenz et al., 2004a). Otros signos neurológicos (ataxia, reflejos táctiles y
de amenaza) están relacionados a la acumulación de D-lactato en fluido cerebroespinal que
en la sangre o a la acidosis del fluido cerebroespinal (Abeysekara et al, 2007). El D-lactato
(en nervios ópticos aislados de ratón) bloquea la generación de potencial de acción al
parecer por bloqueo competitivo de la entrada del L-lactato restringiendo el metabolismo
neuronal (Tekkök et al, 2005). Los terneros con altos niveles de D-lactato no necesitan
terapia específica adicional pues generalmente estos niveles disminuyen con la restitución
del volumen sanguíneo corporal (Lorenz y Vogt, 2006).
3.6.5 Métodos de medición del D-lactato:
Para la cuantificación del D-lactato se puede realizar la cromatografía líquida de alta eficacia
(Omole et al, 1999; Ewaschuk et al., 2002; Ewaschuk et a., 2004b) y el método enzimático
de análisis (Lorenz et al, 2003) basado en la oxidación de D-lactato a piruvato por la enzima
D-lactato deshidrogenasa bajo la conversión simultánea de NAD+ a NADH, siendo
proporcional al contenido de D-lactato en la muestra medido por fluorímetro (340 nm). En
medicina humana el nivel de ácido D-láctico puede ser útil como indicadores de presencia de
infección bacteriana en fluidos corporales con una sensibilidad del 79.7%, y especificidad del
99.5% cuando la concentración de ácido D-lactico fue menor a 0.15 mM (Smith et al, 1989).
Sin embargo, un estudio posterior pudo alcanzar (punto de corte: 0.05 mM) una sensibilidad
de 96% y especificidad del 88% (Marcos et al, 1991). Existen diferentes alternativas para la
medición del L-lactato (Peiro et al, 2010; Burfeind y Heuwieises, 2012; Karapinar et al, 2013).
4. Hipótesis
La acidosis metabólica de origen ruminal, en terneros neonatos, puede ser diagnosticada
igualmente por los métodos del modelo de Henderson-Hasselbalch y por los métodos del
modelo de Stewart.
5. Metodología
5.1 Tipo de estudio
Ensayo clínico experimental prospectivo no aleatorio (longitudinal comparativo) (Dawson
y Trapp, 2005). Se realiza este tipo de estudio con un grupo control y un grupo de casos
clínicos con el fin de comparar las condiciones fisiológicas frente a los animales
sometidosa experimento de modo prospectivo con mayor control de las variables
intentando reproducir el modelo de experimentación utilizado por Gentile y colaboradores
(Gentile et al, 2004).
5.2 Análisis estadístico
Se analizaron los promedios, valores mínimos y máximos, rangos, desviación estándar
para las variables cuantitativas. La significancia estadística se consideró con un valor de
p< 0,05. Se realizó un análisis de regresión linear simple (RLS) y de correlación y se
estableció el coeficiente de correlación de Spearman entre las variables tenidas en
cuenta. El análisis estadístico se realizó con el programa estadístico INSTAT® versión
2.01.
5.3 Población
Se estudiaron un total de 11 terneros sanos de lechería, machos y hembras de descarte
para los propietarios con edades entre 5 y 10 días divididos en: un grupo control dos (2)
terneros los cuales se les ofrecerá hasta dos litros de leche entera ultra alta temperatura
UHT larga vida apta para consumo humano.En cada toma se ofrece vía tetina a la altura
una ubre tres veces al día durante los dos días. Un segundo grupo de nueve (9) terneros
será sometido al experimento (casos) Ningún ternero fue sometido 2 veces al modelo de
acidosis ruminal inducida. El estudio se realizó en la cuidad de Cogua (Cundinamarca)
ubicada 34 Km de Bogotá (altitud 2631 msnm), vereda Roda Montada.
32 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
5.4 Criterios de inclusión y exclusión
Como criterios de inclusión y exclusión se escogieron terneros entre 2 y 10 días de edad
clínicamente sanos (frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, color de membranas
mucosas orales, tiempo del llenado capilar gingival y temperatura corporal –rectal-) sin
signos de deshidratación ni de depresión mental, anorexia a los cuales no se les haya
administrado medicamento alguno. Se excluyeron animales que ya hubiesen sido
utilizados en el experimento y además que en la fase 2 (inducción acidosis ruminal
mediante aplicación de lactorreemplazador en rumen) presentaran 2 o más de los
siguientes signos clínicos: depresión severa con recumbencia prolongada, grado de
estimación de deshidratación >10% (Constable et al, 1998), ausencia completa de reflejo
de succión, apetito disminuido en 2 alimentaciones consecutivas ó acidosis metabólica
severa con exceso de base actual calculado en < 15 mmol/l.
5.5 Consideraciones éticas
Dentro de las consideraciones éticas el protocolo se siguieron los lineamientos descritos
por Gentile y colaboradores en el 2004 con la intención de producir acidosis ruminal en
terneros (Gentile et al, 2004) y fue aprobado por el Comité de Bioétca de la Facultad de
Medicina Veterinaria y de Zootecnia de la Universidad Nacional de Colombia sede
Bogotá mediante oficio CB-011-2015 (09/04/2015). En este ensayo clínico la disfunción
del reflejo de la gotera esofágica fue simulada por la aplicación intraruminal de
lactoreemplazador vía sonda oro-ruminal (Naylor, 2003) con dos litros de
lactoreemplazador en cada toma.
5.6 Protocolo del estudio
En la fase de pre-inducción (primer día) a todos los once (11) terneros entre 6 y 10 días
de edad se les practicará examen clínico verificando que se encuentren clínicamente
sanos sin signos de enfermedad, deshidratación, depresión mental o anorexia a los
cuales no les haya sido administrado medicamento alguno. A todos los 11 animales se
les ofrecerá hasta máximo dos litros de leche entera ultra alta temperatura UHT larga
vida apta para consumo humano en cada toma (08:00, 13:00 y 18:00 horas)
ofreciéndoles mediante tetina a la altura de la ubre facilitando la ruta fisiológica hacia el
abomaso (Dirr y Dirksen, 1989) respondiendo a la recomendación general de consumo
Metodología 33
del 10% de su propio peso vivo (Àvila-Tellez y Gasquez-Gòmez, 2010; Huuskonen et al.
2011). Durante el experimento se les restringió el acceso al agua ad libitum en virtud a
que el libre acceso al agua ayuda a establecer el funcionamiento adecuado de la gotera
esofágica (Orskov, 1988).
El segundo día (fase de inducción) a las 07:30 horas se practicó de nuevo examen
clínico a todos los once (11) terneros (2 animales del grupo control y 9 animales del
grupo experimental de casos) verificando que se encuentren clínicamente sanos sin
signos de enfermedad, deshidratación ni depresión mental, sin anorexia a los cuales no
se fue administrado medicamento alguno. Al grupo 1 – control- (2 animales) se les
ofreció de a dos (2) litros de leche entera pasteurizada vía oral a las 08:00, 13:00 y
18:00 horas mediante tetina a la altura de la ubre igual que el día de la pre-inducción. Se
tomaron muestras de sangre a las: 07:45 horas (Tiempo cero = T 0;
DETERMINACIÓN DE VALORES DE BASE), 12:45 horas (Tiempo uno = T 1), 17:45
horas (Tiempo dos = T 2) cumpliendo con el protocolo ―guía para la correcta toma de
sangre en bovinos a partir de la vena coccígea y de la vena yugular externa‖ de la
Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia de la Universidad Nacional de Colombia
y se tomaron muestras de fluido ruminal a las: 07:50 horas , 12:50 horas y a las 17:50
horas.
Al grupo 2 –casos- (9 casos) |se les tomaron muestras de sangre a las: 07:45 horas
(Tiempo cero = T 0; DETERMINACIÓN DE VALORES DE BASE), 12:45 horas (Tiempo
uno = T 1), 17:45 horas (Tiempo dos = T 2) cumpliendo con el protocolo ―guía para la
correcta toma de sangre en bovinos a partir de la vena coccígea y de la vena yugular
externa‖ de la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia de la Universidad
Nacional de Colombia; se les tomaron muestras de fluido ruminal a las: 07:50 horas,
12:50 horas y a las 17:50 horas y posteriormente se les ofreció un (1) litro de leche
entera pasteurizada vía oral mediante tetina a la altura de la ubre a las 08:00, 13:00 y
18:00 horas. En ambos grupos se tomaron muestras de líquido ruminal a las 07:50 horas,
12:50 horas y 17:50 horas mediante succión ejercida a través de dosificador (pistola)
Multi-Lhaura 30 ml (Ref: 10808), para la obtención de su valor de pH ruminal con el
potenciometro portable HI98128 Hanna Instruments® calibrado según instrucciones del
fabricante. Durante el tiempo del experimento los animales no recibieron ningún tipo de
alimento ni bebida diferente a las mencionadas en el protocolo experimental. Una vez
34 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
finalizado el los animales retornarán a sus respectivos establos. Al grupo 2 –casos- (9
casos) |se le administró lactoreemplazador en rumen para llevar a la producción
ruminal de ácido D-láctico en los terneros. El lactoreemplazador a utilizar en la fase
experimental será Sprayfo Red© (Licencia de venta ICA No.: 7617 AL). El tercer día se
observarán los animales verificando su estado de salud con el objetivo de garantizar su
bienestar.
Figura 2. Estimación de recorrido de la sonda desde la boca hasta el rumen (última
costilla)
Figura 3. Inserción de sonda oro-ruminal
Metodología 35
Figura 4. Líquido ruminal obtenido mediante sonda oro-ruminal
Figura 5. Medición pH líquido ruminal obtenido mediante sonda oro-ruminal antes de
administración de leche en rumen
36 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Figura 6. Obtención de muestra de sangre venosa (vena yugular externa)
Figura 7. Medición pH sanguíneo venoso
Metodología 37
Figura 8. Administración de lacto-reemplazador vía oro-ruminal
Figura 9. Medición pH líquido ruminal obtenido mediante sonda oro-ruminal posterior a la
administración de lactorreemplazador en rumen
38 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Figura 10. Medición de D-lactato por espectrofotometría
Metodología 39
5.7 Flujograma del experimento
FASE
PRE- INDUCCION (Día 1)
FASE INDUCCION
(Día 2)
FASE DE RECUPERACIÓN
(Día 3)
11 Terneros (2 animales del grupo 1 –control-; y 9 animales del grupo 2 –casos-) clínicamente sanos entre 2 y 10 días de edad. Primer EXAMEN CLINICO.
11 Animales acondicionados en finca Cogua (Primer día antes de la fase de inducción) 2 Lts de leche entera a todos los animales a las 08.00, 13.00 y 18.00 h, mediante tetina (altura de la ubre).
07:30 horas: Segundo EXAMEN CLINICO a 11 Terneros (2 animales del grupo 1 –control-; y 9 animales del grupo 2 -casos-) Toma de muestra de sangre a 11 Terneros a las 07:45 horas (Tiempo cero = T0; DETERMINACIÓN DE VALORES DE BASE), 12:45 horas (Tiempo uno = T1) y a las 17:45 horas (Tiempo dos = T2)
GRUPO CONTROL: Colocación sonda oro-ruminal para toma de muestra y medición de pH de líquido ruminal a las 07:50, 12:50 y 17:50 horas con inmediato retiro de la sonda.
06:00 horas: Supervisión y examen clínico a todos los animales del estudio hasta el retorno de los valores clínicos fisiológicos dentro de los rangos considerados de referencia.
GRUPO CASOS: Administración de 2 L de lactoreemplazador intraruminal y retiro de sonda oro-ruminal a las 07:55 y 12:55 horas.
GRUPO CONTROL: Alimentación con dos (2) litros de leche mediante tetina a la altura de la ubre a las 08:00, 13:00 y 18:00 horas.
GRUPO CASOS: Alimentación con un (1) litro de leche mediante tetina a la altura de la ubre a las 08:00, 13:00 y 18:00 horas.
GRUPO CASOS: Colocación sonda oro-ruminal, Toma de muestra y medición de pH de líquido ruminal a las 07:50, 12:50 y 17:50 horas.
40 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
5.8. Manejo de muestras
5.8.1 Fluido ruminal
Las muestras de líquido ruminal se obtuvieron mediante succión ejercida a través de
dosificador (pistola) Multi-Lhaura 30 ml (Ref: 10808) y fueron depositadas en vasos
plásticos desechables y su valor de pH fue registrada con el pHmetro portable HI98128
Hanna Instruments® calibrado según instrucciones del fabricante.
5.8.2 Sangre venosa:
Las muestras de sangre se extrajeron anaeróbicamente de la vena yugular externa en
cjeringas estériles desechables con anticoagulante (30 UI de heparina de litio; BD
PRESET® Becton Dickinson, Referencia: 364413 presión parcial de gases sanguíneos,
pH, electrolito). De la misma muestra se tomaron 0.5 ml para la determinación de
proteínas plasmáticas totales (PPT) por refractometría (refractómetro ATC®).
