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DESARROLLO DE UN MODELO DE HEMODILUCIÓN
EXPERIMENTAL EN CANINOS PARA LA EVALUACIÓN DE LA EFICACIA Y
LA SEGURIDAD DE PORTADORES DE OXÍGENO.
PEDRONELL COLEY HERNANDEZ
UNIVERSIDAD DE LOS ANDES
FACULTAD DE INGENIERÍA
DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA MECÁNICA
BOGOTA
2004
DESARROLLO DE UN MODELO DE HEMODILUCIÓN
EXPERIMENTAL EN CANINOS PARA LA EVALUACIÓN DE LA EFICACIA Y
LA SEGURIDAD DE PORTADORES DE OXÍGENO.
Pedronell Coley Hernández.
Trabajo de grado para optar el título de
Ingeniero Mecánico
Asesor:
Juan Carlos Briceño Triana Ph. D
UNIVERSIDAD DE LOS ANDES
FACULTAD DE INGENIERÍA
DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA MECÁNICA
BOGOTA
2004
A Dios, por las bendiciones que día a día me regala.
A mi madre y mi abuela, a quienes dedico todos mis esfuerzos,
A mi padre y mi hermana.
AGRADECIMIENTOS
El autor expresa sinceros agradecimientos a:
Juan Carlos Briceño T., Ph. D., Ingeniero Mecánico y Asesor del proyecto, por su
incondicional dedicación, orientación y aportes necesarios para la realización de
este proyecto.
Diana Gaitan, quien dirige el Grupo de Hemosustituto en la Fundación
CardioInfantil Instituto de Cardiología, por sus aportes y sugerencias en el
desarrollo de este proyecto.
Andrés Felipe León, Medico Veterinario, por su incondicional apoyo y
disponibilidad.
Andrés Felipe Santacruz, Estudiante de Ingeniería Industrial, por su apoyo y
colaboración.
Fundación CardioInfantil, por el apoyo que brindó en el desarrollo del proyecto.
Clínica Veterinaria Universidad de la salle, quienes se encargaron de apoyar con
el cuidado de los animales, por su comprensión y apoyo
A todas las personas que confiaron en mí y que de una u otra forma brindaron su
apoyo, compañía y colaboración.
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CONTENIDO
INTRODUCCIÓN....................................................................................................................7
1 MARCO TEÓRICO............................................................................................................9
1.1 LA SANGRE....................................................................................................................9
1.2 FISIOLOGÍA DEL TRANSPORTE DE OXÍGENO............................................................11
1.3 “HEMOSUSTITUTOS”....................................................................................................14
1.3.1 PORTADORES DE OXÍGENO. (OXYGEN CARRIERS –OC)........................................14
1.4 POTENCIALES APLICACIONES CLÍNICAS DE HEMOSUSTITUTOS.............................30
1.4.1 HEMODILUCIÓN NORMOVOLÉMICA (HN). .........................................................30
1.5 REPOSICIÓN Y MANTENIMIENTO DE LÍQUIDOS: FLUIDOTERAPIA..........................36
1.6 FORMULACIÓN DE LA EMULSIÓN DE PERFLUOROCARBONO................................39
2 METODOLOGÍA. ............................................................................................................42
2.1 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL..............................................................................42
2.1.1 IMPLEMENTACIÓN DEL PROTOCOLO...................................................................42
2.1.2 PROTOCOLO EXPERIMENTAL. ...............................................................................43
2.2 MONITOREO DE VARIABLES. .....................................................................................45
2.2.1 TOMA DE DATOS.....................................................................................................45
2.2.2 HEMATOLOGÍA.......................................................................................................48
2.2.3 QUÍMICA SANGUÍNEA............................................................................................51
2.2.4 GASOMETRÍA...........................................................................................................54
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ii
2.2.5 TEMPERATURA CORPORAL....................................................................................57
3 RESULTADOS...................................................................................................................58
3.1 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL..............................................................................58
3.1.1 PROTOCOLO EXPERIMENTAL. ...............................................................................60
3.2 MONITOREO DE VARIABLES. .....................................................................................62
3.2.1 HEMATOLOGÍA.......................................................................................................64
3.2.2 BIOQUÍMICA SANGUÍNEA......................................................................................72
3.2.3 GASOMETRÍA...........................................................................................................72
4 DISCUSIÓN.....................................................................................................................85
4.1 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL..............................................................................85
4.1.1 IMPLEMENTACIÓN DEL PROTOCOLO...................................................................89
4.2 MONITOREO DE VARIABLES ......................................................................................90
5 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES...................................................................96
BIBLIOGRAFÍA......................................................................................................................99
ANEXOS..............................................................................................................................104
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LISTA DE TABLAS
Tabla 1 Composición de Fluosol ® 24
Tabla 2. Propiedades de OxygentTM 26
Tabla 3 Volumen de sangre en algunos animales. 31
Tabla 4. Formula de evaluación de las microemulsiones de perfluorocarbono 40
Tabla 5. Característica de la Formula de microemulsiones de perfluorocarbono. 41
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LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Curva de disociación de oxígeno. 13
Figura 2. Curva de disociación de oxígeno para sangre humana y emulsión PFC. 29
Figura 3. Frecuencia de toma de datos. 46
Figura 4. Tubos para muestras. 47
Figura 5. RELACIÓN DE REGISTROS. 63
Figura 6. Recuento de hematíes (ERIT). 65
Figura 7. Hemoglobina (Hb). 65
Figura 8. Hematocrito (Hct). 66
Figura 9. Fluorocrito (Fct). 66
Figura 10. Obtencion del Fluorocrito (Fct). 67
Figura 11. Volumen Corpuscular Medio (VCM). 68
Figura 12. Hemoglobina Corpuscular Media (VCM). 68
Figura 13. Concentración de Hb Comparada con el Hct (CHCM). 69
Figura 14. Conteo de plaquetas (PLQ). 70
Figura 15. Volumen medio plaquetario (VMP). 70
Figura 16 Glóbulos Blancos (LEUCOS). 71
Figura 17. pH arterial. 73
Figura 18. pH venoso. 73
Figura 19. Presión parcial de O2 Arterial. 74
Figura 20. Presión parcial de O2 Venoso. 74
Figura 21. Presión parcial de Co2 arterial. 75
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Figura 22. Presión parcial de Co2 Venoso. 75
Figura 23. HCO3- Arterial. 76
Figura 24. HCO3- Venoso. 76
Figura 25. Diferencia artero-venosa de concentración de oxígeno. 77
Figura 26. Concentración total de oxígeno arterial. 78
Figura 27. Concentración total de oxígeno venoso. 79
Figura 28. Aportes de cada fase en el grupo de hemacel. 80
Figura 29. Aportes de cada fase en el grupo de Lactato de Ringer. 81
Figura 30. Aportes de cada fase en el grupo de lactato de Ringer con 100%O2. 82
Figura 31. Aportes de cada fase en el grupo PFC1. 83
Figura 32. Aportes de cada fase en el grupo PFC2. 84
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RESUMEN
Con el fin de evaluar los beneficios del uso de hemosustitutos es necesario
estudiar la eficacia y seguridad del uso de estas sustancias. El estudio in vivo es
preciso para el desarrollo de sustancias de posterior uso en humanos y la
observación de la respuesta propia de los organismos que se someten a
aplicación de hemosustitutos es una buena forma de evaluar su comportamiento.
En este proyecto se desarrolla una metodología para evaluar la eficacia y
seguridad del uso de portadores de oxígeno en un modelo de hemodilución
normovolémica en caninos. Así el objetivo de este trabajo fue el rediseño,
desarrollo y aplicación de un protocolo experimental para la realización de
reemplazo de sangre por hemosustitutos de forma normovolémica y el monitoreo
de variables consideradas de alta importancia previo, durante y posterior a la
aplicación de dichas sustancias en un modelo experimental en caninos.
Para el desarrollo del protocolo se tomó un protocolo inicial realizado por el grupo
de investigación en hemosustitutos en la Fundación Cardio-Infantil Instituto de
Cardiología aplicado en conejos. Se realizaron varios experimentos en conejos
pero finalmente se decidió proceder con caninos, cachorros French Poodle
(Caniche) entre 1.5 y 3 kilogramos de peso, de buena presencia física y del mismo
proveedor. En la ejecución experimental se definieron dificultades que se
superaron progresivamente obteniendo mejores resultados en el procedimiento
en cachorros.
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INTRODUCCIÓN
El obtener una sustancia que pueda sustituir a la sangre en todas sus funciones, ha
sido para el hombre, un objetivo esquivo a lo largo de la historia. Para ello, ha
realizado un sin número de intentos con muy pocos resultados.
La sangre cumple muchas funciones, tanto, como para ser considerada un tejido
conectivo, incluso, muchos la definen como un órgano por si misma, siendo su
complejidad uno de los muchos limitantes en la búsqueda de un reemplazo que
cumpla con la gran mayoría de sus funciones.
Una de las principales funciones de la sangre, sino la principal, es el transporte de
oxígeno. Los portadores artificiales de oxígeno, mal llamados “sangre artificial” o
“hemosustitutos”, se limitan al transporte de gases respiratorios y solo por un
reducido periodo de tiempo, no cumpliendo con las complejas e
interrelacionadas características de metabolismo, regulación, hemostática y
sistema de defensa que sí cumple la sangre. Pero la consecución de sustitutos de
sangre portadores de oxígeno, es la definición de una larga búsqueda con
alcances innumerables y aplicaciones de gran ayuda para la humanidad.
Muchas enfermedades e intervenciones quirúrgicas requieren de transfusiones
alogénicas necesarias para oxigenar tejidos. Estas transfusiones aunque
actualmente presentan un nivel de seguridad muy alto, representan también un
riesgo elevado; riesgos de transmisión de enfermedades infecciosas (existe la
llamada ventana inmunológica, tiempo en el cual muchas enfermedades están
presentes pero no son detectadas con las pruebas), reacciones alérgicas ó a
antígenos, escasez de sangre, tiempo de vida útil, incluso costos, formas de
almacenamiento y procesamiento, culturas, ideologías o religiones impiden
muchas veces la administración necesaria de la misma.
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Actualmente se conocen básicamente dos tipos de sustitutos portadores de
oxígeno. Los perfluorocarbonos (PFC-OC) y los basados en hemoglobina
modificada (Hb-OC).
En 1966 Clark y Gollan, demostraron de forma dramática la capacidad de
transportar oxígeno del PFC con la supervivencia de un ratón inmerso totalmente
en un liquido fluorocarbonado. Pero las características hidrofóbicas de este
líquido, revelaron la necesidad de preparar una microemulsión inyectable para
poder utilizarlos como portadores de oxígeno intravascular [Riess 01].
Después de décadas de pronunciado esfuerzo, parecería que se esta muy cerca
de alcanzar aprobaciones de las autoridades de salud a nivel mundial para el uso
de preparaciones inyectables que garanticen seguridad y que sean capaces de
entregar O2 a los tejidos y remover el CO2. Pero para ello se debe garantizar la
eficacia, seguridad y bajos daños al organismo.
En Colombia, el Grupo de Ingeniería Biomédica de la Universidad de los Andes,
dirigido por el Dr. Juan Carlos Briceño, con la colaboración de la Ingeniera Diana
Marcela Gaitán, quien orienta las Investigaciones en Hemosustitutos en la
Fundación Cardio-Infantil, con el apoyo de la Clínica Veterinaria Universidad de
la Salle y con el respaldo de un grupo interdisciplinario se desarrolla, fabrica y
evalúa diferentes emulsiones de sustitutos de sangre portadores de oxígeno.
Basado en el monitoreo de variables sanguíneas y temperaturas, para el presente
proyecto se desarrolla un protocolo para evaluar eficacia y seguridad de una
emulsión portadora de oxígeno, basada en una emulsión de
perfluorooctilbromida, con Epikuron 200 , fosfolípido a base de lecitina de huevo,
como surfactante, realizada en un modelo experimental en animales.
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1 MARCO TEÓRICO
El uso de sustancias capaces de reemplazar las múltiples funciones de la sangre
brindando seguridad, eficacia y generando reacciones adversas mínimas, ha sido
fuente de investigación por muchos años. El desarrollo de dichas sustancias no se
encuentra de momento a nuestro alcance, pero si se puede pensar en el
desarrollo de “sustitutos de sangre” que puedan reemplazar la sangre en
funciones especificas, y de hecho se podría pensar en el cumplimiento de las
variadas características de la sangre como la unión de diferentes sustitutos que
satisfagan necesidades particulares. Para el desarrollo de estas sustancias es
necesario conocer más a fondo el comportamiento de la sangre, sus complejas
funciones en el organismo y estudiar bajo modelos experimentales in vitro e in vivo
tanto la eficacia como seguridad de estos productos, no se debe olvidar que
todos los sustitutos en desarrollo, presentan efectos colaterales, por ello debe
valorarse el riesgo/beneficio.
1.1 LA SANGRE
La sangre es un tejido conectivo, con células sostenidas en una matriz fluida
formada de componentes orgánicos e inorgánicos. Es un liquido viscoso, de color
rojo intenso, constituido por una parte liquida o plasma y por una serie de células
como son glóbulos rojos (eritrocitos), glóbulos blancos (leucocitos) y plaquetas
(trombocitos) en suspensión.
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El plasma se puede definir como la porción líquida, acuosa una vez eliminados los
elementos formes y las partículas. Representa aproximadamente el 50% del
volumen total de la sangre y esta constituido por agua, electrolitos, proteínas,
glucosa, grasas, bilirrubinas y gases, contiene hormonas, enzimas, vitaminas y
minerales. Es esencial para el transporte de los elementos celulares de la sangre a
través de la circulación, los nutrientes, el mantenimiento del equilibrio ácido-base
y el transporte de productos de desecho procedente de los tejidos. El plasma y el
líquido intersticial tiene un contenido de proteínas muy similar, de allí su
importancia para mantener la presión osmótica y el intercambio hidroelectrolítico
entre los capilares y los tejidos [Mosby 64].
La sangre cumple múltiples y complejas funciones en el organismo,
primordialmente participa en el intercambio de oxígeno y dióxido de carbono en
los tejidos periféricos y en el envió del dióxido de carbono a los pulmones para su
eliminación. Para ello la sangre transporta gases respiratorios de dos formas
básicas: se sabe que menos del 2% del oxígeno está disuelto en la parte acuosa
del plasma y el resto del oxígeno está unido a la molécula de Hemoglobina. La
Hemoglobina es una proteína globular que se encuentran presentes en grandes
concentraciones en los eritrocitos. Por otra parte los glóbulos blancos, participan
en la fagocitosis de bacterias, hongos, virus y cuerpos extraños, destoxicación de
las proteínas tóxicas producidas en las reacciones alérgicas y las lesiones celulares
y el desarrollo de la inmunidad [Mosby 64]. Por ultimo, pero no menos importante,
el organismo cuenta con un mecanismo de coagulación (hemostasia)
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equilibrado por muchos sistemas complejos para evitar la hemorragia a la vez que
se previene la coagulación intravascular, este mecanismo se encuentra
directamente relacionado con las plaquetas y el flujo de sangre dentro de los
vasos sanguíneos[Ganon 90].
1.2 FISIOLOGÍA DEL TRANSPORTE DE OXÍGENO.
Una de las “desventajas” que se adquiere, gracias a la disposición anatómica y
fisiológica de los organismos grandes, es la incapacidad de que sus células
individualmente interactúen con el medio ambiente que les rodea, esto debido
a la necesidad de mantener una cubierta protectora que los recubra y que
limite el acceso o contacto de cualquier cantidad de agentes que podrían
acabar fácilmente con sus células. Gracias a esta cubierta (piel) los organismos
logran impermeabilizarse y mantener mecanismos para protegerse, pero eso
conlleva a la necesidad de que exista una superficie de intercambio
especializada, tal como es el pulmón o una branquia, así como un sistema de
circulación, a través del cual pueda haber un intercambio de gases y otras
necesidades como nutrientes o productos de desecho, para que todas las células
sean satisfechas [Devlin 99]. En este momento se pueden definir dos tipos de
respiración: la respiración externa es el intercambio de gases entre la sangre y el
exterior, y la respiración interna es el intercambio de gases entre la sangre y los
tejidos.
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El O2 y el CO2 son transportados entre los pulmones y el resto de los tejidos por
medio de la sangre. Estos gases en la sangre se encuentran en un muy bajo nivel
presentes de forma física en la sangre, la mayor parte de estos se encuentra
directamente relacionada con la presencia de algún tipo de interacción con la
hemoglobina, que es la proteína mayoritaria del eritocrito [Devlin 99].
Básicamente existen 2 formas para transportar oxígeno: disuelto en la sustancia, o
unido a una molécula que lo transporte. En la sangre ambos mecanismos se
presentan [Dietz]. Se sabe que menos del 2% del oxígeno está disuelto en la parte
acuosa del plasma y el resto del oxígeno está unido a la molécula de
hemoglobina. La mitad hemo-hierro de la molécula de hemoglobina permite el
alojamiento y la liberación de oxígeno, en función de la tensión parcial del
oxígeno a la cual la hemoglobina es expuesta. La estructura tetramérica de la
porción de la proteína permite a la hemoglobina enlazar cuatro moléculas de
oxígeno dentro de las cavidades en las subunidades de cada proteína [Leone
98].
La hemoglobina forma una combinación química reversible con el oxígeno
cuando está en contacto con un medio rico en este gas, como es la atmósfera.
Este contacto tiene lugar en los capilares de los órganos respiratorios, las
branquias y los pulmones. La hemoglobina en combinación con el oxígeno (la
oxihemoglobina) es más ácida y, en consecuencia, provoca la disociación de los
iones bicarbonato y carbonato de sodio del plasma sanguíneo. Cuando la sangre
oxigenada (rica en oxihemoglobina) llega a los tejidos, el balance de oxígeno se
invierte y la hemoglobina libera oxígeno. Al volverse más básica, provoca la
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liberación de iones sodio que se combinan con el dióxido de carbono
procedente de los tejidos para formar bicarbonato de sodio.
Las interacciones hemoglobina – oxígeno generan cambios de conformación
estructural que facilitan la carga y descarga del oxígeno en la circulación
pulmonar y los tejidos periféricos, respectivamente. La curva de fijación de
oxígeno de la hemoglobina de la sangre normal tiene forma sigmoidea, no
hiperbólica, y no puede ser descrita mediante la expresión correspondiente a un
equilibrio sencillo. La hemoglobina se constituye en un portador fisiológico de
oxígeno muy bueno, en los pulmones bajo condiciones normales la hemoglobina
está saturada en un 98% y en un músculo activo solo es cercano a un 33%, lo que
indica que cede cerca del 65% de oxígeno que puede transportar [Devlin 99]. La
eficiencia de la captura y liberación de oxígeno puede sin embargo ser alterada
por el balance ácido – base, la presión parcial del dióxido de carbono, la
temperatura y el 2,3-difosfo-glicerato [Leone 98].
Tomado y adaptado de [Devlin 99] Figura 1. Curva de disociación de oxígeno.
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1.3 “HEMOSUSTITUTOS”.
La palabra “hemosustituto” procede de la unión del prefijo griego con que se
denota sangre (hâima) y el vocablo sustituto, procedente del latín subtitutus, que
significa colocar en lugar de otro. Los términos “sangre artificial” y “hemosustituto”
son frecuentemente usados de forma indebida puesto que supone la sustitución
de la sangre en todas sus funciones.
Básicamente, los productos en desarrollo y aplicados en este proyecto, remplazan
volumen y/o transportan O2 y CO2 intravascularmente por corto tiempo; no se
cumple con muchas otras funciones que realiza la sangre como son metabolismo,
regulación, hemostática y sistema de defensa, por ello el termino “portadores de
oxígeno” define mejor el tipo de sustancia en estudio en este proyecto.
1.3.1 PORTADORES DE OXÍGENO. (Oxygen Carriers –OC)
Dentro de las características de los transportadores de O2 inyectables, éstos
deben tener gran afinidad por el O2, para absorberlo durante su paso a través
del lecho capilar pulmonar, alcanzando luego tejidos y órganos. También deben
tener mayor afinidad por el CO2, para liberar el oxígeno rápida y eficazmente a
todos los órganos. Los portadores de oxígeno deben estar preferiblemente libres
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de actividades fisiológicas diferentes a la liberación de oxígeno para no
perjudicar los mecanismos cardiovasculares compensatorios que normalmente
previenen la hipoxia de los tejidos conservando las ventajas de la hemodilución y
otras funciones corporales [Riess 01]. Desde el punto de vista logístico, debe ser
fácilmente utilizable, estable a los cambios de temperatura y universalmente
compatible. Además debe tolerar un tiempo aceptable de almacenamiento,
una persistencia intravascular satisfactoria y ser eficaz a aire ambiente. En cuanto
a la seguridad tisular, debe estar libre de efectos secundarios que puedan
producir disfunción orgánica.
