Bioquímica Clínica - 2013

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Determinación de Glucosa en Sangre

Armijos Rodrigo*, Calva Jessica*, Calva Henry*, Jaramillo Gyselle* & Sarango Paulo*

****Profesionales en Formación, Ciencias de la Salud, Titulación de Bioquímica y Farmacia, Universidad Técnica Particular de Loja, San Cayetano Alto s/n C.P. 11 01 608; Loja, Ecuador.

Resumen: La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena principalmente en el hígado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre. La determinación de glucosa en sangre es útil para el diagnóstico de numerosas enfermedades metabólicas, fundamentalmente de la diabetes mellitus. También es necesaria esta prueba, una vez diagnosticada la diabetes, para controlar la dosis de insulina que se debe administrar para tratarla. Palabras claves: Glucosa, Enfermedades, Diagnóstico, Diabetes Mellitus, Insulina. Abstract: The glucose is the principal source of energy for the cellular metabolism. It is obtained fundamentally across the supply, and is stored principally in the liver, which has a basic paper in the maintenance of the levels of glucose in blood. The determination of glucose in blood is useful for the diagnosis of numerous metabolic diseases, fundamentally of the diabetes mellitus. Also it is necessary this one tries, once diagnosed the diabetes, to control the dose of insulin that it is necessary to administer to treat her. Keywords: Glucose, Diseases, Diagnosis, Diabetes Mellitus, Insulin.

Introducción: El análisis de glucosa puede ser diagnósticamente importante en la diabetes, hipoglucemia y diversos trastornos suprarrenales e hipofisarios. Los métodos enzimáticos para la determinación de glucosa fueron descritos por primera vez por Keilin y Hartree (Keilin, D. 1948). La FDA de Estados Unidos ha propuesto como método de referencia para la determinación de glucosa un procedimiento totalmente enzimático que emplea hexocinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (Passey, R. 1977). La glucosa es oxidada a D-gluconato por la glucosa oxidasa (GOD), con formación de peróxido de hidrógeno. En presencia de peroxidasa (POD), el fenol y la 4-aminoantipirina (4-AA) se condensan

por acción del peróxido de hidrógeno, formando una quinonaimina roja proporcional a la concentración de glucosa en la muestra. (Trinder, P. 1969) Mediante el presente, establecimos un posible diagnóstico de glucosa en la sangre o control de rutina de glucosa en un paciente. Materiales y Métodos Materiales: Micropipetas de 20 µL y de 1000 µL. Puntas para micropipeta. Tubo Vacutainer sin heparina. 5 tubos de ensayo de 16 x 100 mm Agujas Vacutainer. Campana. Torundas. Equipo semi-automatizado para

química sanguínea. Centrifugadora.

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Reactivos: Cerodos. Glucosa God-pap Enzimas Hiumatrol Métodos: Realizamos una venopunción en el paciente, trasladamos la muestra a la centrifugadora en donde la mantendremos por 5 minutos, hasta que se centrifugue la sangre ponemos 1000 µL de glucosa oxidasa en cada tubo de ensayo, en el cual el primero va a tener glucosa oxidas, el segundo tubo ponemos los 1000 µL de glucosa oxidasa y 10 µL de estándar, en el tercer tubo ponemos 1000 µL de glucosa oxidasa y 10 µL de cerodos, tomamos 40 µL de suero, repartidos 10 µL en cuatro tubos de ensayo, los rotulamos según el reactivo que se aplica en cada uno de ellos, ya que todos los tubos estén bien preparados los incubamos a una temperatura de 37 ° C, luego procedimos a la lectura en el equipo de cada uno de los tubos, la lectura nos mostró resultados por absorbancia (mg/dL). Resultados:

ABSORBANCIA Mg/dL

Blanco 4.367 3.50

Estándar 0.037 100 Cerodos 0.055 147.9 Muestra # 1 0.127 340.1 Muestra # 2 0.031 83.8

Grafica 1. Absorbancia

Grafica 2. Niveles de Glucosa en Mg/dL

Grafica 3. Correlación Absorvancia - Mg/dL

Discusión La hemoglobina glicosilada puede resultar modificada por alteraciones que varíen el natural recambio de los glóbulos rojos, tales como por hemorragias, anemia hemolítica, transfusiones, embarazo etc., situaciones que producirían falsos descensos. También se puede ver alterada por la ingestión de dosis elevadas de ácido acetil salicílico, vitamina C, alcohol, altas cifras de lípidos en sangre, etc., que producirían falsos aumentos. La prueba de hemoglobina glicosilada es muy importante, sin embargo no puede sustituir al monitoreo de glucemias, ya que ésta no puede medir su control diario y por lo tanto no le permite ajustar sus dosis de medicamentos orales, de insulina, de actividad física, de ingesta de alimentos en el día a día.

0

2000

4000

6000

Blanco Estándar Cerodos Muestra# 1

Muestra# 2

Absorbancia

0

20

40

60

80

100

120

Blanco Estándar Cerodos Muestra# 1

Muestra# 2

Mg/dL

0

1000

2000

3000

4000

5000

Correlación Absorbancia : Mg/dL

Absorbancia

Mg/dL

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Conclusiones y Recomendaciones: Como sabemos los niveles normales

de glucosa en la sangre son de 80 – 120 Mg/dL, observamos en la tabla niveles en algunos casos muy elevados, pero esto se puede deber a que el paciente, esta ingiriendo medicamentos, los mismos que le producen una alteración en los niveles de glucosa.

La técnica utilizada en la determinación de glucosa fue muy buena pero hubo error al tomar la cantidad de reactivo por lo que se observó un color que no era tan rosa pálido, así que hay que mejorar la técnica de pipeteo ya que al parecer es muy importante para poder obtener una buena fiabilidad en el resultados.

Tener cuidado al momento de pipetear la sangre y colocarla completamente en el tubo ya que esta tiende a quedarse pegada en las paredes de las puntas.

BIBLIOGRAFÍA: Keilin, D. Hartree, E.F., Biochem. J. 42,

250 (1948). Passey, R.B., Gillum, R.L., Fuller, J.B., Urry,

F.M., Giles, M.L., Evaluation and Comparison of Ten

Trinder, P. Ann. Clin. Biochem. 6: 24 (1969).

White F. La Importancia del Consenso en la Prevención y el Control de la Diabetes en América Latina y El Caribe. Visión Médica 1999; 20:13-16.

Herrera JL. El control de la diabetes en el umbral del siglo XXI. Revista Clínica Española 1998; 197:12 a 15.

Prat J. Diabetes mellitus and its degenerative complications: a prospective study of 4400 patients observed. Diabetes Care 1998; 1:168-188 y 252 a 263.

Orchard TJ, Forrest KY y Becker DJ. Cumulative glicemic exposure and microvascular complications in insulin-dependent diabetes mellitus. Arch Int Med 2002; 157: 1851-1856.

Tests of glycemia in diabetes (Technical Review). Diabetes Care 18 :896–909, 2006

Análisis de la Hemoglobina glicosilada Tests of glycemia in diabetes (Technical Review). Diabetes Care 18 :896–909, 2006