4.10. Determinación de Calcio en el Alimento.

La evaluación de calcio en la dieta reviste una gran importancia ya que un desbalance con el fósforo u otros minerales generará un bajo crecimiento.

Reactivos

Acido clorhídrico (1 – 3 %)

Acido nítrico 70%

Hidróxido de amonio (1:1 v/v)

Indicador de rojo de metilo (1 g en 200 ml de etanol)

Solución de oxalato de amonio 4.2 %

Acido sulfúrico 98 %

Solución estándar de permanganato de potasio 0.05N

Materiales y Equipo

crisoles de porcelana

matraces volumétricos de 250 ml

vasos de precipitado de 250 ml

Papel filtro para análisis cuantitativos libre de cenizas

Procedimiento

Calcine en crisol de porcelana 2.5g de muestra finamente molida. Adicione 40ml de HCI y unas gotas de HNO3 al residuo, caliente el crisol hasta ebullición, enfríe y transfiera a un matraz volumétrico de 250ml, afore y mezcle. Pase a un vaso de precipitado 100ml de sol. para cereales o alimentos con cereales ó 25ml para alimentos con minerales. Diluya a 100ml y adicione 2 gotas de rojo de metilo. Adicione NH4OH gota a gota hasta que vire a pardo anaranjado, luego adicione 2 gotas de HCl para dar un color rosa. Diluya con 50ml de agua, hierva y adicione con agitación 10ml de sol 4.2% de oxalato de amonio. Ajuste el pH con ácido para regresar al color rosa si es necesario.

Déje reposar, filtre y lave el precipitado con la solución de NH4OH (1.5%). Coloque el papel filtro con el precipitado en un vaso, adicione una mezcla de 125ml de agua y 5ml de H2SO4, caliente a 70°C y titule con la solución de permanganato y calcule:

Ca (%)= 0.1((ml Sol. Permanganato/Peso de la Muestra) × (Alicuota usada en ml/250)

FIGURA 17

Determinación de calcio en alimento e ingredientes alimenticios.

4.11. Determinación de Fósforo

Al igual que el calcio, este mineral es indispensable para el buen desarrollo de los organismos cultivados, debiendo estar presente en las dietas en cantidades suficientes para satisfacer las necesidades metabólicas de los organismos. Este elemento en proteínas de origen vegetal puede estar formando parte de fitatos, por lo cual su disponibilidad puede estar limitada, por lo que se recomienda una determinación de ácido fítico previa al uso de tales materiales.

Reactivos

Reactivo de Molibdato. Disuelva 40 g de molibdato de amonio 4.H2O en 400 ml de agua caliente y enfríe. Disuelva 2 g de metavanadato de amonio en 250 ml de agua caliente, enfríe y adicione 450 ml de ácido perclórico al 70%. Gradualmente adicione la sol. de molibdato a la sol. de vanadato con agitación y diluya a 2 1.

Estándar de Fósforo. Prepare una solución stock disolviendo 8.788 g de Ortofosfato dihidrógeno potasio en agua y llévelo a 1 1. Prepare la solución de trabajo diluyendo la sol. stock 1 en 20 (Conc. de trabajo 0.1 mg P//ml).

Materiales y Equipo

Espectrofotómetro para leer a 400 nm

Matraces graduados de 100 ml

Procedimiento

1. Pase una alicuota como en la determinación de Ca a un matraz de 100 ml y adicione 20 ml del reactivo de molibdovanato. Aforelo, mezcle y deje reposar por 10 min.

2. Transfiera alicuotas del estándar de trabajo conteniendo 0.5, 0.8, 1.0 y 1.5 mg de P en matraces de 100 ml y trátelos como al anterior.

3. Lea la muestra a 400 nm ajustando el estándar de 0.5 mg a 100% de transmisión.

4. Determine mg de fósforo en la muestra usando una curva estándar.

FIGURA 18

Determinación de fósoforo en dietas e ingredientes alimenticios.