La medición y lectura de los gases sanguíneos venosos, BUN, electrolitos y L-lactato se
realizó con el dispositivo para medición I-STAT® Abbott® (Peiro et al, 2010; Karapinar et
al, 2013) utilizando los cartuchos I-Stat®:
- i-Stat CG4+ (Abbott Laboratories®): pH, PCO2, PO2, Lactato (Lac), TCO2*, HCO3*, BE*,
sO2* (* = valores calculados).
- i-Stat EC8+ (Abbott Laboratories®): Sodio (Na), Potasio (K), Cloruro (Cl), pH, PCO2,
Nitrógeno úrico (BUN)/Urea, Glucosa (Glu), Hematocrito (Hct), TCO2*, HCO3*, BE*, Intervalo
aniónico* (Anion Gap), Hemoglobina* (Hb); (* = valores calculados).
También se extrajeron muestras de sangre de la vena yugular externa tomando 10 cc de
sangre completa con jeringas estériles desechables de polipropileno DISCARDIT®
Becton Dickinson de otros 10 mls colocados en tubo sin anticoagulante para la obtención
posterior del suero (procesamiento de la muestra y medición del D-lactato).
Para la determinación de D-ñactato se procesaron las muestras de sangre sin
anticoagulante que fueron centrifugadas a (5000 revoluciones por minuto durante 10
minutos) dentro de las 20 minutos siguientes a la toma de la muestra, se extrajo 1 ml de
suero sobrenadante colocándolo en tubos microcentrífuga Eppendorf® de 1.5 ml
Metodología 41
conservándose congelados a -20°C hasta su procesamiento en el Laboratorio de
Bioquímica (3er piso) de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Colombia
Sede Bogotá (Anexo B) para la medición del D-lactato (KIT D-Lactic acid ® R-Biopharm;
Prueba enzimática -340 nm-; Ref: 11112821035).
5.9. Variables de medición:
Las variables fisiológicas de medición (Tabla 2) se registrarán en el formato determinado
(Anexo C).
Tabla 2: Variables fisiológicas de medición del estudio.
NOMBRE DE LA
VARIABLE
TIPO DE
VARIABLE
UNIDAD DE
MEDIDA
VALOR
NORMAL REFERENCIA
pH ruminal Cuantitativa 6.5 – 7.5 Dirksen y Garry, 1987
pH sanguíneo venoso Cuantitativa 7.35 a 7.50 Radostitis et al., 2007.
PCO2 Cuantitativa mm Hg 34 a 45 Radostitis et al., 2007.
L-Lactato Cuantitativa mmol/L 0.6 a 2.2 Radostitis et al., 2007
D-Lactato Cuantitativa mmol/L <3.96 Lorenz et al., 2003.
Bicarbonato ([HCO3-]) Cuantitativa mmo/L 20 a 30 Radostitis et al., 2007.
Dióxido de carbono total (TCO2) Cuantitativa mEq/L 28 a 34 Constable, 2014.
Exceso de base (EB) Cuantitativa mmol/L -2.5 a 2.5 Radostitis 2007 citado por
Muller et al., 2012
Sodio (Na+) Cuantitativa mEq/L 132 a 152 Radostitis et al., 2007
Potasio (K+) Cuantitativa mEq/L 3.9 a 5.8 Radostitis et al., 2007
Cloruro (Cl-) Cuantitativa mEq/L 95 a 110 Radostitis et al., 2007
Anion Gap (AG)=
[Na+]+[K+])-([Cl-]+[HCO3-]).
Cuantitativa mEq/L 8.9 a 15.0 Constable et al., 2005.
Hidrogeniones metabólicos
(H+ met = H
+TOT – H
+CO2)
Cuantitativa nM -5 a +5 Cruz et al, 2009
Proteínas plasmáticas totales
(PPT). Cuantitativa g/L 40.9 a 69.1 Pohler 2004.
DIF medida =
([Na+] + [K+]) – ([Cl-]) Cuantitativa mEq/L 38.3 a 47.7 Constable et al., 2005.
Concentración plasmática total
de ácidos débiles (ATOT)= (0.343 x
[PPT g/l]).
Cuantitativa mmol/L 15.9 a 21. Constable et al., 2005.
42 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Brecha de Iones Fuertes = SIG=
([[ATOT] / {1+107.08-pH
}) – AG Cuantitativa mEq/L -3.0 a + 3.0 Constable et al., 2005.
Urea Cuantitativa mmol/L ≤10.8 Pohler 2004.
Creatinina Cuantitativa µmol/L ≤159 Pohler 2004.
Temperatura (T°) Cuantitativa Grados Celsius 39 a 40.5 Terra, 2010.
Frecuencia cardíaca (FC) Cuantitativa Latidos por
minuto (lpm) 100 a 140 Terra, 2010
Frecuencia respiratoria (FR) Cuantitativa Respiraciones
por minuto (rpm) 30 - 60 Terra, 2010
Membranas mucosas Cualitativa color rosadas Jackson y Cockcroft,
2002.
Tiempo de Llenado Capilar
(TLLC) Cuantitativa segundos <2‖
Jackson y Cockcroft,
2002.
Hematocrito Cuantitativa
% PVC
(porcentaje del
volumen del
paquete celular)
24 - 46 Morris, 2010.
5.10. Cálculos ácido-base
Las variables físicoquímicas del modelo de iones fuertes fueron calculadas así:
- La Diferencia de Iones fuertes: DIF3 ó DIFmedida= ([Na+] + [K+]) – ([Cl-]) (Constable, 1999).
- La concentración plasmática total de ácidos débiles (ATOT) fue calculada: ATOT (mmol)/L)
= (0.343 x [proteínas plasmáticas totales, g/l]).
- La carga total negativa de la concentración de proteínas plasmáticas totales A- (mmol):
(mmol/L) = [ATOT]/{1+10(7.08-pH)}; donde pKa= 7.08 es la constante de disociación efectiva
de los ácidos débiles plasmáticos totales (Constable, 2002).
- La Brecha de Iones Fuertes (Strong Ion Gap) SIG se calculó asi= [[ATOT] / {1+107.08-pH}) –
AG (Constable et al., 2005).
- D-lactatemia es definida como concentración sérica de D-lactato > 3,96 mmol/L (Lorenz
et al., 2003).
Metodología 43
5.11 Clasificación de las alteraciones ácido-base
Las alteraciones ácido-base se clasificaron de la siguiente manera de acuerdo a los
modelos Henderson-Hasselbalch (H-H), Modelo Simplificado de Iones Fuertes e
Hidrogeniones Metabólicos (tabla 3):
Tabla 3: Clasificación de las alteraciones ácido-base según los modelos Henderson-
Hasselbalch (H-H) y Modelo Simplificado de Iones Fuertes. Modificado de Constable,
1999, Constable 2005 (pvCO2, presión venosa parcial de dióxido de carbono; EB,
Exceso de Base; H+met, Hidrogeniones metabólicos; DIF diferencia de iones fuertes; ATOT,
concentración plasmática total de ácidos débiles no volátiles).
MODELO TIPO DE ALTERACIÓN METODO ACIDOSIS ALCALOSIS
HENDERSON-
HASSELBALCH
Respiratoria pCO2 [34–45 mmHg] ↑ pCO2 ↓ pCO2
Metabólica
EB [ -2.5 a + 2.5 mmol/L] ↓ EB ↑ EB
H+ met [- 5 nM a + 5 nM] > + 5 < -5
MODELO
SIMPLIFICADO DE
IONES FUERTES
Respiratoria pCO2 [34–45 mmHg] ↑ pCO2 ↓ pCO2
Iones Fuertes DIF3 [38.3 a 47.7 mEq/L]
↓ DIF3 ↑ DIF3
Ácidos débiles no
volátiles ATOT [15.9 a 21 mmol/L] ↑ ATOT ↓ATOT
6. Resultados
Se estudiaron 11 terneros (10 machos Holstein y 1 hembra Jersey) (tabla 4). con un
peso promedio de 41.09 Kg (± 3.56) y edad promedio de 7.27 días (± 1.34) Los animales
reunieron los criterios de inclusión a los cuales se les tomaron los datos previamente
establecidos.
Tabla 4. Razas de terneros utilizadas en este estudio.
EDAD (días) SEXO
PESO (kilos) RAZA
A1 5 macho 42 holstein
A2 8 hembra 46 yersey
A3 7 macho 37 holstein
A4 6 macho 41 holstein
A5 6 macho 39 holstein
A6 7 macho 35 holstein
A7 8 macho 42 holstein
A8 10 macho 47 holstein
A9 8 macho 41 holstein
A10 8 macho 43 holstein
A11 7 macho 39 holstein
Cinco (5) animales al tiempo cero (T0; 07:45 horas) presentaron hipotermia leve (T°<
38.5°C) al momento de la toma de muestra junto con otro animal en el tiempo uno (T1;
12:45 horas); asi como solo un animal presentó hipertermia leve (T°> 39.5°C) en el T1.
(Tabla 5). De otra parte cinco (5) animales al T0 presentaron bradicardia (FC <100 lpm) y
dos animales presentaron taquicardia leve (FC >140 lpm); uno en el Tiempo 1 y otro en
el Tiempo 2 (T2; 17:45 horas). Así mismo ocho (8) animales) presentaron bradipnea (FR
< 30 rpm); seis (6) en el T0, uno en el T1 y otro en el T2 mientras que solo un animal
presentó taquipnea (FR > 60 rpm) en T0 (Tabla 5).
46 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Tabla 5. Valores (promedio y desviación estándar) de T°, FC y FR en animales de los
grupos control y casos en tiempo cero (T0), tiempo uno (T1) y tiempo dos (T2).
Rango de
Referencia
Grupos de
animales TIEMPO CERO TIEMPO UNO TIEMPO DOS
Temperatura
(°C)
38.5 – 39.5
(Jackson y
Cockcroft, 2002)
Control 38.1 ± 0 38.25 ± 0.35 39.0 ± 0.14
Casos 38.4 ± 0.25 38.8 ± 0.47 39.02 ±0.24
Frecuencia
Cardíaca (lpm)
100 – 140
(Terra, 2010)
Control 109 ±1.41 128 ±22.62 124 ±11.31
Casos 101.77 ±11.50 123.77 ± 11.24 131.55 ± 19.53
Frecuencia
Respiratoria
(rpm)
30 – 60
(Terra, 2010)
Control 28 ±5.65 48 ±5.65 38.0 ±2.82
Casos 32.66 ± 15.81 40.66 ± 13.03 38.33 ± 6.78
Dos animales del grupo control presentaron fluido ruminal con pH bajo (6.19 y 6.33) en
T1 y otro animal en T2 (6.42) por debajo del límite inferior establecido como rango de
referencia (6.5 - 7.5; Dirksen y Garry, 1987). Al T1 los animales sometidos al ensayo
clínico todos presentaron acidosis ruminal (pH de fluido ruminal < 6.5) con un promedio
de 4.97 y al T2 todos los animales continuaron presentando acidosis ruminal con pH del
fluido ruminal inferior a 6.5 (4.56 ± 0.24) (Figura 11).
Figura 11. Gráfico de dispersión de valores de pH ruminal en grupos control y de casos en los
tiempos 0, 1 y 2 (las líneas punteadas indican el rango de los valores normales aceptados).
Resultados 47
Tabla 6. Valores (promedio y desviación estándar) de pH ruminal, concentración sérica
de L-lactato y D-lactato en animales de los grupos control y grupo de casos tiempo cero
(T0), tiempo uno (T1) y tiempo dos (T2).
En cuanto a la concentración sérica de L-lactato de muestras de sangre venosa en el
grupo control se encontró un aumento por encima del límite superior establecido como
rango de referencia (2.2 mmol/L) en T1 y T2 mientras que en los animales del grupo de
casos se encontraron dentro de los límites de referencia (Tabla 6). De otra parte la
concentración sérica de D-lactato en los animales del grupo control se encontró en todos
los tiempos de muestreo por debajo del rango considerado como fisiológico (< 3.96
mmol/L) igual que los animales del grupo de casos T0 (2.27 mmol/L; ± 1.31). En T1 los
animales del grupo de casos presentan un incremento significativo en la concentración
sérica de D-lactato (5.87 mmol /L ± 0.89) y descenso del pH del fluido ruminal (4.97 ±
0.23) lo que se considera una acidosis ruminal. En el grupo de casos, en T2, se conservó
la acidez ruminal (4.56 ± 0.24) y la tendencia ascendente de la concentración sérica de
D-lactato (8.95 mmol/L ± 0.84) (Figura 12).
