Detección y caracterización de Detección y caracterización de Escherichia coliEscherichia coli productor de toxina Shiga en alimentosproductor de toxina Shiga en alimentos
Epidemiología molecular de las infecciones por STECEpidemiología molecular de las infecciones por STEC
Bioq. Isabel ChinenServicio Fisiopatogenia, Departamento Bacteriología
Instituto Nacional de Enfermedades InfecciosasANLIS “Dr. Carlos G. Malbrán”
DEFINICION DE EHEC / STECDEFINICION DE EHEC / STEC
Cepas de E. coli productor de toxina Shiga (STEC) que producen enfermedades severas en el hombre pertenecen a la categoría de E. coli enterohemorrágico (EHEC)
EHEC es un subgrupo dentro de los STEC Factores de virulencia en cepas EHEC:
• Toxina Shiga (Stx1, Stx2, variantes de Stx1 y Stx2)• Factores de adherencia: Isla de patogenicidad (LEE)• Enterohemolisina (EHEC-Hly)
Humanos: > 150 serotipos; 50 serotipos asociados a SUH Animales, alimentos, otros reservorios: > 200 serotipos
MANIFESTACIONES DE LA INFECCION POR MANIFESTACIONES DE LA INFECCION POR Escherichia coliEscherichia coli PRODUCTOR DE TOXINA SHIGA PRODUCTOR DE TOXINA SHIGA
Portación asintomática Diarrea acuosa Diarrea sanguinolenta Colitis hemorrágica Síndrome Urémico Hemolítico
Aunque la diarrea se autolimita en 1 semana, 5 – 10% de los pacientes evolucionan a SUH
SINDROME UREMICO HEMOLITICOSINDROME UREMICO HEMOLITICO
Anemia hemolítica microangiopática
Insuficiencia renal aguda
Trombocitopenia
Tasa de letalidad del 2 al 5%
Tipos de EstrategiasTipos de Estrategias Notificación obligatoria, inmediata e individualizada en Planilla C2 al
SNVS. Abril 2000 - Resolución N°346/00
Vigilancia Centinela: Unidades Centinela con SUH como EVENTO TRAZADOR DE ETA:
• 24 UC - 16 Jurisdicciones. Ciudad de Buenos Aires (3), Córdoba, Corrientes, Chaco, Chubut, Entre Ríos, La Pampa, Mendoza, Neuquén, Pcia. de Buenos Aires (5), Río Negro, Salta, San Juan, Santa Fé (3), Tucumán, S. del Estero
Sistema de Vigilancia de Laboratorios (SIVILA)
Vigilancia molecular (PulseNet de América Latina y El Caribe)
Programa de Enfermedades Emergentes – OPS- Países del Conosur y Centroamérica.
VIGILANCIA DE SUH Y DIARREAS ASOCIADAS A STECVIGILANCIA DE SUH Y DIARREAS ASOCIADAS A STEC
7.6
25.7
19.2
14.0
38.0
24.7
38.0
0-5>5-10
>10-20
34.4
9.6
4.1
31.6
22.2
9.7
0.910.2
12.8
3.4
7.6
105.2
2.5
5.0
SUH - ARGENTINA 2007SUH - ARGENTINA 2007
Incidencia
0
20
40
60
80
100
120
Janu
ary
Febru
ary
March
April
MayJu
ne July
Augus
t
Septem
ber
Octobe
r
Novembe
r
Decembe
r
15/100,000 niños <5 años
>20
0
20
40
60
80
100
120
140
160
0-12months
13-24months
25-36months
37-48months
49-60months
≥ 61months
No.
of
No.
of
Cas
esC
ases
No.
of
No.
of
Cas
esC
ases
Male
Female
SUH EN ARGENTINASUH EN ARGENTINA
Alrededor de 300 a 400 casos nuevos por añoTasa de notificación: 15 / 100.000 niños < 5 años, mas de 10.000 desde 1965
Pródromos: Diarrea 90%, sanguinolenta 75%
1ª causa pediátrica de IRA y 2ª causa de IRC
Responsable del 20% de transplantes renales
Evidencia de infección por STEC en el 40% de casos de SUH- O157:H7 el serotipo prevalente- Shigella dysenteriae Tipo 1 no aislada
STEC O157:H7STEC O157:H7
El 11 de mayo de 2004, se incluyó en el Código Alimentario Argentino el art. 156 tris y se modificaron los art. 255 y 302.
