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El código genético es universal y degenerado
64 posibles combinaciones de tripletes solo 20 aminoácidos
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Las secuencias se pueden traducir en tres diferentes marcos de lectura
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Los intermediarios entre los codones y los aminoácidos son los tRNA
tienen una longitud de aproximadamente 80 nucleótidos
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Interacción codón-anticodón
la 3ª posición puede no aparear (hipótesis del “bamboleo”) las bacterias tienen 31 diferentes tRNA los eucariontes tienen 48
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El apareamiento en la tercera posición es laxo
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Bases modificadas que se encuentran en los ARNt
• Pseudouracilos (ψ) • 4 tiouridina • 2 metilguanina • 2 isopententenil adenina • Dihidrouridina (D) • Inosina
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Las aminoacil tRNA sintetasas acoplan el aminoácido con la molécula de tRNA
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Las aminoacil ARNt sintetasas tienen varios sitios importantes
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Aminoacil-tRNA sintetasas
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Existen diferentes interacciones entre las enzimas con sus tRNA´s
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Existe un mecanismo de corrección tanto para el tRNA como para el aminoácido
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Aminoácidos similares pasan por un doble filtro
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El crecimiento de la cadena polipeptídica es por adición del amino al grupo carboxilo
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La traducción se realiza en los ribosomas
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Ribosomas procariontes y eucariontes
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Sitios de unión del tRNA al ribosoma
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El ARNr juega un papel muy importante en la traducción
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Interacciones con ARN de la subunidad chica del ribosoma permite un reconocimiento correcto
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La síntesis de proteínas tiene 3 etapas
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Factores de iniciación
IF2, which uses GTP, promotes the binding of the initiator tRNA to the start codon in the P site.
Portion of 16S rRNA
The mRNA binds to the 30S subunit. The Shine-Dalgarno sequence is complementary to a portion of the 16S rRNA.
3′ 5′
30S subunit
Shine- Dalgarno sequence (actually 9 nucleotides long)
Start codon
IF3 IF1
IF1 IF3
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70S initiation complex
This marks the end of the initiation stage
IF1 and IF3 are released.
IF2 hydrolyzes its GTP and is released.
The 50S subunit associates.
tRNAfMet
IF2 GTP
E A P
3′
3′ 5′
70S initiation complex
IF1 IF3
Initiator tRNA
tRNAfMet
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Interacción del ribosoma con el RNAm
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Interacción con el ARNr 16S
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En bacterias los mensajes policistrónicos tienen varios sitios de reconocimiento del ribosoma
5´AGGAGGU3´ Shine-Dalgarno
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En bacterias existen dos aminoacil- tRNA para met
El fMet-tRNA iniciador tiene características especiales
Reconoce los codones AUG ó GUG
En la mitad de los casos, la metionina es removida de la proteína
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Solo el tRNA de inicio entra al sitio P
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Factores de iniciación forman un complejo con los extremos del mensaje
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Complejo de la subunidad pequeña y el tRNA de inicio
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Complejo mensaje-ribosoma
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Diferentes factores de iniciación están involucrados en eucariontes
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En eucariontes el reconocimiento del codón de inicio es diferente
Regla de Kozak
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Proteínas adicionales requeridas para la traducción (factores de elongación)
EF-Tu, EF-G bacterias EF1, EF2 eucariontes
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El polipéptido se trasloca al aminoacil-tRNA
La actividad de peptidil transferasa está asociada al ARNr 23S
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La traslocación ocurre en dos pasos
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Los dos factores de elongación tienen funciones distintas
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El final de la traducción se marca con tres codones específicos (UAA, UAG, UGA) que no son reconocidos por ningún tRNA
La peptidil transferasa cataliza la transferencia del péptido a una molécula de agua y el péptido se libera
Factores de terminación UAA ocre RF1 UAG ambar UGA UAA RF2
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El factor de liberación eucarionte semeja a un tRNA
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eRF1 utiliza agua para hidrolizar el péptido
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Los ribosomas se reciclan al final de la traducción
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El papel de la hidrólisis de GTP
Se hidrolizan 2 GTP´s por cada aminoácido incorporado La hidrólisis promueve cambios conformacionales Cargado de tRNA con su aminoácido 1 ATP (2 enlaces) /Aa TRADUCCION Iniciación 1 GTP Elongación 2 GTP/ Aa Terminación 1 GTP
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Comparación entre la traducción procarionte y eucarionte
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Síntesis en polisomas
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Regulación a nivel de la traducción
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Inhibidores en la síntesis de proteínas se usan como antibióticos
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Inhibidores de la síntesis de proteínas en eucariontes y en procariontes
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Selenocisteína es introducida en el codón de paro UGA