Rango de
Referencia
Grupos de
animales TIEMPO CERO
TIEMPO
UNO
TIEMPO
DOS
pH venoso
yugular externa
7.35 – 7.50
(Radostitis et al., 2007)
Control 7.37 ± 0.03 7.45 ± 0.02 7.40 ± 0.08
Casos 7.36 ± 0.06 7.45 ± 0.02 7.29 ± 0.08
pH ruminal 6.5 - 7.5 (Dirksen y Garry,
1987)
Control 6.85 ± 0.48 6.44 ± 0.15 6.30 ± 0.16
Casos 6.73 ± 0.41 4.97 ± 0.23 4.56 ± 0.24
Concentración
L-Lactato sérico
0.6 – 2.2 mmol/L
(Radostitis et al, 2007)
Control 1.42. ± 0.30 2.20 ± 0.13 2.36 ± 0.46
Casos 1.80 ± 0.63 1.88 ± 0.48 1.58 ± 0.42
Concentración D-
lactato sérico
< 3.96 mmol/L
(Lorenz et al, 2003)
Control 1.17 ± 0.06 2.41 ± 0.81 2.77 ± 1.18
Casos 2.27 ± 1.31 5.87 ± 0.89 8.95 ± 0.84
48 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Figura 12. Gráfico de cajas y bigotes de valores de concentración de D-lactato sérico en
grupos control y de casos en los tiempos 0, 1 y 2 (La línea punteada indica el valor
máximo normal).
Solo un animal en el tiempo 0 (A2, pH venoso sanguíneo:= 7.31; [D-lactato]= 4.67
mmol/L) y otro animal del tiempo 1 (A1, pH venoso sanguíneo:= 7.34; [D-lactato]= 5.15
mmol/L) presentaron valores de acidemia y aumento del D-lactato mientras que 8 de los
9 animales del grupo de casos presentaron acidemia e hiper D-lactatemia en el T2.
La regresión linear entre la concentración de D-lactato sérico y pH sanguíneo venoso en
terneros cidémicos con D-lactatemia elevada mostró un valor r : -0.6368 (p > 0.05),
estadísticamente no significativa (p= 0.0895). Sin embargo la correlación de Spearman
entre la concentración de D-lactato sérico y pH sanguíneo venoso en terneros
académicos con D-lactato elevado obtuvo un valor r:-0.9048 (p <0.01) estadísticamente
muy significativa (p=0.0046). La regresión linear entre la concentración de D-lactato
sérico y pH ruminal en terneros con D-lactatemia elevada mostró un valor r: 0.1137 (p >
0.05) estadísticamente no significativa (p= 0.7886). Asi mismo la correlación de
Spearman entre la concentración de D-lactato sérico y pH ruminal en terneros
Resultados 49
acidémicos con D-lactatemia elevada obtuvo un valor r: 0.1190 (p > 0.05)
estadísticamente no significativa (p= 0.7930).
Se observaron valores de pH sanguíneo obtenidos de vena yugular externa ligeramente
inferiores al rango de referencia (7.35 – 7.50; Radostitis et al, 2007) en 5 animales del
grupo de casos (7.36 ± 0.06) en T0 (Figura 13); 8 animales con valores inferiores a pH
7.35 en ese mismo grupo en el T2 (7.29 ± 0.08) y un animal del grupo control en T0.
Figura 13. Gráfico de cajas y bigotes de valores de pH sanguíneo venoso obtenidos de
vena yugular externa en grupos control y de casos en los tiempos 0, 1 y 2 (las líneas
punteadas indican el rango de los valores normales aceptados).
Los valores calculados de brecha aniónica (AG) desplegaron resultados ligeramente
superiores a los valores considerados como de referencia (15.0 mEq/L) en ambos grupos
(control y casos) en todos los momentos de muestreo (T0, T1 y T2) inclusive cuando los
animales no habían recibido lactoreemplazador en el rumen ni leche entera vía tetina con
una tendencia al aumento en el T2 para ambos grupos (Tabla 7):
50 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Tabla 7. Valores (promedio y desviación estándar) de pH sanguíneo venoso, bicarbonato
estándar, exceso de base, AG, DIF3 o medida, [ATOT] y Brecha de Iones Fuertes (SIG) en
grupos control y casos en T0, T1 y T2.
Rango de
Referencia
Grupos de
animales
TIEMPO
CERO
TIEMPO
UNO
TIEMPO
DOS
pH sanguíneo
venoso yugular
externa
7.35 – 7.50
(Radostitis et al.,
2007)
Control 7.37 ± 0.03 7.45 ± 0.02 7.40 ± 0.08
Casos 7.36 ± 0.06 7.45 ± 0.02 7.29 ± 0.08
Bicarbonato
estándar
20 – 30 mmol/L
(Radostitis et al.,
2007)
Control 24.85 ± 0.64 26.75 ± 2.62 27.65 ± 3.04
Casos 26.34 ± 1.99 26.58 ± 2.30 21.98 ± 7.24
Exceso de base
-2.5 – 2.5 mmol/L
(Radostitis 2007
citado por Muller et
al., 2012)
Control 0 ± 0 2.50 ± 2.12 3.50 ± 4.95
Casos 1.00 ± 2.45 1.56 ± 2.92 0.39 ± 6.08
Anion Gap
[Na+]+[K
+])-([Cl
-
]+[HCO3-])
8.9 – 15.0 mEq/L
(Constable et al.,
2005)
Control 16.05 ± 0.07 16.55 ± 0.81 17.65 ± 0.92
Casos 16.44 ± 0.81 16.38 ± 2.05 16.52 ± 3.15
DIF medida=
([Na+]+[K+])–([Cl-])
38.3 – 47.7 mEq/L
(Constable et al.,
2005)
Control 40.90 ± 0.57 43.30 ± 1.98 45.30 ± 2.12
Casos 42.84 ± 2.11 42.96 ± 1.99 38.50 ± 5.3
Concentración
plasmática total de
ácidos débiles (ATOT)
15.9 – 21.0 mmol/L
(Constable et al.,
2005)
Control 27.44 ± 0.97 26.75 ± 0.00 28.98 ± 2.67
Casos 25.57 ± 4.05 26.72 ± 5.47 24.85 ± 6.11
Brecha de Iones
Fuertes (SIG).
([[ATOT] / {1+107.08-pH
})
– AG
-3.0 a +3.0 mEq/L
(Constable et al.,
2005)
Control 2.08 ± 0.23 2.14 ± 0.40 1.83 ± 0.23
Casos 2.08 ± 5.19 1.63 ± 3.65 -1.26 ± 3.59
En el T0 a través del modelo de H-H solo se obtuvieron un caso de acidosis metabólica
(> +5 nM) por el método de hidrogeniones metabólicos (H+met); 5 casos de acidosis
respiratoria (PCO2 > 45 mmHg) y cuatro casos de alcalosis metabólica (3 EB y 1 H+met );
mientra que el modelo simplificado de iones fuertes encontró de 10 casos de Acidosis por
aumento de ATOT (ATOT >21 mmol/L) incluidos los dos animales del grupo control y 6
casos con acidosis respiratoria. Ya en el T1 el abordaje H-H identifica 1 caso como
acidosis metabólica (H+met) y 6 casos de alcalosis metabólica (2 casos por método H+
met y
4 casos por método EB) mientras que el modelo simplficado de iones fuertes disminuye
su diagnóstico encontrando 9 casos de acidosis por aumento de ATOT.
Resultados 51
Ya en el T2 ambos modelos (H-H) y Simplificado de Iones Fuertes encuentran ambos 17
diagnósticos diferentes discriminados así:
El modelo H-H dentifica 10 casos de acidosis metabólica (6 casos por método H+met y 4
casos por método EB) al igual que el modelo simplificado de iones fuertes (3 casos por
DIF disminuida y 7 casos por aumento de ATOT). El modelo H-H encuentra 4 acidosis
respiratorias y 3 alcalosis metabólicas (1 caso por método H+met y 2 casos por método
EB) mientras que el modelo de iones fuertes encuentra 4 acidosis respiratorias y 2
alcalosis respiratorias (Figura 14). Cabe anotar que los datos de referencia del modelo
de hidrogeniones metabólicos fueron obtenidos de sangre venosa central en pacientes
humanos (Cruz et al, 2009).
Figura 14. Gráfico de dispersión de valores de Hidrogeniones metabólicos en grupos
control y de casos en los tiempos 0, 1 y 2 (las líneas punteadas indican el rango de los
valores normales aceptados).
En el T2 se encontraron tres casos con baja DIF que se usan para indicar acidosis por
iones fuertes aclarando que los casos a y b también fueron categorizados como acidosis
metabólica según el abordaje de H-H.
52 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
a. DIF: 26.4 mEq/L, [Na+]: 137 mEq/L, [Cl-]: 115 mEq/L, [K+]: 4.4 mEq/L, pH: 7.19; [D-
lactato] sérico: 9.86 mmol/L, AG: 17 mEq/L, SIG: -5.41 mEq/L;
b. DIF: 34.2 mEq/L, [Na+]: 135 mEq/L, [Cl-]: 106 mEq/L, [K+]: 5.2 mEq/L, pH: 7.14; [D-
lactato] sérico: 9.63 mmol/L, AG: 22.1 mEq/L, SIG: -4.13 mEq/L; y
c. DIF: 37.2 mEq/L, [Na+]: 138 mEq/L, [Cl-]: 106 mEq/L, [K+]: 5.2 mEq/L, pH: 7.28; [D-
lactato] sérico: 9.38 mmol/L, AG: 16.1 mEq/L, SIG: 0.84 mEq/L.
Según el concepto de la brecha iónica fuerte (SIG Normal – 3.0 a + 3.0 mEq/L que podría
indicar Acidosis por ácidos orgánicos si SIG – 3.0: L-lactato, D-lactato, β-OH butirato,
acetoacetato, sulfato y uratos; Constable et al, 1997) se encontraron: en el T0 un animal
con valor de SIG: -4.96 mEq/L, pH: 7.39, [D-lactato] sérico: 2.75 mmol/; mientras que en
el T2 se registraron 4 animales todos acidémicos y con D-lactatemia elevada.con valores
de:
a. SIG: -5.73 mEq/L, pH: 7.33, [D-lactato] sérico: 7.57 mmol/L;
b. SIG: -5.41 mEq/L, pH: 7.19, [D-lactato] sérico: 9.86 mmol/L;
c. SIG: -4.36 mEq/L, pH: 7.30, [D-lactato] sérico: 7.73 mmol/L;
d. SIG: -4.13 mEq/L, pH: 7.14, [D-lactato] sérico: 9.63 mmol/L
Valores > 3.0 mEq/L (podría indicar un incremento en cationes fuertes no identificados;
evento raro; Constable, 2014) se encontraron en T0:
a. SIG: 13.75 mEq/L, pH: 7.43, [D-lactato] sérico: 1.02 mmol/L;
b. SIG: 3.63 mEq/L, pH: 7.38, [D-lactato] sérico: 1.05 mmol/L
Asi como en el T1 solo tres valores:
a. SIG: 4.22 mEq/L, pH: 7.39, [D-lactato] sérico: 5.7 mmol/L;
b. SIG: 8.43 mEq/L, pH: 7.38, [D-lactato] sérico: 5.92 mmol/L;
c. SIG: 4.64 mEq/L, pH: 7.36, [D-lactato] sérico: 6.56 mmol/L.
Ya finalizando en T2 se halló solo un valor de: SIG: 3.23 mEq/L, pH: 7.28, [D-lactato]
sérico: 9.47 mmol/L.
La Regresión linear entre la concentración de D-lactato sérico y AG en terneros D-
lactatemia elevada mostró un valor r: 0.1878 (p> 0.05) estadísticamente no significativa
Resultados 53
(p= 0.6560). Además la correlación de Spearman entre la concentración de D-lactato
sérico y AG en terneros con D-lactatemia elevada tuvo un valor r : 0.4286 (p > 0.05)
también estadísticamente no significativa (p= 0.2992).
Asi mismo la Regresión linear entre la concentración de D-lactato sérico y SIG en
terneros con D-lactatemia elevada mostró un valor r: 0.3485 (P> 0.05) estadísticamente
no significativa (p= 0.3975) y la correlación de Spearman entre la concentración de D-
lactato sérico y SIG en terneros con lactatemia incrementada reveló un valor r: 0.1905
(P> 0.05) estadísticamente no significativa (p=0.6646).
Tabla 8: Resultados de alteraciones ácido-base según los modelos Henderson-
Hasselbalch (H-H) y Modelo Simplificado de Iones Fuertes en el T0
T0
HENDERSON-HASSELBALCH STEWART
Animal PCO2 BE H+met PCO2 DIF ATOT Dx
C1
C2
40
46.2
N
AcR
0
0
N
N
0.36
0.43
N
N
40
46.2
N
AcR
40.5
41.3
N
N
26.75
28.12
AcM
AcM
A1
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
A9
41.8
51.3
54.1
54.6
45.4
40.6
44
43.4
48.4
N
AcR
AcR
AcR
AcR
N
N
N
AcR
4
0
1
1
4
3
-3
1
-2
ALM
N
N
N
ALM
ALM
AcM
N
N
-5.21
0,5
-1.03
-1.29
-3.96
-3.3
3.88
-1.53
3.36
AL
N
N
N
N
N
N
N
N
41.8
51.3
54.1
54.6
45.4
40.6
44
43.4
48.4
N
AcR
AcR
AcR
AcR
N
N
N
AcR
45
43.8
43.4
43.4
45.6
43.6
39.5
41.2
40.1
N
N
N
N
N
N
N
N
N
22.3
28.13
21.95
25.38
17.84
29.5
29.5
28.13
27.44
AcM
AcM
AcM
AcM
N
AcM
AcM
AcM
AcM
TOTAL
T0
N=6 N=7 N=
10
N=6 N=11 N=1
Ac-M
=1
Ac-M
= 10
AcR
=5
Al-M
=3
ALM
=1
AcR =5
N: Normal; AcR: Acidosis Respiratoria; Ac-M: Acidosis Metabólica; ALM: Alcalosis
Metabólica; ALR: Alcalosis Respiratoria.