Especificaciones microbiológicas Productos preparados a base de carne picada una vez cocidos:ausencia de E. coli/g y ausencia de E. coli O157:H7/NM en 5 muestras de 65 g cada una
Carne picada fresca y chacinados frescos: E. coli máximo 5 x 102 UFC/g, y ausencia de E. coli O157:H7/NM en 5 muestras de 65g cada una.
Metodología recomendada es la validada por USDA/FSIS.
CODIGO ALIMENTARIO ARGENTINOCODIGO ALIMENTARIO ARGENTINO
Características de E. coli O157:H7
Posee la mayoría de las características bioquímicas de la especie, con las siguientes diferencias:
No fermenta el Sorbitol o lo hace lentamente No posee actividad de b-glucuronidasa Temperatura óptima de crecimiento: 30-42ºC Desarrolla pobremente a 44-45ºC No desarrolla a temperaturas superiores a 45ºC No desarrolla a temperaturas de –10ºC pero
sobrevive en productos congelados (-20ºC) sin cambio en el número total de microorganismos por períodos prolongados
Es resistente a los cambios de pH (por Ej. Durante la fermentación de embutidos
CRITERIOS PARA LA DETECCIÓN DE STEC O157
MORFOLOGIA DE LAS COLONIAS EN MEDIO SELECTIVO
DETECCION DEL SEROGRUPO O157
CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS DISTINTIVAS
DETECCION DE LA ENTEROHEMOLISINA
DETECCION DE GENES (DETECCION DE GENES (stxstx))
PRODUCCION DE TOXINA SHIGA (Stx)PRODUCCION DE TOXINA SHIGA (Stx)
TEMPERATURAS DE CRECIMIENTO
BAJO NUMERO DE UFC EN ALIMENTOS
BAJA DOSIS INFECTIVA (< 100 UFC/G)
DETECCION DE STEC O157 EN ALIMENTOSCONSIDERACIONES GENERALES
Detección, aislamiento e identificación de Escherichia coli O157:H7 de productos cárnicos
USDA / FSIS (2008) ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO
AISLAMIENTO TAMIZAJE
- AISLAMIENTOMEDIOS SELECTIVOS SEPARACION INMUNOMAGNETICA
- SEROAGRUPAMIENTO
Positivopotencial
Positivopresuntivo
( - ) ( + )
CONFIRMACIÓNPRODUCCION DE Stx / DETECCIÓN DE GENES stxDETECCIÓN DE fliCH7IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA Positivo
confirmado
ETAPA DE ENRIQUECIMIENTO
CONDICIONES DE INCUBACION
- TEMPERATURA Y TIEMPO 42 ± 0.1ºC / 15-22 h- SIN AGITACION
MEDIOS DE CULTIVO (suplemento antibiótico)- ECm + novobiocina- CTS + acriflavina- CTSm + casaminoácidos + novobiocina - CTS / AP + vancomicina, cefsulodina y cefixima
TECNICA DE TAMIZAJE DE TAMIZAJE O157 O157
De acuerdo a USDA/FSIS deben cumplimentar:
Servicio Fisiopatogenia (LNR) INEI-ANLIS “Dr. C.G. Malbrán”
Sensibilidad: 98% Falsos negativos: 2% Especificidad: 90% Falsos positivos: 10% Eficiencia: 94%
Detección de STEC O157Detección de STEC O157Tamizaje. Métodos RápidosTamizaje. Métodos Rápidos
Premier - MeridianTECRA
Inmunostat Card - MeridianREVEAL - NeogenRapidCheck O157- SDI Singlepath GLISA - MerckLateral Flow System - Dupont
Vidas ICE/ACE - Bio MérieuxPCR Real TimeNucliSens - Bio Mérieux
ELISA
