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Bacilos GramnegativosBacilos GramnegativosFermentadores de GlucosaFermentadores de Glucosa
ObjetivoObjetivo
Conocer las principales características biológicas de los bacilos gramnegativos, su capacidad para producir infecciones,
las posibilidades diagnósticas y las medidas profilácticas
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Familia Enterobacteriaceae
Géneros EspeciesEscherichia E. coliShigella S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, S. dysenteriaeSalmonella S. enterica, S. bongoriKlebsiella K. pneumoniae, K. oxytocaEnterobacter E. cloacae, E. aerogenes, E. agglomeransSerratia S. marcescens, S. odorifera, S. fonticolaCitrobacter C. freundii, C. diversusProteus P. vulgaris, P. mirabilis
Yersinia Y. enterocolítica, Y. pestisy 20 más
TaxonomíaTaxonomía
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Familia Enterobacteriaceae
Bacilos gramnegativos Anaerobios facultativos No esporulados Catalasa positiva Fermentadores de glucosa Oxidasa negativa Reductores de nitratos a nitritos Móviles, las que lo son, mediante flagelos peritricos. Se los encuentra en el suelo, el agua, animales y plantas. Pueden formar parte de la flora normal y ser patógenos.
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Enterobacterias - Determinantes antigénicos
Antígeno O (somático): se encuentra en la pared bacteriana. Permite
clasificarlas en serotipos O. Son polisacáridos.
Antígeno H (flagelar): sólo presente en especies móviles. Permite clasificarlas en serotipos H. Son proteínas.
Antígeno K (capsular): sólo presente en especies capsuladas. Permite clasificarlas en serotipos K. Son polisacáridos.
Antígeno F (fimbrial): presente en algunas bacterias fimbriadas. Son proteínas.
Antígeno Vi (superficie): presente en algunas especies.
Su conocimiento tiene aplicación en la tipificación con fines diagnósticos (identificación serológica) y epidemiológicos.
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Enterobacterias - Factores de patogenicidad
Cápsula: es adhesiva y es antifagocitaria.
Fimbrias: permiten la adherencia a la célula huésped.
Exoenzimas: ureasa, gelatinasa, lipasa, desoxirribonucleasa.
Aerobactinas: permiten la captación de hierro desde el medio.
Endotoxina: LPS de pared, se libera al destruirse la bacteria.
Exotoxinas: no todas las especies las producen. Sólo son producidas por las patógenas obligadas.
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Géneros: Escherichia, Klebsiella, Serratia, Enterobacter, Citrobacter, Proteus, Morganella, Providencia, etc.
Forman parte de la flora normal del hombre y los animales, están presentes en el suelo, el agua y las plantas.
Producen infección cuando salen de su hábitat o hay alteraciones de las defensas locales.
Producen infecciones extraintestinales como ser: infecciones urinarias, sepsis, meningitis, abscesos, neumonías, otitis, sinusitis, meningitis, etc.
Enterobacterias - Patógenos oportunistas
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Enterobacterias oportunistasDiagnóstico de laboratorio
Orina, sangre, punción de heridas y abscesos, esputos, etc.
Examen en fresco y Coloración de Gram
Siembra en Agar E.M.B. o Mac Conkey y Agar sangre
Incubar 24 hs a 37ºC
Coloración de Gram y estudio de colonias
Pruebas bioquímicas
Antibiograma
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Diferenciación BGNOF
(Oxidación-fermentación)
Fermentadores
(ambos tubos viran al amarillo)
Oxidativo o Inertes
(vira el tubo expuesto al 02, o
no vira ninguno, respectivamente)
Bacilos Gram (-)
fermentadores de la glu
Enterobacterias
Vibrio
Aeromonas
Bacilos Gram (-)
no fermentadores de la glu
Pseudomonas
Acinetobacter
Moraxella
Alcalígenes
Burkholderia
Stenotrophomonas
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Diferenciación BGNFG
Oxidasa
(+) (-)
Vibrio
Aeromonas
Enterobacterias
Ox Ox
Oxidasa
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Enterobacterias - Diagnóstico de laboratorio
SH2UreaCitrato
Agar Mac Conkey
Ox Ox
Oxidasa
Triple azúcar hierro (TSI)
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Enterobacterias oportunistas Diagnóstico de laboratorio
Género Lactosa Movilidad Urea Citrato SH2
Escherichia + + - - - Klebsiella + - + + - Proteus - + + - + Citrobacter + + - + + Serratia + + - + - Enterobacter + + +/- + -
Otras pruebas: producción de indol, descarboxilasas, rojo de metilo, DNAsa, Voges-Proskauer, fermentación de azúcares, etc.
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Géneros: Escherichia, Shigella, Salmonella, Yersinia
No forman parte de la flora normal y su presencia en la muestra es indicativa de infección.
Se transmiten de hombre a hombre por vía ano-mano-boca o se adquieren a partir de aguas y alimentos contaminados.
Producen infecciones intestinales excepto Salmonella que puede producir sepsis, neumonías, etc.
Son la primer causa de muerte de etiología infecciosa en niños de países subdesarrollados.