54 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Tabla 9: Resultados de alteraciones ácido-base según los modelos Henderson-
Hasselbalch (H-H) y Modelo Simplificado de Iones Fuertes en el T1.
T1
HENDERSON-HASSELBALCH STEWART
Animal PCO2 BE H+met PCO2 DIF ATOT Dx
C1
C2
42.9
35.2
N
N
4
1
ALM
N
-5.19
-1.57
ALM
N
42.9
35.2
N
N
44.7
41.9
N
N
26.75
26.75
Ac-M
Ac-M
A1
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
A9
43.3
42.2
44
43.4
43.9
41.5
45.9
40.9
41.1
N
N
N
N
N
N
AcR
N
N
-2
3
2
4
7
0
2
0
-2
N
ALM
N
ALM
ALM
N
N
N
N
2.6
-5.09
-3.28
-4.62
-7.61
-0.39
-2.83
-0.77
-1.93
N
ALM
N
N
ALM
N
N
N
N
43.3
42.2
44
43.4
43.9
41.5
45.9
40.9
41.1
N
N
N
N
N
N
AcR
N
N
44.1
45.1
41.7
45.8
44.5
41.6
41.4
42.5
39.9
N
N
N
N
N
N
N
N
N
27.29
27.19
19.89
24.7
17.15
30.87
33.96
28.81
31.56
Ac-M
Ac-M
N
Ac-M
N
Ac-M
Ac-M
Ac-M
Ac-M
TOTAL
T1
N=
10
N=7 N=8 N=
10
N=
11
N= 2
Ac-M=9
AcR
=1
ALM
=4
ALM=
3
AcR
=1
N: Normal; AcR: Acidosis Respiratoria; Ac-M: Acidosis Metabólica; ALM: Alcalosis
Metabólica; ALR: Alcalosis Respiratoria.
Resultados 55
Tabla 10: Resultados de alteraciones ácido-base según los modelos Henderson-
Hasselbalch (H-H) y Modelo Simplificado de Iones Fuertes en el T2.
T2
HENDERSON-HASSELBALCH STEWART
Animal PCO2 BE H+met PCO2 DIF ATO
T
Dx
C1
C2
30.1
46.9
ALR
AcR
7
0
AL
N
2.91
0.22
N
N
30.1
46.9
ALR
AcR
46.8
43.8
N
N
27.1
30.87
Ac-M
Ac-M
A1
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
A9
45.2
25
39.6
55.9
55.2
41
36
38.4
44.1
AcR
ALR
N
AcR
AcR
N
N
N
N
-2
-1.5
0
0
4
-4
-6.5
-3
-5
N
N
N
N
AL
AM
AM
AM
AM
2.02
35.8
9.85
0
-5.3
6.0
35.4
3.56
8.45
N
AM
AM
N
AL
Ac-M
Ac-M
N
Ac-M
45.2
25
39.6
55.9
55.2
41
36
38.4
44.1
AcR
ALR
N
AcR
AcR
N
N
N
N
40.2
26.4
42.4
42.1
42.8
40.7
34.2
40.5
37.2
N
Ac-M
N
N
N
N
Ac-M
N
Ac-M
15.78
20.58
19.21
25.38
20.58
30.18
33.61
30.87
27.44
Ac-M
N
N
Ac-M
Ac-M
Ac-M
Ac-M
Ac-M
Ac-M
TOTAL
T2
N=5 N=5 N=5 N=5 N=9 N=2
ARL
=2
AcM
=4
Ac-M
= 5
ALR=
2
Ac-M=
3
AcM =
8
AcR
=4
ALM
=2
ALM=
1
AcR
=4
AL=1
N: Normal; AcR: Acidosis Respiratoria; Ac-M: Acidosis Metabólica; ALM: Alcalosis
Metabólica; ALR: Alcalosis Respiratoria.
Los resultados obtenidos de acuerdo a los diferentes modelos se resumen en la Tabla 8.
Tabla 11: Resultados de alteraciones ácido-base según los modelos Henderson-
Hasselbalch (H-H) y Modelo Simplificado de Iones Fuertes.
MODELO TIPO DE
ALTERACIÓN MÉTODO
TIEMPO 0 TIEMPO 1 TIEMPO 2
ACIDOSIS ALCALOSIS ACIDOSIS ALCALOSIS ACIDOSIS ALCALOSIS
HENDERSON-
HASSELBALCH
Respiratoria PvCO2 6 0 1 0 4 2
Metabólica
BE 1 3 0 4 4 2
H+met 0 1 0 3 5 1
MODELO
SIMPLIFICADO
DE IONES
FUERTES
Respiratoria PvCO2 6 0 1 0 4 2
Iones Fuertes DIF 0 0 0 0 3 0
Ácidos débiles
no volátiles ATOT 10 0 9 0 8 1
7. Discusión
Conviene destacar la importancia de conocer la fisiologia de la lactacion en el ternero y
como al alterarse el reflejo de cierre de la gotera esofágica puede producir acidosis
ruminal con implicaciones fisiológicas importantes y que en la práctica son fuente de
alteraciones en crecimiento y ganancia de peso con pérdidas económicas
representativas. El modelo experimental de alimentacion lactea al rumen permite conocer
dichas alteraciones de forma controlada.
Las hipotermias iniciales en el T0 pueden atribuirse al ayuno y a la fría temperatura
medio-ambiental del Municipio de Cogua (T°: 14 °C; 2600 msnm; Alcaldía Municipal de
Cogua) al momento de toma de la temperatura (07:45 horas) añadiendo que los
neonatos presentan deficiente termorregulación y se puede presentar una variación
diurna de la temperatura corporal de hasta 0.5 a 1.0 °C (Terra, 2010).
Los valores de pH del fluido ruminal descendieron con la administración de
lactorreemplazador intraruminal, posiblemente como dice Moller y colaboradores (Moller
et al, 1997) porque la leche y sus sustratos (también contenidos en el
lactorreemplazador) sirven de sustrato a la flora ruminal y aumenta por esta vía las
concentraciones séricas de D-lactato. Investigaciones previas han reportado que el paso
de leche al rumen en terneros conlleva a acidosis ruminal (Gentile et al, 2004). Dirr en
1998 reportó dos tipos de acidificación ruminal fermentativa: láctica y butírica siendo la
más predominante la acidificación láctica (Dirr, 1998) resaltando que no se puede atribuir
la ácidosis ruminal solo al ácido D- láctico debido a que la fermentación de los
carbohidratos por parte de flora ruminal (Lactobacillu) también son generados otros
compuestos (Ewaschuk et al, 2004 a) como ácidos grasos no volátiles. Además pueden
presentarse casos de elevada D-lactatemia sin acidemia (Gentile et al, 2004) tal como
ocurrió en 8 de los nueve animales del grupo de casos al tiempo 1 y en 1 animal del
grupo de casos en T2.
58 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Las concentraciones de L-lactato pueden presentarse elevadas al nacimiento (Sorge et
al, 2009) y permanecer asi en terneros recién nacidos por al menos 7 días de edad
(Kasari, 1994). En este estudio los animales fueron de 2 a 10 días de nacidos, sin
embargo las concentraciones de L-Lactato se mantuvieron dentro de los rangos
establecidos como de referencia como ya se ha reportado en animales con acidosis
ruminal (Gentile et al, 2004) asi como también se han reportado valores de L-Lactato
sanguíneo venoso superiores a los considerados como fisiológicos en animales con
acidosis ruminal (El-ashker et al, 2012). La correlación de Spearman entre la
concentración de D-lactato sérico y pH venoso sanguíneo en terneros hiper D-
lactatémicos fue de -0.9048 (P <0.01) estadísticamente muy significativa (0.0046) y en
consecuencia podría postularse que el ácido D-láctico podría estar involucrado con el
origen de la acidemia (Treftz et a, 2015 a).
Se presentó en un animal del grupo casos en el tiempo cero (aun sin administración de
leche intrarruminal) con valor de D-lactato de 4.67 mmo/L superior al reportado como
rang de referencia (3.96 mmol/L) y con un brecha aniónica de 18 mEq/L probablemente
por el ayuno del paciente que eventualmente pudiera generar cuerpos cetónicos,
butrirato o β-hidroxibutirato (Constable et al, 1997). Tal variación puede deberse a
diferencias en las dietas de los animales tomados como referencia frente a los pacientes
locales (Lorenz et al, 2003).
Es necesario recalcar que las concentraciones de ácidos grasos no volátiles producidos
en el rumen (ácidos acético, propiónico, butírico, láctico entre otros) dependen del tipo de
alimento (Gentile 1995) y de esta forma se generan los cambios en el epitelio ruminal
tales como hiperqueratosis y paraqueratosis que pueden afectar su posterior absorción y
de esta forma el desarrollo normal de los terneros con cambios en su metabolismo
(Dirksen y Garry, 1987; Herrli-Gygi et al, 2006). Por consiguiente otros aniones fuertes
tales como sulfatos, β-hidroxibutirato, acetoacetato y cationes fuertes como el magnesio,
calcio (Constable et al, 1997) y aniones asociados a uremia (hipurato, oxalato, urato,
hidroxipropionato y furanpropionato; Niwa et al, 1986) pueden eventualmente influenciar
sobre el valor de pH sanguíneo aunque estos no fueron medidos en este experimento.
Discusión 59
Solo un animal de los nueve que presentaron D-lactatemia elevada exhibió hiperkalemia,
algo ya reportado (Treftz et al, 2013b). No obstante los ácidos orgánicos estimulan la
liberación de insulina que introduce potasio a la célula y de esta forma puede no generar
cambios en la concentración de potasio (Adrogué et al, 1986; Guzman-Mora et al, 2004).
Desde la década de 1980s el doctor Peter Stewart propuso una mirada diferente a las
relaciones físico-químicas en las soluciones acuosas como la sangre y que pueden
cuantitativamente relacionarse con las alteraciones ácido-base clásicas. Su propuesta se
fundamenta en las interacciones de electroneutralidad entre iones fuertes en soluciones
complejas. Igual que Henderson y Hasselbalch, entiende que el CO2 es un factor
independiente de acidificación de una solución y su alteración corresponde a las
alteraciones ácido-base respiratorias. Denomina ATOT a los aniones derivados de ácidos
orgánicos presentes (por ejemplo: el lactato o los cuerpos cetónicos, las proteínas que
tienen un débil carácter ácido y a los fosfatos), todos estos también son vistos como
variables independientes que afectan el pH. Los iones fuertes (Na+, K+, Cl-) son el tercer
grupo de elementos independientes que ajustarán sus concentraciones (DIF) de acuerdo
con los cambios en las otras variables independientes. Queda asi que el pH y el HCO3
son variables dependientes de las interacciones de los tres grupos de variables
independientes anteriores.
Actualmente las acidosis pueden interpretarse como resultado de varios tipos de
alteraciones: la acumulación de CO2 (respiratoria); un incremento en ATOT (claramente
metabólica) o una disminución en la DIF (también atribuida a alteraciones metabólicas
como proponen los seguidores de Stewart). Esta puede ser debida a la sobreproducción
de ácidos orgánicos (lactato, cetoácidos), pérdida de cationes fuertes, exceso de cloruro
(administración de cloruro de sodio) lo cual lleva una disminución de la DIF y a
incrementar la SIG (cetoacidosis, acidosis láctica), este último cálculo incluye la brecha
aniónica (AG= anion gap) descrita antes del modelo de Stewart como un complemento
en la interpretación de las acidosis metabólicas identificadas por el método de H-H. Para
precisar estas variables (ver Tabla 1: Variables fisiológicas de medición del estudio).
Naylor reporta que los animales menores de 8 días de edad tienden a la acidosis láctica
mientras que los terneros de mayor edad presentan acidosis no láctica (Naylor, 1987 b).
En este estudio solo dos animales fueron categorizados con acidosis metabólica según el
modelo H-H. Estos también presentaban D-lactatemia aumentada y alto anion gap. Se
60 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
han encontrado relaciones significativas entre acidosis láctica y anion gap elevado
(Schelcher et al, 1998, Ewaschuck et al, 2003) sin embargo, en estos dos casos la
regresión linear entre la concentración de D-lactato sérico y AG en estos animales mostró
un valor r: 0.1878 (p> 0.05) estadísticamente insignificante y tambien hubo baja
correlación entre la [D-lactato] sérico y AG (r: 0.4286; p > 0.05) similar a lo encontrado
por Constable y colaboradores con L-lactato (1997).