Test de inmunocromatografía
Métodos automatizados
Detección, aislamiento e identificación de Escherichia coli O157:H7 de productos cárnicos
USDA / FSIS (2008) ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO
AISLAMIENTO TAMIZAJE
- AISLAMIENTOMEDIOS SELECTIVOS SEPARACION INMUNOMAGNETICA
- SEROAGRUPAMIENTO
Positivopotencial
Positivopresuntivo
( - ) ( + )
CONFIRMACIÓNPRODUCCION DE Stx / DETECCIÓN DE GENES stxDETECCIÓN DE fliCH7IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA Positivo
confirmado
AISLAMIENTO DE STEC AISLAMIENTO DE STEC
Procedimiento de diagnóstico definitivo
Métodos de cultivoCultivo directo en medios selectivosCultivo con enriquecimiento previo
Métodos de inmunoconcentraciónSeparación inmunomagnética (Dynal, Neogen)Inmunocaptura (TECRA)
miniVIDAS: método automatizado
Selectivos y/o diferenciales SMAC C-SMAC CT-SMAC Agar Sangre Triptosa
CromogénicosAgar O157:H7 IDCHROMAgar O157
FluorogénicosMUG (4-metilumberiferil-β-D-glucurónido)BCIG (5-bromo-4-cloro-3-indonil -β-D-glucurónido)
AISLAMIENTO DE STECAISLAMIENTO DE STECMEDIOS DE CULTIVO - STEC O157:H7/NMMEDIOS DE CULTIVO - STEC O157:H7/NM
SEROAGRUPAMIENTOSEROAGRUPAMIENTO
Aglutinación directa en lámina
- Antisueros anti-O157 (Difco, INPB)
- Reactivos de látex (OXOID)
Detección, aislamiento e identificación de Escherichia coli O157:H7 de productos cárnicos
USDA / FSIS (2008) ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO
AISLAMIENTO TAMIZAJE
- AISLAMIENTOMEDIOS SELECTIVOS SEPARACION INMUNOMAGNETICA
- SEROAGRUPAMIENTO
Positivopotencial
Positivopresuntivo
( - ) ( + )
CONFIRMACIÓNPRODUCCION DE Stx / DETECCIÓN DE GENES stxDETECCIÓN DE fliCH7IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA Positivo
confirmado
CONFIRMACIÓN
• IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA• SEROTIPIFICACIÓN CONFIRMATORIA O157:H7
Al menos uno de los siguientes criterios:• PRODUCCION DE Stx • DETECCIÓN DE GENES stx• DETECCIÓN DE fliCH7
Detección, aislamiento e identificación de Escherichia coli O157:H7 en productos cárnicos
USDA / FSIS (2008)
Detección de STX- Citotoxicidad en células Vero -Métodos inmunológicos
• ELISA Meridian• Test de inmunocromatografía Merck• RPLA Denka Seiken
CONFIRMACION DE STECCONFIRMACION DE STEC
Detección de genes stx- Hibridación- PCR
Detección, aislamiento e identificación de Escherichia coli O157:H7 de productos cárnicos
USDA / FSIS (2008) ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO
AISLAMIENTO TAMIZAJE
- AISLAMIENTOMEDIOS SELECTIVOS SEPARACION INMUNOMAGNETICA
- SEROAGRUPAMIENTO
Positivopotencial
Positivopresuntivo
( - ) ( + )
CONFIRMACIÓNPRODUCCION DE Stx / DETECCIÓN DE GENES stxDETECCIÓN DE fliCH7IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA Positivo
confirmado
STEC no-O157STEC no-O157
PREVALENCIA DE STEC no-O157