Recientes investigaciones y estudios de este tipo de sustancias con características
tan específicas se ha centrado en dos tipos de materiales ácelulares, ya sea en
base de emulsiones de perfluorocarbono o de derivados de hemoglobina. De
esta manera, el mecanismo fundamental del transporte de oxígeno es
rotundamente diferente al de los hematíes
1.3.1.1 Portadores de oxígeno basados en hemoglobina.
Los portadores de oxígeno basados en hemoglobina modificada se pueden
dividir en dos grandes grupos:
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I. Soluciones de hemoglobina (Hb)
En 1930, Amberson, inicia las primeras investigaciones con Hb bovina en solución
salina intravenosa. Posteriores experimentos se realizaron pero con presencia de
altas presiones arteriales y disfunciones renales. Los efectos secundarios se debían
a una inadecuada purificación que podía activar la cascada del complemento
por lo que era necesario remover los estromas de las células de los glóbulos rojos
de la solución de Hb. Cuando la Hb es liberada de los eritrocitos humanos, se
disocia (cambia su estructura química y sus enlaces alfa y beta) y esto hace que
disminuya su peso molecular y su tamaño. Cambia de forma tetramérica a un
dímero que es filtrado por los riñones disminuyendo el tiempo de permanencia en
la circulación intravascular. Actualmente el desarrollo de portadores de oxígeno
basados en hemoglobina está obteniendo resultados satisfactorios en cuanto a
las limitaciones descritas; así como también ha explorado otras fuentes de
obtención de hemoglobina libre de estroma con buenos resultados [Leone 98]. En
años recientes se ha avanzado profundamente en el entendimiento de los
mecanismos de los efectos secundarios de la infusión de Hb, principalmente la
vasoconstricción y consecuente hipertensión, efectos observado en la primera
generación de Hb y que resultaron ser un inconveniente para el posible uso
clínico.
En la actualidad se desarrolla Hb de enlace cruzado intramolecular, Hb
polimerizada, Hb conjugada y Hb de microburbujas. Existen diferentes fuentes de
Hb, entre las cuales se destacan la humana, bovina y las de biotecnología.
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Sus ventajas son: a) alta capacidad para transportar y liberar O2 y CO2 bajo
condiciones fisiológicas; b) buena capacidad para el oxígeno en una presión
parcial de oxígeno fisiológica; c) presenta capacidad oncótica; d) larga vida en
almacenamiento; e) es posible la esterilización/inactivación viral; f) ausencia de
antígenos propios de la sangre [Stowel 01].
Las desventajas principales son: a) vida media plasmática corta (18-58 h); b)
potencial toxicidad renal (Hb no modificada); c) vasoactividad (efectos
hipertensivos por unión con el óxido nítrico); d) probable riesgo de sepsis (por
posible daño al sistema retículo endotelial y aumento del crecimiento bacteriano
por medio de la fuente de hierro) [Stowel 01].
Se han realizado estudios en fase III (clínica) con diferentes productos en
diferentes situaciones: PolyHeme® (Northfield Laboratories Inc.) en pérdida aguda
de sangre, en cirugía y trauma, en donde se mantuvieron niveles de Hb
adecuados y se disminuyó la transfusión sanguínea. Hemopure® (Biopure
Corporation, Cambridge, Massachusetts, EUA) en cirugía cardiaca y no cardiaca,
con lo cual difieren la transfusión sanguínea. En virtud de la vida media
plasmática corta, su utilidad se limita a situaciones de urgencia [Stowel 01].
II. Hemoglobina encapsulada en liposomas (LEH).
Según Chang una molécula de Hb encapsulada podía tener pocos efectos
colaterales, larga vida intravascular y mayor capacidad de transporte de
oxígeno. Así, en 1957, propone encapsular la Hb dentro de una seudo membrana
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de lípidos o liposomas (LEH). La membrana, que realmente es la parte artificial de
un eritrocito sintético, está compuesta por una doble capa de fosfolípidos con
moléculas de colesterol adicionado para mayor estabilidad. Una vez
administrados son consumidos por el sistema retículo endotelial con lo que
podrían disminuir la resistencia a las infecciones. Existen varios métodos de
fabricación algunos aún están en desarrollo.
La mayor desventaja implica las dificultades técnicas para la preparación de
liposomas de un tamaño uniforme; sin embargo, se continúa su investigación, ya
que este tipo de sustituto aún no llega a estudios clínicos en humanos. La
Administración de Drogas y Alimentos de las Estados Unidos (FDA por sus siglas en
inglés) no ha establecido aún la eficacia para ninguno de los sustitutos bajo
desarrollo, excepto para el uso de anemia en aplicaciones veterinarias. El
establecimiento de la seguridad de estos sustitutos aún no está enteramente
claro, tampoco el balance de riesgo-beneficio es uniforme [Stowel 01].
1.3.1.2 Portadores de oxígeno basados en perfluorocarbonos.
Debido a la importante capacidad de disolver altas cantidades de O2 y CO2,
líquidos perfluorocarbonados han sido propuestos como posibles sustitutos
portadores de oxígeno. A 37°C la solubilidad de O2 es usualmente entre 15 y 20
veces mayor que en el plasma y con el CO2 es aproximadamente 3 veces mayor
que en el plasma [Biro 87]. Su historia se remonta a 1966, cuando los trabajos
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pioneros de Clark y Gollan demostraron que las emulsiones fluorocarbonadas
(PFC) tienen la capacidad de transportar oxígeno, cuando reportan la sobrevida
de un ratón que accidentalmente estuvo sumergido en una solución
perfluoroquímica por un periodo prolongado de tiempo [Stowel 01]. Sin embargo,
las características hidrofóbicas de este líquido, vislumbraron la necesidad de
preparar una microemulsión inyectable para poder utilizarlos como portadores de
oxígeno intravascular [Riess 01].
Las microemulsiones de perfluorocarbono son un mecanismo de transporte de
oxígeno intravascular temporal. Estas soluciones estas compuestas de una fase
acuosa con electrolitos, para regular el pH y la presión osmótica; una fase oleosa,
que contiene el perfluorocarbono; y un surfactante, que forma un sistema
monofásico, con las otras dos fases [Galindo 02].
Los PFCs no se encuentran presentes en la naturaleza, son producidos al sustituir
átomos de hidrógeno en un compuesto orgánico por átomos de flúor [Riess 98].
Los compuestos químicos perfluorocarbonados están formados principalmente
por carbono y flúor, aunque también pueden contener bromo, nitrógeno u
oxígeno. Su gran capacidad para disolver gases los convierte en un medio posible
para el transporte de oxígeno a los tejidos del cuerpo.
Un factor importante es que la solubilidad de sólidos y otros líquidos en estos
compuestos es muy baja, lo que evita que sea contaminado fácilmente por
partículas extrañas. El tamaño de los átomos de flúor en comparación con el
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tamaño de los átomos de hidrogeno, es mucho mayor y su alta densidad de
electrones hace que se forme un escudo compacto de electrones que garantiza
una protección efectiva de la cadena; también ejerce un efecto repulsivo en
contra de la mayoría de reactivos y enzimas [Riess 98].
Según el arreglo molecular de los químicos perfluorocarbonados, éstos pueden
clasificarse en 5 grupos básicos: Cadena abierta, Cadena ramificada, Anillo,
Doble Anillo y Triple Anillo [Goodin 94]. Vale la pena destacar que aunque se
pueden sintetizar un sin numero de compuesto de este tipo, solo unos pocos sirven
como hemosustitutos; muchos poseen una afinidad por el oxígeno muy alta o muy
leve para ser usada en sistemas biológicos, mientras que otros generan efectos
tóxicos secundarios de gran magnitud [Vásquez 01]. Los líquidos
perfluorocarbonos que se suelen usar como portadores de oxígeno son
moléculas de 8 a 10 átomos de carbono con pesos moleculares en un rango de
450 a 500 [Spahn 00].
En los PFCs el oxígeno se encuentra disuelto, no unido químicamente al elemento
como sucede con la hemoglobina. En contraste con el enlazamiento químico del
O2 al sitio porfirina-hierro de la hemoglobina, la disolución del O2 en los
perfluorocarbonos ocurre pasivamente, con las moléculas de gas ocupando los
espacios intermoleculares del perfluorocarbono líquido. La solubilidad de los gases
en el PFC se relaciona con la debilidad de las fuerzas intramoleculares de Van der
Waals que existen entre las moléculas de fluorocarbonos y eventualmente a la
posición del flúor en el extremo superior derecho de la Tabla Periódica de los
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Elementos [Riess 98]. Interacciones tan débiles permiten que se introduzcan
fácilmente las moléculas de gas en el PFC. Además, dichas interacciones en los
PFCs, son las responsables de la baja tensión superficial, baja constante
dieléctrica, alta fluidez y alta compresibilidad [Riess 98].
Las características sigmoidales de la curva de disociación de oxígeno de la
hemoglobina no se cumple con el PFC, la solubilidad de O2 en los
perfluorocarbonos y sus emulsiones se incrementa linealmente con la presión
parcial del O2 (pO2) de acuerdo a la Ley de Henry, donde la disolución física de
los gases en éstos es directamente proporcional a la presión parcial del gas [Lowe
01]. La solubilidad del oxígeno en un PFC especifico esta relacionada entonces
con la solubilidad del PFC para este gas. Los principios que gobiernan el
transporte de oxígeno en las microemulsiones de PFC son básicamente los mismos
a los que operan para el plasma. Aunque en ambos casos la disolución es
proporcional a la presión parcial del oxígeno, la solubilidad del oxígeno en el PFC
es distintivamente 20 veces mayor que la del plasma. Los enlaces de Van der
Waals entre el oxígeno y las moléculas de PFC son de un orden de magnitud más
débil que el enlace de coordinación covalente O2-Fe(II) en la Hb, reflejando en
proporciones y radios de extracción mucho más altos que se usualmente se
acerca al 90% con emulsiones de PFC, comparado con el 25% de la Hb en
condiciones normales
Las características del intercambio de oxígeno se ven afectadas únicamente por
las características físico-químicas de la microemulsión a administrar , dado que los
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PFC no presentan una notable degradación en el tiempo y tampoco presentan
oxidación, no se presenta cambios durante la circulación o por almacenamiento
Debido a su inmiscibilidad con los sistemas acuosos como la sangre y otros fluidos
corporales la administración intravascular de los PFCs fue posible cuando Sloviter,
y luego Geyer, los formularon como emulsiones [Riess 98]. Esta emulsión consiste
en una dispersión de moléculas muy pequeñas de fluorocarbono en una solución
fisiológica electrolítica que debe ser muy estable en presencia de sangre y otros
fluidos biológicos [Riess 98]. Es el resultado de mezclar un compuesto insoluble en
agua en forma de gotículas dentro de una matriz acuosa. Cada gotícula se
encuentra recubierta por una capa delgada de surfactante, sustancia que se
adhiere a la superficie de pequeños conglomerados moleculares en el
compuesto y que sirve como emulsificante y estabilizador de la emulsión [Riess
98]. Los surfactantes constituyen el recubrimiento externo de las gotas de
perfluorocarbono, de allí que sea de suma importancia la escogencia del
surfactante o composición de estos para obtener las mejores características
esenciales de las emulsiones, manteniendo buena estabilidad y
biocompatibilidad.
Los polaxameros (p. e. bloques poliméricos de polioxietileno, polioxipropileno)
como el polaxamero 188 (Pluronic® F-68), lecitina de huevo y más recientemente
surfactantes fluorados, se encuentran dentro de los surfactantes que han sido
utilizados en el desarrollo de las emulsiones de perfluorocarbono. Pluronic ® F-68
fue el surfactante primario utilizado en Fluosol® (sin embargo contenía pequeñas
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23
cantidades de lecitina y oleato de potasio). No obstante, la emulsión obtenida
con este surfactante presentaba baja estabilidad y dificultades en la esterilización
[Riess 01] [Riess 98]. Las otras dos emulsiones de primera generación que también
utilizaron polaxameros como emulsificante y que se han probado en humanos
son: Perftoran (conocido como Ftorosan,, Perftoran Co. Puschino, Rusia) y
Emulsion noll (Institute for organic Chemistry, Shangai, China), [Lowe 01][Galindo
02].
Las lecitinas de yema de huevo, tienen la gran ventaja de haber sido usadas por
más de 25 años en la producción de emulsiones lipídicas para nutrición
parenteral, y ser bien recibidas por la comunidad médica. No obstante, se
observaron mejoras significantes en la estabilidad con el uso de lecitina de huevo
respecto a Pluronic ® F-68, en razón al excelente balance hidrofílico-lipofílico entre
la lecitina y perflubron, que resulta en mejor adhesión entre las cadenas
hidrofóbicas y el perflubron comparada con otros perfluorocarbonos [Lowe
01][Galindo 02].
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24
Primera generación de emulsiones de perfluorocarbono inyectable [Galindo 02]
Fluosol ®, es el arquetipo de las preparaciones de la primera generación.
Emulsión que fue inestable, requería transporte y almacenamiento en condiciones
refrigeradas, reconstitución previa a su uso y debía ser utilizada dentro de pocas
horas [Riess 01]. Estas se constituyeron en razones limitantes para su uso, dado
que los incómodos procedimientos de preparación y manejo representaron un
inconveniente para su utilización, al lado de la necesidad de realizar pruebas
previas en el paciente de la sensibilidad al Pluronic®. Se presentaron otras
deficiencias en el uso de este PFC, ejemplos claros son: el reducido transporte de
oxígeno, debido al bajo contenido de perfluorcarbonos (alrededor del 10 % vol),
la baja solubilidad de oxígeno por parte de estos y el uso de cantidades
significante de un perfluorcarbono de larga vida en la formulación, como es el
perfluorotripropilamina (tiempo de vida media 65 días aproximadamente) en la
tabla 1 se presenta algunas de sus características [Riess 98].
Tabla 1 Composición de Fluosol ®
Composición % w/v Función Perfluorodecalin Perfluorotripropilamina Pluronic ® F-68 Lecitina de huevo Oleato de potasio Glicerol NaCl KCl MgCl2 CaCl2 NaHCO3 Dextrosa
14.0 6.0 2.7 0.4 0.03 0.8 0.60 0.034 0.020 0.028 0.21 0.18
Portador de oxígeno Emulsificantes Crioprotector Balance iónico, control de pH y presión osmótica
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25
Fuente: Riess J. 2001. Oxygen carriers (“Blood substitutes”)-Raison d’Etre chemistry, and Some physiology. Chemical Reviews. Vol. 101, No 9, 2866. Las emulsiones de que se desarrollaron en Rusia y China, Perftoran y Emulsión nov,
eran similares a Fluosol®, en cuanto a su formulación, por lo que básicamente
sufrieron los mismos inconvenientes [Lowe 01].
El fracaso comercial de Fluosol®, se atribuye a la inestabilidad del producto y los
requerimientos para su manipulación. Por eso fue importante comprender la
estructura y mecanismos de desestabilización de la emulsión para obtener
productos con características satisfactorias [Galindo 02].
Segunda generación de productos
El superar los inconvenientes encontrados en el desarrollo de los primeros
productos es el reto de esta nueva etapa. Oxygent®, una de las emulsiones más
avanzadas de esta generación, desarrollada por Alliance Pharmaceutical Corp.;
utiliza como perfluorocarbono, perflubron y como emulsificante lecitina de huevo;
y ha mejorado algunos de los aspectos limitantes de los productos de primera
generación. La adición de pequeñas cantidades de perfluordecil bromuro, un
agente represor de la difusión molecular, representó una mayor estabilidad a
largo tiempo; la concentración del perfluorocarbono (típicamente 60% w/v ~31 %
v/v) fue aumentada, las emulsiones resultantes fueron esterilizables, y se optimizó
la formulación y el proceso de fabricación de las emulsiones iniciales obteniendo
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26
como resultado final emulsiones que podían ser almacenadas bajo condiciones
estándar de refrigeración hasta por dos años, sin la necesidad de
manipulaciones adicionales antes de su uso. La tabla 2. presenta algunas de las
propiedades de Oxygent TM [Riess 98]. La actual emulsión de Oxyfluor® es una
emulsión de PFDCO al 76% w/v emulsificada con aceite alazor (pH 7.2 –7.5) y el
tamaño de partícula entre 0.22 – 0.25 µm [Galindo 02].
Tabla 2. Propiedades de OxygentTM
Propiedad Valor Contenido de PFC (% w/v) Diámetro medio de gota (µm) pH Viscosidad (cp) Osmolaridad (mOsm/ kg) Esterilizable, no pirogénica Estabilidad
60.20 ± 0.06 0.17 ± 0.01 7.10 ± 0.04 4.0 ± 0.1 304 ± 6 > 1 año a 5 –10 °C
Fuente: Lowe, 2000. Second-generation perfluorocarbon emulsion blood substitutes. Art. Cells, Blood Subs. and Immob. Biotech. 28 (1), 25-38 El tamaño de partícula y la distribución de las gotas, requieren ser controladas
cuidadosamente, porque las partículas pequeñas (diámetro < 0.2 µm), pueden
evadir el sistema retículo-endotelial con mayor facilidad, para obtener mayor
persistencia intravascular con menores efectos secundarios. No obstante, la
tecnología para la producción de tales partículas envuelve la utilización de
métodos mecánicos de alta presión, como los homogenizadores o
microfluidizadores, que en laboratorios bien acondicionados permiten tener
capacidades de producción cercanas a la demanda esperada.
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27
1.3.1.3 Toxicidad y efectos secundarios del uso de PFC.
En los primeros periodos de ensayo hubo la tendencia de culpar a los PFC por
cualquier tipo de reacción observada en los animales posterior al suministro de las
emulsiones de PFC [Zuck 94]. Notaron, a medida que avanzaban las
investigaciones, que dichas reacciones eran resultado de impurezas en el PFC, al
uso de otros ingredientes en la formulación o a características inapropiadas de la
emulsión usada en el momento del estudio [Zuck 94].
Las emulsiones de perfluorocarbonos son dispersiones de pequeñas gotas de
perfluorocarbono en una solución fisiológica de electrolitos. Cada gota esta
recubierta con una delgada capa de surfactante que actúa como emulsificador
y estabilizador. El diámetro de estas emulsiones, típicamente varía en el rango de
0.1 – 0.2 µm, es decir entre 30 –70 veces menos que el tamaño de los glóbulos
rojos. Las gotas de emulsión de perfluorocarbono se convierten en material
particulado y después de la opsonización, básicamente las gotículas son
eliminadas progresivamente de la circulación por los macrófagos. Retenidas
temporalmente en los órganos del sistema de macrófagos titulares (compuesto
principalmente por el hígado, el bazo y la médula ósea). Posteriormente
reintroducidas a la circulación por medio de los portadores de lípidos con una
relación que depende de la solubilidad del PFC en los lípidos. Éste es
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28
eventualmente liberado en cada pasada a través del lecho capilar pulmonar y
excretado sin ningún cambio como vapor con el aire expirado [Zuck 94][Riess 01].
Para que finalmente la persistencia intravascular sea limitada (la vida media en
dosis clínicas, típicamente se encuentran en el rango de 4 –15 horas) [Lowe
01][Riess 01][Riess 98].
La gradual acumulación de perfluorocarbonos en el hígado, médula ósea y bazo
en los pacientes tratados con hemosustitutos perfluorocarbonados ha sido
observada en muchos experimentos; en caso de aplicar elevadas o repetidas
dosis se puede producir saturaciones del sistema retículo endotelial, lo que en
consecuencia representa una depresión transitoria de la capacidad de respuesta
del sistema de defensa del organismo [Zuck 94].
Se ha documentado algunos efectos secundarios producto de la aplicación de
PFC-OC durante experimentación tanto en animales como en humanos. Posterior
a la aplicación de PFC en pacientes voluntarios (concientes), se manifiesta
inicialmente la sensación de resfriado (“ flu-like”) con dolores moderados de
cabeza y espalda, destellos o parpadeos faciales; dos horas y media después
presentan nausea, fiebre y escalofrió, acidosis metabólica y respiratoria, efectos
catalogados como leves y usualmente reversibles al cabo de 12 a 24 horas, otros
efectos que se presentaban en los días posteriores eran descenso en el conteo de
plaquetas y picos febriles [Zuck 94][Lutz 85].
IM-2004-I-12
29
1.3.1.4 Perfluorocarbonos y hemoglobina
Los portadores de oxígeno basados en Hb y PFC presentan diferentes
características en el sistema de transporte. Los dos tipos de moléculas no pueden
ser más diferentes en términos de su estructura, mecanismo de toma y transporte
de oxígeno a los tejidos, reactividad y formulación de los portadores (por ejemplo
emulsiones vs. Soluciones) [Riess 98].