Se ha postulado que terneros con acidosis ruminal degluten e incrementan la tasa de
producción de saliva, proceso que podría explicar en parte la pérdida de bicarbonato
(Battig 1992 citado por Stocker et al, 1999). Grude y colaboradores no encontraron
niveles elevados de D-lactato en sangre con alto anion gap en terneros bebedores en
leche (Grude et al, 1999). Los terneros con indigestión crónica pueden presentar acidosis
metabólica hipeclorémica o acidosis metabólica con alto anion gap o una combinación de
las dos. El alto AG puede ser causado por aniones no identificados y la acidosis
hiperclorémica presuntamente resulta de pérdida de bicarbonato (Stocker et al, 1999) por
ajuste entre iones fuertes. Otra pérdida indirecta de bicarbonato podría ocurrir cuando el
ácido D-láctico es producido y al disociarse, sus hidrogeniones son amortiguados por el
HCO3- formando H2CO3 que por disociación y solubilidad se excreta como CO2 por la vía
respiratoria. También puede ser perderse HCO3- cuando por vía renal acompaña al Na+ o
un K+ en intercambio por el NH4+ (Halperin y Goldstein, 1999).
Con frecuencia se pretende explicar una alteración ácido-base de manera unicausal, sin
embargo la evidencia demuestra que en la instauración de una acidosis, por ejemplo por
hiperlactatemia, no solo intervenen el anion característico (lactato) sino que también
metabólica y fisiológicamente se producen otros sustratos concurrentes o en paralelo que
muchas veces no se identifican quedando estimados a través de palabras difusas como
―brecha aniónica‖, ―brecha de ion fuerte‖, que dejan intuir la necesidad de discriminar
otros sustratos lo cual puede ser dispendioso en tiempo y costoso en recursos. Los
aniones no medidos pueden ser la variable acidificante más importante en los pacientes
con hiperlactatemia aún más que el lactato en si, dado que los aniones no identificados
disminuyen la DIF causando acidosis (Rinaldi y De Gaudio, 2005). Los dos casos que
presentaron D-lactatemia elevada también exhibieron SIG < 3 mEq/L lo que podría
alertar sobre la presencia de aniones fuertes no medidos y otros ácidos orgánicos.
Discusión 61
Además la regresión linear entre la concentración de D-lactato sérico y SIG mostró un
valor r: 0.3485 (P> 0.05) estadísticamente no significativo; tampoco hubo correlación
entre la concentración de D-lactato sérico y SIG r: 0.1905 (P> 0.05) estadísticamente
significativo. Otros estudios señalan que SIG es ligeramente mejor que el AG en la
cuantificación de la concentración de aniones no medidos al menos en terneros con
diarrea (Treftz et al, 2015a; Vebdnarski et al, 2015). Por consiguiente se recomienda para
la utilización del concepto de brecha aniónica (AG) su ajuste para la concentración de
albúmina lo que le daría utilidad diagnóstica suficiente (Chawla et al, 2008). Puede
incluirse el valor de la carga de la albúmina sérica que de esta forma revelaría un
aumento clínicamente significativo de estos ―aniones no medidos‖ en la mayoría de los
casos (Hatherill et al, 2002) lo cual no se efectuó en este estudio. Algunos pacientes con
hipoalbuminemia frecuentemente presentan reducción en valores de [ATOT] aunque no se
encuentren alcalémicos y su DIF también se encuentre reducida (Kellum, 1998). Esto
indica que aunque haya acidosis por aumento de ATOT no es la única variable que influye
sobre el pH sanguíneo y también hace parte de la debilidad del concepto diagnóstico y
terapéutico que se pretende obtener a partir de la DIF y sus subrogados dado que hasta
el momento no hay estudios que indiquen con suficiente evidencia la becesidad de tratar
las alteraciones metabólicas administrando o sustrayendo albúmina.
Tres animales presentaron Acidosis por Iones Fuertes con D-lactatemia elevada y alto
AG, dos de ellos con baja SIG aunque presentaban valores de electrolitos dentro de los
rangos de referencia. En medicina humana se ha reportado que el 20% de los pacientes
con hiperlactatemia severa mostraron valores normales de pH, [HCO3-], [BE] y [DIF]
(Tuhay et al, 2008). Además Kellum (1998) ha señalado que los pacientes en estado
crítico con hipoalbuminemia a menudo tienen pH normal, DIF reducida y exceso de base
normal, lo que podría considerarse como una respuesta fisiológica a la hipoalbuminemia
a fin de conservar el pH en su rango normal (Sirker et al, 2002). Además en los casos de
acidosis metabólica se puede aumentar el calcio ionizado pues es desplazado de sus
sitios de unión por los iones hidrógeno lo que eventualmente podría afectaría en alguna
medida la concentración de cationes fuertes y en consecuencia elevar el valor de SIG
(Cooper et al, 1992).
La SIG reveló 4 animales con posible acidemia por presencia de ácidos orgánicos no
medidos (aniones no medidos) con valores inferiores a 3 mEq/L. Sin embargo, 5
62 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
animales que mostraron SIG superior a 3 mEq/L se encontraban con D-lactatemia
elevada y pH sanguíneo normal indicando que posiblemente habría presencia de
cationes fuertes no medidos, que no neceseriamente se reflejan en el resultado final del
pH sanguíneo venoso posiblemente por respuestas compensatorias del animal y de la
acción de los buffers plasmáticos. Según la teoría de Stewart una alta relación Cl:Na (>
0.79) tiene un efecto acidificante y una baja proporción Cl:Na (<0.75) tiene un efecto
alcalinizante sobre el plasma (Durward y Murdoch , 2003). Sin embargo en este estudio
se observó que en los tres casos de acidosis por iones fuertes (disminución de la DIF) los
animales presentaron valores de sodio, potasio y cloro dentro de los rangos establecidos
como de referencia.
El agua comparada con el plasma a pH 7.4 es un ácido débil, por tanto la adición de
agua libre al plasma de un sujeto puede tener un efecto acidificante (acidosis dilucional)
mientras que la deshidratación podría tener un efecto alcalinizante. Esta hipótesis fue
planteada por Haskins y su grupo en el 2006 e hicieron los experimentos
correspondientes. La evaporación o hidratación experimental con agua libre de muestras
de plasma de cabra causó un cambio cuantitativo proporcional en la concentración
solutos iónicos menos del bicarbonato. El HCO3- estándar incrementó únicamente el 11%
con la evaporación y disminuyó solo el 2% con la hidratación lo cual se atribuyó a la
interacción del bicarbonato con el sistema buffer bicarbonato-ácido carbónico y los
ajustes complejos con otros sistemas buffer en el plasma. La evaporación produjo un
ligero efecto de alcalosis metabólica estadísticamente significativo, mientras que la
adición de agua tuvo efecto de acidosis metabólica estadísticamente insignificante
(Haskins et al, 2006). La deshidratación en terneros aumenta la [ATOT] plasmático
(Bachmann et al, 2009b) aunque la alimentación con leche puede incrementar el volumen
de hidratación plasmático (Bachmann et al, 2009a).
De otra parte se postula que las proteínas ejercen efecto sobre el pH. Por ejemplo:
Staempfli habla de una acidosis hiperproteinémica y una alcalosis hipoproteinémica
(Staempfli 2005). Igualmente se sabe que la hipoalbuminemia reduce el anion gap (Figge
et al, 1998), y se resalta que la carga negativa neta en las proteínas del plasma bovino
normal es físicamente el principal componente del AG (> 90%) (Staempfli 2005). De allí
que la administración de un bolo de infusión de una solución comercial de albúmina 20%
puede conducir a una acidosis leve (Bruegger et al, 2005). Dado que en este modelo de
Discusión 63
iones fuertes el [ATOT] corresponde a los tampones no volátiles como albúmina, globulina
y fosfatos, un alto [ATOT] podría atribuirse en parte a la carga eléctrica que ejerce la alta
concentración de fósforo inorgánico que presentan los animales jóvenes pues la hormona
de crecimiento incrementa la absorción de fosfatos en el riñón En el rumen el fosfato
trabaja como tampón para los ácidos grasos volátiles y como sustrato para los
microorganismos (Klinkon y Jezec, 2012). Sin embargo, la [ATOT] plasmática no siempre
se correlaciona con el pH sanguíneo venoso (Bachmann et al, 2012), lo que puede
representar las diferencias cinéticas de equilibrio de cada componente, rápida en los
iones y lenta en las proteínas. En terneros amamantados con leche se establece un
incremento gradual de las proteínas séricas totales y de albúmina desde el nacimiento
hasta los dos meses de edad, ambos tipos de proteína son más altas que en terneros
amamantados con cantidades limitadas de leche (Klinkon y Jezec, 2012). Las
concentraciones de albúmina plasmática aumentan durante la primera semana de vida
dependiente del suministro de calostro (Blum y Hammon, 2000; Perez-Santos et al,
2015). Se desconoce si los animales de este estudio consumieron calostro y en que
cantidades en sus primeras horas posnatales, lo que pudiera tener efectos sobre la [ATOT]
plasmática.
Autores como Siggard-Andersen líderes del modelo H-H no clasifican como desórdenes
ácido-base los cambios en [ATOT] a pesar del efecto de las proteínas sobre el pH
(Siggard-Andersen y Fogh-Andersen, 1995). Esto porque no han demostrado correlación
entre la reducción en la concentración de albúmina, que puede ser utilizada como
marcador para la reducción en los ácidos débiles y el cambio en la concentración de ión
hidrógeno lo cual va en contra de la teoría de Stewart (Alston et al, 2004). En este
estudio se encontraron 14 muestras (casos en diferentes tiempos) con aumento de ATOT
pero con pH sanguíneo venoso normal, sin acidosis en el modelo H-H.
En este estudio de tuvo particular interés en evitar errores en la toma y conservación de
las muestras, dado que estos pueden generar alteraciones de los valores de pH, pCO2,
BE (Bleul y Gotz, 2015) pues la hemólisis puede aumentar o disminuir los valores séricos
de K+ y Na+ respectivamente (Roussel et al 1997).
64 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Ninguno de los animales presentó un deterioro que comprometiera su estado vital y
tampoco fue necesario implemenar medidas terapéuticas especiales durante el tiempo de
estudio.
Anexos
A. Anexo: Protocolo para intubación con sonda oro-ruminal en terneros
OBJETIVO
Suministro de alimento (agua, leche, lactoreemplazador, solución electrolítica oral)
directamente en rumen.
GRADO DE INVASIVIDAD
Bajo
MATERIALES
Elementos de restricción física: brete, nariguera, lazos, apretaderos, otros de acuerdo
a la finca.
Guantes desechables.
Clorhidrato de lidocaína gel 2% sin epinefrina.
enema plástico desechable para humanos (Bolsa Travad 1500 BRD0021® para
administración de enema con bolsa de 1500 mL y tubo plástico de 1,52 mt;
Laboratorios Baxter®).
Abrebocas para ternero.
Marcador indeleble
DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO
En los terneros se puede administrar (agua, leche, lactoreemplazador, solución
electrolítica oral) en rumen a través de un enema plástico desechable para humanos.
El operario se colocan los guantes desechables.
66 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Se mide la distancia desde los incisivos del ternero hasta la mitad del abdomen y se
coloca una marca en la sonda en este punto (la colocación correcta de la sonda en
rumen es más fácil comprobando que la punta del tubo avanza a través de la región
caudal con respecto al arco costal hacia la región media del abdomen).
El abrebocas se coloca en la boca del ternero.
Se lubrica la ―sonda‖ (tubo del enema) con gel de lidocaína.
Se cierra la válvula plástica de la sonda (tubo del enema) y se pasa la sonda (tubo
del enema) lentamente a través del abrebocas evitando forzar su entrada al esófago.
La mayor parte de los terneros degluten la sonda a medida que la sonda se introduce
con delicadeza.
El avance de la sonda hasta la marca indica que está ingresando al rumen. La sonda
se puede palpar a medida que avanza por el cuello. Si la sonda va por la tráquea se
estimulará el reflejo de la tos indica que (es poco frecuente) y además la zona no
avanzará hasta la marca efectuada inicialmente en la sonda.
Se puede soplar la sonda y auscultar el abdomen izquierdo para confirmar la
presencia de la sonda en rumen.
Se llena la bolsa del enema con el líquido a suministrar y se ubica a altura superior de
la cabeza del animal.
Se abre la válvula plástica de la sonda (tubo del enema) y se exprime la bolsa con su
contenido para acelerar su administración ruminal.
Adaptado de Naylor 2003.
Sonda oro-
ruminal
13ª costilla
Rumen
Anexos 67
Adaptado de Dirksen 2005.