EXISTEN > 200 SEROTIPOS DESCRIPTOS
NO PRESENTA CARACTERÍSTICAS DISTINTIVAS
CRITERIO DE DETECCIÓN
DETECCION DE STEC no-O157 EN ALIMENTOSCONSIDERACIONES GENERALES
oDETECCION DE GENES (DETECCION DE GENES (stxstx))
oPRODUCCION DE TOXINA SHIGA (Stx)PRODUCCION DE TOXINA SHIGA (Stx)
Aislamiento e identificación de STEC no-O157 a partir de muestras de alimento
Enriquecimiento de la muestra65g de alimento + 585 ml Caldo Ec
Tratamiento en “Stomacher” durante 3 minutosIncubación a 37ºC - 18 hs
Confirmación - Identificación de la colonia STEC+ por PCR múltiple-Identificación bioquímica -Seroagrupamiento por aglutinación en placa y PCR -Caracterización de los factores de virulencia eae/ehxA/saa por PCR
Tamizaje por PCR MK+IAC
Templado:- 1 ml de caldo enriquecido - 150 ul de tritón/1% TE)
- PCR MK (+)
( -)
Aislamiento - Siembra en placas EMB Levine Incubación a 37ºC – 18 hs.
Primer Secuencia del primer (5’-3’) Nº de nucleótidos Tamañodel fragmento de
amplificación (pb)
MK 1 TTTACGATAGACTTCTCGAC 20 224 o 227
MK 2 CACATATAAATTATTTCGCTC 21
ReactivoConcentración de
trabajo del reactivo
Concentración del reactivo en la mezcla
Volumen del reactivo en la mezcla para una determinación (l)
Buffer 10X 1X 5
Mezcla dNTP 2,5 mM 0,1 mM 2
Cl2Mg 50 mM 1,5 mM 1.5
Primer MK 1 0,1 nmol/l 2 pmol/l 0,5
Primer MK 2 0,1 nmol/l 2 pmol/l 0,5
Taq polimerasa 5 U/l 0,02 U/l 0,2
Templado 2
IAC 0,2UFC/ l 2
Agua Trid. estéril 38,3
Volumen Final 50
Tamizaje PCR MK + IAC
1 2 3 4 5 (+) (-) cs M
100 pb
300 pb200 pb
Leotta y col. Enviado a Int. J. Food Microbiol. 2006
PCR MK + IAC para la detección de stx1 y stx2 de Escherichia coli
PCR MK para la detección de los genes PCR MK para la detección de los genes stxstx1 y 1 y stxstx22
Carne con aditivo Carne con aditivoCarne sin aditivo Carne sin aditivo
Carne con aditivo Carne con aditivoCarne sin aditivo Carne sin aditivo
E. coli O157:NM stx1/stx2 E. coli O145:NM stx2
E. coli ONT:H19 stx1 E. coli O26:H11 stx1
1 10 102 103
0,01 0,1 1 10 0,01 0,1 1 10 0,1 1 10 102
+ - s/t M
+ - s/t M
1 10 102 103 1 10 102 103 1 10 102 103
0,1 1 10 102
STECSTEC O157 y no-O157 DE ORIGEN O157 y no-O157 DE ORIGEN HUMANO. 1999-2007HUMANO. 1999-2007
CEPAS STECORIGEN O157
Nº (%)no-O157Nº (%)
SUH 371 (42,1) 148 (58,3)DS 209 (23,8) 26 (10,2)D 184 (20,9) 51 (20,1)
OTROS 116 (13,2) 29 (11,4)TOTAL 880 254
STEC SEROTIPOSSTEC SEROTIPOS
N = 1134
O157:H7 76% O8:H19 0,3%O145:NM 10% O113:H21 0,3%O26:H11 2% O145:H25 0,3%O111:NM 0,8% O171:H2 0,3%O174:H21 0,8% O8:H16 0,2%O103:H2 0,6% O15:H27 0,2%O91:H21 0,4% O174:H28 0,2%
STECSTEC O157 y no-O157 DE ALIMENTOS O157 y no-O157 DE ALIMENTOS 2003-20072003-2007
STEC O157Nº (%)
STEC no-O157Nº (%)
STEC Totales Nº (%)
49 (42,1) 167 (58,3) 216 (100)
Hamburguesas, carne vacuna, carne picada, carne de cerdo, embutidos.