Enterobacterias Patógenos Obligados
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Existen 6 virotipos o patotipos E. coli enteropatógena E. coli enteroinvasiva E. coli enterohemorrágica E. coli enterotoxigénica E. coli enteroadherente E. coli enteroagregativa
Aunque hay diferencias antigénicas, pueden compartir antígenos somáticos
Producen diarrea relacionada con la ingestión de alimentos contaminados con materia fecal, variando de acuosas a disentéricas.
E. coli diarreogénicas
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Patogénesis
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Shigella
4 especies pertenecientes a 4 grupos serológicos O:
A S. dysenteriae B S. flexneri
C S. boydii D S. sonnei
Las especies más frecuentes
en nuestro país son
S. flexneri (85%) y S. sonnei (15%)
Son todas inmóviles
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Patogénesis
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Salmonella
2 especies: S. bongori y S. enterica 6 subespecies de S. enterica:
S. enterica, S. salamae, S. arizonae S. houtenae, S. diarizonae, S. indica
Más de 2500 serotipos según sus antígenos O, H y Vi. La mayoría de las especies son móviles
Producen diarrea relacionada con la ingestión de alimentos contaminados con materia fecal, pudiendo dar complicaciones como sepsis, neumonías, abscesos, etc. Salmonella Typhi produce fiebre tifoidea.
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Patogénesis
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Enterobacterias diarreogénicas Diagnóstico de laboratorio
Materia fecal
Examen en fresco y Coloración de Gram
Siembra en Agar E.M.B. o Mac Conkey y Agar SS
Incubar 24 hs a 37ºC
Pruebas bioquímicas
Identificación serológica
Antibiograma
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Protocolo mínimoProtocolo mínimo
Rutina ® Salmonella y Shigella Heces sanguinolentas ® + ECEH Inmunocomprometido ® + Cryptosporidium
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Siembra inicial-Aislamiento primario
Medios poco selectivos
Medios selectivos
Medios de
enriquecimiento18 hs
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Siembra Inicial Agar Eosina Azul de Metileno
Agar Mac Conkey
Agar Salmonella Shigella Agar XLD
Agar Verde Brillante Bilis Agar Hektoen Enterico
Medios cromogénicos Agar Mac Conkey Sorbitol
Caldo Selenito Caldo Tetrationato
Caldo Rappaport-Vassiliadis Caldo Bolton
Agua peptonada alcalina
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Caldos de enriquecimiento
Salmonella: Selenito o rappaport Vasiliadis
E. coli O157: Agua peptonada +TEL + CFX
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EMB Agar Mac Conkey
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Agar Salmonella Shigella
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Agar XLD Agar Hektoen Enterico
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CHROMagar E. coli 0157
0157
CHROMagar Salmonella
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ATS
SIM LDC FEA ONPGColonias
sospechosas
SF
Identificación inicialIdentificación inicial
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Identificación definitiva
TSI URE ODC ADH OXI CIT DNAsaATS
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Enterobacterias diarreogénicas Diagnóstico de laboratorio
Género Lactosa Movilidad Urea Citrato SH2
Escherichia + + - - -Shigella - - - - -Salmonella - + - + +Yersinia - - + - -
Otras pruebas: producción de indol, descarboxilasas, rojo de metilo, acetato, Voges-Proskauer, fermentación de azúcares, etc.
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ONPG
Fenilalanina
(-) (+)
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SIM
SH2+ Ind+ Mot+
SH2+ Ind- Mot-
SH2- Ind+ Mot+
SH2- Ind- Mot-
Lisina Decarboxilasa
Citrato/Acetato
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Triple Azúcar Hierro
Ureasa
Positivo Negativo
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Lisina Hierro Agar
LIA – SH2 - LIA + SH2 - LIA + SH2 -
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Serotipos Serotipos SalmonellaSalmonella
Serovariedad
o serotipo
Chaco Corrientes TOTAL
n n n %
S. Newport 4 57 61 35,5
S. Enteritidis 10 34 44 25,5
S. Infantis 27 8 35 20,3
S. Typhimurium
7 2 9 5,2
Otros 7 16 23 13.5
Total 55 117 172 100
Identificación serológicaIdentificación serológica
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Antibiograma
Acido nalidíxicoAcido nalidíxicoAmpicilinaAmpicilina
Ampicilina/sulbactamaAmpicilina/sulbactamaTrimetoprima/sulfametoxazolTrimetoprima/sulfametoxazol
Cefalosporinas de 3ra generaciónCefalosporinas de 3ra generaciónCiprofloxacinaCiprofloxacina
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Prevención de las diarreas
Uso de agua potable para beber Provisión de agua para higiene Higiene personal Higiene de los alimentos Adecuada disposición de excretas Adecuada conservación de los alimentos
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Medidas de control
1) calentar el alimento hasta alcanzar temperatura suficiente para eliminar a las
bacterias, de 65 a 74°C
2) conservar el alimento a temperaturas menores de 5°C
3) prevenir la contaminación cruzada después del tratamiento térmico y
4) evitar que las personas con síntomas de gastroenteritis o portadores, manipulen
alimentos.
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Recordar:¡En unas pocas horas, los gérmenes se pueden multiplicar en millones¡