Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
8. ANEXOS
8.1 COMPOSICION DE MEDIOS DE CULTIVO
CALDO ACETATO MINERAL
Fosfato ácido di sódico dodecahidratado.
Fosfato diácido monopotásico
Sulfato de Magnesio heptahidratado
Cloruro de Amonio
Acetato de Sodio
Bicloruro de Calcio dihidratado
Solución de elementos traza
Carbonato de Sodio al 0.05%
Agua destilada
pH final
Esterilización a 121 ºC por 15 min.
2.25 g
0.345 g
0.05 g
0.25 g
0.000125 g
0.00025 g
0.75 mL
0.11 mL
250 mL
7.0
MEDIO AUXILIAR ( AUX MEDIUM)
Sulfato amoníaco
Base
Aminoácidos.
Vitaminas y sustancias nutritivas
Tampón fosfato
Agar
pH final
Esterilización a 121 ºC por 15 min.
2 g
82.8 mg
250 mg
35.9 g
0.04 M pH= 7.1 1000 mL
1.5 g
7.0-7.2
Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
CETRIMIDE AGAR
Peptona de gelatina
Cloruro de Magnesio
Sulfato potásico
N-cetil-N,N,N,-trimetilamoniobromuro(Cetrimide)
Agar-agar
Glicerina
Petróleo al 1 %
20 g
1.4 g
10 g
0.3 g
13 g
10 mL
Esterilización a 121 ºC por 15 min.
AGAR KING-B
Peptona de carne
Glicerol
Fosfato diácido de Potasio
Sulfato de Magnesio
Agar
Agua destilada
pH final
4 g
2 g
0.3 g
0.3 g
3 g
200 mL
7.0
Esterilización a 121 ºC por 15 min.
MEDIO MINERAL
Cloruro de Sodio
Cloruro de Potasio
Fosfato diácido de Potasio
Sulfato de Magnesio heptahidratado
Fosfato ácido di sódico
Nitrato de Amonio
Agua destilada
Petróleo crudo
pH final
24 g
0,7 g
2,0 g
1,0 g
3,0 g
1,0 g
1000
mL
10 mL
7.0
Esterilización a 121ºC por 15 minutos.
Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
MEDIO MÍNIMO DE GOLDMAN Fosfato ácido di potásico
Fosfato diácido de Potasio
Sulfato de Magnesio
Sulfato diamónico
Etanol
Agua destilada.
pH final
Esterilización a 121ºC por 15 minutos.
Extracto de levaduras al 3%.
18 g
6 g
0.02 g
4 g
20 mL
1000 mL
7.0
MEDIO PALLERONI
Fosfato ácido di sódico
Fosfato diácido de Potasio
Cloruro de Sodio
Cloruro de Amonio.
Sulfato de Magnesio heptahidratado
Citrato amónico férrico
Cloruro de Calcio
Agua destilada
pH final
9.37 g
8.976 g
1.7 g
0.2 g
0.1 g
0.01 g
0.001 g
200 mL
6.8
Esterilización a 121 ºC por 15 min., excepto el Citrato amónico férrico y Cloruro de Calcio el cual se
esteriliza por filtración y se adiciona en condiciones estériles a partir de una solución concentrada.
Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
8.2 CARACTERÍSTICAS DEL DESTILADO DE CRUDO DE PETRÓLEO A 200 ºC
CUADRO Nº 01
Nº Tiempo de retención (TR)
Componentes Peso molecular (PM)
Fórmula %
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34
1.33 1.55 2.07 2.69 3.17 3.87 4.28 4.43 5.09 7.74 8.28 10.76 15.83 16.86 17.79 19.64 22.34 24.88 24.88 25.90 27.30 29.60 31.80 33.91 35.94 37.87 39.73 41.51 43.23 44.89 46.47 48.08 49.97 52.22
n-pentano n-hexano n-heptano 2 metil pentano 3 metil hexano 1,1,2trimetil ciclohexano 1-hexeno 2 metil hexano 2 etil hexano 2 metil decano 4 metil decano n-nonano 2 metil undecano 3,5 dimetil octano 2 metil undecano dodecano n-tridecano n-tetradecano tetradecano 2 metil tridecano n-pentadecano pentadecano n-hexadecano n-heptadecano n-octadecano octadecano n-eicosano n-heneicosano n-dodocosano n-pentacosano n-octacosano n-nonacosano n-triacontano n-dotriacontano
76 86 100 72 100 126 84 86 114 114 156 128 170 142 170 170 184 198 198 198 212 212 226 240 254 254 282 296 310 352 394 408 422 450
C5H12 C6H14 C7H16 C6H14 C7H14 C9H28 C6H12 C7H16 C8H18 C11H24 C12H26 C9H20 C12H26 C10H22 C12H26 C12H26 C13H28 C14H30 C14H30 C14H30 C15H32 C15H32 C16H34 C17H36 C18H38 C18H38 C20H42 C21H44 C22H46 C25H52 C28H58 C29H60 C30H62 C32H66
0.49 0.77 0.57 0.64 1.82 2.18 2.14 2.05 7.58 9.52 0.38 13.17 5.95 9.39 2.55 8.56 7.86 5.09 3.48 3.90 3.93 1.37 1.22 0.96 0.85 0.77 0.71 0.55 0.43 0.37 0.20 0.20 0.20 0.10
Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
INTERPRETACIÓN: Saturados aciclicos
Saturados cíclico
Insaturados-olefínico
Aromáticos
95.77% (37.38% parafínico)
2.18
2.05
0.00
100.00
PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS
GRAVEDAD API A 60º F 19.0
DESTILACIÓN
Hasta 200 ºC
Residuo pesado
%DESTILADO
15
85
CONDICIONES CROMATÓGRAFO DE GASES: GC/MS
Columna:
T. Horno:
Injector:.