Debido al mecanismo de absorción y transporte de oxígeno de cada portador,
los PFC-OC pueden liberar el oxígeno transportado con una eficiencia de
alrededor del 90 % comparado con la Hb-OC de únicamente el 25 – 30%, como
se puede observar en la figura 3.[Riess 98].
tomado de [Keipert 94] NOTACIÓN: C O2 = CONCENTRACIÓN DE O2; P O2 = PRESIÓN PARCIAL DE O2.
Figura 2. Curva de disociación de oxígeno para sangre humana y emulsión PFC.
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30
Nótese que el 5 % en volumen de O2 puede ser descargado tanto por la sangre
como por la emulsión de perfluorocarbono. Sin embargo, con la emulsión de PFC,
se requiere mayores valores de pO2. Además que el O2 transportado por emulsión
de PFOB es mas completamente descargado que el O2 transportado por la
sangre. Resultando en aproximadamente en una relación de extracción de O2
(O2~Ex.) de 90 y 25%.
1.4 POTENCIALES APLICACIONES CLÍNICAS DE HEMOSUSTITUTOS.
Considerando los obstáculos en el desarrollo y las limitaciones de consecución de
productos, algunas aplicaciones de sustitutos portadores de oxígeno son mas
viables que otras. En general su uso es de gran importancia en Cirugías (bypass
cardiopulmonar, trauma, cáncer, ortopedia y otras cirugías de carácter electivo),
resucitación de emergencia por hemorragia traumática, tratamiento de shock y
hemodilución normovolémica.
1.4.1 HEMODILUCIÓN NORMOVOLÉMICA (HN).
1.4.1.1 Volumen sanguíneo.
La volemia corresponde al volumen o cantidad de sangre circulante en el
organismo, usualmente se expresa como volumen (ml), relaciones: de volumen-
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31
peso (ml/Kg o ml/lb) ó en porcentaje como proporción directa con el peso
corporal ( %), ver tabla 3.
Especie Volumen sanguíneo normal ml/lb
Peso Corporal %
Rata 25 6-7
Conejos 35 6-7
Gatos 28-30 6-7
Perros 35-40 8-9 Tomado y modificado de [Medway 90]
Tabla 3 Volumen de sangre en algunos animales.
La regulación del volumen en de sangre el organismo depende de: los factores
que controlan el nivel de eritrocitos y de los factores que regulan la cantidad de
plasma (presión sanguínea, producción de orina, gasto cardiovascular, sed,
ingestión de sodio y acción hormonal de la aldosterona y hormona antidiurética
[Medway 90].
Se puede presentar disminución en los componentes celulares por pérdida
rápida de células, como ocurre en hemorragias. La hemólisis y la insuficiencia
para formar células usualmente poco afectan el volumen sanguíneo total
[Medway 90].
Por otra parte las disminuciones del componente plasmático resultan por pérdidas
de líquidos en intestino, riñones, piel o pulmones [Medway 90]. Lesiones de
paredes vasculares pueden representar perdida de plasma (solo ó con eritrocitos)
[Medway 90]. La cantidad de sodio suministrada o perdida es de gran influencia
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32
para la cantidad de plasma en el organismo, así la baja en volumen de plasma se
puede deber a perdidas de sodio, y el aumento a fallas en el control de niveles
de sodio ó a la excesiva ingestión del mismo.
En animales como el caballo, el perro y el gato, el funcionamiento del bazo esta
altamente desarrollado. El bazo funciona como almacén de reserva de eritrocitos
[Medway 90], efecto conocido como secuestro esplénico. La contracción del
bazo producida durante periodos de excitación, ejercicio violento e incluso
durante o inmediatamente después de una hemorragia, se ve reflejado en la
elevación del volumen sanguíneo causado por la adición de eritrocitos; motivo
por el cual el cuentas como cantidad de eritrocitos, hemoglobina y hematocrito
se ven aumentadas [Medway 90]. Pero no se debe esperar alteraciones en
concentraciones de proteínas plasmáticas.
El bazo, además de almacenar eritrocitos y plaquetas, interviene en distintas
funciones, como son defensa, hemopoyesis y la destrucción de hematíes y
plaquetas, produce leucocitos, monocitos, linfocitos y células plasmáticas [Mosby
64]. Fabrica hematíes antes del nacimiento y se cree que posterior al nacimiento
puede fabricar hematíes bajo condiciones de anemia hemolítica muy grave. Los
macrófagos que recubren los senos esplénicos destruyen microorganismos por
fagocitosis. En humanos bajo condiciones de hemorragia intensa puede, en
menos de 60 segundos, aumentar el volumen sanguíneo entre 350 y 550 ml
[Mosby 64].
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33
1.4.1.2 Hemodilución.
La hemodilución, término empleado para definir la dilución de la sangre, tuvo sus
inicios poco después del descubrimiento de los grupos sanguíneos. Panico y
Neptuno llevan a cabo la técnica de hemodilución en cirugía cardiaca hacia el
año 1959 para evitar el uso de sangre para el llenado del sistema en la circulación
extracorpórea con relativo éxito [Argüero 00].
Este procedimiento es usado en pacientes programados a cirugía electiva que
normalmente requerirían transfusión y en estudios que simulan circunstancias
determinadas de anemia inducida por retiro controlado de sangre. La dilución de
la sangre hasta un valor del hematocrito de 20 - 25 % se denomina hemodilución
moderada, y cuando el hematocrito disminuye a valores alrededor de 10% se
refiere como dilución extrema. La hemodilución intencionada tiene tres aspectos
manifiestos: 1) procura la disminución de la viscosidad sanguínea al descender el
hematocrito, 2) reduciendo la capacidad de transporte de oxígeno de la sangre,
lo que resulta en 3) un aumento del gasto cardiaco y del volumen latido por
aumento del retorno venoso. La respuesta a la baja en la capacidad de
transportar oxígeno se ve compensado de tres maneras diferentes: 1) incremento
en la velocidad del flujo sanguíneo, 2) aumento en la extracción tisular de
oxígeno y 3) desplazamiento de la curva de la hemoglobina hacia la derecha o
disminución de la afinidad por oxihemoglobina.
IM-2004-I-12
34
Se sabe actualmente que los cambios fisiológicos que se aplican a la
hemodilución están relacionados con diversos factores de la serología sanguínea,
alterando de forma diversa y transitoria la fisiología de la microcirculación [Salazar
98]. En estudios anteriores se ha demostrado que la HN incrementa la fluidez de la
sangre, disminuye la segregación de eritrocitos y trombocitos, reduce la
viscosidad del plasma, descongestiona la circulación pulmonar, mejora la
microcirculación y la oxigenación de los tejidos [Cernaianu 94].
1.4.1.3 Normovolémia.
La Hemodilución Normovolémica consiste en extraer cantidades controladas de
sangre total de un paciente inmediatamente antes de la cirugía y
simultáneamente reemplazarla con un líquido ácelular , como soluciones de
cristaloides, coloides y/o portadores de oxígeno, conservando así el volumen
sanguíneo circulante en sus límites normales (normovolémia). La hemodilución se
considera normovolémica cuando el volumen de exanguinación es recuperado
en forma equiparable por medio de infusión de fluidos intravasculares,
hipovolémica cuando la exanguinación intencional o accidental es superior al
volumen de fluidos administrados, e hipervolémica cuando la resustitución del
volumen es superior a la cantidad de la sangre pérdida.
Cuando se realiza la hemodilución en condiciones de isovolémia e isooncóticas
las principales característica son la disminución de la viscosidad de la sangre y el
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35
cambio de la capacidad de transportar oxígeno. Por ello la gran mayoría de las
formas de sustitución o reemplazo de sangre tienen como objetivo realizarla de
forma que se mantenga la normovolémia. Las variables que pueden ser
manipuladas en la selección de las propiedades de transporte para el fluido con
el cual se implementa la presión oncótica, la viscosidad y la capacidad de
transporte de oxígeno de la mezcla de la sangre original y el sustituto [Sunder 75].
1.4.2.3.1 Uso clínico de la hemodilución normovolémica.
La hemodilución surgió a partir del aprovechamiento de las reservas fisiológicas
del organismo, pues preserva el tejido isquémico marginal mediante una mayor
fluidez de la sangre, el aumento de la velocidad del flujo, la disminución de la
concentración de hematíes, la reducción de la viscosidad de la sangre y el
mejoramiento del microcirculatorio en los tejidos isquémicos.
En operaciones de cirugía electiva la sangre extraída es coleccionada en bolsas y
son devueltas al paciente durante o al final de la cirugía, según el sangrado
intraoperatorio y las necesidades del paciente, es decir se le transfunde su misma
sangre sin los riesgos propios de transfusiones alogénicas y sin los trámites y costos
de la transfusión autóloga.
Los beneficios de este método son claros para el paciente y para el centro
asistencial. Las unidades obtenidas por hemodilución no necesitan de ningún tipo
IM-2004-I-12
36
de pruebas así que su costo es mucho mas bajo que las de donación autóloga
de sangre. Como las unidades de sangre no se sacan de la sala de operaciones,
la posibilidad de un error administrativo que pueda conllevar a una
incompatibilidad ABO, son teóricamente eliminadas. La sangre obtenida por
hemodilución no requiere inversión de tiempo por el paciente ya que se hace al
momento de la cirugía y no prolonga el tiempo de ella o de la anestesia.
Disminuye el número de transfusiones. Se suprime el riesgo de contagio de
enfermedades infecciosas producida por transfusiones alogénicas, desaparición
del riesgo de reacciones alérgicas y de incompatibilidad entre la sangre del
donante y del receptor. Facilidad para ciertas comunidades religiosas, como los
testigos de Jehová que no aceptan sangre de donantes pero sí este método.
1.5 REPOSICIÓN Y MANTENIMIENTO DE LÍQUIDOS: FLUIDOTERAPIA.
Existen muchas soluciones ya preparadas para la reposición de déficit de líquidos.
En función de su distribución corporal, las soluciones intravenosas utilizadas en
fluidoterapia pueden ser clasificadas en soluciones cristaloides, cuando se
componen de electrólitos y otros solutos, como la glucosa, que son capaces de
entrar a todos los compartimentos hídricos corporales, y coloides, cuando llevan
sustancias que sólo se distribuyen a nivel del espacio plasmático. Las soluciones
cristaloides tienen las ventajas que son menos costosas que las soluciones
coloides, no son alergénicas y están más disponibles, pero presentan las
desventajas que cuando son utilizadas en grandes volúmenes, se reduce la
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37
presión oncótica del plasma y produce acúmulos de líquido intersticial, lo que
conduce al paciente a un edema pulmonar, sobre todo en los casos de perfusión
prolongada.
A continuación se presenta una tabla descriptiva de los principales cristaloides de
uso frecuente:
Na+ K+ Cl- HCO3- glucosa Ca++ osmolalidad CRISTALOIDE
(mmol/l) (mmol/l) (mmol/l) (mmol/l) (g/l) (mmol/l) (mOsm/l)
NaCl 0,9% 154 154 308
Glucosa 5% 5 252
Ringer 148 4 156 3 (Ca) 310
Ringer lactato 130 4 109 28 (lact) 2 (Ca) 272
Glucosa 3,3% + NaCl 0,3%
51 51 3,3 270
Glucosa 5% + NaCl 0,9%
154 154 5 560
NaCO3H 1,4% 167 167 334
NaCO3H 8,4% 1000 1000 2000
KCl 14,9% 2000 2000 4000
Entre las soluciones cristaloides, se pueden diferenciar las de reemplazo, aquéllas
que tienen una composición electrolítica similar al líquido extracelular, y las de
mantenimiento, soluciones más pobres en sodio y más ricas en potasio que las
anteriores, usadas para cubrir las pérdidas normales obligatorias de agua
(respiratorias, cutáneas, fecales y urinarias).
La solución de reemplazo ideal es el Ringer lactato, la cual es equivalente al
plasma en sodio, potasio y cloro; igualmente lo es en bicarbonato al llevar lactato
que es convertido en bicarbonato a nivel hepático.
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38
La solución de mantenimiento debe poseer unos 40-60 mmol/l de sodio y 15-30
mmol/l de potasio. Una manera sencilla de proveerse de una solución de
mantenimiento es administrar una parte de Ringer lactato o de NaCl 0,9% con dos
partes de glucosa 5%, añadiendo 20 mmol/l de KCl en solución final (10 ml KCl
14,9% por litro de solución final). De forma similar, se puede usar la solución de
NaCl 0,3% + glucosa 3,3%, añadiendo los 20 mmol/l de KCl en solución final.
Las soluciones cristaloides tienen la desventaja que tienden a desviarse
rápidamente del espacio vascular al espacio intersticial y luego al espacio
intracelular. Ej. La Solución Ringer a los 30 minutos de infundida sólo permanece
en el espacio vascular el 25% del volumen. Los coloides no son sustitutos de los
cristaloides, pero reducen hasta en un 40-60% la cantidad requerida de estos. Los
coloides son soluciones con moléculas grandes que no escapan fácilmente del
espacio vascular provocando una expansión del volumen vascular al jalar líquidos
del espacio intersticial y se pueden clasificar como naturales (plasma) y sintéticos
(gelatinas y almidones).
Los coloides naturales principales son albúmina y fracciones proteicas de plasma
humano. La albúmina es sintetizada en hígado. Presenta el mayor poder oncótico
entre las proteínas del plasma, con un peso molecular de 69 000 daltons.
Los coloides sintéticos son mezclas de polímeros de glucosa de varios pesos
moleculares. Por su peso molecular se clasifican en coloide de alto peso
molecular y coloide de bajo peso molecular. Los coloides de alto peso molecular
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39
(más de 69000 Daltons) se retienen durante mayor tiempo en el espacio vascular,
ejerciendo por lo tanto mayor tiempo su efecto de expansión del plasma. Los
coloide de bajo peso molecular tienen moléculas de menor tamaño (no ejercen
mucho tiempo su efecto de expansión del plasma) pero al tener mayor número
de partículas su efecto osmótico (capacidad de jalar líquidos al espacio vascular)
es mucho mayor que los de alto peso molecular. Las gelatinas para uso
terapéutico son derivados de gelatina ósea de ganado vacuno. Existen diferentes
variedades y los más utilizados en cirugía cardiovascular son: Plasmagel, Plasmin,
Haemaccel, y otros. Su peso molecular oscila por los 35 000 daltons y entre el 70 al
80 % de las moléculas están bajo el valor umbral renal y por tanto son eliminadas
por la orina con facilidad. Los preparados de gelatina estimulan la liberación de
mediadores de reacciones alérgicas como son la histamina, la SRL-A y las
prostaglandinas. El grado de hipotensión que puede acompañar a este tipo de
reacciones se debe a la histamina principalmente.
1.6 FORMULACIÓN DE LA EMULSIÓN DE PERFLUOROCARBONO.
En este proyecto se evalúa el uso de una microemulsión perfluorocarbonada
como portador temporal de oxígeno intravascular en un modelo experimental en
caninos. El PFC-OC usado fue desarrollado en la Planta Piloto de Hemosustitutos,
Fundación Cardio-Infantil Instituto de Cardiología, teniendo como base la
metodología de preparación desarrollada en el Trabajo de grado realizado por
Johanna Galindo para optar por el título de Ingeniera Química, en el cual se
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realiza primero una preparación de un concentrado de lecitina en agua, a partir
de Ovothin 160, Epikuron 200 ó Epikuron 170 (Lucas Meyer, GMBH & CO,
Alemania). Paso seguido se realiza una premezcla del concentrado de lecitina
con la fase acuosa y se adiciona a la fase oleosa, que podía ser Perfluorooctil
bromuro ó Perfluorodecalin. En este momento la premezcla es pasada por el
microfluidizador [Galindo 02]. Para criterios de estabilidad y homogeneidad se
realizaron pruebas de envejecimiento acelerado, para observar la estabilidad del
tamaño de partícula y el pH durante el periodo de almacenamiento, y se le
determinó el tamaño de partícula, el pH y la viscosidad [Galindo 02].
La composición propuesta por Long, en la patente U.S. 4,865,836, para la
obtención de emulsiones de perfluorcarbono brominado para uso animal interno
como agente de contraste y portadores de oxígeno, fue la formulación base
para la elaboración de microemulsiones de perfluorocarbono y se describe en la
Tabla 4 y Tabla 5. [Galindo 02].
Compuesto, en solución acuosa Concentración % w/v
Perfluorocarbono Lecitina L-α-tocoferol Glicerol Difosfato de sodio, Na2HPO4 Monofostato de sodio, NaH2PO4
38.36 % 9.1% 0.2 % 1.0 % 0.012 % 0.057 %
Tomado de [Galindo 02] .
Tabla 4. Formula de evaluación de las microemulsiones de perfluorocarbono
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41
Em
ulsif
ica
nte
El agente surfactante fosfolipídico, se debe encontrar en el rango entre 2 –14 % w/v, con cantidades preferidas alrededor de 6 % para concentraciones de 75 % w/v y de 7 – 10 % para concentraciones del 100%. La lecitina por su composición química, posee características tanto hidrofóbicas como hidrofílicas lo que la hacen un surfactante apropiado para el perfluorcarbono.
Ad
itivo
El componente adicional en la formulación de la emulsión de perfluorocarbono se considera que hace que la membrana de la partícula discontinua sea más compatible y fuerte respecto a la continua; este componente adicional podría ser tocoferol, una hormona esteroide, colesterol o preferiblemente una combinación de los tres. Otros nutrientes pueden ser adicionados como glucosa, aminoácidos, proteínas y lípidos.
Se ha encontrado que tocoferoles tales como el alfa tocoferol, y análogos solubles en agua, son antioxidantes apropiados para aumentar el tiempo de residencia de la molécula de oxígeno en la partícula. Estos se deben añadir en cantidades oscilantes entre 0.01 – 0.5 % w/v; también se ha encontrado que retardan la oxidación del lípido surfactante, que disminuye la estabilidad del sistema.
Solu
ció
n sa
lina
La fase acuosa estabilizada con monofosfato y difosfato de sodio como solución buffer, dan un pH final entre 6.8 y 7.2. Adicionalmente la adición de glicerol ayuda a controlar la osmolaridad de la emulsión resultante en la corriente sanguínea
Tomado y modificado de [Galindo 02].
Tabla 5. Característica de la Formula de microemulsiones de perfluorocarbono.
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42
2 METODOLOGÍA.
2.1 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.
Los experimentos fueron realizados en la Sala de Cirugía Experimental de la
Fundación Cardio-Infantil Instituto de Cardiología; con aceptación y revisión del
protocolo por el Comité de Ética de Experimentación Animal de dicha institución;
los análisis de laboratorio clínico fueron realizados en el Laboratorio de Análisis
Clínico Fundación Cardio-Infantil Instituto de Cardiología; los animales fueron
cuidados previo y posterior a los procedimientos en la Clínica Veterinaria de la
Universidad de la Salle.
2.1.1 IMPLEMENTACIÓN DEL PROTOCOLO
El protocolo inicial presentado a continuación se baso en el protocolo diseñado
para la “Evaluación de eficacia y seguridad en un modelo de hemodilución
normovolémica en conejos” necesario para el “Proyecto Hemosustituto” que
desarrolla el grupo de investigación de hemosustitutos en la Fundación Cardio-
Infantil instituto de Cardiología, específicamente dicho protocolo, se uso en el
desarrollo de experimentos en conejos durante el año 2003. Esté es el resultado de
muchos años de experimentación e investigación, como también de observación
de procedimientos realizados para otras investigaciones.
IM-2004-I-12
43
2.1.2 PROTOCOLO EXPERIMENTAL.
I. Implantación de catéteres
Se anestesia el animal con 10 mg/kg xilacina, 40 mg/kg ketamina intramuscular.
Se remueve el pelo en la zona del cuello utilizando una solución depiladora. Por
disección se cateteriza la arteria carótida y la vena yugular utilizando catéteres
monolumen pediátrico calibre 22. Los catéteres se fijan a la región dorsal del
cuello usando cinta y evitando que puedan ser mordidos por el animal. Los
catéteres se llenan con solución salina heparinizada (30 IU/ml).
II. Hemodilución
Criterios de inclusión: el experimento se realiza 24-48 horas después de la
implantación de los catéteres sí 1) FC > 320 ppm, 2) presión arterial media > 80
mmHg, 3) Hct > 45 %, PaO2 > 50 mmHg. El animal se excluye del estudio cuando
se observen signos de inflamación o sangrado.
La línea arterial se utiliza para monitoreo de presión, infusión de fluidos y toma de
muestras de hematología, química sanguínea y gases arteriales. La línea venosa
se utiliza para toma de muestras de gases venosos.