> 30 serotipos diferentes
Asociados a casos humanos O157:H7 O113:H21 O8:H19 O91:21 O103:H2 O174:H21
01020
30405060
708090
Stx types
Stra
ins%
Human
Non-Human
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
Stx types
Stra
ins%
Human
Non-Human
STEC O157STEC O157 STEC no-O157STEC no-O157
Genotipificación deGenotipificación de StxStx
Food Food
75%
3%
9%
13% Humanos14%
5%
29%
52%
Alimentos
eae eae / / ehxehxAA de cepas STEC aisladas de de cepas STEC aisladas de humanos y alimentoshumanos y alimentos
Fagotipos de STEC O157 Fagotipos de STEC O157
0
5
10
15
20
25
30
35
2 4 8 14 24 26 31 32 39 45 49 47 54 71 73 87 NT
Phage Type
Stra
ins
%
HumansFood
EPIDEMIOLOGÍA MOLECULAR EN TIEMPO REALEPIDEMIOLOGÍA MOLECULAR EN TIEMPO REAL PFGE
• Protocolos de CDC para PulseNet 24-h • Enzimas : XbaI and AvrII/BlnI • Cepa de referencia: S. Braenderup CDC#H9812 • Programa informático: BioNumerics Ver. 4.6 (Applied Maths) 2007
Bases de Datos 1988-2008STEC O157
Nº de cepas: 1207Nº de patrones XbaI-PFGE: 524Patrones prevalentes XbaI-PFGE (17%)
AREXHX01.0011 (118 cepas)AREXHX01.0022 (83 cepas)
STEC no-O157Nº de cepas: 450Nº de patrones XbaI-PFGE: 315Patrones prevalentes XbaI-PFGE (7%)
AREXSX01.006 (15 strains)AREXSX01.0124 (14 strains)
• Confirmación de brotes
• Detección de “Clusters” Brotes difusos
RELACION CLONAL DE CEPAS DE RELACION CLONAL DE CEPAS DE E. coliE. coli O157 O157 PERTENECIENTESPERTENECIENTES A UN BROTE EN LA COMUNIDAD A UN BROTE EN LA COMUNIDAD
NEUQUEN NEUQUEN
Localidad: San Martín de los Andes
Barrios: El Arenal, Oasis, Centro
Período: 24/02/07 al 03/03/07
Nº Cepa XbaI-PFGE Genotipo Fagotipo Caso Edad Sexo Lugar Código de Brote Stx
Dice (Opt:1.50%) (Tol 1.5%-1.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-98.3%]
PFGE-XbaI
100
9590
PFGE-XbaI
247/07
255/07
254/07
246/07
234/07
AREXHX01.0200
AREXHX01.0200
AREXHX01.0200
AREXHX01.0440
AREXHX01.0086
.
.
.
.
.
