PROGRAMA: Mejoramiento Gentico para problemas limitantes en Pimentn y Aj PROYECTO: MEJORAMIENTO GENETICO DE AJI Y PIMENTON PARA RESISTENCIA A Phytophthora capsici Leonian
FINANCIADO POR MINISTERIO DE AGRICULTURA Y ASOHOFRUCOL
ALIANZA Entidad de Investigacin: UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA SEDE PALMIRA
Entidades del Sector Productivo AGRONILO S. A. GRAJALES S. A.
Investigador principal: CARLOS GERMAN MUOZ PEREA, Ph.D. Coinvestigadores: MARIO AUGUSTO GARCIA, Ph.D. ELIUD GARCIA, I.A (Estudiante Maestra UNAL) NATALIA MENDOZA, I.A. (Estudiante Maestra UNAL) IFIGENIA HURTADO, I.A. (Estudiante Maestra UNAL) JAIME ENRIQUE CARDENAS, I.A. (GRAJALES /AGRONILO)
ZONAS PRODUCTORAS DE AJ Y PIMENTN
Toro La Unin Roldanillo Bolivar
Darien Yotoco Dagua Yumbo Candelaria
INCIDENCIA Y PERDIDAS ECONOMICAS OCASIONADAS POR LA ENFERMEDAD
SINTOMATOLOGIA DE LA ENFERMEDAD EN CULTIVOS DE AJ Y PIMENTN
SINTOMATOLOGIA DE LA ENFERMEDAD EN CULTIVOS DE AJ Y PIMENTN
Phytophthora capsici LeonianNombre genero phyto y phthora destructor de plantas. Esta especie fue descrita por primera vez por LEONIAN en 1922. En 1937 fue reportado por primera vez atacando cultivos de Cucrbitas. En 1940 fue encontrado en cultivos de berenjena, frutos de meln dulce, calabaza y frutos de tomate. En forma natural afecta un amplio rango de Cucurbitceas y Solanceas. Puede afectar alrededor de 45 especies de plantas cultivadas y malezas (14 familias). Leonian, 1922
OBJETIVO GENERAL Desarrollar variedades de pimentn y aj con resistencia a Phytophthora capsici
OBJETIVOS ESPECIFICOS1. Identificar germoplasma de Capsicum spp resistente a Phytophthora capsici 2. Introgresar la resistencia a P. capsici en variedades comerciales de aj y pimentn 3. Seleccionar lneas de Capsicum spp con resistencia a P. capsici 4. Aislar e identificar cepas de P. capsici
METODOLOGIA1. Identificar germoplasma de Capsicum spp resistente a Phytophthora capsici
METODOLOGIA2. Introgresar la resistencia a P. capsici en variedades comerciales de aj y pimentn
Esquema de Mejoramiento y seleccinCruzamientos Resistente x Comercial Comercial x Resistente
Semilla F1
Avance descendencia semilla nica F1=F3
Seleccin lneas F4 en Campo
Seleccin Lneas F5
Ensayo Preliminar Rendimiento F6
Ensayo Rendimiento F7
Ensayo y Rendimiento F8
METODOLOGIA3. Seleccionar lneas de Capsicum spp con resistencia a P. capsici
METODOLOGIA4. Aislar e identificar cepas de P. capsici
ZONAS PRODUCTORAS DE AJ Y PIMENTN
Toro La Unin Roldanillo Bolivar
Darien Yotoco Dagua Yumbo Candelaria
AISLAMIENTO DEL PATGENO
CULTIVOS MONOZOOSPORICOS
Modificacin de la metodologa propuesta por Lamour y Hausbeck , 2000
CARACTERIZACIN MORFOLOGICA DE LOS AISLAMIENTOS
Siembra del Patgeno (ZA) Temperatura 25C por tres das Estimulacin Lumnica Temperatura 25C+/-1C por tres das 2400 lx
Preparacin de cubres y portaobjetos Temperatura 25C+/-1C por tres das 2400 lx
Modificacin de la metodologa propuesta por Alizadeh y Tsao, 1985
PRUEBAS DE PATOGENICIDAD
Caracterizacin MolecularDigestin con MSPI 100 bp ladder Fragmento sin digerir
946 pb
290 pb 219pb 194pb 140pb
DETERMINACIN DE SENSIBILIDAD AL METALAXYL-M+MANCOZEB
Siembra del Patgeno (ZA) Concentraciones 0 ug/ml 0,1 ug/ml 1 ug/ml 5 ug/ml 10 ug/ml 50 ug/ml 100 ug/ml
Evaluacin Despus de tres das < 30% Sensible 30% a 90% Sensibilidad intermedia >90% Resistente
Basada en la metodologa propuesta por Lamour y Hausbeck, 2000
RESULTADOS1. Se han identificado hasta ahora 10 genotipos de Capsicum spp resistentes a Phytophthora capsici
Seis genotipos resistentes de Capsicum annum Dos genotipos resistentes de Capsicum chinense Dos genotipos resistentes de Capsicum frutescens
RESULTADOS2. Se cruzaron los 10 genotipos con resistencia a P. capsici en variedades comerciales de aj y pimentn y se avanzaron hasta F4 por descendencia de semilla nica
RESULTADOS3. Se seleccionaron 80 lneas F4 de Capsicum spp con resistencia de campo a P. capsici y con buen comportamiento agronmico. Se inocularon en invernadero 24 plantas F5 de F4 y se seleccionaron las mas resistentes.
RESULTADOS4. Se han obtenido 130 aislamientos de P. capsici y se han caracterizado parcialmente para morfologa, molecular, patogenicidad y resistencia a fungicidas
VARIACIN EN LAS FORMAS DE ESPORANGIOS
Bipapilados
Caduco Intercalado
Ovoides
Asimtricos
Elipsoide con base estrecha
Globoso
Promedio del largo y ancho de esporangios de aislamientos de P. capsici del Valle del CaucaAislamientosYB11408 RD263708 BL241260 YT259608 RD253108 CD131150 DMS
Largo (um)60.10 57.53 56.43 56.93 42.16 40.10 9.18
Ancho (um)37.76 31.10 30.30 27.83 29.00 26.73 5.47
OOSPORAS
CLAMIDOSPORA
Vacuola Central
Ausentes o poco frecuentes
Marcador de peso molecular 100bp ladder
Marcador de peso molecular 100bp ladder
16 16 18 22 26 27 30 34 35 36 36 37 38 39 40 43 44 44 45 49 49 57 58 60 61 62 63 64
290 pb 219pb 194pb 140pb
Fecha de realizacin del gel: 11 de febrero del 2009
Crecimiento de aislamientos de P. capsici del Valle del Cauca bajo una dosis de 10 ug ml-1 de Metalaxyl-M (4%) + Mancozeb (64%)AislamientosYB11108 YB261008 RD121308 RD263708 DMS
Media (cm)3.65 1.05 4.00 0.82 0.33
Relacin aislamiento tratado / control62.75 21.75 61.25 17.25 6.17