Toma de datos base y pr imer intercambio:
Se estima la volemia como 70 ml/kg. Se verifica el funcionamiento de los
catéteres. Se implementa el monitoreo de ECG y PAM. Se extrae el 40% de la
volemia a una velocidad de 1 ml/min por la línea arterial. Inmediatamente
IM-2004-I-12
44
después se infunde el mismo volumen extraído con Hemacel a 1 ml/kg. Del
volumen extraído se toman las muestras para hematología, química sanguínea y
gases arteriales. Se extrae 1 ml por la línea venosa para gases. Se verifica que el
animal cumpla con los criterios de inclusión.
Toma de datos I1 y segundo intercambio:
Al menos 10 min después de finalizada la infusión del primer intercambio se ventila
el animal con 100% oxígeno. Se extrae el 40% de la volemia a una velocidad de 1
ml/min por la línea arterial. Inmediatamente después se infunde el mismo volumen
extraído con 20% Hemacel y 80% emulsión de PFC a 1 ml/kg. Del volumen
extraído se toman las muestras para hematología, química sanguínea y gases
arteriales. Se extrae 1 ml por la línea venosa para gases.
Toma de datos I 2:
Al menos 15 min después de finalizada la infusión del segundo intercambio se
ventila el animal con 100% oxígeno. Se extrae sangre a una velocidad de 1 ml/min
por la línea arterial para muestras de hematología, química sanguínea y gases
arteriales. Se extrae 1 ml por la línea venosa para gases. Inmediatamente después
se infunde el mismo volumen extraído con 20% Hemacel y 80% emulsión de PFC a
1 ml/kg.
El grado de hemodilución isovolémica es producido por el retiro continuo del 40 %
de la volemia (entendida como 70 ml/kg peso corporal), los cuales son
inmediatamente reemplazados por el mismo volumen de Hemacel,
seguidamente se vuelve a extraer el 40 % de la volemia (Sangre + hemacel) y se
inyecta el hemosustituto de prueba en una solución 80 % hemosustituto + 20 %
IM-2004-I-12
45
hemacel. Al iniciar la segunda hemodilución el sujeto es sometido a una
composición del 100 % en el oxígeno inspirado.
La química sanguínea (fosfatasa alcalina, bilirrubinas y transaminasas) cuadro
hemático y gases arteriales y venosos son determinados en la línea base, al
finalizar la primera hemodilución y después de finalizada la segunda.
2.2 MONITOREO DE VARIABLES.
Con el fin de evaluar el comportamiento del organismo ante el suministro de las
soluciones de reemplazo de sangre se estableció realizar análisis de sangre con el
fin de observar cambios a nivel de calidad y cantidad de las células sanguíneas
(Hematología), esclarecer posibles cambios sustanciales en enzimas de función
hepática (Química), revisar el comportamiento de oxigenación y equilibrio ácido-
base (Gasometría). También se considero de suma importancia el monitoreo de la
temperatura corporal. Para evaluar de forma continua y consistente para todos
los procedimientos las variables mencionadas se medirán con una frecuencia
determinada.
2.2.1 TOMA DE DATOS.
2.2.1.1 Frecuencia de toma de datos.
IM-2004-I-12
46
Para evaluar la respuesta del organismo al procedimiento de la hemodilución de
forma continua se tomaran temperatura, muestras de bioquímica sanguínea,
hematología y gases (arterial y venoso) antes del primer intercambio (muestra 0),
al terminó de este (muestra 1) y al finalizar el segundo intercambio (muestra 2).
Posterior al término de la hemodilución se tomara temperatura, muestras para
hematología y gases cada 15 minutos durante la primera hora (muestras 3, 4, 5, 6);
desde allí cada hora hasta completar las 6 horas posteriores al fin de la
hemodilución (muestras 7, 8, 9, 10, 11, 12); luego se completan las primeras 24
horas tomando cada 6 horas (muestra 12, 13 y 14) y se continua tomando cada
24 horas hasta que sea posible (muestra 15,…) durante los próximos 6 días. Por
otra parte las muestra para química solo se toma en la primera hora (muestra 6), a
las 6 , 12 y 24 horas (muestra 11, 12, 14) y luego cada 24 horas hasta que sea
posible. La figura 3. lo muestra de forma mas clara.
Muestra 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 …
Descripción
pre
vio
mita
d
fina
l
0:15
0:30
0:45
1:00
2:00
3:00
4:00
5:00
6:00
12:0
0
18:0
0
24:0
0
48:0
0
c/
24 h
r
Hematológia
Química
Gasometría
Temperatura
Figura 3. Frecuencia de toma de datos.
IM-2004-I-12
47
2.2.1.2 Obtención de las muestras.
• Las muestras para análisis de gases se obtienen con jeringas de 1 cc.
debidamente marcadas, Art (arterial) y Ven (venosa) respectivamente, y
con un baño de solución heparinizada al 5%. Es muy importante que no se
envíen muestras con presencia de coágulos, por pequeños que estos sean,
ya que podrían obstruir la maquina de análisis de gases. Estas muestras
deben ser analizadas tan pronto como sea posible o depositadas en
nevera lo que induce posibles errores menores con relación al valor real de
las variables.
• Las muestras para hematología y química se deben recoger en tubos
debidamente marcados, Figura 4. para ser llevadas al Laboratorio de
Análisis Clínico de la Fundación Cardio-Infantil instituto de Cardiología. Estos
tubos difieren unos de otros por el uso o no de diferentes anticoagulantes u
otros componentes específicos requeridos para algunas muestras.
Figura 4. Tubos para muestras.
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48
Se usaron Tubos “Tapa Roja”, sin anticoagulante, para muestras de Análisis
Químico.
Los Tubos “Tapa Morada”, con EDTA como anticoagulante, se uso para
muestras de carácter hematológico. El EDTA tiene la ventaja de mantener
la morfología normal de los glóbulos sanguíneos y además impide que las
plaquetas se adhieran a la superficie del tubo y se agrupen. Se debe tener
la misma precaución de no permitir coágulos en la muestra enviada, y
además procurar no causar lisis (rupturas de las células) absorbiendo la
sangre del organismo y depositándola en el tubo de forma controlada. Los
tubos usados permiten, gracias a que vienen presurizados, el deposito de la
muestra punzando con la aguja la tapa, pero esto podría causar la lisis de
los componentes, por ello se recomienda destaparlos y verter la sangre en
el tubo sin el uso de aguja. Para asegurarse de que toda la sangre entre en
contacto con el anticoagulante se debe “batir” suavemente previniendo
la formación de coágulos.
2.2.2 HEMATOLOGÍA
Se determinó realizar pruebas que informen sobre el número y las características
de las células de la sangre con el fin de identificar posibles cambios sustanciales
con la aplicación del PFC.
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49
El término citometría hemática parece ser el más adecuado para referirse a la
medición de las células de la sangre. La correcta interpretación de la citometría
hemática supone el análisis detallado de cada uno de los datos que informa, los
cuales pueden dividirse en tres grandes grupos: datos de la serie roja, de la serie
blanca y de la serie trombocítica.
2.2.2.1 SERIE ROJA
• Hemoglobina (Hb). Se mide en gramos por decilitro (g /dl) y representa la
cantidad de esta proteína por unidad de volumen. Este parámetro debe
ser el único empleado para definir si hay o no anemia, es decir, sólo si las
cifras de hemoglobina son inferiores a los valores normales puede
asegurarse que existe anemia. Los valores de referencia para la
hemoglobina son variables y dependen de la edad, sexo, altura del lugar
de residencia, etc.
• Hematocrito (Hct). Se mide en porcentaje (%) y representa la proporción
de eritrocitos en el total de la sangre. Los valores de referencia para el
hematocrito son variables y dependen de la edad, sexo, altura del lugar de
residencia, etc.
• Numero de Glóbulos Rojos (Erit). Se mide en millones por microlitro (106/µl) y
representa como su nombre lo indica la cantidad de glóbulos rojos
presentes en la sangre.
IM-2004-I-12
50
• Volumen globular (corpuscular) medio (VCM). Es una forma de expresar el
tamaño de los eritrocitos y se mide en femtolitros (fl). Es de suma
importancia en el esclarecimiento de la causa de una anemia.
• Hemoglobina corpuscular media (HCM). Se expresa en picogramos (pg) y
representa la cantidad promedio de hemoglobina en cada eritrocito. Este
índice debe ser el único que se utilice para referirse a la cantidad de
hemoglobina presente en cada eritrocito.
• Concentración de Hemoglobina Comparada con el Hematocrito.(CHCM).
• *Fluorocrito (Fct). Se mide en porcentaje (%) y representa la proporción de
perfluorocarbono en el total de la sangre, básicamente es una analogía al
Hematocrito.
2.2.2.2 SERIE BLANCA Ó LEUCOS.
Los datos representativos obtenidos son: número de glóbulos blancos, cuenta
diferencial y alteraciones de los mismos.
• Número de glóbulos blancos (LEU). Se mide en miles por microlitro (103/µl) y
como su nombre lo indica representa la cantidad de glóbulos blancos en
la sangre. El número de leucos depende de muchos factores como la
edad, el peso, el consumo de hormonas, etc.
• Cuenta diferencial de glóbulos blancos. Hacer la cuenta diferencial de los
glóbulos blancos es de gran importancia, a través de esta se relaciona en
la sangre el número diferenciado de neutrófilos (NEU), eosinófilos (EO),
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51
basófilos (BA), linfocitos (LIN), monocitos (MON). Se describen como numero
(#) en 103/µl, o con su relación (%) al total de LEUCOS. Gracias a este tipo
de diferenciación se puede ser más certero en determinar tanto las causas
como el avance de enfermedades, alergias, infecciones, etc.
2.2.2.3 SERIE TROMBOCÍTICA.
• Numero de plaquetas (PLQ). Se mide en mil por microlitro (103/µl) y como su
nombre lo indica representa la cantidad de plaquetas en la sangre.
• Volumen plaquetario medio (VMP): se mide en fl y es una forma de
expresar el tamaño de las plaquetas.
2.2.3 QUÍMICA SANGUÍNEA.
La prolongada retención de PFC en el hígado ha generado preocupación con
respecto a los posibles efectos colaterales que el uso de emulsiones de PFC como
transportadores de oxígeno puedan causarle al funcionamiento del hígado y el
sistema retículo endotelial [Luzt 85].
El hígado es tal vez el órgano mas complicado del cuerpo, tiene más de 500
funciones distintas. El problema que se afronta con el uso de pruebas hepáticas,
es el de la falta de relación de distintas funciones [Medway 90].
IM-2004-I-12
52
Se determino realizar análisis de variables que se puedan relacionar con la
función hepática. Se evalúa la síntesis, metabolismo y enzimas (proteínas que
actúan como catalizadores biológicos) relacionadas con la función hepática.
2.2.3.1 FUNCIONES BIOQUÍMICAS ESPECÍFICAS: Síntesis y Metabolismo. [Amich 94]
Las pruebas bioquímicas metabólicas de la función hepática se basan en el
papel del hígado en el metabolismo de proteínas, hidratos de carbono y lípidos.
La capacidad del hígado para metabolizar sustancias también es una medida de
la función hepática, pero en este caso los resultados pueden estar influidos por
otras causas ajenas al hígado.
• Albúmina (ALB): Cuantitativamente es la proteína más importante
sintetizada por el hígado. Aunque su concentración en plasma esta muy
influida por diversos factores, ajenos al hígado, su disminución es un
excelente indicador de la gravedad de una hepatopatía crónica. Se mide
en g/dl.
• Proteína (PROT): El hígado es el centro de la síntesis de proteínas y lípidos. Se
mide en g/dl.
• Globulina (GLOB): Son sintetizadas por el hígado, sus niveles en suero se
aumentan en las hepatopatías crónicas y otras afecciones extrahepática.
Se mide en gr/dl .
• A/G: determina la relación Alb / Glob.
IM-2004-I-12
53
• Colesterol (COL): El metabolismo lipídico es de una gran complejidad y el
hígado cumple una función integradora y reguladora de la mayoría de los
procesos metabólicos de los lípidos. Todas las células sintetizan colesterol,
siendo el hígado y el intestino sus mayores productores. Esta síntesis esta
regulada por la ingesta, ya que el aumento del colesterol alimentario,
disminuye la síntesis de colesterol endógeno. Se elimina del organismo
mediante la conversión hepática y la excreción a través de la bilis. Se mide
en mg/dl.
2.2.3.2 FUNCIÓN ENZIMÁTICO. [Amich 94]
Todas las enzimas séricas tienen su origen en las células. Sus niveles en el suero se
incrementan en las enfermedades que conducen a un aumento de su liberación
por el tejido lesionado. Se utiliza una serie de enzimas como indicadores de la
enfermedad hepática, donde se destacan:
• Fosfatasa alcalina (FA): se encuentra en huesos, hígado, intestino y
placenta. Es el prototipo del grupo de enzimas indicadoras de obstrucción
hepática. Se mide en U/l.
• Gamma Glutamil Transferasa (GGT): Guarda relación con la FA en las
hepatopatías y es el indicador más sensible de las vías biliares. También es
afectado por afecciones pancreáticas, cardiacas, renales y pulmonares,
por tanto no es específica. Se mide en U/l.
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54
• AlaninaminoTransferasa (ALAT o GPT): Existe principalmente en el hígado,
no existen elevaciones en enfermedades que no afectan al hígado. Se
mide en U/l.
• AspartatoAminotransferasa (ASAT ó GOT): Se halla en el corazón, músculo
esquelético, riñón, cerebro e hígado, por tanto menos específica para el
hígado que la ALAT. Se mide en U/l.
• DesHidrgenasa Láctica (LDH): Aunque conserva casi una ubicua
distribución en todos los tejidos del organismo, se presentan cambios en su
concentración relacionados con deficiencias a nivel del hígado. Se mide
en U/l.
2.2.4 GASOMETRÍA .
Valoración por diferentes métodos de la cantidad de oxígeno, dióxido de
carbono, iones hidrógeno (relacionada con el pH), y otros gases disueltos en la
sangre. Se realiza con el fin de valorar el grado de oxigenación, ventilación y
determinar el equilibrio ácido-base. Las herramientas usadas para gasometría
sanguínea son capaces de medir otras variables ( Na+, K+,Ca++, Hct) y calcular
otras (HCO3-, TCO2, BEb, SBC, BEecf, % sO2C).
• El pH una solución es el logaritmo de base 10 de la reciproca de la
concentración de H+. El pH del agua cuando los iones de H+ y OH- se
encuentra en iguales cantidades tiene valor 7, un pH menor a este se
IM-2004-I-12
55
considera ÁCIDO mientras que en pH superior se consideran ALCALINO. En
la escala de pH, que va de 1 a 14, 1 es asignado a una sustancia muy
ácida, y 14 a una sustancia muy básica.
En la sangre el pH arterial �7.4 y pH venoso�7.36. Cuando en la sangre se
encuentran niveles de pH inferiores a este, se considera un estado de
acidosis (alcalosis cuando son pH superiores). Un estado de acidosis es una
indicación de deficiencia de oxigenación en los tejidos, lo que puede llevar
a un estado de hipoxia, o muerte por insuficiencia de oxígeno dentro del
organismo
• La Presión Parcial de un gas se mide en “mmHg” y representa la presión
ejercida por cualquier gas en una mezcla gases. La presión parcial de
oxígeno y dióxido de carbono (pO2 y pCO2) están relacionada con la
oxigenación de los tejidos.
2.2.4.1 DETERMINACIÓN DE PARÁMETROS DE OXIGENACIÓN. [Arcos 98].
Cuando las emulsiones de perfluorocarbono son usadas como sustitutos
portadores de sangre, el contenido total de oxígeno, tanto para arteria como
para vena, se calcula como la suma de los aportes de la tres fases de fluido que
transportan oxígeno:
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56
( ) ( ) ( )PLASMAPFCERITTOTAL CoCoCoCo ,2,2,2,2 ++=
Para cada fase se puede calcular así:
•
=
sangredeml
mlOSoHbCo ERIT
222 **34.1
Donde,
CO2 ERIT: Contenido de oxígeno en la fase de glóbulos rojos.
Hb : Contenido de hemoglobina en la sangre.
1.34 : es el valor de disociación de oxígeno en 100 ml de sangre.
SO2 : Saturación de oxígeno en la sangre.
•
=
sangredeml
mlOPoFctCo PFCPFC
222 760
**α
Donde,
CO2 PFC: Concentración de oxígeno en la fase de PFC.
PFCα :Coeficiente de solubilidad de oxígeno en e PFC, se asume 41.
Fct : Porcentaje de Fluocrito en la sangre.
Po2 : Presión parcial de oxígeno en mmHg.
•
=
sangredeml
mlOPoCo PLASMA
222 *003.0
Donde,
Co2 plasma : Concentración de oxígeno en la fase plasma.
El consumo y transporte de oxígeno a los tejidos, incluso la contribución de cada
fase, pueden ser calculados, pero se encuentran en función del gasto cardiaco,
valoración que no se realizo en este experimento por la dificultad del
IM-2004-I-12
57
procedimiento. En este sentido la medida más cercana para relacionar la
cantidad de oxígeno entregada a los tejidos es la diferencia de concentraciones
arterio-venosa, que esta definida simplemente por la diferencia en sus
concentraciones de oxígeno.
2.2.5 TEMPERATURA CORPORAL.
Se mide en °C y esta asociado con el metabolismo del cuerpo, defensa y
viscosidad de la sangre. Aumentos en la temperatura se pueden deber a
infecciones, enfermedades neurológicas, neoplasias, anemia perniciosa,
tromboembolismo, taquicardia paroxística, insuficiencia cardiaca congestiva,
aplastamiento o trauma severo, así como por un gran número de fármacos
[Mosby 64].
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58
3 RESULTADOS.
En este proyecto se desarrolló una metodología para evaluar la eficacia y
seguridad del uso de PFC como portadores de oxígeno basándose en un modelo
de Hemodilución normovolémica en modelos animales y se realizó el monitoreo
de variables consideradas de importancia.
3.1 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.
El modelo animal escogido usa caninos, cachorros French Poodle (Caniche) de
edad entre 2 y 3.5 meses y de peso entre 1 y 3 Kg,( Proveedor: Criadero Arkaninos,
Suba, Cundinamarca.), para la realización de hemodiluciones normovolémicas
(induciendo la baja de hematocrito) con el fin de evaluar la seguridad y eficacia
in vivo del uso de emulsiones de perfluorocarbono como portadores temporales
de oxígeno.
Según la sustancia que se use como reemplazo sanguíneo durante la
hemodilución y la presencia o no de ventilación con 100% O2, los experimentos
ejecutados se pueden clasificar en 5 grupos principales.
El primer grupo usa Hemacel (Haemaccel ® Aventis.), que es un sustituto de
plasma. No es un expansor del plasma, pero actúa como sustituto de volumen. Su
ingrediente activo es la Poligelina, polipéptido que se fabrica a partir de la
IM-2004-I-12
59
gelatina bovina. Puede representar un riesgo durante aumentos del volumen
intravascular y sus consecuencias o aumento en el volumen del líquido
intersticial, o la hemodilución. Con el uso de Hemacel se ha observado liberación
de histamina en bajas cantidades.
En el segundo y quinto grupo se utiliza una solución cristaloide, Lactato de Ringer
(Baxter Healthcare, Round Lake, IL, USA). La diferencia entre estos grupos consiste
en la aplicación de ventilación 100% O2 para el quinto grupo. Las características
del lactato de ringar se encuentran descritas en el capitulo 1.5.
Los grupos restantes son los grupos en los que se evalúa el uso de
perfluorocarbono como portador de oxígeno. Ambos requieren de ventilación
con O2. La emulsión usada en ambos casos está compuesta con
Perfluoroctilbromida y Epikuron 200 como surfactante. Difieren en la cantidad
usada de perfluorocarbono; en el tercer grupo se tiene una proporción de 1:2 de
PFC y lactato de Ringer (1/3 de la solución es PFC), mientras que en el cuarto
grupo se maneja una relación de 2:1 de los mismos componentes.
A pesar del deseo de realizar muchos experimentos para cada grupo, por
dificultades de logística y tiempo, solo fue posible constituir un grupo de 3
animales para el grupo de Hemacel, 2 para el grupo de lactato de Ringer, 2 para
cada grupo de PFC, y 1 para el grupo de lactato de Ringer con 100% O2.
IM-2004-I-12
60
3.1.1 PROTOCOLO EXPERIMENTAL.
El protocolo final es el producto de la continua experimentación y observación de
los procedimientos realizados, efectuando cambios con el fin de solucionar las
dificultades que se presentaron con el propuesto inicialmente.
I. Implantación de catéteres
Se relaja el animal anestesiándolo con 10 mg/kg xilacina. Se busca acceso
venoso a través de la vena radial en una de las extremidades superiores, con
yelco 22G de 1”, de ser necesario se debe depilar la zona. Se coloca tapón
heparinizado y se fija con esparadrapo a la pata. Se anestesia con 40 mg/kg
Ketamina i.v. Se lava y depila la zona del cuello. Para mantener asepsia se debe
remover la mayor parte posible del pelo depilado, cambiar el campo y limpiar
profundamente la zona depilada con alcohol.