Stx2only
Stx2only
stx2 only
Stx2only
Stx2-Stx2vh-a
4
4
4
4
2
BD
BD
HUS
BD
HUS
2- 3
3- 11
3- 6
1- 3
1- 8
F
M
M
M
M
SM Andes
SM Andes
SM Andes
SM Andes
Neuquén
07NQEXH-3
07NQEXH-3
07NQEXH-3
07NQEXH-3
N° cepa Origen Fecha de Semana aislamiento epidemiológica
Dice (Opt:1.50%) (Tol 1.5%-1.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-98.3%]
100 PFGE-XbaI PFGE-BlnI
106/04 ctrol 1
106/04 ctrol 2
106/04 orig
Contacto
Contacto
Contacto
24/02/04
02/03/04
12/02/04
8/04
9/04
6/04
Brote de E. coli O157 en un Jardín de Infantes Entre Rios, Argentina. 2004
N° cepa Origen Edad Sexo Fecha de aislamiento
Figura 1: confirmación mediante PFGE del Brote E. coli O157:H7 stx2 / stx2c (stx2vh-a) / eae / ehxA
XbaI-PFGE AREXHX01.0243 BlnI-PFGE AREXHA26.0064
Dice (Opt:1.50%) (Tol 1.5%-1.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-98.3%]
PFGE-BlnI
100
PFGE-XbaI PFGE-BlnI
63/0464/0465/0499/04
SUHDSDS
Asintomático
27/01/0430/01/0402/02/0412/02/04
3 a 10 m2 a 4 m4 a 7m2 años
MMFM
Figura 2: control de excreción de STEC O26:HNTE. coli O26:NT stx1 / eae / ehxA
XbaI-PFGE AREXSX01.0108 BlnI-PFGE AREXSA26.0069
Dice (Opt:1.50%) (Tol 1.5%-1.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-98.3%]
100 PFGE-XbaI PFGE-BlnI
11 2ºM2
33 2ºM1* 3ºM1* 4ºM4
2008-08-252008-08-302008-09-11
2008-09-112008-09-182008-09-082008-09-222008-09-11
HUSHUSContacto/padre
Contacto/madreContacto/madre
asintomáticaContacto/tía
0- 10 0- 10 29
24 24 0- 10 0- 10 20
FFM
FFFFF
Nº TM Origen Edad (a-m) Sexo
BD
Brote Familiar. Neuquén – Agosto/Septiembre 2008E. coli O157:H7 stx2 / stx2c (stx2vh-a) / eae / ehxA
XbaI-PFGE AREXHX01.0331 BlnI-PFGE AREXHA26.0083Investigación del caso:
Caso: Niña de 10 meses SUH (1ºM 25/08/08 y 2ºM 30/08/08)Diarrea Sanguinolenta (3ºM 08/09/08)
Grupo familiar - 3 contactos asintomáticos: padre (1ºM 11/09/08), madre (1ºM 11/09/08) y tía (1ºM 11/09/08).
Seguimiento de la excreción: Caso: niña de 10 meses Asintomática 27 días luego de la 1º M (4ºM 22/09/08) Grupo familiar - 1 contacto asintomático: madre 7 días luego de la 1º M (2ºM 18/09/08).
RELACION CLONAL DE CEPAS DE RELACION CLONAL DE CEPAS DE E. coliE. coli O145 O145 PERTENECIENTES A UN PERTENECIENTES A UN BROTE FAMILIARBROTE FAMILIAR
Dice ( Opt :1.50%) (Tol 1.5% -1.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0% -98.3%]
PFGE -XbaI
100
PFGE -XbaI
1104/06
1105/06
1106/06
AREXSX01.0006
AREXSX01.0006
AREXSX01.0006
Contacto/hermana
Contacto/hermana
Contacto/padre
Htal. Prov. Heller
Htal. Prov. Heller
Htal. Prov. Heller
/Neuquén
/Neuquén
/Neuquén
N°Cepa Patrón XbaI-PFGE Origen Procedencia
Caso SUH : Niña 20 meses criterios diagnósticos negativos
Contacto hermana: 13 años
Contacto padre: 38 años
Contacto hermana: 15 años E. coli O145:NM Stx2, Int-, EHEC-Hly
Contacto hermana: 4 meses
• Caso:Caso: niña de 2 años atendida en el Hospital Garrahan el 26 de abril de 2002, con diarrea sanguinolenta que evoluciona a SUH