Vol.inj:
Split:
Gas arrastre:
Medianamente polar SUPELCO 608
80 ºC (8,5’); 45 ºC/min hasta 150 ºC (1’) 8 ºC/min hasta 280 ºC (12’)
80 ºC (0,2’); 50 ºC/min hasta 100 ºC (5’); 50 ºC/min hasta 300 ºC hasta el final de
corrida.
1,5 µl
[50:1]
Helio 20.8psi (1,73 mL/min)
NOTAS:
TR: Tiempo de retención, secuencia en que se separan los componentes en el cromatograma.
PM: Peso molecular
Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
Gráfico Nº 01:Tiempo de retención en la columna y porcentaje de cada componente del
destilado de crudo.
Gráfico Nº 01: Tiempo de retención en la columna y porcentaje de cada componente del
destilado de crudo.
g
Grafico N° 01:
Tiempo de retención en la columna y porcentaje de cada componente del destilado de crudo.
8.3 CARACTERISTICAS DEL SUELO DE CULTIVO.
CUADRO Nº 02
Conductividad (C.E)
Análisis Mecánico pH Carbonato de Calcio CaCO3
Materia Orgánica (M.O)
Fósforo P
Óxido dipotásico K2O
Cationes Cambiables
Cationes intercambiables (CIC)
Ca++ Mg++ K+ Na Ds/m P.S*
Arena %
Limo %
Arcilla %
Textura P.S % % ppm kg/ha
Cmol (+)/kg
1.03 69.45 22.3 8.28 Franco Arenoso
6.4 0.00 2.6 49.45 (0.005%)
585.60 (0.49%)
13.72 9.60 (0.038%)
3.20 (0.0077%)
0.46 (0.0017%)
0.17 (0.0004%)
P.S*: Pasta Saturada
Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
INTERPRETACIÓN: CONDUCTIVIDAD : Muy ligeramente salino: Ligeramente salino: Moderadamente salino: Fuertemente salino: Extremadamente salino: MATERIA ORGANICA (M.O) Bajo: Medio: Alto: CALCAREO TOTAL CaCO3%
Bajo: Medio: Alto: FÓSFORO P (ppm) Bajo: Medio: Alto: POTASIO K 2O (kg/ha) Bajo: Medio: Alto: REACCION DEL SUELO (pH) Fuertemente ácido: Moderadamente ácido: Ligeramente ácido: Neutro: Ligeramente alcalino: Moderadamente alcalino: EQUIVALENCIAS 1 mmhos/cm = 1 cmol (+) kg =
C.E. (sales). Según respuesta de los cultivos (dS/m) < 2 2-4 4-8 8-16 >16 < 2% 2-4% >4% < 1% 1-5% > 5% < 7% 7-14% >14 % < 300 300-600 > 600 5.1-5.5 5.6-6.0 6.1-6.5 6.6-7.3 7.4-7.8 7.9-8.4 1 dS/m 1 me/100g
Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
8.4 BIODEGRADACIÓN DE CRUDO EN TERRARIOS
FOTO Nº 01
CONSORCIO BACTERIANO EXÓGENO CONSORCIO BACTERIANO NATIVO
CONTROL ABIÓTICO
Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
8.5 DETERMINACIÓN DE LA REGRESIÓN MÚLTIPLE POR PASOS CON EL PROGRAMA SPSS 9.0 WINDOWS.
Gráfico Nº 02. Ingreso de datos al SPSS.
Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
Gráfico Nº 03. Selección de método de regresión lineal múltiple
Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
Gráfico Nº 04.Selección de variables y del método de regresión lineal múltiple: Stepwise.
Biodegradación de crudo de petróleo en terrarios. Escalante Guzmán, Rocío Miluska.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca Central UNMSM
8.6 ESCALA TURBIDIMÉTRICA MC. FARLAND
Tubo Cloruro de Bario (1%)
Ácido sulfúrico(1%)
Millones de m.o/mL
1 0.1 9.9 300 2 0.2 9.8 600 3 0.3 9.7 900 4 0.4 9.6 1200 5 0.5 9.5 1500 6 0.6 9.4 1800 7 0.7 9.3 2100 8 0.8 9.2 2400 9 0.9 9.1 2700 10 1.0 9.0 3000
Fuente: Microbiología de laboratorio (Bradshaw, 1976)