Durante los procedimientos para cateterizar la arteria carótida y la vena yugular
se debe proceder de forma rápida procurando usos mínimos de anestésico.
A nivel del cuello en uno de los lados se realiza una incisión, por disección se
cateteriza la vena yugular, de ser posible la yugular externa, con yelco 22G de 2”.
Se compruebe buen funcionamiento, se coloca tapón hepar inizado de caucho y
se sutura el yelco a la piel para fijarlo, se sutura la herida.
Al otro lado del cuello se realiza una incisión, se busca y disecciona la arteria
carótida. Para exponerla, se levanta y se toma un punto de sutura en los músculos
que al levantarla quedan bajo esta (músculos que antes se encontraban sobre la
IM-2004-I-12
61
arteria). Se pasa un par de “aparejos”, hilos que permitirán al halar obstruir el flujo
de sangre, ya que en la arteria la presión es mayor y si no se maneja con cuidado
las perdidas no controlados de sangre son mayores. El yelco debe ser un poco
más grueso y mas rígido que el usado en la vena, un yelco de 20G de 2” esta
bien. Se distienden los aparejos, se punza con la aguja guía del yelco, justo
cuando este pase por la zona donde esta el aparejo se hala limitando el flujo de
sangre. Se cierra el aparejo alrededor de la arteria. Se comprueba
funcionamiento, se coloca tapón heparinizado de caucho y se sutura el yelco a
la piel, se cierra la herida. Se coloca líquido de mantenimiento, Lactato de Ringer
o solución salina a una velocidad de infusión muy baja, por el acceso de la vena
radial, para evitar la deshidratación propia del uso de anestesia. Se deja
recuperar, aproximadamente de 2 a 4 horas, procurando que se levante por si
mismo, y se procede con la hemodilución.
II. Hemodilución.
La línea venosa radial se usa para la infusión de líquidos y medicamentos. La línea
venosa yugular se utiliza para toma de muestras de gases venosos y se alterna
con la línea arterial durante el retiro de sangre. La línea arterial se usa para la
toma de muestras de hematología, química sanguínea y gases arteriales.
Antes de iniciar la hemodilución se toma la muestra “base”; química sanguínea,
cuadro hemático y gases arteriales y venosos.
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62
Intercambio:
Se estima la volemia como 70 ml/kg. Se verifica el funcionamiento de los
catéteres. Se ventila el animal con 100% oxígeno. Sin el uso de anestesia o
tranquilizantes se extrae el 40% de la volemia a una velocidad de 1 ml/min
alternando a voluntad la línea arterial y la línea venosa yugular . Inmediatamente
después, por la línea venosa radial, se infunde el mismo volumen extraído con 20%
Lactato de Ringer y 80% emulsión de PFC a 1 ml/min. Para obtener la muestra
“fin”, Del volumen extraído se toman las muestras para hematología (1ml),
química sanguínea (1ml) y gases arteriales (0.5 ml). Se extrae sangre por la línea
venosa para gases (0.5 ml).
3.2 MONITOREO DE VARIABLES.
Para el análisis descriptivo de los datos obtenidos, hubo que reorganizar el orden
de las muestras. Muchas muestras no podían ser tomadas en el momento que
sugería el protocolo, y al mismo tiempo se debía llevar el orden lógico de las
mismas. Esto crea una inconsistencia al analizar muestras tomadas 15 minutos
posterior a la hemodilución (muestra 1 según el protocolo) y cualquier muestra
que aunque sea la primera posterior a la hemodilución se haya podido obtener
justo 1 hora después de realizar la hemodilución. Los datos fueron reorganizados
en lapsos de tiempo buscando la mayor consistencia de los mismos. A dicha
reubicación en lapsos de tiempo se denominó “registros”. Registros con números
negativos representan muestras tomadas antes del término de la hemodilución; el
IM-2004-I-12
63
registro cero, es el término de la hemodilución, y registros positivos representan la
toma de muestras posteriores al término de la hemodilución. La figura 5. presenta
en detalle la forma como se numeran de los registros.
Figura 5. RELACIÓN DE REGISTROS.
La tendencia de las variables valoradas se presentan en graficas: en estas se
muestra la línea de tendencia de los promedios de los 5 grupos y sus respectivas
desviaciones para cada registro. Para definir la línea de tendencia del grupo de
Hemacel se utilizo “H”, para el grupo de lactato de Ringer se uso “LR” y si el animal
se encuentra ventilado con 100% O2 “LR –O2”. Para las emulsiones de
perfluorcarbono se uso “PFC1” si mantenía la relación 1:3 y “PFC2” si es de 2:3.
La temperatura que en un principio era una variable de salida tuvo que ser
controlada para asegurar la sobrevivencia de los animales. Las medidas de la
temperatura se ven graficada en anexos.
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64
3.2.1 HEMATOLOGÍA
Se sugiere el uso de contadores de partículas por citometría de flujo para la
medición de todos los parámetros e índices eritrocíticos. El laboratorio Clínico de
la Fundación Cardio-Infantil donde se realizaron estos análisis cuenta con este tipo
de herramientas, además para algunos parámetros se uso una microcentrífuga
que era facilitada por el Banco de Sangre de la Fundación Cardio-Infantil.
El comportamiento de las variables de composición sanguínea se presenta a
continuación:
Las primeras tres figuras presentan un grupo relacionado con los glóbulos rojos. La
figura 6 presenta el conteo de eritrocitos o glóbulos rojos; la figura 7, la cantidad
presente de la Hb y la figura 8 el % de eritrocitos en el volumen sanguíneo.
Además se muestra en la figura 9 el Fct, siendo éste el % presente de PFC en la
sangre:
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65
ERIT
0
1
2
3
4
5
6
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
10^6
/µl
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 6. Recuento de hematíes (ERIT).
Hb
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
g /
dl
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 7. Hemoglobina (Hb).
IM-2004-I-12
66
Hct
0
5
10
15
20
25
30
35
40
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
%H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 8. Hematocrito (Hct).
Fct
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
4
4.5
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
%
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 9. Fluorocrito (Fct).
IM-2004-I-12
67
La obtención del fluorocrito no se realiza con los citómetros de flujo por que aun
no se ha implementado el uso de esta herramienta para su medición. La forma de
medir el *Fct, se realiza al centrifugar tubos capilares con muestra de sangre. Al
separarse durante la centrifugación se pueden identificar el plasma (de color
amarillento, casi traslucido), una pequeña franja de proteínas y enzimas (color
blancuzco), la parte del hematocrito (color rojo intenso) y bajo esta la parte de
perfluorocarbono (de color blancuzco ó parecido al color inicial del PFC previo a
la hemodilución). Al colocarla sobre una hoja con escala se puede medir sus
porcentajes, como lo muestra la figura 10:
Figura 10. Obtención del Fluorocrito (Fct).
A continuación se presentan Índices Hematimétricos que relacionan el
hematocrito, la hemoglobina y el eritrocito. La figura 11 presenta el VCM, el HCM
en la figura 12 y por ultimo el CHCM se presenta en la figura 13.
IM-2004-I-12
68
VCM
56
58
60
62
64
66
68
70
72
74
76
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
flH LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 11. Volumen Corpuscular Medio (VCM).
HCM
18
23
28
33
38
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
pg
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 12. Hemoglobina Corpuscular Media (HCM).
IM-2004-I-12
69
CHCM
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
g /d
lH LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 13. Concentración de Hb Comparada con el Hct (CHCM).
En la serie trombocítica se analizó el conteo de plaquetas y su volumen
corpuscular, de gran importancia ya que uno de los efectos adversos
documentados del uso de PFC-OC, es la disminución de plaquetas posterior a la
hemodilución. Este proceso es conocido como trombocitopenia ó
plaquetopenia. En la revisión bibliográfica se reporta la disminución en el conteo
de plaquetas en días posteriores a la aplicación del perfluorocarbono.
A continuación se presentan las graficas que muestra la tendencia del conteo de
plaquetas, figura 14, y del volumen corpuscular plaquetario, figura15:
IM-2004-I-12
70
PLQ
0
100
200
300
400
500
600
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
10^3
/µl
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 14. Conteo de plaquetas (PLQ).
VMP
4
6
8
10
12
14
16
18
20
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
fl
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 15. Volumen medio plaquetario (VMP).
IM-2004-I-12
71
En la serie de blancos, se observaron los cambios en el conteo total de glóbulos
blancos, se tienen los datos para lo diferenciales solicitados pero la interpretaron
de esos resultados son de características muy profundas. Los glóbulos blancos, sin
embargo sí deberían ser de estudio profundo para conocer el estado del
paciente y su evolución postoperatoria. Reconocer las causas que generan
respuestas del sistema de defensa del organismo puede ser un mecanismo de
ayuda para el seguimiento de efectos secundarios causados por el uso de
perfluorocarbono y la mejoría en sus formulaciones. En la siguiente grafica, figura
16, se muestra el seguimiento del conteo total de leucos:
LEUCOS
-5
0
5
10
15
20
25
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
10^3
/µl
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 16 Glóbulos Blancos (LEUCOS).
IM-2004-I-12
72
3.2.2 BIOQUÍMICA SANGUÍNEA.
Los resultados de las pruebas de bioquímica sanguínea se muestran en los anexos.
En el cual se muestra la tendencia de las diferentes enzimas de función hepática
y proteínas de función metabólica, que aquí se estudiaron, pero que debido al
corto tiempo de toma de datos no asegura que los cambios se deban a cambios
tan rápidos a nivel hepático. Las graficas de bioquímica sanguínea se presentan
en los anexos.
3.2.3 GASOMETRÍA.
Los datos de mayor relevancia en el desarrollo de este proyecto, están
relacionados con la eficacia y seguridad de los PFC-OC. En este sentido son pH,
Presiones parciales de O2 y CO2, saturación de O2, tomadas todas estas para
arteria y vena.
En la figura 18 se presenta el pH venoso, el pH arterial se encuentra en la figura 17.
Las presiones parciales de O2 para arteria y vena, se encuentran en la figura 19 y
la figura 20, respectivamente.
Las presiones parciales para CO2 se encuentran en las figuras 21y 22.
IM-2004-I-12
73
pH-ART
6.4
6.6
6.8
7
7.2
7.4
7.6
7.8
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
pH
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 17. pH arterial.
pH- VEN
6.2
6.4
6.6
6.8
7
7.2
7.4
7.6
-4.00 -2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00
REGISTRO
pH
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 18. pH venoso.
IM-2004-I-12
74
pO2- ART
0
20
40
60
80
100
120
140
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
mm
Hg
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 19. Presión parcial de O2 Arterial.
pO2 -VEN
0
20
40
60
80
100
120
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
mm
Hg
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 20. Presión parcial de O2 Venoso.
IM-2004-I-12
75
pCO2- ART
0
20
40
60
80
100
120
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
mm
Hg
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 21. Presión parcial de Co2 arterial.
pCO2 -VEN
0
20
40
60
80
100
120
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
mm
Hg
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 22. Presión parcial de Co2 Venoso.
IM-2004-I-12
76
HCO3- ART
2
7
12
17
22
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
mm
ol /
LH LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 23. HCO3- Arterial.
HCO3- VEN
0
5
10
15
20
25
30
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
mm
ol /
L
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
Figura 24. HCO3- Venoso.
IM-2004-I-12
77
Para los parámetros de oxigenación se usaron las ecuaciones propuestas en las
ecuaciones descritas en el capitulo 2.2.4.1.
La diferencia de concentraciones artero-venosa, figura 25, es la medida mas
cercana para relacionar la cantidad de oxígeno que es entregada a los tejidos.
A continuación se presentan las concentraciones y concentraciones obtenidas.
En la figura 25 se muestra la diferencia de concentraciones de oxígeno en arteria
y vena.
D ART-VEN
-6
-4
-2
0
2
4
6
8
10
12
14
-2 0 2 4 6 8 10 12
REGISTRO
H LR LR-O2 PFC1 PFC2
Figura 25. Diferencia artero-venosa de concentración de oxígeno.
IM-2004-I-12
78
En las figura 25 y figura 26 se presenta la concentraciones de oxígeno individuales
de arteria y vena
Co2-art
0
2
4
6
8
10
12
14
16
-2 0 2 4 6 8 10 12
REGISTRO
H LR LR-O2 PFC1 PFC2
Figura 26. Concentración total de oxígeno arterial.
IM-2004-I-12
79
Co2-ven
0
2
4
6
8
10
12
-2 0 2 4 6 8 10 12
REGISTRO
H LR LR-O2 PFC1 PFC2
Figura 27. Concentración total de oxígeno venoso.
Aportes individuales de cada fase y para cada grupo de sustituto se encuentran
descritos por las siguientes graficas:
En la figura 28 se presenta los aportes para el grupo Hemacel, en la figura 29 para
lactato en la figura 30 los aportes de cada fase para lactato con presencia de
oxígeno. En la figura 30 y figura 31 se presentan para los grupos con emulsión:
IM-2004-I-12
80
90%
91%
92%
93%
94%
95%
96%
97%
98%
99%
100%
-2.00 -1.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00
Promedio de CO2PL-a
Promedio de CO2PFC-a
Promedio de CO2RBC-a
GRUPO H
REGISTRO
Datos
3
5
7
9
11
13
15
17
-2.00 -1.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00
Promedio de CO2PL-a
Promedio de CO2PFC-a
Promedio de CO2RBC-a
GRUPO H
REGISTRO
Datos
Figura 28. Aportes de cada fase en el grupo de hemacel.
IM-2004-I-12
81
90%
91%
92%
93%
94%
95%
96%
97%
98%
99%
100%
-1.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00
Promedio de CO2PL-a
Promedio de CO2PFC-a
Promedio de CO2RBC-a
GRUPO LR
REGISTRO
Datos
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
-1.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00
Promedio de CO2PL-a
Promedio de CO2PFC-a
Promedio de CO2RBC-a
GRUPO LR
REGISTRO
Datos
Figura 29. Aportes de cada fase en el grupo de Lactato de Ringer.
IM-2004-I-12
82
90%
91%
92%
93%
94%
95%
96%
97%
98%
99%
100%
-2.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00
Promedio de CO2PL-a
Promedio de CO2PFC-a
Promedio de CO2RBC-a
GRUPO LR-O2
REGISTRO
Datos
6
6.5
7
7.5
8
8.5
9
9.5
10
10.5
-2.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00
Promedio de CO2PL-a
Promedio de CO2PFC-a
Promedio de CO2RBC-a
GRUPO LR-O2
REGISTRO
Datos
Figura 30. Aportes de cada fase en el grupo de lactato de Ringer con 100%O2.
IM-2004-I-12
83
90%
91%
92%
93%
94%
95%
96%
97%
98%
99%
100%
-1.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 7.00 8.00
Promedio de CO2PL-a
Promedio de CO2PFC-a
Promedio de CO2RBC-a
GRUPO PFC1
REGISTRO
Datos
Figura 31. Aportes de cada fase en el grupo PFC1.
4
5
6
7
8
9
10
11
-1.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 7.00 8.00
Promedio de CO2PL-a
Promedio de CO2PFC-a
Promedio de CO2RBC-a
GRUPO PFC1
REGISTRO
Datos
IM-2004-I-12
84
90%
91%
92%
93%
94%
95%
96%
97%
98%
99%
100%
-2.00 -1.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00
Promedio de CO2PL-a
Promedio de CO2PFC-a
Promedio de CO2RBC-a
GRUPO PFC2
REGISTRO
Datos
6
7
8
9
10
11
12
13
14
-2.00 -1.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00
Promedio de CO2PL-a
Promedio de CO2PFC-a
Promedio de CO2RBC-a
GRUPO PFC2
REGISTRO
Datos
Figura 32. Aportes de cada fase en el grupo PFC2.
IM-2004-I-12
85
4 DISCUSIÓN.
4.1 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.
Para realizar la hemodilución de forma óptima hubo que generar cambios
sustanciales en el desarrollo del experimento, muchas dificultades fueron
identificadas y superadas en su debido momento y de la mejor forma posible. A
continuación se presenta de forma muy simple las evoluciones de mayor impacto
que se realizaron.
Se dispuso en un principio desarrollar el experimento en un modelo en roedores,
ratas Wistar Albino. Con la bibliografía consultada se logró determinar que los
roedores son una especie fácil de manipular y mantener, pero es muy
complicado realizar la hemodilución y extraerles muestras de sangre suficiente
para completar el procedimiento [Vásquez 01], por lo que no se realizó ningún
experimento en roedores.
Se prefirió entonces realizarlos en animales de mayor tamaño, conejos. Para ello
se compraron conejos machos al mismo proveedor, de buen aspecto físico,
alimentados con conejina, de peso promedio 1.5 Kg. Se realizaron entre el 20 de
enero y el 12 de febrero de 2004 un total de 6 experimentos, de los cuales en
ningún caso se logro completar la hemodilución; se presentaron muchos
IM-2004-I-12
86
taponamientos y fraccionamientos de catéteres, respiración agitada y muertes
prematuras.
Finalmente se estableció realizar el procedimiento en caninos. Se inicio probando
con cachorros mestizos donados, de peso promedio 1.5 Kg.; estos presentaban
enfermedades comunes asociadas con su establecimiento en perreras.
Para mejorar las condiciones físicas de los animales en búsqueda de descartar
enfermedades que incidieran en el experimento se continuaron realizando los
procedimientos en cachorros French Poodle (Caniche), alimentados con
concentrado para cachorros, de buen aspecto físico y comprados al mismo
proveedor.
Para evaluar la eficacia y seguridad del PFC-OC de forma descriptible se procuró
generar el mayor número de experimentos posibles, se pensó en realizar dos
grupos básicos: uno de control y otro experimental, con no menos de 4
tratamientos para cada grupo. El grupo de control se utilizaría Hemacel
(Haemacell Aventis pharma, Ecuador) y en el grupo de experimentación una
emulsión PFC-OC basada en Perfluoroctilbromida con Ovothin 160 como
surfactante.
Problemas con el filtrado de la emulsión de perfluorocarbono a ser infundida y la
escasa cantidad de emulsión preparada para la hemodilución, hizo inminente
preparación de nuevas emulsiones y la “re-microemulsificacion” de las existentes.
IM-2004-I-12
87
Como perfluorocarbono se usaría Perfluorooctilbromida y Ovothin 160 como
surfactante. El Ovothin 160 fue escogido para la preparación de la emulsión
debido a sus características reológicas que disminuyen los problemas de
sedimentación a su mayor afinidad por la fase acuosa y la dispersa [Galindo 02].
El Epikuron 200 presenta una notable facilidad de preparación pero debido a la
diferencia de densidad entre las fases, se sedimenta en muy poco tiempo
[Galindo 02]. Se realizó la microemulsión con PFOB y Ovothin 160, pero se observo
la buena conformación y estabilidad de una emulsión de PFOB y Epikuron 200
realizada tiempo atrás, así que se propuso realizar las posteriores microemulsiones,
de ser necesarias, con Epikuron 200 como surfactante. Esta emulsión con Epikuron
200 fue la que finalmente se uso en los experimentos analizados.
Durante las hemodiluciones se comprobó la fácil y rápida sedimentación de la
emulsión. El retiro de sangre y reposición de fluidos se realizaba usando jeringas de
10 cc. a una velocidad de 1ml/min conectadas a los catéteres (arterial y venoso
respectivamente). Es poco probable poder mantener en movimiento la jeringa
que tiene la emulsión de perfluorocarbono para evitar su sedimentación previa
y/o durante la infusión, conservar en buen estado los catéteres y no lastimar al
paciente. Se resolvió canalizando la vena radial y usarla para líquidos de infusión,
mantenimiento y reposición, como también para aplicación de medicamentos y
anestesia. Esto llevó a poder infundir la emulsión de perfluorocarbono con una
tasa controlada, muy cercana e incluso menor a 1 ml/min con el uso de un
buretrol que puede ser movido para evitar la sedimentación y mantener en buen
estado los catéteres. Esta elección permite también el retiro sangre alternando el
IM-2004-I-12
88
catéter de la vena y el de la arteria, asegurando y verificando la facilidad de
extracción de sangre por ambas vías.
El uso de anestésicos fue siendo determinado en el avance de los experimentos.
Se debe proceder de forma rápida con el fin de no requerir dosis excesivas de
anestesia. La hemodilución se debe realizar solo cuando el animal ya se haya
repuesto de la anestesia. El uso de líquidos de mantenimiento es necesario
durante la canalización, para evitar niveles de deshidratación alta y realizar el
mantenimiento propio que requiere el organismo.