• Alimento sospechoso:Alimento sospechoso: hamburguesas caseras consumidas 48 horas antes del inicio de la diarrea
• Se aisló del coprocultivo y del alimento:Se aisló del coprocultivo y del alimento: Escherichia coli O157:H7 eae/stx2+stx2vh-a/EHEC-hlyA, PT4 con idéntico patrón de XbaI-PFGE y BlnI-PFGE
Rivas et al. EID 2003, 9: 1184-6
SUH POR CONSUMO DE HAMBURGUESASSUH POR CONSUMO DE HAMBURGUESAS
XbaXbaI pattern EXHX01.0047I pattern EXHX01.0047
ARG = pattern 1 ARG = pattern 1 CDC = pattern CDC = pattern 22
BlnBlnI pattern EXHA26.0015I pattern EXHA26.0015
Comparación de patrones de PFGE de Argentina y USA
Relación genética de cepas STEC O157 por XbaI-PFGE. Comparación de los resultados obtenidos por técnicas de
subtipificación y datos referentes a las muestras (origen, lugar y fecha de toma de muestra)
XbaI Cluster Muestra Genotipo stx PT Origen TM Local1 I 841/01 stx 1+stx 2+stx 2vh-a 4 HP 05/08/01 A1 I 842/01 stx 1+stx 2+stx 2vh-a 4 HP 17/08/01 A1 I 843/01 stx 1+stx 2+stx 2vh-a 4 HP 17/08/01 B1 I 844/01 stx 1+stx 2+stx 2vh-a 4 HP 17/08/01 C1 I 845/01 stx 1+stx 2+stx 2vh-a 4 HP-C 17/08/01 D4 I 511/02 stx 2+stx 2vh-a 4 HC 29/04/02 E4 I 512/02 stx 2+stx 2vh-a 4 HC 30/04/02 F5 NR 514/02 stx 2+stx 2vh-a 8 HC 29/04/02 G6 II 335/02 stx 2vh-a 4-14 HC 25/04/02 H7 II 335/02 D stx 2+stx 2vh-a 2 HC 25/04/02 H8 II 325/02 stx 2+stx 2vh-a 2 HC 11/04/02 I9 NR 470/02 stx 1+stx 2vh-a 14 HC 29/04/02 J2 III 869/01 stx 2+stx 2vh-a 4-16 HC-C 27/08/01 K2 III 872/01 stx 2+stx 2vh-a 4-16 HC 27/08/01 D2 III 888/01 stx 2+stx 2vh-a 4-16 HP 27/08/01 SD3 III 334/02 stx 2+stx 2vh-a 4-16 HP 25/04/02 D3 III 336/02 stx 2+stx 2vh-a 4-16 HC 25/04/02 H3 III 458/02 stx 2+stx 2vh-a rdnc-87 HC 29/04/02 L3 III 870/01 stx 2+stx 2vh-a 4-16 HC-C 27/08/01 B3 III 871/01 stx 2+stx 2vh-a 4-16 HP-C 27/08/01 B
HP: Hamburguesa de pollo HC: Hamburguesa de carneHP-C: Hamburguesa de pollo-Cocida HC-C: Hamburguesa de carne-CocidaTM: Toma de Muestra SD: Sin Dato
CONCLUSIONESCONCLUSIONES
La recuperación de cepas con idéntico patrón XbaI-PFGE, PT y genotipo stx de muestras obtenidas:
En diferentes locales fuente única de contaminación En distintas fechas persistencia en la fuente de origen En muestras crudas y cocidas, falla en el proceso de
y en el mismo local cocción o contaminación cruzada
La recuperación de cepas con diferente patrón XbaI-PFGE, PT y genotipo stx de muestras obtenidas: En el mismo local diferentes cepas circulantes
CONCLUSIONES STEC O157 y no-O157 son detectados en
enfermedad humana, en el reservorio animal y en alimentos
Es importante fortalecer la vigilancia del SUH e infecciones por STEC mediante:
- Integracción de las diferentes áreas- Implementación de metodologías sensibles de diagnóstico tanto en laboratorios clínicos como de bromatología. - Implentación de PFGE en tiempo real- Consolidación de la base de datos
Muchas Gracias!