B. Anexo: Determinación de ácido D-láctico en suero de terneros
Método enzimático por espectrofotometría UV Lectura: 340 nm, contra blanco o agua. Temperatura: 18-20°C Numero de muestras: 36 sueros Corrido por duplicado Materiales y equipos: Espectrofotómetro de luz UV Cubeta de cuarzo 1 cm Pipetas de 1000uL, 200uL y 50uL Puntas de 1000 y 200 Tubos eppendorf, volumen final 1.120mL Agua destilada, para sustitución de reactivos y lavado de cubetas. Gradilla de tubos eppendorf Pancha de agitación (shaker) Cubeta con hielo El Kit contiene: Botella 1 con aprox. 30 ml de solución. Botella 2 con aprox. 210 mg NAD, liofilizado. (Diluir) Botella 3 con aprox. 0,7 ml glutamato piruvato transaminasa. Botella 4 con aprox. 0,7 ml D-lactato deshidrogenasa. Botella 6 con solución de control de ensayo D-lactato. Utilice la solución de control de ensayo sin diluir. Preparación de las soluciones: Utilizar contenido de las botellas 1, 3 y 4 sin diluir y mantener a 2-8 °C. Llevar la solución 1 a 20-25 ° C antes de su uso. Disuelva el contenido de la botella 2 con 6 ml de agua destilada y mantener a 2-8 ° C.
PIPETEAR EN TUBO BLANCO MUESTRA STANDARD SOLUCIÓN 1 SOLUCIÓN 2 SOLUCIÓN 3 CONTROL 6 MUESTRA DE SUERO AGUA DESTILADA
0.500 ml 0.100 ml 0.010 ml - - 0.500 ml
0.500 ml 0.100 ml 0.010 ml - 0.050 ml 0.450 ml
0.500 ml 0.100 ml 0.010 ml 0.050 ml - 0.450 ml
Anexos 69
Mezclar, agitación suave, y leer absorbancias después de aprox. 5 minutos de las soluciones de la muestra (A1), standard y blanco. Añadir: SOLUCIÓN 4 0,010 ml 0,010 ml - Mezclar, agitación suave, esperar tiempo de reacción aprox. 30 min y leer las absorbancias de las soluciones (A2) y blanco. Añadir: Determinar las diferencias de absorbancia (A2-A1) D-láctico y (A3-A2) L-láctico.
Aplicando la siguiente formula:
C [g]= ((V x MW) / (e x d x v x 1000)) x Abs
V: volumen final [ml] v: volumen de la muestra [ml] MW: peso molecular de las sustancias analizadas [g/mol] d: tamaño de la cubeta [cm] e: coeficiente de extensión de NADH.
C. Anexo: Hoja de registro de datos
Fecha: ___________________ Animal: _________________ Edad: ______
Sexo: _____ Peso: ________ Raza: ___________ Marca: _____________
T 0 07:45
T 2 12:45
T 4 22:45
DIA 1 DIA 1 DIA 1 Temperatura
Frecuencia cardíaca
Frecuencia respiratoria
Membranas mucosas
Tiempo de Llenado Capilar
pH RUMINAL
pH
PCO2
PO2
L-Lactato
Bicarbonato
TCO2
Exceso de base)
SO2
Sodio
Potasio
Cloruro
Anexos 71
BUN
Glucosa
Hematocrito
Anion Gap (EC8+)
[Na+]+[K+])-([Cl-]+[HCO3-]).
Hemoglobina
Proteínas plasmáticas totales
(refractómetro ATC®).
DIF medida =
([Na+] + [K+]) – ([Cl-])
Concentración plasmática total
de ácidos débiles (ATOT)
carga total negativa de la [PPT] A-
Brecha de Iones Fuertes ([[ATOT] /
{1+107.08-pH
}) – AG
D-Lactato
Depresión severa con recumbencia prolongada
Grado de estimación de deshidratación >10% (Constable et al., 1998).
Ausencia completa de Reflejo de succión.
Apetito disminuido en 2 alimentaciones consecutivas
-Acidosis metabólica severa con exceso de base actual calculado en < 15 mmol/l.
Retrasado, incompleto o ausente
OBSERVACIONES:_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
D. Anexo: Hoja de resultados de variables y tiempo 0
E. Anexo: Hoja de resultados de variables y tiempo 1.
F. Anexo: Hoja de resultados de variables y tiempo 2.
G Anexo. Composición del lactoreemplazador (dìa 2: fase de inducción)
Se utilizó lactoreemplazador (sustituto lácteo) Sprayfo Red© (Licencia de venta
ICA No.: 7617 AL).
Proteína: 20% mínimo, Grasa: 15% mínimo, cenizas: 9% máximo, fibra 0.8 %
máximo, humedad: 3.5% máximo, lactosa: 43%, calcio: 0.7%, fósforo: 0.7%, àcido
fumàrico: 0.2%, Vitamina A: 40000 UI, Vitamina D3: 5000 UI, Vitamina E: 80 mg,
Vitamina B1: 6 mg, Vitamina B2: 6 mg, Vitamina B6: 4 mg, Vitamina B12: 40 mcg,
Vitamina K3: 4 mg, Vitamina C: 160 mg, Manganeso (Mn): 45 mg, Hierro (Fe): 90
mg, Zinc (Zn): 84 mg, Magnesio (Mg): 0.3 mg, Yodo (I): 1.0 mg.
Se mezcla 1 Kg de lactoreemplazador en 8 Lts de agua potable quedando 9 litros
de lactoreemplazador preparado.
Bibliografía
Abeysekara S, Naylor JM, Wassef AW, Isak U, Zello GA. (2007). D-Lactic acid-induced neurotoxicity in a calf model. Am J Physiol Endocrinol Metab 293, E558-565. Adams R, Holland MD, Aldridge B, Garry FB, Odde KG. (1991). Arterial blood sample collection from the newborn calf. Vet Res Commun 15, 387-394. Adrogué HJ, Lederer ED, Suki WN, Eknoyan G. (1986). Determinants of plasma potassium levels in diabetic ketoacidosis. Medicine (Baltimore) 65, 163-172. Alarcon P, Conejeros I, Carretta MD, Concha C, Jara E, Tadich N, Hidalgo MA, Burgos RA. 2011. D-lactic Acid interferes with rhe effects pf platelet activating factor on bovine neutrophils. Vet Immunol Immunopathol 144, 68-78. Alcaldia Municipal de Cogua. http://www.cogua-cundinamarca.gov.co/informacion_general.shtml (último acceso 14 de julio de 2015). Alston RP, Cormack L, Collinson C. 2004. Metabolic acidosis developing during cardiopulmonary bypass is related to a decrease in strong ion difference. Perfusion. May;19(3):145-52. Aluja AK, Randhawa S, Rathor S. (1990). Effect of monensin in ameliorating subacute lactic acidosis in Buffalo calves. Acta Vet. Brno 59, 171-178. Astrup P, Jorgensen K, Andersen OS, Engel K. (1960). The acid-base metabolism. A new approach. Lancet 1, 1035-1039. Avila-Tellez S, Gasquez-Gòmez R. (2010). Crecimiento y desarrollo de becerros. Capítulo 11. En: Avila-Tellez S, Gutierrez-Chavez AJ. 2010. Producción de Leche con Ganado Bovino, Editorial Manual Moderno, segunda Ediciòn, Mèxico D.F., Mèxico, pp. 313-333. Bachmann L, Homeier T, Arlt S, Brueckner M, Rawel H, Deiner C, Hartmann H. (2009a). Influence of different oral rehydration solutions on abomasal conditions and the acid-base status of suckling calves. J Dairy Sci 92, 1649–1659 Bachmann L, Berchtold J, Siegling-Vlitakis C, Willing A, Radtke E, Hartmann H. (2009b). Stewart variables of the acid-base status in calves. Age related behaviour and influence of spontaneously occurring diarrhoea. Tierärztl Prax 37, 365–374.
78 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Bachmann L, Schmidt B, Rauwolf U, Wenge J, Coenen M. (2012). Change of plasma volume, osmolality, and acid–base status in healthy calves after feeding of milk and water- and milk-based oral rehydration solutions. J Dairy Sci 95, 6006–6014. Bangoura B, Daugschies A. (2007). Influence of experimental Eimeria zuernii infection in calves on electrolyte concentrations, acid-base balance and blood gases. Parasitol Res 101, 1637-1645. Batting U, Regi G, Stocker H, Zahner M, Risch P. (1992). Pansensaft-Untersuchung bei Kalbern mit gestorter und normaler Sauglust- Tieraztliche Praxis. 20, 44 – 48. Citado por: Stocker H, Lutz H, Kaufmann C, Rusch P. (1999). Acid-base disorders in milk-fed calves with chronic indigestion. Vet Rec 145, 340-346. Bednarski M, Kupczynski R, Sobiech P. (2015). Acid-base disorders in calves with chronic diarrhea. Pol J Vet Sci 18, 207-215. Benjamin M (1991). Líquido y electrolitos. Manual de Patología Clínica en Veterinaria. 3ª reimpresión, México, DF, Ed. Limusa, p. 254. Bednarski M, Kupczyński R, Sobiech P. (2015). Acid-base disorders in calves with chronic diarrhea. Pol J Vet Sci, 18(1):207-15. Betancur H, César; Martínez A, Yordan; Cruz M, Luis. (2015). Physiology of acid-base balance in bovines with diarrhea backgrounds from Monteria, Colombia. Revista MVZ Córdoba 20, 4591-4601. Bittrich S, Morel C, Philipona C, Zbinden Y, Hammon HM, Blum JW. (2002). Physiological traits in preterm calves during their first week of life. J Anim Physiol A Anim Nutr 86, 185 – 198. Bleul U, Gotz E. (2015). Effect of syringe type, storage temperature and time delay on venous blood gas values in newborn calves. Comp Clin Pathol 24, 117–125. Bleul U, Schwantag S, Kähn W. 2008. Blood gas analysis of bovine fetal capillary blood during stage II labor. Theriogenology 69, 245-251. Blum JW, Hammon H. (2000). Colostrum effects on the gastrointestinal tract, and on nutritional, endocrine and metabolic parameters in neonatal calves. Livestock Production Science 66, 151–159. Braun U, Gautschi A. (2013). Ultrasonographic examination of the forestomachs and the abomasum in ruminal drinker calves. Acta Vet Scand 55, 1. Bruegger D, Jacob M, Scheingraber S, Conzen P, Becker BF, Finsterer U, Rehm M. (2005). Changes in acid-base balance following bolus infusion of 20% albumin solution in humans. Intensive Care Med 31, 1123-1127. Burfeind O, Heuwieser W. (2012). Validation of handheld meters to measure blood L-lactate concentration in dairy cows and calves. J Dairy Sci 95, 6449-6456.
Bibliografía 79
Carlson, GP (1989). Fluid, Electrolyte, and Acid-Base Balance. En: Kaneko, J.J. ed. Clinical and Biochemistry of Domestic Animals. 4a Ed, San Diego, California, U.S.A., Ed. Academic Press, p. 543-575. Chawla LS, Shih S, Davison D, Junker C, Seneff MG. (2008). Anion gap, anion gap corrected for albumin, base deficit and unmeasured anions in critically ill patients: implications on the assessment of metabolic acidosis and the diagnosis of hyperlactatemia BMC Emerg Med 16, 18. Coelho L, Facury Filho EJ, Ribeiro M, Carvalho AU, Castro C, Ferreira pm, Freitas M. (2008). Clinical Pathological Features and Acid-Base Balance in Calves with Experimental Anaplasmosis. En: Memorias: XXV World Buiatrics Congress, 2008 - Budapest, Hungary. Calf Physiology, Management and Diseases, p. 235. Constable PD, Schmall LM, Muir III WW, Hoffsis GF. (1991). Respiratory, renal, hematologic, and serum biochemical effects of hypertonic saline solution in endotoxemic calves. Am J Vet Res 52, 990 – 998. Constable PD (1997). A simplified strong ion model for acid-base equilibria: application to horse plasma. J. Appl. Physiol 83, 297–311. Constable PD, Streeter RN, Koening GJ, Perkins NR, Gohar HM. (1997). Determinants and utility of the anion gap in predicting hyperlactatemia in cattle. J Vet Intern Med 11,71-79. Constable PD. (1999). Clinical assessment of acid-base status. Strong ion difference theory. Vet Clin North Am Food Anim Pract 15, 447-471. Constable PD. (2000). Clinical assessment of acid-base status: comparison of the Henderson-Hasselbach and strong ion approaches. Vet Clin Path 29,115-128. Constable PD (2002). Calculation of variables describing plasma nonvolatile weak acids for use in the strong ion approach to acid-base balance in cattle. Am J Vet Res 63, 482 – 490. Constable PD, Staempfli HR (2004). Using the simplified strong ion approach to determine the mechanism for an acid-base disturbance in calves. En: Memorias: 23rd World Buiatrics Congress, Quebec, Canada, julio 11-16, abstract 026 (3364). Constable PD, Staempfli HR, Navetat H, Berchtold J, Schelcher F. (2005). Use of a Quantitative Strong Ion Approach to Determine the Mechanism for Acid–Base Abnormalities in Sick Calves with or without Diarrhea. J Vet Inter Med 19, 581–589. Constable, PD (2008). Strong ion difference theory: a revolutionary approach to the diagnosis and treatment of acid-base abnormalities in cattle. En: Memorias XXV Jubilee World Buiatrics Congress, Budapest, Hungary, Proceedings, p.28-33. Constable PD. (2014). Acid-Base Assessment When and How To Apply the Henderson- Hasselbalch Equation and Strong Ion Difference Theory. Vet Clin North Am Food Anim Pract 30, 295-316.