Se dedujo de los primeros experimentos que la realización de una doble
hemodilución era un procedimiento muy drástico. Se quiso realizar entonces una
hemodilución determinada no por porcentajes con relación a la cantidad del
volumen sanguíneo, sino con un hematocrito meta; i.e. se extraería sangre y se
realizarían consecutivas y muy seguidas muestras del hematocrito hasta llegar a
un punto dado. El hematocrito meta se planteo como menor a 24%, que es ya
considerado un nivel bajo de eritrocitos, y por consiguiente de hemoglobina, en la
sangre. Como ya se había mencionado el bazo en los caninos funciona como
una gran reserva de almacenamiento de sangre, y se observo su funcionamiento
en subidas esporádicas del Hct posterior a una pérdida controlada de sangre. Los
cachorros previos a la hemodilución presentaban incluso niveles de hematocrito
menores al postulado como limite, Hct meta. Por este motivo se continuaron
realizando los experimentos con extracciones de sangre en función de la volemia
y realizando un solo intercambio.
IM-2004-I-12
89
El 40% de la volemia es retirado y remplazado por el sustituto relativo a cada
grupo. El Hemacel fue escogido debido a su uso frecuente en la práctica clínica,
sin embargo, se notó que producía una reacción menor en los perros y los
deprimía mucho. Se opto entonces por solución de lactato de Ringer, con la cual
se observo mejorías en el tiempo de reposición de los animales. Esta solución de
lactato de Ringer, también se uso para la mezclas de las emulsiones de PFC para
reponer volumen plasmático.
Para la canalización del cachorro es requiere cuando menos tres personas. Para
la toma de datos, por lo menos dos. Por logística, el procedimiento debe ser
realizado intentando que la primera hora posterior a la hemodilución no sea tan
tarde, procurando tener recursos (artículos, personas, locaciones,…) asequibles en
caso de emergencia y que las bajas temperaturas nocturnas empeoraban el
estado físico del animal.
4.1.1 IMPLEMENTACIÓN DEL PROTOCOLO
El mayor logro obtenido en el protocolo, para la canalización, fue la observación
de los diversos comportamientos en las diferentes líneas a canalizar y la
aplicación del reconocimiento de las dificultades para hallar soluciones a las
mismas. Así se pudo determinar que se requería de formas diferentes de
canalización. Primero se determino que por la vena radial se podía infundir
IM-2004-I-12
90
líquidos (pero no se debía extraer sangre porque su tamaño limitado podría hacer
que se colapsara fácilmente), sin necesidad de tener que realizar incisión para
buscar dicha vena,
La radial se toma en una extremidad superior de forma relativamente fácil.
Para poder realizar la muestra de gases se continuaba necesitando una línea
venosa por donde se pudiese extraer sangre, para ello se tomó la vena yugular
externa. Esta se busca por disección, posee un tamaño moderado, y no presenta
presión considerable en el torrente sanguíneo, para ésta se usa un yelco que no
debe ser muy rígido y tamaño moderado,
El acceso arterial se hace en la arteria carótida, que se encuentra en una capa-
nivel muscular mas profunda que la vena. Se procede por disección, se levanta y
luego se expone tomando un punto de sutura en el músculo que antes la
protegía. El catéter para la carótida debe ser de mayor tamaño y un poco más
rígido que el usado en la vena yugular.
4.2 MONITOREO DE VARIABLES
La frecuencia deseada para la recolección de datos no se pudo cumplir como se
esperaba. Los experimentos presentaban situaciones adversas, como
taponamiento y ruptura de catéteres, colapso de venas, requerían en muchos
IM-2004-I-12
91
casos del un posicionamiento específico de catéteres para poder extraer sangre
o infundir, sangrado, etc.
Para poder realizar un control cronológico de las muestras obtenidas, se enumero
la primera muestra tomada (justo antes de la hemodilución) como muestra cero,
posterior a ello la numeración es consecutiva, de tal forma que al terminar la
hemodilución se realiza la muestra 1. Hasta allí esta de acuerdo con la frecuencia
de toma de datos propuesta en la metodología, pero, por los inconvenientes
propios de cada experimento no se pudo obtener la muestra 2 y siguientes en el
momento que se requería para todos los experimentos.
El registro 0, esta determinado por el final de la hemodilución. Anterior a este se
crearon dos registros (-2 para tiempos que excedan las 2 horas previas a la
hemodilución y -1 para los que se encuentran anterior a esta medida). En el
sentido positivo también se crearon lapso de tiempo con el fin de que el análisis
sea más consistente con el efecto del PFC en función del tiempo. La partición del
tiempo para definir los lapsos de tiempo esta descrita en la figura 5, cap 3.2.
4.2.1.1 TENDENCIA DE DATOS.
Se observa que el comportamiento en el tiempo de las líneas de los promedios de
los grupos para las graficas de ERTI, Hb, y Hct son muy parecidas entre si para
cada grupo, esto se debe a que son parámetros interrelacionados, la
hemoglobina es una proteína que se encuentra ligada a los eritrocitos, y el
IM-2004-I-12
92
hematocrito es la medida en %Vol. de los eritrocitos en sangre total. La
disminución de la cantidad de eritrocitos influye en la cantidad de hemoglobina
como también en el porcentaje que de este se vea en la sangre. Como el
proceso de la hemodilución lo que busca es un descenso controlado de lo
eritrocitos estas tres líneas deberían tener una tendencia a descender de forma
continua en durante todo el experimento, se observa en raras ocasiones que no
sucede así. Este tipo de comportamiento puede ser explicado por el desempeño
del bazo durante el secuestro esplénico, almacenado eritrocitos y plaquetas que
son liberadas al torrente sanguíneo. La respuesta ideal esperada se encuentra
manifiesta en la curva que presenta el tratamiento LR-O2, un descenso rápido
debido a la hemodilución y posterior estabilización de la misma.
La medida del Fct nos muestra que la fracción presente de PFC es muy parecida
en ambas. Solo alrededor de la media hora se presenta una diferencia,
acentuada debido a que el tratamiento PFC1 presenta una baja y el PFC2 un
alza.
Del análisis de gases se observa que la tendencia en conjunto de la presión
parcial de O2 es mayor en la arteria (alrededor de los 80mmHg) que en la vena
(cercano a los 30mmHg). Que con relación al tiempo, los niveles de presión
parcial de oxígeno presentan tendencias muy parecidas para arteria y vena en
cada grupo.
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93
La presión parcial de CO2 presenta características similares de tendencias para
cada grupo pero maneja niveles promedio muy similares, en la arteria alrededor
de 20mmHg y en la vena muy cercana a 30mmHg.
El pH presenta también características muy similares en la línea de tendencia
entre los grupos. Tanto en la arteria como en la vena se presenta una leve
acidosis. Ambos están un tanto debajo de pH 7.4, alrededor de pH 7,3.
El caso del Hemacel presenta una línea de tendencia de mala oxigenación y de
empeoramiento al transcurrir el tiempo, bajos niveles de presión parcial de O2 en
vena y arteria, una acidosis pronunciada tanto en vena como arteria y presiones
parciales de CO2 elevadas.
El bicarbonato en la sangre se comporta como un mecanismo amortiguador y
corrector del pH. De las graficas obtenidas se observa que cuando se uso LR (o
LR-O2) el pH se mantuvo a niveles cercanos a los normales y mantiene una alta
presencia de HCO3-. Para el PFC1 (y un tanto menos para el PFC2) la baja en el
HCO3- repercutía en una acidosis tanto en vena como arteria.
De la grafica de leucos se podrían inferir muchas cosas, pero la interpretación de
una respuesta de defensa esta ligada a muchos otros factores en el organismo,
creo seria un tanto imprudente inferir sin conocer a fondo. De hecho en la
mayoría de los casos donde se busca una interpretación aplicable es posible
obtener cierta información en cuanto a diagnostico, pronostico y tratamiento del
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94
caso especifico. De momento solo se puede describir características de la línea
de tendencia. Se observa que el número de leucos se mantiene sobre el resto con
el uso de LR y aun mas pronunciado con LR-O2, que los grupos PFC1 y PFC2
presentan un comportamiento muy similar y se encuentran en medio de la curva
de H y LR.
El VCM es una medida relativa al tamaño de los eritrocitos, aquí se observa que el
tamaño se mantiene elevado en los grupos PFC1, PFC2 y H, mientras que presenta
también un nivel bajo para LR y LR-O2.
La HCM, corresponde al contenido de la hemoglobina en cada eritrocito y se
observa que los grupos PFC1 y PFC2 se encuentran mucho mas alto que en los
otros tratamientos, y que en los grupos LR y LR-O2 se encuentra mas bajo. Pero
aun así se encuentra en los niveles normales.
La CHCM, representa la concentración de hemoglobina comparada con el
hematocrito. Al igual que las dos anteriores los grupos con PFC se encuentran mas
arriba presentando un ascenso posterior a la hemodilución, mientras que el resto
se mantiene constante.
De las figuras de parámetros de oxigenación se observa que los grupos PFC1 y
PFC2 presentan niveles altos de concentración total de oxígeno arterial, como se
esperaba. Lo interesante se encuentra en que presentan bajos niveles de
concentración de oxígeno en la vena, lo que indica que como portadores bien
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95
pueden cumplir la función de transporte temporal de oxígeno a nivel intravascular
ya que a nivel de los tejidos presenta la tendencia a liberar el oxígeno que ha
tomado a nivel pulmonar. Caso contrario se presenta en el LR-O2, puesto que
presenta un nivel alto tanto en arteria como vena, el aporte de la fase plasma es
constante en toda la duración del experimento, tan solo el 1 % del total.
Se observa además que los mayores niveles de aporte en la concentración de
oxígeno por parte de la fase plasma se presenta cuando los niveles de
concentración total es menor.
El parámetro más cercano, que se pudo calcular, para medir la eficacia, esta
dado por la diferencia artero-venosa, y es como se esperaba se encontró un
mayor índice en PFC1 y PFC2, siendo el PFC2 (el de mayor concentración de
PFC) el que presento una diferencia mayor.
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96
5 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
Se observó que el experimento realizado en el canino de mayor peso y edad
(Lactato de Ringer con ventilación de oxígeno), fue el que mejor evolucionó al
procedimiento de hemodilución normovolémica. Es de destacar que ese
experimento fue el resultado de todo el aprendizaje y cambios realizados al
protocolo inicial y que no sería justo inferir en base a un solo experimento que el
logro se debió al peso/edad del animal.
Para asegurar que los procedimientos sean mas homogéneos, se sugiere
realizarlos en animales de mismo peso, raza y del mismo proveedor.
Se sugiere además realizar un mayor número de experimentos, que se puedan
evaluar estadísticamente y se pueda inferir resultados de forma mas precisa y
exacta.
Es de suma importancia seguir paso a paso el protocolo experimental y si se
quisiera seguir desarrollándolo, los cambios experimentales que se realicen se
deben hacer de uno a la vez, puesto que cambios realizados de forma no
controlada generan confusión.
En cuanto a la seguridad del uso de perfluorocarbono falta mucho por
desarrollar. En los experimentos cuyos grupos tenían emulsiones de PFC cabe
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97
destacar que se presentaron reacciones alérgicas, choques anafilácticos y
depresiones en los caninos.
Se observo que como portadores de oxígeno son algo eficaces pues si reciben
oxígeno en los pulmones y posteriormente lo liberan en los tejidos de mejor forma
que los otros grupos evaluados.
Aunque el análisis médico y patológico de las causas de mortalidad de las
unidades experimentales esta más allá del alcance de este proyecto, una
selección más amplia de variables de respuesta, relacionadas con patrones
patológicos de las unidades experimentales, y una repetición de un mayor
número de experimentos podría dar luces sobre las razones de las muertes de los
perros utilizados en esta clase de experimentos.
Se debe implementar a demás, el uso de herramientas para optimizar los
procedimientos, como son herramientas para medir gasto cardiaco y bombas
extracorpóreas.
Por último, y muy a pesar de las grandes dificultades que el proceso de
experimentación presentó, el autor manifiesta que fue de su agrado el haber
trabajado en el desarrollo de ésta investigación. En el cual fue de gran
importancia el trabajo interdisciplinario en búsqueda de las mejores soluciones
posibles y se considera de alto compromiso el aporte que tan variadas disciplinas
pueda realizar para la consecución de objetivo tan puntual y esquivo como el
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hallazgo de sustitutos sanguíneos portadores de oxígeno. El trabajo realizado
presenta su punto de importancia en los posibles experimentos y evaluaciones
que se puedan realizar con el uso del protocolo desarrollado. Con ello se abre
una puerta para continuar con prácticas de modelos de Hemodilución, en
prácticas experimentales de evaluación de portadores de oxígeno.
Es evidente que experimentos encaminados en progresos tan significativos para la
humanidad se deben realizar sin descanso. Para el desarrollo de estas sustancias
es necesario conocer más a fondo el comportamiento de la sangre, sus
complejas funciones en el organismo y estudiar bajo modelos experimentales in
vitro e in vivo tanto la eficacia como seguridad de estos productos. No se debe
olvidar que todos los sustitutos en desarrollo, presentan efectos colaterales, por
ello debe valorarse el riesgo/beneficio y que experimentos como este tiene su
fundamento en la consecución de las formulaciones que generen menor daño o
efectos secundarios en el organismo.
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99
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104
ANEXOS
ANEXO 1. PROTOCOLO EXPERIMENTAL.. 105
ANEXO 2. TABLAS DE DATOS OBTENIDOS 107
ANEXO 3. DATOS ORDENADOS POR REGISTROS, PROMEDIOS Y DESVIACIONES
ESTANDAR POBLACIONALES. 113
ANEXO 4. GRAFICAS DE QUÍMICA Y TEMPERATURA. 152
ANEXO 5. FOTOS DURANTE EL PROCEDIMIENTO 159
ANEXO 6. TABLA DE ANESTESIA, CANTIDADES PARA HEMODILUCIÓN. 162
ANEXO 7. FORMATO PARA REGISTRO DE EXPERIMENTOS. 163
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105
ANEXO 1. PROTOCOLO EXPERIMENTAL.
PROTOCOLO EXPERIMENTAL.
Implantación de catéteres
Se relaja el animal anestesiándolo con 10 mg/kg xilacina. Se busca acceso
venoso a través de la vena radial en una de las extremidades superiores, con
yelco 22G de 1”, de ser necesario se debe depilar la zona. Se coloca tapón
heparinizado y se fija con esparadrapo a la pata. Se anestesia con 40 mg/kg
Ketamina i.v. Se lava y depila la zona del cuello. Para mantener asepsia se debe
remover la mayor parte posible del pelo depilado, cambiar el campo y limpiar
profundamente la zona depilada con alcohol.
Durante los procedimientos para cateterizar la arteria carótida y la vena yugular
se debe proceder de forma rápida procurando usos mínimos de anestésico.
A nivel del cuello en uno de los lados se realiza una incisión, por disección se
cateteriza la vena yugular, de ser posible la yugular externa, con yelco 22G de 2”.
Se compruebe buen funcionamiento, se coloca tapón heparinizado de caucho y
se sutura el yelco a la piel para fijarlo, se sutura la herida.
Al otro lado del cuello se realiza una incisión, se busca y disecciona la arteria
carótida. Para exponerla, se levanta y se toma un punto de sutura en los músculos
que al levantarla quedan bajo esta (músculos que antes se encontraban sobre la
arteria). Se pasa un par de “aparejos”, hilos que permitirán al halar obstruir el flujo
de sangre, ya que en la arteria la presión es mayor y si no se maneja con cuidado
las perdidas no controlados de sangre son mayores. El yelco debe ser un poco
más grueso y mas rígido que el usado en la vena, un yelco de 20G de 2” esta
bien. Se distienden los aparejos, se punza con la aguja guía del yelco, justo
cuando este pase por la zona donde esta el aparejo se hala limitando el flujo de
sangre. Se cierra el aparejo alrededor de la arteria. Se comprueba
funcionamiento, se coloca tapón heparinizado de caucho y se sutura el yelco a
la piel, se cierra la herida. Se coloca líquido de mantenimiento, Lactato de Ringer
o solución salina a una velocidad de infusión muy baja, por el acceso de la vena
radial, para evitar la deshidratación propia del uso de anestesia. Se deja
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106
recuperar, aproximadamente de 2 a 4 horas, procurando que se levante por si
mismo, y se procede con la hemodilución.
Hemodilución.
La línea venosa radial se usa para la infusión de líquidos y medicamentos. La línea
venosa yugular se utiliza para toma de muestras de gases venosos y se alterna
con la línea arterial durante el retiro de sangre. La línea arterial se usa para la
toma de muestras de hematología, química sanguínea y gases arteriales.
Antes de iniciar la hemodilución se toma la muestra “base”; química sanguínea,
cuadro hemático y gases arteriales y venosos.
Intercambio:
Se estima la volemia como 70 ml/kg. Se verifica el funcionamiento de los
catéteres. Se ventila el animal con 100% oxígeno. Sin el uso de anestesia o
tranquilizantes se extrae el 40% de la volemia a una velocidad de 1 ml/min
alternando a voluntad la línea arterial y la línea venosa yugular . Inmediatamente
después, por la línea venosa radial, se infunde el mismo volumen extraído con 20%
Lactato de Ringer y 80% emulsión de PFC a 1 ml/min. Para obtener la muestra
“fin”, Del volumen extraído se toman las muestras para hematología (1ml),
química sanguínea (1ml) y gases arteriales (0.5 ml). Se extrae sangre por la línea
venosa para gases (0.5 ml).
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107
ANEXO 2. TABLAS DE DATOS OBTENIDOS
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MUESTRA 0 1 2 3 4 0 1 2 3 4 5 0 1 2 3 4 5
HORA 17:18 19:33 20:24 20:58 21:12 15:50 17:02 17:27 17:48 18:20 18:29 13:51 14:38 14:51 15:09 15:24 15:43
LEU 12.8 2 3.1 1.7 2.2 10.4 2.2 2.6 3.1 1.9 1.7 0.9 0.6 0.7 1 1 0.7NEU % 29.6 1.9 6.4 5 3.8 3.8 1.7 2.5 3.2 3.4 4.2 2.8 13.5 5.8 4.8 6.7 15.7
LIN % 55.2 73.7 71.3 69.1 71.8 90.3 96.8 70.5 77 61.2 52.2 83.2 81 91.6 93.8 91.8 83.5MON % 11.1 24 21.8 24.7 23.9 3.6 0.7 26.8 19.2 34.3 40.8 13.3 5 1.6 0.9 1 0.4
EO % 3.7 0 0.1 0.6 0 2.3 0.6 0 0.1 0.7 2 0.7 0.1 0.4 0.5 0.5 0.3BA % 0.4 0.4 0.4 0.6 0.5 0 0.2 0.2 0.5 0.4 0.5 0 0.4 0.5 0 0 0.1
NEU # 3.8 0 0.2 0.1 0.1 0.4 0 0.1 0.1 0.1 0.1 0 0.1 0 0 0.1 0.1LIN # 7.1 1.5 2.2 1.2 1.6 9.4 2.2 1.8 2.4 1.2 0.9 0.8 0.5 0.7 1 0.9 0.6
MON # 1.4 0.5 0.7 0.4 0.5 0.4 0 0.7 0.6 0.6 0.7 0.1 0 0 0 0 0EO # 0.5 0 0 0 0 0.2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0BA # 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
ERIT 5.3 3.61 4.87 4.49 3.91 4.89 3.21 3.72 4.1 4.88 4.88 3.7 3.38 2.63 2.32 2.36 2.31HB 11.8 8 10.9 10 8.8 11.5 7.5 8.6 9.6 11.4 11.4 8.7 8 6.3 5.6 5.6 5.4
HCT 34.9 24.3 33.6 30.8 27 35.3 22.4 26.4 29.8 35.5 36.3 25.4 23.7 18.4 16 16.4 16.4VCM 65.7 67.3 69 68.6 69.2 70.8 69.7 70.8 72.6 72.6 74.4 68.7 70 70 68.9 69.4 70.8HCM 22.3 22.2 22.3 22.3 22.5 23 23.3 23.1 23.5 23.3 23.4 23.4 23.6 23.8 24.1 23.7 23.4
CHCM 33.8 32.9 32.3 32.5 32.5 32.5 33.3 32.6 32.4 32.1 31.4 34.1 33.8 34 35 34.1 33.1ADE 14.7 14.6 15 15.3 15.3 15.6 15.4 15.1 15.6 16 16.6 14 13.9 13.4 13.5 13.6 13.8PLQ 278 176 182 135 122 507 52 27 53 57 59 136 57 55 45 44 22VMP 9.7 11.2 11.3 10.4 10.9 9.5 10.3 8.5 9.2 8.4 8.9 12.8 11.9 10 9.9 9.9 9.9
FCT 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
ALBUMINA 2.8 0.9 0.7 2.3 1 1.3 1.5 1.7COL 225 75 68 185 92 94 123 45LDH 446 2104 561 1212 241 2077 654 863
FA 116 135 69 240 180 422 145 269GGT 12 13 11 10 10 16 11 11ALAT 23 101 20 45 30 62 39 15ASAT 36 175 27 32 17 88 81 137PROT 5.3 3 2.6 4.4 2.6 2.9 3.4 3.8GLOB 2.5 2.1 1.9 2.1 1.6 1.6 1.9 2.1
A/G 1.1 0.4 0.4 1.1 0.6 0.8 0.8 0.8
pH 7.417 7.098 6.996 6.773 7.043 7.32 7.198 7.037 6.874 6.533 6.472 7.317 7.277 7.289 7.284 7.237 7.241pCO2 29.8 33.7 19.6 62.5 87.1 31.1 23.6 22.1 26 72.2 112.3 20.8 20.5 20.4 19.5 18.3 18.4pO2 69 73 81 55 42 50 126 117 100 30 18 76 71 74 76 83 84HCO3-- 19.4 10.5 4.8 9.2 24 16.2 9.3 6 4.8 6.1 8.3 10.7 9.6 9.9 9.3 7.9 8TCO2 20.3 11.6 5.4 11.2 26.6 17.1 10 6.7 5.6 8.3 11.7 11.4 10.3 10.5 9.9 8.4 8.6BEb -3.3 -17.6 -24.4 -25.9 -8.1 -8 -16.3 -22.6 -27.2 -33.9 -33.5 -12.4 -14.2 -13.7 -14.3 -16.6 -16.3SBC 22.2 10.9 5.6 3.4 17.3 18.2 12.2 7.3 3.5 -3.9 -3.9 15.1 13.7 14.1 13.7 11.9 12.1BEecf -5.4 -19.4 -26.7 -25.9 -6.8 -10.1 -19 -24.9 -28.7 -32.9 -31.7 -15.6 -17.3 16.9 -17.5 -19.8 -19.6% sO2C 94.3 87.9 88.2 55 53.5 82.7 98.1 9.2 90.3 17.5 5.4 94.3 92.4 93.3 93.8 94.4 94.7pH 7.351 7.044 6.844 6.699 6.638 7.313 7.128 6.981 6.716 6.476 6.448 7.244 7.154 7.209 7.165 7.162 7.151pCO2 41.6 47 63 77.7 80.2 39.4 38.4 42.3 60.4 110.2 99.3 3.9 29.9 28.2 28.1 24.1 24.5pO2 35 20 20 7 13 31 25 34 22 10 4 18 27 25 24 28 26HCO3-- 23.2 12.9 11 9.7 8.7 20.2 12.8 10.1 7.8 8.2 6.9 14.8 10.6 11.4 10.2 8.7 8.6TCO2 24.5 14.4 12.9 12.1 11.1 21.4 14 11.4 9.7 11.6 10 15.9 11.5 12.2 11.1 9.4 9.4BEb -1.7 -16.9 -23 -27.3 -29.4 -5 -15.1 -20.6 -28.4 -33.5 -35.2 -10.8 -16.2 -14.4 -16.3 -17.6 -17.8SBC 22.6 9.4 4.5 0.9 -0.7 19.7 11.2 7.2 0.3 -4 -5.3 14.3 10.5 11.9 10.3 9.5 9.2BEecf -2.6 -17.8 -23 -26.7 -28.6 -6.2 -16.6 -21.7 -28.2 -31.7 -33.5 -12.7 -18.3 -16.7 -18.6 -20.1 -20.4% sO2C 65.1 17.6 12.1 2.4 4.3 53.6 30.9 38.8 11.6 2.5 0.9 21.6 36.3 34.8 31 38.8 34.4
p3
MU
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p5p4
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p6 p7
ART
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111
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FA 236 272 282 144 188 -GGT 13 10 10 10 10 11ALAT 29 10 16 34 25 27ASAT 41 118 299 61 78 117PROT 4.6 3.7 3.8 4.2 3.6 3.7GLOB 2.4 2.1 2.1 2.2 2 2
A/G 0.9 0.8 0.8 0.9 0.8 0.9
pH 7.313 7.411 7.42 7.398 7.376 7.37 7.399 7.335 7.318 7.323 7.13 7.295 7.296 7.271 7.29 7.214pCO2 33.3 15.4 20.3 19.2 21.2 21.8 22.6 24.4 24.7 19.7 43.2 23 22.3 21.7 18.8 21.3pO2 83 92 82 88 82 84 71 68 65 69 59 74 70 70 76 65HCO3-- 17 9.9 13.3 12 12.6 12.7 14.1 13.1 12.8 10.3 14.5 11.3 11 10.1 9.2 7.8TCO2 18.1 10.3 13.9 12.6 13.2 13.4 14.8 13.9 13.5 10.9 15.9 12 11.7 10.8 9.7 9.3BEb -7.5 -11 -8.1 -9.6 -9.6 -9.6 -7.9 -10.1 -10.8 -12.6 -13.6 -12.5 -12.7 -14 -14.3 -16.4SBC 19 16.3 18.6 17.4 17.3 17.4 18.7 16.9 16.3 14.9 13.8 15.1 14.9 13.9 13.7 11.8BEecf -9.4 -14.9 -11.4 -13 -12.8 -12.7 -10.9 -12.9 -13.5 -15.9 -14.8 -15.4 -15.7 -17 -17.6 -19.3% sO2C 95.3 97.6 96.6 97.1 96.2 96.3 94.5 92.7 91.4 92.7 80.9 93.6 92.3 91.8 94 88.4pH 7.308 7.245 7.263 7.256 7.221 7.246 7.24 7.273 7.218 7.212 7.221 7.153 7.165 7.255 7.17 7.102pCO2 36.9 34.7 35.7 34.4 37.9 36.9 36.1 29.6 35.1 30.8 41.4 33.5 32 9.6 28.8 31.8pO2 33 25 25 23 20 22 23 33 18 20 22 39 14 104 28 20HCO3-- 18.7 15.2 16.3 15.5 15.7 16.2 15.7 13.8 14.4 12.5 17.1 11.9 11.7 4.3 10.6 10TCO2 19.8 16.3 17.4 16.5 16.8 17.4 16.8 14.8 15.5 13.4 18.4 12.9 12.6 4.6 11.5 11BEb -6.3 -10.5 -9.2 -10.1 -10.7 -9.7 -10.2 -10.9 -11.7 -13.4 -9.5 -15.2 -15.1 -19 -15.9 -17.9SBC 18.9 15 16 15.2 14.5 15.4 15 15.2 13.5 12.3 15.5 12 10.6 10.1 10.8 8.7BEecf -7.8 -12.3 -10.9 -11.9 -12.2 -11.2 -11.9 -13.2 -13.5 -15.5 -10.7 -17.1 -17.1 -23 -18.1 -19.8% sO2C 58.2 36.6 38.1 32.2 24.6 29.1 32.5 57.1 19 23.3 27.1 60.2 12.2 97.3 38.8 20.2
p9p8
ART
VENA
IM-2004-I-12
112
MUESTRA 0 1 2 3 4 5
HORA 12:03 16:25 16:45 17:00 17:15 17:30
LEU 8.3 13.7 16.3 16.5 16.4 18.1NEU % 4.2 4.9 4.1 92 4.3 91LIN % 89.9 93.2 94.8 6.8 94.7 8.1
MON % 2.2 0.1 1 0.2 0.1 0.1EO % 3.7 1.8 1 1 0.9 0.8BA % 0 0 0 0 0 0
NEU # 0.3 0.7 0.7 15.2 0.7 16.5LIN # 7.5 12.8 15.5 1.1 15.5 1.5
MON # 0.2 0 0 0 0 0EO # 0.3 0.2 0.2 0.2 0.1 0.2BA # 0 0 0 0 0 0
ERIT 3.7 2.61 2.49 2.43 2.42 2.44HB 7.9 5.6 5.4 5.2 5.2 5.2
HCT 24 17 16.3 15.9 15.9 16.1VCM 64.9 65.3 65.5 65.6 65.6 65.9HCM 21.5 21.4 21.5 21.4 21.5 21.3
CHCM 33.1 32.8 23.9 32.7 32.7 32.3ADE 15.5 15.4 14.9 14.8 14.9 15PLQ 133 51 55 96 54 63VMP 17.9 10.3 11.8 18.6 11.7 11.8
FCT 0 0 0 0 0 0
ALBUMINA 2.2 1.6 1.7COL 104 76 8.1LDH 1148 438 468
FAGGT 11 10 10ALAT 48 21 43ASAT 46 39 55PROT 4.7 4 4.2GLOB 2.5 2.4 2.5
A/G 0.9 0.7 0.7
pH 7.427 7.384 7.402 7.421 7.401 7.433pCO2 30.7 24.4 26.7 28.3 28.8 25.6pO2 76 75 62 63 103 56.1HCO3-- 20.4 14.7 16.8 18.6 18.1 18.4TCO2 21.4 15.5 17.6 19.5 19BEb -2.2 -7.7 -5.7 -3.8 -4.7 -7.2SBC 23.1 18.8 20.3 21.8 21.3BEecf -4.1 -10.5 -8.2 -6 -6.9 -7.5% sO2C 95.6 95.1 91.9 92.8 98.1 90.8pH 7.37 7.345 7.341 7.378 7.348 7.421pCO2 41.7 41.4 31.6 31.2 32 28.2pO2 37 40 31 42 82 37HCO3-- 24.4 22.9 17.4 18.6 17.8 17.9TCO2 25.7 24.1 18.4 19.6 18.7BEb -0.3 -2.1 -6.5 -4.8 -6.1 -6SBC 23.8 22.5 18.7 20.6 20.1BEecf -11.1 -3 -8.5 -6.7 -8.1 -6.5% sO2C 68.5 72.6 57.4 76.8 95.5 73
p10
MU
ES
TR
EO
GA
SE
S
ART
VENA
CU
AD
RO
HE
MA
TIC
OQ
UIM
ICA
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113
ANEXO 3. DATOS ORDENADOS POR REGISTROS, PROMEDIOS Y DESVIACIONES ESTANDAR POBLACIONALES.
IM-2004-I-12
114
HB g/dl REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 12 8 11 10 8.8
2.00 11.5 7.5 8.6 9.6 11 11.43.00 8.7 8 6.3 5.6 5.6 5
Total H 12 10.1 7.8 6.3 7.1 8.7 8 10 10.1
LR 4.00 8.6 8.4 7 6.5 6 6.9 6 6.25.00 9.6 8 8.1 7.3 8 8.4 6 6.1 5.7 6.1 4.9
Total LR 9.1 8.2 8.1 7.15 6.5 7 7.7 6 6.1 5.7 6.2 4.9
LR-O2 10.00 7.9 5.6 5.4 5.2 5.2 5Total LR-O2 7.9 5.6 5.4 5.2 5.2 5
PFC1 6.00 5.9 8.2 8.1 7.4 77.00 7.9 6.3 6.4 6 6 3.1 4
Total PFC1 5.9 8.1 7.2 6.4 6.7 6 3.1 4
PFC2 8.00 10.3 9.8 9.2 9.1 8.9 9 8.5 8 8.49.00 5.9 6 4.8 6.1
Total PFC2 5.9 10.3 7.9 7 9.1 8.9 9 6.1 8.5 8 8.4
Desvestp de HB REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 1.4 0.23570226 0 1.5 2.255363977 3 0 1.3LR 0.5 0.2 0 0.15 0 0.6 0.75 0.4 0 0 0.05 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.15 0.9 0 0.7 0.5 0 0PFC2 0 0 1.9 2.2 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
115
HCT % REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 34.9 24 33.6 30.8 27
2.00 35.3 22 26.4 29.8 36 363.00 25.4 24 18.4 16 16.4 16
Total H 34.9 30.35 23 18.4 21.2 26.6 26 30.8 32
LR 4.00 26.6 25 20.6 19.6 19 21 17 195.00 27.7 24 24.4 21.9 23 25 19 18 16.8 18 14.1
Total LR 27.15 24 24.4 21.25 19.6 21 23 18 18 16.8 19 14.1
LR-O2 10.00 24 17 16.3 15.9 15.9 16Total LR-O2 24 17 16.3 15.9 15.9 16
PFC1 6.00 17.4 23 21.6 20.3 197.00 23 15.4 16 14.2 14 5.1 9
Total PFC1 17.4 23 18.5 16 17.3 16 5.1 9
PFC2 8.00 30.6 23 21.4 21.3 21 21 20 19 219.00 17.9 15 11.4 15
Total PFC2 17.9 30.6 19 16.4 21.3 21 21 15 20 19 21
Desvestp de HCT REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 4.95 0.79302515 0 5.2 7.377443098 9.55 0 4.65LR 0.55 0.75 0 0.65 0 1.85 1.8 1.1 0 0 0.35 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.05 3.1 0 3.05 2.4 0 0PFC2 0 0 3.85 5 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
116
ERIT 10^6/microl REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 5.3 3.61 4.87 4.49 3.91
2.00 4.89 3.21 3.72 4.1 4.88 4.883.00 3.7 3.38 2.63 2.32 2.36 2.31
Total H 5.3 4.295 3.4 2.63 3.02 3.776666667 3.595 4.49 4.395
LR 4.00 4.36 4.2 3.46 3.29 3.18 3.52 2.84 3.125.00 4.44 3.67 3.75 3.36 3.54 3.8 2.95 2.79 2.6 2.81 2.21
Total LR 4.4 3.935 3.75 3.41 3.29 3.36 3.66 2.895 2.79 2.6 2.965 2.21
LR-O2 10.00 3.7 2.61 2.49 2.43 2.42 2.44Total LR-O2 3.7 2.61 2.49 2.43 2.42 2.44
PFC1 6.00 2.5 3.22 3.05 2.86 2.637.00 3.37 2.25 2.33 2.13 2.09 0.77 1.3
Total PFC1 2.5 3.295 2.65 2.33 2.495 2.36 0.77 1.3
PFC2 8.00 4.41 3.23 3.09 3.04 3.01 2.94 2.92 2.87 3.029.00 2.5 2.07 1.65 2.12
Total PFC2 2.5 4.41 2.65 2.37 3.04 3.01 2.94 2.12 2.92 2.87 3.02
Desvestp de ERIT REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.595 0.1639 0 0.7 1.05 1.285 0 0.485LR 0.04 0.265 0 0.05 0 0.18 0.14 0.055 0 0 0.16 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.075 0.4 0 0.365 0.27 0 0PFC2 0 0 0.58 0.72 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
117
VCM fl REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 65.7 67 69 69 69
2.00 70.8 70 70.8 73 73 743.00 68.7 70 70 68.9 69 71
Total H 65.7 69.75 69 70 69.85 70 72 69 72
LR 4.00 60.8 60 59.6 60 60 60 60 615.00 62.4 64 64.8 65.2 65 65 65 65 65 65 63.9
Total LR 61.6 62 64.8 62.4 60 62 63 62 65 65 63 63.9
LR-O2 10.00 64.9 65 65.5 65.6 66 66Total LR-O2 64.9 65 65.5 65.6 66 66
PFC1 6.00 69.6 71 71 71 717.00 67 68.6 68.6 66 67 67 69
Total PFC1 69.6 69 69.8 68.6 69 69 67 69
PFC2 8.00 69.3 70 69.1 69.9 70 70 68 68 709.00 71.5 72 69.3 72
Total PFC2 71.5 69.3 71 69.2 69.9 70 70 72 68 68 70
Desvestp de VCM REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 1.05 1.208304597 0 0.95 1.611072796 0.9 0 2.6LR 0.8 2.2 0 2.8 0 2.1 2.4 2.6 0 0 2 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 1.65 1.2 0 2.35 2.1 0 0PFC2 0 0 0.85 0.1 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
118
HCM pg REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 22.3 22.2 22.3 22.3 22.5
2.00 23 23.3 23.1 23.5 23.3 23.43.00 23.4 23.6 23.8 24.1 23.7 23.4
Total H 22.3 23.2 23.03333333 23.8 23.6 23.16666667 23.35 22.3 22.95
LR 4.00 19.8 20 20.1 19.9 20.2 19.8 19.7 19.85.00 21.6 21.9 21.6 21.8 21.5 22.2 21.9 22 21.9 21.5 22.2
Total LR 20.7 20.95 21.6 20.95 19.9 20.85 21 20.8 22 21.9 20.65 22.2
LR-O2 10.00 21.5 21.4 21.5 21.4 21.5 21.3Total LR-O2 21.5 21.4 21.5 21.4 21.5 21.3
PFC1 6.00 23.4 25.5 26.7 25.9 26.47.00 23.4 28 27.5 28.4 28.2 39.9 26.8
Total PFC1 23.4 24.45 27.35 27.5 27.15 27.3 39.9 26.8
PFC2 8.00 23.4 30.2 29.8 29.8 29.5 29.6 29 28.4 27.79.00 23.8 29.1 29.3 28.7
Total PFC2 23.8 23.4 29.65 29.55 29.8 29.5 29.6 28.7 29 28.4 27.7
Desvestp de HCM REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.2 0.602 0 0.5 0.6182 0.05 0 0.45LR 0.9 0.95 0 0.85 0 0.65 1.2 1.1 0 0 0.85 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 1.05 0.65 0 1.25 0.9 0 0PFC2 0 0 0.55 0.25 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
119
Promedio de CHCM REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 33.8 32.9 32.3 32.5 32.5
2.00 32.5 33.3 32.6 32.4 32.1 31.43.00 34.1 33.8 34 35 34.1 33.1
Total H 33.8 33.3 33.33333333 34 33.8 32.93333333 32.6 32.5 31.95
LR 4.00 32.6 33.7 33.7 33.3 33.4 32.8 33.1 32.55.00 34.6 34.2 33.2 33.4 33.3 34 33.7 33.8 33.9 33.1 34.8
Total LR 33.6 33.95 33.2 33.55 33.3 33.35 33.4 33.4 33.8 33.9 32.8 34.8
LR-O2 10.00 33.1 32.8 23.9 32.7 32.7 32.3Total LR-O2 33.1 32.8 23.9 32.7 32.7 32.3
PFC1 6.00 33.6 36.1 37.5 36.5 37.17.00 34.7 40.8 40.1 42.7 42.2 59.6 38.7
Total PFC1 33.6 35.4 39.15 40.1 39.6 39.65 59.6 38.7
PFC2 8.00 33.8 43.1 43 42.6 42.3 42.3 42.4 42.1 39.89.00 33.3 40.6 42.2 39.8
Total PFC2 33.3 33.8 41.85 42.6 42.6 42.3 42.3 39.8 42.4 42.1 39.8
Desvestp de CHCM REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.8 0.368 0 1.2 0.826 0.5 0 0.55LR 1 0.25 0 0.15 0 0.05 0.6 0.3 0 0 0.3 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.7 1.65 0 3.1 2.55 0 0PFC2 0 0 1.25 0.4 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
120
Promedio de ADE REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 14.7 14.6 15 15.3 15.3
2.00 15.6 15.4 15.1 16 16 16.63.00 14 13.9 13 13.5 14 14
Total H 14.7 14.8 14.6 13 14.3 15 15 15.3 16
LR 4.00 20.3 20.1 20.5 20 20 20.5 20 205.00 14.6 14.1 14 13.9 14 14.4 14 14 14 14 14
Total LR 17.45 17.1 14 17.2 20 17 17.5 17 14 14 17 14
LR-O2 10.00 15.5 15.4 15 14.8 15 15Total LR-O2 15.5 15.4 15 14.8 15 15
PFC1 6.00 14.1 13.7 14 14 147.00 15 15 15.2 15 15 15.2 15
Total PFC1 14.1 14.4 14 15.2 14 14 15.2 15
PFC2 8.00 13.9 13.9 14 13.9 14 14 14.5 15 159.00 15.2 14.1 15 13.7
Total PFC2 15.2 13.9 14 14 13.9 14 14 13.7 14.5 15 15
Desvestp de ADE REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.8 0.612825877 0 0.8 0.837987006 1.1 0 0.65LR 2.85 3 0 3.3 0 2.9 3.05 2.85 0 0 2.9 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.65 0.4 0 0.7 0.6 0 0PFC2 0 0 0.1 0.45 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
121
PLQ 10^3/microlitro REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 278 176 182 135 122
2.00 507 52 27 53 57 593.00 136 57 55 45 44 22
Total H 278 321.5 95 55 36 93 40 135 90.5
LR 4.00 234 45 84 17 50 76 55 585.00 181 117 ## 146 ## 169 ## 115 ## 104 93
Total LR 207.5 81 ## 115 17 96 123 89 115 ## 81 93
LR-O2 10.00 133 51 55 96 54 63Total LR-O2 133 51 55 96 54 63
PFC1 6.00 118 116 ## 109 ##7.00 11 94 132 146 ## 27 48
Total PFC1 118 63.5 ## 132 128 ## 27 48