80 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Cooper DJ, Walley KR, Dodek PM, Rosenberg F, Russell JA. (1992). Plasma ionized calcium and blood lactate concentrations are inversely associated in human lacctic acidosis. Intensive Care Med 18, 286 – 289. Corey HE. (2005). Bench-to-bedside review: Fundamental principles of acid-base physiology. Critical Care 9, 184-192. Cruz LE, Diaztagle JJ, Giraldo E, Melo E, Sprockel JJ. (2009). Comparación de diferentes medidas para el abordaje fisiológico del estado ácido-base en pacientes críticos: papel de los hidrogeniones metabólicos (H+met). Acta Colombiana de Cuidado Intensivo 9, 131 – 144. Dawson B, Trapp RG. (2005). Diseño de estudios en investigación médica. Editorial Manual Moderno, Ciudad de México DF, México., 4ta edición, pp. 7 – 16. Dirksen G, Garry FB. (1987). Diseases of the forestomachs in calves - Part II - Comp Contin Educ 9, 173-179. Dirksen G. Enfermedades de retículo y rumen en el ternero lactante y el bovino joven. En: Gerrit-Dirksen, Hans-Dieter Gründer, Matthaeus Stöber, 4ta edición, Medicina Interna y Cirugía del Bovina, Buenos Aires, Argentina, Inter-Medica Editorial, 2005. p.414. Dirr L, Dirksen G. (1989). Oesophageal groove dysfunction as a complication of neonatal diarrhea in the calf. The Bovine Practitioner. 24:53-60. Dirr L. (1988). Untersuchungen u¨ber die Dysfunktion des Schlundrinnenreflexes beim jungen Kalb [Tesis de Doctorado]. Munich (Alemania): University of Munich; 1988 [in German]. Citado por: Lorenz I, Gentile A. 2014. D-Lactic Acidosis in Neonatal Ruminants. Vet Clin Food Anim 30, 317 – 331. Dunlop RH, Hammond PB. (1965). D-lactic acidosis of ruminants. Ann N Y Acad Sci 119, 1109-1132. Durward A, Murdoch I. (2003). Understanding acid-base balance. Current Paediatrics 13, 513—519. El-Ashker M, El-Sebaei M, Salama M. (2012). Evaluation of the Inflammatory Reaction in Calves with Acute Ruminal Drinking. J Vet Sci Technol 3,116. Elkhair NM, Siegling-Vlitakis C, Radtke E, Willing A, Hartmann H. (2009). Age-dependent response of the acid-base parameters (Henderson-Hasselbalch, Stewart) in healthy calves with experimentally induced metabolic acidosis. Berl Munch Tierarztl Wochenschr 122, 63-69. Emmet M, Narins RG. (1977). Clinical use of anion gap. Medicine 56, 38-54 Ewaschuk JB, Zello GA, Naylor JM, Brocks DR. (2002). Metabolic acidosis: separation methods and biologicalrelevance of organic acids and lactic acid enantiomers. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 781, 39-56.
Bibliografía 81
Ewaschuk JB, Naylor JM, Zello GA. (2003). Anion gap correlates with serum D- and DL-lactate concentration in diarrheic neonatal calves. J Vet Intern Med 17, 940-942. Ewaschuk JB, Naylor JM, Palmer R, Whiting SK, Zello GA. (2004a). D-lactate production and excretion in diarrheic calves. J Vet Intern Med 18, 744-747. Ewaschuk JB, Naylor JM, Barabash WA, Zello GA. (2004b). High-performance liquid chromatographic assay of lactic, pyruvic and acetic acids and lactic acid stereoisomers in calf feces, rumen fluid and urine. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 15, 347-351. Ewaschuk JB, Naylor JM, Zello GA. (2005). D-lactate in human and ruminant metabolism. J Nutr 135, 1619-1625. Feldman BF, Rosenberg DP. (1981). Clinical use of anion gaps in veterinary medicine. J Am Vet Med Assoc 178, 396-398. Fencl V, Jabor A, Kazda A, Figge J. (2000). Diagnosis of Metabolic Acid–Base Disturbances in Critically Ill Patients. Am J Respir Crit Care Med 162, 2246–2251. Figge J, Jabor A, Kazda A, Fencl V. (1998). Anion gap and hypoalbuminemia. Crit Care Med 26, 1807–10. Figge J, Rossing TH, Fencl V. (1991). The role of serum proteins in acid-base equilibria. J Lab Clin Med 117, 453-467. Fürll M. Alteraciones del metabolismo ácido-base. Enfermedades de la sangre. En: Gerrit-Dirksen, Hans-Dieter Gründer, Matthaeus Stöber. 4.ed. Medicina Interna y Cirugía del Bovino. Buenos Aires, Argentina: Inter-Médica editorial, 2005. p.238. Gabow PA, Kaehny WD, Fennessey PV, Goodman SI, Gross PA. (1980). Diagnostic importance of an increased serum anion gap. New Engl J Med 303, 854-858. Gabow PA. (1985). Disorders associated with an altered anion gap. Kidney Int 27, 472-483. Garry FB, Hull BL, Rings DM, Kersting K, Hoffsis GF. (1985). Prognostic value of anion gap calculation in cattle with abomasal volvulus: 58 cases (1980 – 1985). J Am Vet Med Assoc 192, 1107 – 1112. Gentile A, Baur T. (1995). Conseguenze della somministrazione intraruminale di soluzioni reidratanti o di latte. Atti Soc It Buiatria 27, 571-582. Gentile A. (1995). Acidity of the rumen liquid of calves after intra-ruminal administration of solutions for oral rehydration DTW. Deutsche tierärztliche Wochenschrift 102, 241-244. Gentile A, Rademacher G, Seeman G, Klee G. (1998). Systemic effects of ruminal acidosis following ruminal drinking in dairy calves. A retrospective analysis of 293 cases. Abstract. Tierarztl Prax Ausg G Grosstiere Nutztiere 26, 205-209.
82 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Gentile A, Sconza S, Lorenz I, Otranto G, Rademacher G, Famigli-Bergamini PW, Klee W. (2004). D-Lactic acidosis in calves as a consequence of experimentally induced ruminal acidosis. J Vet Med A Physiol Pathol Clin Med 51, 64-70. Gomez DE, Lofstedt J, Stampfli HR, Wichtel M, Muirhead T, McClure JT. (2013). Contribution of Unmeasured Anions to Acid–Base Disorders and its Association with Altered Demeanor in 264 Calves with Neonatal Diarrhea. J Vet Intern Med; 27: 1604–1612. Groutides C, Michell AR (1990). Evaluation of acid-base disturbances in calf diarrhea. Vet Rec 126, 29-31. Grove-White DH, Michell AR. (2001). Comparison of the measurement of total carbon dioxide and strong ion difference for the evaluation of metabolic acidosis in diarrhoeic. Vet Rec 148, 365-370. Grove-White DH, White DG. (1999). Abdominal distension in collapsed diarrhoeic calves: biochemical findings and treatment. Vet Rec 144, 639-642. Grude T, I. Lorenz, Rademacher G, Gentile A, Klee K. (1999). Levels of d- and L-lactate in rumen liquid, blood, and urine in calves with and without evidence of ruminal drinking. Proceedings 32nd Annual Convention AABP, 23–26/09/1999, Nashville, Tennessee (USA), 213–214. Guzman-Mora F, Carrizosa-Alajmo E, Gómez-Vergara A, Jimenez C. (2004). Desórdenes del balance del potasio. Líquidos y electrolitos en cirugía. Fisiopatología celular y bioquímica. Editorial Médica Panamericana, 3ra reimpresión, Bogotá D.C., Colombia, p 47. Halperin ML, Goldstein MB. (1999). The Clinical Approach to Acid-Base Disorders. Fluid, Electrolyte, and Acid-Base Physiology. 3a Ed, Philadelphia, W.B. Saunders, p. 76. Hardefelt LY, Poulsen KP, Darien BJ. (2011). Secondary renal tubular acidosis in a Herefordcalf. Vet Clin Pathol 40, 253-255. Haskins SC, Hopper K, Rezende ML. (2006). The acid–base impact of free water removal from, and addition to, plasma. J Lab Clin Med 147, 114–120. Hatherill M, Waggie Z, Purves L, Reynolds L, Argent A.(2002). Correction of the anion gap for albumin in order to detect occult tissue anions in shock. Arch Dis Child 2002;87:526–529. Herrli-Gygi M, Hammon HM, Zbinden Y, Steiner A, Blum JW. (2006). Ruminal drinkers: endocrine and metabolic status and effects of suckling from a nipple instead of drinking from a bucket. J Vet Med A Physiol Pathol Clin Med 53, 215-224. Henry N, Senozan NM. (2001). The Henderson–Hasselbalch Equation: Its History and Limitations. Journal of Chemical Education 78, 1499 – 1503.
Bibliografía 83
Huuskonen A, Tuomisto L, Kauppinen R. (2011). Effect of drinking water temperature on water intake and performance of dairy calves. J Dairy Sci 94, 2475-2480. Jackson PG, Cockcroft PD. (2002). The General Clinical Examination of Cattle. En: Clinical Examination of Farm Animals. Editorial Blackwell Science, p. 10. Kaneko JJ, Harvey JW, Bruss ML, eds. (2008). Clinical biochemistry of domestic animals, ed 6. Academic Press, Burlington, MA. Karapinar T, Kaynar O, Hayirli A, Kom M. (2013). Evaluation of 4 point-of-care units for the determination of blood l-lactate concentration in cattle. J Vet Intern Med 27, 1596-1603. Kasari TR, Naylor JM. (1984). Metabolic acidosis without clinical signs of dehydration in young calves. Can Vet J 25, 394-399. Kasari TR, Naylor JM. (1986). Further studies on the clinical features and clinicopathological findings of a syndrome of metabolic acidosis with minimal dehydration in neonatal calves. Can Vet J 50, 502-508. Kasari TR. (1994). Physiologic mechanisms of adaptation in the fetal calf at birth. Vet Clin North Am Food Anim Pract 10, 127-136. Kasari TR. (1999). Metabolic acidosis in calves. Vet Clin North Am Food Anim Pract 15, 472-486. Kellum JA, Kramer DJ, Pinsky MR. (1995). Strong Ion Gap: A methodology for exploring unexplained anions. J Crit Care 10, 51-55. Kellum JA. (1998). Recent advances in acid-base physiology applied to critical care. En: Vincent JL, ed. Yearbook of Intensive Care and Emergency Medicine. Heidelberg: Springer- Verlag, 579-587. Kellum J, Elbers P (Ed). Stewart´s Textbook of Acid-Base. Peter A. Stewart (Capítulos 1, 2,3), Second Edition, Acidbase.org, The Netherlands, Amsterdam, 2009. Klinkon M, Jožica Ježek J (2012). Values of Blood Variables in Calves, A Bird's-Eye View of Veterinary Medicine, Dr. Carlos C. Perez-Marin (Ed.), ISBN: 978-953-51-0031-7. Kraut JA, Madias, NE. (2007). Serum anion gap: its uses and limitations in clinical medicine. Clin J Am Soc Nephrol 2, 162-174. Ling B, Peng F, Alcorn A, Lohmann K, Bandy B, Zello A. (2012). D-Lactate altered mitochondrial energy production in rat brain and heart but not liver. Nutr Metabol (London) 9, 6. Lorenz I (2002). Influence of serum D-lactate concentration on clinical signs in calves with metabolic acidosis.XXII World Buiatrics Congress. Hannover, Alemania, 18 - 23 August, 542-326.
84 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Lorenz I, Gentile A, Klee W. (2004 a). Investigations on the clinical signs of hyper D-lactatemia in calves. Proceedings XXIIIth World Buiatric Congress, Québec, July 11-16. Lorenz I. (2004 b). Investigations on the influence of serum D-lactate levels on clinical signs in calves with metabolic acidosis. Vet J 168, 323–327. Lorenz I, Gentile A, Klee W. (2005). Investigations of D-lactate metabolism and the clinical signs of D-lactataemia in calves. Vet Rec 156, 412-415. Lorenz I, Hartmann I, Gentile A. (2003). Determination of D-lactate in calf serum samples – an automated enzymatic assay. Comparative Clinical Pathology 12, 169-171. Lorenz I, Vogt S. (2006). Investigations on the association of D-lactate blood concentrations with the outcome of therapy of acidosis, and with posture and demeanour in young calves with diarrhoea. J Vet Med A Physiol Pathol Clin Med 53, 490-494. Marcos MA, Vila J, Gratacos J, Brancos M, Jimens De Anta MT. (1991). Determination of D-lactate concentration for rapid diagnosis of bacterial infections of body fluids. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 10, 966-969. Matousek S, Handy J, Rees SE. (2011). Acid–base chemistry of plasma: consolidation of the traditional and modern approaches from a mathematical and clinical perspective. J Clinical Monit Comput 25, 57–70. Mejia G, Oliver O. (2004). Risk factors for morbidity and mortality in calves during the first four months of life in selected dairy herds in the high altitude tropic in Colombia. XXIII World Buiatrics Congress, Quebec City, Canada, July 11-16, 359 (3341). Michell AR, Bywater RJ, Clarke AW, Hall LW, Waterman AE. (1991). Regulación de los fluidos corporales. Fluidoterapia Veterinaria. 1a Ed, Edit. Acribia, Zaragoza, España. pp.1-21. Møller PD, Diernæs L, Sehested J, Hyldgaard-Jensen J, Skadhauge E. (1997). Absorption and Fate of L- and D-Lactic Acid in Ruminants. Comp. Biochem. Physiol. Vol. 118A, No. 2, pp. 387–388. Morris D.E. (2010). Alteraciones del eritrón. En: Smith B.P. (ed.). Medicina Interna de Grandes Animales. 4.ed. Barcelona: Elsevier España, 2010. p. 401. Navetat H, Biron P, Contrepois M, Rizet C, Valarcher J-F, Schelcher f. Espinasse J. (1997). Les gastroenterites paralysantes: maladie ou syndrome?. Bulletin de l´Academie Veterinarie De France 70, 327-336. Naylor JM. (1987). Severity and nature of acidosis in diarrheic calves over and under one week of age. Can Vet J 28, 168-173. Naylor JM, Ewaschuk JB, Zello G. (2002). A new hypothesis for the development of acidosis in diarrheic calves-the role of novel organic acids.XXII World Buiatrics Congress. Hannover, Alemania, 18 - 23 August. 543-432.
Bibliografía 85
Naylor JM. (2003). Terapia Electrolítica Oral. En: Roussel AJ, Constable PD. Fluidoterapia. Clínicas Veterinarias de Norte América, Práctica en Animales de Consumo, Editorial Inter-Médica, Buenos Aires, Argentina, pp.41-58. Naylor JM, Zello G. Abeysekara S. (2006). Advances in oral and intravenous fluid therapy of calves with gastrointestinal disease. XXIV World Buiatrics Congress. Nice, France. Niwa T, Asada H, Maeda K, Yamada K, Ohki T, Saito A. (1986). Profiling of organic acids and polyols in nerves of uraemic and non-uraemic patients. Chromatogr 25, 15-22. Omole OO, Brocks DR, Nappert G, Naylor JM, Zello GA. (1999). High-performance lquid chromatographic assay of (±)lactic acid and its enantiomers in calf serum. J Chromatogr B Biomed Sci Appl, 727, 23-29. Omole OO, Nappert G, Naylor JM, Zello GA. (2001). Both L- and D-lactate contribute to metabolic acidosis in diarrheic calves. J Nutr 131, 2128-2131. Orskov ER. (1988). Nutrición proteica de los rumiantes, Capítulo 1; Fisiología del estómago de los rumiantes: metabolismo del nitrógeno. Editorial Acribia S.A., Zaragoza, España, P. 15. Panciera RJ, Boileau MJ, Step DL. (2007). Tympany, acidosis, and mural emphysema of the stomach in calves: report of cases and experimental induction. J Vet Diagn Invest 19, 392-395. Peiró JR, Borges AS, Goncalves RC, Mendes LC. (2010). Evaluation of a portable clinical analyzer for the determination of blood gas partial pressures, electrolyte concentrations, and hematocrit in venous blood samples collected from cattle, horses, and sheep. Am J Vet Res 71, 515-521. Perez-Santos M, Castillo M, Hernandez J, Abuelo A. (2015). Biochemical variables from Holstein-Friesian calves older tan one week are comparable to those obtained from adult animals of stable metabolic status on the same farm. Vet Clin Pathol 44, 145–151. Pohler N. Referenzbereiche für die klinische Chemie und das Enzym Transketolase bei fünf bis vierzehn Tage alten Fleck-viehkälbern. Doctoral thesis. Munich: Veterinary Faculty, Ludwig-Maximilians-University; 2004. citado por: Trefz FM, Constable PD, Lorenz I. (2015 a). Quantitative physicochemical analysis of acid-base balance and clinical utility of anion gap and strong ion gap in 806 neonatal calves with diarrhea. J Vet Intern Med 29, 678-687. Preston A, Noller C. (1973). Metabolism of D-lactate by tissues of the ruminant digestive tract. J Anim Sci 37, 1403-1407. Quigley J. 2005. Rumen acidosis and rumen drinking in milk-fed calves; Calf Note #113. http://www.calfnotes.com/pdffiles/CN113.pdf . Último acceso: 23 de enero de 2014. Radostits OM, Gay CC, Hinchcliff KW, Constable PD. (2007). Reference laboratory values. Appendix 2. En: Radostits OM, Gay CC, Hinchcliff KW, Constable PD EDS.
86 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Veterinary Medicine. A Textbook of the Diseases of Cattle, Horses, Sheep, Pigs, and Goats. Philadelphia: WB Saunders Company; 2007:2047–2050. Reynolds CK, Tyrrell HF, Armentano LE (1992). Effects of mesenteric vein β-butyrate infusion on liver metabolism by beef steers. J Anim Sci 70,2250-2261. Rinaldi S, De Gaudio AR. 2005. Strong ion difference and strong anion gap: The Stewart approach to acid base disturbances Current Anaesthesia & Critical Care, 16, 395–402 Roussel AJ, Cohen ND, Holland PS, Taliaoferro L, Green R, Benson P, Navarre CB, (1998). Alterations in acid-base balance and serum electrolyte concentrations in cattle: 632 cases (1984 – 1994). J Am Vet Med Assoc 212, 1769-1775. Roussel AJ, Whitney MS, Cole, DJ (1997). Interpreting a bovine serum chemistry profile: Part 2. Vet Med 92, 559 – 566. Schelcher F, Marcillaud S, Braun J, Contrepois J, Valarcher H, Navetat H. (1998). Metabolic acidosis without dehydration and no or minimal diarrhoea in suckler calves is caused by hyper D-lactatemia. En: Memorias XX World Buiatrics Congress 371–374. Sherlock M, Healy AM, Doherty ML. (2003). Acid-base balance in field cases of bovine babesiosis. Vet Rec 152, 687-688. Shimomura Y, Sato H. (2006). Fecal D- and L- lactate, succinate, and volatile fatty acid levels in young dairy calves. J Vet Med Sci 68, 973-977. Siggard-Andersen O, Engel K. (1960). A micro method for determination of pH, carbon dioxide tension, base excess and standard bicarbonate in capillary blood. Scand J Clin Lab Invest. 12, 172-176. Siggard-Andersen O. (1966). Titratable acid or base of body fluids. Annals New York Academy os Sciences 133, 41-58. Siggaard-Andersen O, Fogh-Andersen N. (1995). Base excess or buffer (strong ion difference) as measure of non respiratory acid-base disturbance. Acta Anaesthesiol Scand Supp 107,123–128. Singer RB, Hastings AB. 1948. An improved clinical method for the estimation of disturbances of the acid-base balance of human blood. Medicine, 27, 223-242. Sirker AA, Rhodes A, Grounds RM, Bennett ED. (2002). Acid-base physiology: the 'traditional' and the 'modern' approaches. Anaesthesia 57, 348-56. Smith SM, Eng RH, Campos JM, Chmel H. (1989) .D-lactic acid measurements in the diagnosis of bacterial infections. J Clin Microbiol 27(3):385-388. Sorge U, Kelton D, Staufenbiel R. (2009). Neonatal blood lactate concentration and calf morbidity. Vet Rec 164, 533-534.
Bibliografía 87
Stäempfli HR, Pringle JH, Lumsden JH, Oliver O, Kilmer B, Baird JD. (1996). Experimental evaluation of a novel oral electrolyte solution in the treatment of natural occurring neonatal calf diarrhoea. Proceedings of the XIXth World Buaitrics Congress, Edinburgh, Scotland, UK, British Cattle Association, Edinburgh, Scotland, UK. pp. 98–101. Stämpfli H. (2005). Role of electrolytes in acid-base balance: theory and practicality. Proceedings of the ACVIM (American College Veterinary Internal Medicine) Forum Baltimore. Electronic Proceedings. Stäempfli HR, Oliver O Pringle JH. (2012). Clinical Evaluation of an Oral Electrolyte Solution Formulated Based on Strong Ion Difference (SID) and Using Propionate as the Organic Anion in the Treatment of Neonatal Diarrheic Calves with Strong Ion Acidosis. Open J Vet Med 2, 34-39. Stewart PA. (1983). Modern quantitative acid-base chemistry. Can J Physiol Pharmacol 61, 1444-1461. Stocker H, Lutz H, Kaufmann C, Rusch P. (1999). Acid-base disorders in milk-fed calves with chronic indigestion. Vet Rec 145, 340-346. Szenci O, Gálfi P, Lajcsák A. (1984). Comparison of Carbonic Anhydrase In Neonatal and Maternal Red Blood Cells with different Levels of Acidosis in Newborn Calves. Zentralbl Veterinarmed A 31, 437 – 440. Szenci O, Kutas F, Haraszti J. (1982). Influence of induced maternal acidosis on the acid-base balance of the newborn calf. Acta Vet Acad Sci Hung 30, 71 – 77. Szenci O. (1983). Effects of type and intensity on assistance on acid-base balance of newborn calves. Acta Vet Acad Sci Hung 31, 73 – 79. Szenci O. (1985). Influence of the mode and timing of calving assistance on the acid-base balance of dam and newborn calf. Acta Vet Acad Sci Hung 33, 199 – 204.Szenci O, Taverne MAM. (1988). Perinatal Blood Gas and Acid-Base Status of Caesarean-derived Calves. J Vet Med A Physiol Pathol Clin Med 35, 572-577. Tekkok SB, Brown AM, Westenbroek R, Pellerin L, Ransom BR. (2005). Transfer of glycogen-derived lactate from astrocytes to axons via specific monocarboxylate transporters supports mouse optic nerve activity. J Neurosci Res 81, 644-652. Terra L.R. Anamnesis, exploración física y registros médicos en rumiantes. En: Smith BP (ed). Medicina Interna de Grandes Animales. 4. ed. Barcelona: Elsevier España, 2010. p.3 – 14. Toledo-Maciel A, Marcelo Park M. 2007. Unmeasured anions account for most of the metabolic acidosis in patients with hyperlactatemia. Clinics;62(1):55-62. Trefz FM, Lorch A, Feist M, Sauter-Louis C, Lorenz I. (2013 a). The prevalence and clinical relevance of hyperkalaemia in calves with neonatal diarrhoea. Vet J 195, 350-356.
88 Evaluación del estado ácido-base en terneros con acidosis ruminal inducida experimentalmente: Aplicación de dos modelos de diagnóstico
Trefz FM, Constable PD, Sauter-Louis C., Lorch A, Knubben-Schweizer G, Lorenz I. (2013 b). Hyperkalemia in neonatal diarrheic calves depends on the degree of dehydration and the cause of the metabolic acidosis but does not require the presence of acidemia. J Dairy Sci 96, 7234-7244. Trefz FM, Constable PD, Lorenz I. (2015 a). Quantitative physicochemical analysis of acid-base balance and clinical utility of anion gap and strong ion gap in 806 neonatal calves with diarrhea. J Vet Intern Med 29, 678-687. Trefz FM, Lorch A, Zitzl J, Kutschke A, Knubben-Schweizer G, Lorenz I. (2015 b). Risk factors for the development of hypokalemia in neonatal diarrheic calves. J Vet Intern Med 29, 688-695. Trefz FM, Lorch A, Zitzl J, Kutschke A, Knubben-Schweizer G, Lorenz I. (2015 c). Effects of alkalinization and rehydration on plasma potassium concentrations in neonatal calves with diarrhea. J Vet Intern Med 29, 696-704. Tubbs PK. (1965). The metabolism of d-alpha hydroxy acids in animal tissues. Ann N Y Acad Sci 119, 920-926; citado por: Lorenz I, Gentile A, Klee W. (2005). Investigations of D-lactate metabolism and the clinical signs of D-lactataemia in calves. Vet Rec 156, 412-415. Tuhay G, Pein MC, MaseviciuS FD, Kutscerauer DO, Dubin A. (2008). Severe hyperlactatemia with normal base excess: a quantitative analysis using conventional and Stewart approaches. Crit Care 12, 1-7. Van Slyke D, Hastings A, Hiller A, Sendroy J. (1928) Studies of gas and electrolyte equilibria in blood. XIV. The amounts of alkali bound by serum albumin and globulin. J Bio Chem 79, 769 – 780. Vaughan-Jones RD, Spitzer KW, Swietach P. (2009). Intracellular pH regulation in heart. J Mol Cell Cardiol 46, 318–331. Wilkes P. (1998). Hypoproteinemia, strong-ion difference, and acid-base status in critically ill patients. J Appl Physiol 84, 1740-1748. Wirth W. (1995). Elektrolyte und Säure-Basen-Haushalt. In: Kraft W, Durr U, eds. Klinische Labordiagnostik in der Tiermedizin, 3rd ed. Stuttgart: Schattauer; 1995:144–152; citado por: Trefz FM, Constable PD, Lorenz I. (2015 a). Quantitative physicochemical analysis of acid-base balance and clinical utility of anion gap and strong ion gap in 806 neonatal calves with diarrhea. J Vet Intern Med 29, 678-687.