PFC2 8.00 244 373 ## 286 266 ## 269 ## 2559.00 226 140 ## 161
Total PFC2 226 244 256.5 ## 286 266 ## 161 269 ## 255
Desvestp de PLQ REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 185.5 57.31201154 0 9 63.03967005 17.5 0 31.5LR 26.5 36 0 31 0 46 46.5 33.5 0 0 23 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 52.5 18.5 0 18.5 1.5 0 0PFC2 0 0 116.5 120.5 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
122
VMP fl REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 9.7 # 11.3 10 11
2.00 9.5 # 8.5 9.2 8 8.93.00 12.8 # 10 9.9 9.9 10
Total H 9.7 11.15 # 10 9.2 10.1 9 10 9.9
LR 4.00 14 # 12.6 8.4 10 10.1 9 9.75.00 13.4 # 13.1 12.7 11 13.3 13 13 12.2 13 13.3
Total LR 13.7 # 13.1 12.65 8.4 10 11.7 11 13 12.2 11 13.3
LR-O2 10.00 17.9 # 11.8 18.6 11.7 12Total LR-O2 17.9 # 11.8 18.6 11.7 12
PFC1 6.00 15.9 9 8.5 7.9 97.00 7 7.7 8.1 6 8.3 7
Total PFC1 15.9 8 8.5 7.7 8 8 8.3 7
PFC2 8.00 10.5 8 8.3 7.9 8 8 7.8 8 7.79.00 12 9 8.3 9.2
Total PFC2 12 10.5 8 8.3 7.9 8 8 9.2 7.8 8 7.7
Desvestp de VMP REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 1.65 0.65489609 0 0.7 0.87305339 0.75 0 1LR 0.3 0.55 0 0.05 0 0.5 1.6 1.85 0 0 1.55 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.95 0 0 0.1 1.6 0 0PFC2 0 0 0.4 0 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
123
ALB g/dl REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 2.8 1 1
2.00 2.3 1 13.00 1.5 2
Total H 2.8 1.9 1 1 1
LR 4.00 1.4 1 15.00 2.4 2 2 1.7 1.4
Total LR 1.9 2 2 1.7 1.4
LR-O2 10.00 2.2 2 2Total LR-O2 2.2 2 2
PFC1 6.00 0.9 1 17.00 1.9 1 2
Total PFC1 1.4 1 1
PFC2 8.00 2.2 2 29.00 2 2 2
Total PFC2 2 2.2 2 2 2
Desvestp de ALB REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.4 0.355902608 0 0LR 0.5 0.5 0.45 0 0LR-O2 0 0 0PFC1 0.5 0.15 0.4PFC2 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
124
PROT g/dl REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 5.3 3 3
2.00 4.4 3 33.00 3.4 4
Total H 5.3 3.9 3 3 3
LR 4.00 3.8 4 35.00 5 5 4 4.1 3.3
Total LR 4.4 4 4 4.1 3.3
LR-O2 10.00 4.7 4 4Total LR-O2 4.7 4 4
PFC1 6.00 2.1 3 27.00 4.9 4 4
Total PFC1 3.5 3 3
PFC2 8.00 4.6 4 49.00 4.2 4 4
Total PFC2 4.2 4.6 4 4 4
Desvestp de PROT REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.5 0.498887652 0 0LR 0.6 0.6 0.65 0 0LR-O2 0 0 0PFC1 1.4 0.5 1.05PFC2 0 0 0.05 0 0
IM-2004-I-12
125
GLOB gr/dl REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 2.5 2 2
2.00 2.1 2 23.00 1.9 2
Total H 2.5 2 2 2 2
LR 4.00 2.4 2 25.00 2.6 3 2 2.4 1.9
Total LR 2.5 2 2 2.4 1.9
LR-O2 10.00 2.5 2 3Total LR-O2 2.5 2 3
PFC1 6.00 1.2 2 17.00 3 2 2
Total PFC1 2.1 2 2
PFC2 8.00 2.4 2 29.00 2.2 2 2
Total PFC2 2.2 2.4 2 2 2
Desvestp de GLOB REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.1 0.23570226 0 0LR 0.1 0.1 0.2 0 0LR-O2 0 0 0PFC1 0.9 0.35 0.65PFC2 0 0 0.05 0 0
IM-2004-I-12
126
A/G RELACION REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 1.1 0.4 0.4
2.00 1.1 0.6 0.83.00 0.8 0.8
Total H 1.1 0.95 0.6 0.8 0.4
LR 4.00 0.6 0.6 0.65.00 0.9 0.9 0.9 0.7 0.7
Total LR 0.75 0.75 0.75 0.7 0.7
LR-O2 10.00 0.9 0.7 0.7Total LR-O2 0.9 0.7 0.7
PFC1 6.00 0.8 0.7 0.87.00 0.6 0.6 0.7
Total PFC1 0.7 0.65 0.75
PFC2 8.00 0.9 0.8 0.89.00 0.9 0.8 0.9
Total PFC2 0.9 0.9 0.8 0.8 0.9
Desvestp de A/G REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.15 0.163 0 0LR 0.15 0.15 0 0 0LR-O2 0 0 0PFC1 0.1 0.05 0PFC2 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
127
COL mg/dl REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 225 # 68
2.00 185 # 943.00 123 #
Total H 225 154 # 94 68
LR 4.00 144 # 955.00 106 # 69 85 73
Total LR 125 # 82 85 73
LR-O2 10.00 104 # 8Total LR-O2 104 # 8
PFC1 6.00 52 # 307.00 141 ##
Total PFC1 96.5 # 72
PFC2 8.00 200 # ##9.00 131 # ##
Total PFC2 131 200 # ## ##
Desvestp de COL REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 31 19.43078886 0 0LR 19 0.5 13 0 0LR-O2 0 0 0PFC1 44.5 0 41.5PFC2 0 0 16.5 0 0
IM-2004-I-12
128
LDH U/l REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 446 2104 561
2.00 1212 241 20773.00 654 863
Total H 446 933 1069.333333 2077 561
LR 4.00 1035 875 22195.00 1084 822 667 139 1418
Total LR 1059.5 848.5 1443 139 1418
LR-O2 10.00 1148 438 468Total LR-O2 1148 438 468
PFC1 6.00 204 409 48007.00 742 508 2943
Total PFC1 473 458.5 3871.5
PFC2 8.00 1161 2021 33079.00 1364 1128 1365
Total PFC2 1364 1161 1574.5 3307 1365
Desvestp de LDH REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 279 774.4341 0 0LR 24.5 26.5 776 0 0LR-O2 0 0 0PFC1 269 49.5 928.5PFC2 0 0 446.5 0 0
IM-2004-I-12
129
FA U/l REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 0 0 0
2.00 0 0 03.00 0 0
Total H 0 47.5 55.67963921 0 0
LR 4.00 0 0 05.00 0 0 0 0 0
Total LR 39.5 40 42 0 0
LR-O2 10.00Total LR-O2
PFC1 6.00 0 0 07.00
Total PFC1 0 0 0
PFC2 8.00 0 0 09.00 0 0
Total PFC2 0 0 42 0
Desvestp de FA REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 47.5 55.68 0 0LR 39.5 40 42 0 0LR-O2PFC1 0 0 0PFC2 0 0 42 0
IM-2004-I-12
130
GGT U/l REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 12 13 11
2.00 10 10 163.00 11 11
Total H 12 10.5 11.33333333 16 11
LR 4.00 22 13 155.00 16 10 10 10 21
Total LR 19 11.5 12.5 10 21
LR-O2 10.00 11 10 10Total LR-O2 11 10 10
PFC1 6.00 10 10 107.00 14 10 13
Total PFC1 12 10 11.5
PFC2 8.00 13 10 109.00 10 10 11
Total PFC2 10 13 10 10 11
Desvestp de GGT REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.5 1.247219129 0 0LR 3 1.5 2.5 0 0LR-O2 0 0 0PFC1 2 0 1.5PFC2 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
131
ALAT U/l REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 23 101 20
2.00 45 30 623.00 39 15
Total H 23 42 48.66666667 62 20
LR 4.00 30 33 355.00 30 34 38 47 8
Total LR 30 33.5 36.5 47 8
LR-O2 10.00 48 21 43Total LR-O2 48 21 43
PFC1 6.00 21 25 987.00 3484 2528 2581
Total PFC1 1752.5 1276.5 1339.5
PFC2 8.00 29 10 169.00 34 25 27
Total PFC2 34 29 17.5 16 27
Desvestp de ALAT REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 3 37.50851755 0 0LR 0 0.5 1.5 0 0LR-O2 0 0 0PFC1 1731.5 1251.5 1241.5PFC2 0 0 7.5 0 0
IM-2004-I-12
132
ASAT U/l REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 36 175 27
2.00 32 17 883.00 81 137
Total H 36 56.5 109.6666667 88 27
LR 4.00 38 43 1335.00 44 72 67 43 69
Total LR 41 57.5 100 43 69
LR-O2 10.00 46 39 55Total LR-O2 46 39 55
PFC1 6.00 13 31 2687.00 2128 1670 1943
Total PFC1 1070.5 850.5 1105.5
PFC2 8.00 41 118 2999.00 61 78 117
Total PFC2 61 41 98 299 117
Desvestp de ASAT REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 24.5 67.33663358 0 0LR 3 14.5 33 0 0LR-O2 0 0 0PFC1 1057.5 819.5 837.5PFC2 0 0 20 0 0
IM-2004-I-12
133
pH -ART REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 7.417 7.098 6.996 6.773 7.043
2.00 7.32 7.198 7.037 6.874 6.533 6.4723.00 7.317 7.277 7.289 7.284 7.237 7.241
Total H 7.417 7.3185 7.191 7.289 7.1605 7.035666667 6.887 6.773 6.7575
LR 4.00 7.403 7.583 7.434 7.415 7.385 7.434 7.338 7.3865.00 7.406 7.355 7.396 7.424 7.369 7.371 7.347 7.447 7.449 7.417 7.429
Total LR 7.4045 7.469 7.396 7.429 7.415 7.377 7.4025 7.3425 7.447 7.449 7.4015 7.429
LR-O2 10.00 7.427 7.384 7.402 7.421 7.401 7.433Total LR-O2 7.427 7.384 7.402 7.421 7.401 7.433
PFC1 6.00 7.318 7.262 7.037 6.997 7.097.00 7.407 7.382 7.22 7.232 7.245 7.262 7.288
Total PFC1 7.318 7.3345 7.2095 7.22 7.1145 7.1675 7.262 7.288
PFC2 8.00 7.313 7.411 7.42 7.398 7.376 7.37 7.399 7.335 7.318 7.3239.00 7.13 7.295 7.296 7.271 7.29 7.214
Total PFC2 7.13 7.313 7.353 7.358 7.3345 7.333 7.37 7.214 7.399 7.335 7.318 7.323
Desvestp de pH -ART REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.0015 0.073244 0 0.1235 0.150825 0.354 0 0.2855LR 0.0015 0.114 0 0.005 0 0.008 0.0315 0.0045 0 0 0.0155 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.0725 0.1725 0 0.1175 0.0775 0 0PFC2 0 0 0.058 0.062 0.0635 0.043 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
134
Pco2 -ART mmgH REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 29.8 33.7 19.6 62.5 87.1
2.00 31.1 23.6 22.1 26 72.2 112.33.00 20.8 20.5 20.4 19.5 18.3 18.4
Total H 29.8 25.95 25.93333333 20.4 20.8 21.3 45.3 62.5 99.7
LR 4.00 21.9 20.7 20.8 24.8 26.1 19.4 28.8 16.65.00 23.5 24.4 26.5 24.9 26.4 25.2 29.4 25.2 24.6 27.2 25.9
Total LR 22.7 22.55 26.5 22.85 24.8 26.25 22.3 29.1 25.2 24.6 21.9 25.9
LR-O2 10.00 30.7 24.4 26.7 28.3 28.8 25.6Total LR-O2 30.7 24.4 26.7 28.3 28.8 25.6
PFC1 6.00 23.5 13.5 20.4 17 16.67.00 15.5 11.1 15.1 14.3 14.1 15.4 16.9
Total PFC1 23.5 14.5 15.75 15.1 15.65 15.35 15.4 16.9
PFC2 8.00 33.3 15.4 20.3 19.2 21.2 21.8 22.6 24.4 24.7 19.79.00 43.2 23 22.3 21.7 18.8 21.3
Total PFC2 43.2 33.3 19.2 21.3 20.45 20 21.8 21.3 22.6 24.4 24.7 19.7
Desvestp de Pco2 -ART REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 5.15 5.6358 0 1.3 3.3655 26.9 0 12.6LR 0.8 1.85 0 2.05 0 0.15 2.9 0.3 0 0 5.3 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 1 4.65 0 1.35 1.25 0 0PFC2 0 0 3.8 1 1.25 1.2 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
135
Po2 -ART mmgH REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 69 73 81 55 42
2.00 50 126 117 100 30 183.00 76 71 74 76 83 84
Total H 69 63 90 74 96.5 88 57 55 30
LR 4.00 63 79 73 64 69 69 30 445.00 86 68 63 65 63 66 29 77 64 65 68
Total LR 74.5 73.5 63 69 64 66 67.5 29.5 77 64 54.5 68
LR-O2 10.00 76 75 62 63 103 56.1Total LR-O2 76 75 62 63 103 56.1
PFC1 6.00 68 127 81 111 1077.00 80 83 65 89 86 88 100
Total PFC1 68 103.5 82 65 100 96.5 88 100
PFC2 8.00 83 92 82 88 82 84 71 68 65 699.00 59 74 70 70 76 65
Total PFC2 59 83 83 76 79 79 84 65 71 68 65 69
Desvestp de Po2 -ART REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 13 25.47 0 21 8.524 27 0 12LR 11.5 5.5 0 4 0 3 1.5 0.5 0 0 11 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 23.5 1 0 11 10.5 0 0PFC2 0 0 9 6 9 3 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
136
HCO3- -ART mmol/l REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 19.4 10.5 4.8 9.2 24
2.00 16.2 9.3 6 4.8 6 8.33.00 10.7 9.6 9.9 9.3 7.9 8
Total H 19.4 13.45 9.8 9.9 7.65 5.83 7 9.2 16
LR 4.00 13 19.7 14.1 16.1 16 13.1 16 105.00 14.9 13.7 16.4 16.5 15 14.7 16 18 17.2 18 17.3
Total LR 13.95 16.7 16.4 15.3 16.1 16 13.9 16 18 17.2 14 17.3
LR-O2 10.00 20.4 14.7 16.8 18.6 18.1 18Total LR-O2 20.4 14.7 16.8 18.6 18.1 18
PFC1 6.00 12.2 6.1 5.5 4.2 57.00 9.9 6.7 6.3 6.1 6 7 8
Total PFC1 12.2 8 6.1 6.3 5.15 6 7 8
PFC2 8.00 17 9.9 13.3 12 12.6 13 14.1 13 13 10.39.00 14.5 11.3 11 10.1 9.2 7.8
Total PFC2 14.5 17 10.6 12.2 11.05 10.9 13 7.8 14.1 13 13 10.3
Desvestp de HCO3- -ART REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 2.75 0.509901951 0 1.65 1.461354014 0.95 0 7.85LR 0.95 3 0 1.2 0 0.2 0.8 0.35 0 0 3.85 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 1.9 0.6 0 0.95 0.55 0 0PFC2 0 0 0.7 1.15 0.95 1.7 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
137
Promedio de % So2C-ART REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 94 87.9 88.2 55 54
2.00 82.7 98.1 9.2 90.3 18 5.43.00 94.3 92.4 93.3 93.8 94.4 95
Total H 94 88.5 92.8 93.3 51.5 91 56 55 29
LR 4.00 92.5 97.6 95.5 93 94 94.8 54 825.00 96.9 93 92.3 93.4 92 92.6 53 96 94 93 94.2
Total LR 94.7 95.3 92.3 94.45 93 93 93.7 54 96 94 87 94.2
LR-O2 10.00 96 95.1 91.9 92.8 98.1 91Total LR-O2 96 95.1 91.9 92.8 98.1 91
PFC1 6.00 92.3 98.5 89.4 95 967.00 96.3 96.5 88.9 95.5 95 95.7 97
Total PFC1 92.3 97.4 93 88.9 95.3 96 95.7 97
PFC2 8.00 95.3 97.6 96.6 97.1 96.2 96 94.5 93 91 939.00 81 93.6 92.3 91.8 94 88
Total PFC2 81 95.3 95.6 94.5 94.45 95.1 96 88 94.5 93 91 93
Desvestp de % So2C-ART REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 5.8 4.173727351 0 42.3 2.574662869 38.6 0 24.05LR 2.2 2.3 0 1.05 0 0.9 1.1 0.65 0 0 5.8 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 1.1 3.55 0 0.25 0.3 0 0PFC2 0 0 2 2.15 2.65 1.1 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
138
Promedio de pH -VEN REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 7.351 7.044 6.844 6.699 6.638
2.00 7.313 7.128 6.981 6.716 6.476 6.4483.00 7.244 7.154 7.209 7.165 7.162 7.151
Total H 7.351 7.2785 7.108666667 7.209 7.073 6.907333333 6.8135 6.699 6.543
LR 4.00 7.234 7.411 7.332 7.442 7.289 7.363 7.511 7.2935.00 7.282 7.168 7.297 7.353 7.285 7.304 7.365 7.336 7.349 7.359 7.2
Total LR 7.258 7.2895 7.297 7.3425 7.442 7.287 7.3335 7.438 7.336 7.349 7.326 7.2
LR-O2 10.00 7.37 7.345 7.341 7.378 7.348 7.421Total LR-O2 7.37 7.345 7.341 7.378 7.348 7.421
PFC1 6.00 7.213 7.063 6.883 6.943 6.9937.00 7.231 7.173 7.099 7.037 7.012 7.114 7.118
Total PFC1 7.213 7.147 7.028 7.099 6.99 7.0025 7.114 7.118
PFC2 8.00 7.308 7.245 7.263 7.256 7.221 7.246 7.24 7.273 7.218 7.2129.00 7.221 7.153 7.165 7.255 7.17 7.102
Total PFC2 7.221 7.308 7.199 7.214 7.2555 7.1955 7.246 7.102 7.24 7.273 7.218 7.212
Desvestp de pH -VEN REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.0345 0.046942 0 0.092 0.187505 0.3375 0 0.095LR 0.024 0.1215 0 0.0105 0 0.002 0.0295 0.073 0 0 0.033 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.084 0.145 0 0.047 0.0095 0 0PFC2 0 0 0.046 0.049 0.0005 0.0255 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
139
Pco2 -VEN mmHg REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 41.6 47 63 77.7 80
2.00 39.4 38.4 42.3 60.4 ## 993.00 3.9 29.9 28.2 28.1 24.1 25
Total H 41.6 21.65 38.4 28.2 35.2 49.17 67 77.7 90
LR 4.00 32.6 28.4 30.2 24.7 32 24.5 17 295.00 33.7 43.2 13.4 22.9 34 32.1 26 28 29.1 29 40.2
Total LR 33.15 35.8 13.4 26.55 24.7 33 28.3 21 28 29.1 29 40.2
LR-O2 10.00 41.7 41.4 31.6 31.2 32 28Total LR-O2 41.7 41.4 31.6 31.2 32 28
PFC1 6.00 32 38.8 36.3 25.3 267.00 25.1 26.2 26.5 28.7 30 25.2 26
Total PFC1 32 32 31.3 26.5 27 28 25.2 26
PFC2 8.00 36.9 34.7 35.7 34.4 37.9 37 36.1 30 35 30.89.00 41.4 33.5 32 9.6 28.8 32
Total PFC2 41.4 36.9 34.1 33.9 22 33.35 37 32 36.1 30 35 30.8
Desvestp de Pco2 -VEN REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 17.75 6.981085557 0 7.1 17.75656373 42.85 0 9.55LR 0.55 7.4 0 3.65 0 1.35 3.8 4.25 0 0 0.15 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 6.85 5.05 0 1.7 1.9 0 0PFC2 0 0 0.6 1.85 12.4 4.55 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
140
Po2 -VEN mmHg REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 35 20 20 7 13
2.00 31 25 34 22 10 43.00 18 27 25 24 28 26
Total H 35 24.5 24 25 29 23 18 7 9
LR 4.00 24 20 19 20 30 18 56 265.00 30 32 25 29 36 26 57 29 30 32 31
Total LR 27 26 25 24 20 33 22 57 29 30 29 31
LR-O2 10.00 37 40 31 42 82 37Total LR-O2 37 40 31 42 82 37
PFC1 6.00 31 25 27 43 327.00 17 19 22 17 26 17 24
Total PFC1 31 21 23 22 30 29 17 24
PFC2 8.00 33 25 25 23 20 22 23 33 18 209.00 22 39 14 104 28 20
Total PFC2 22 33 32 19.5 63.5 24 22 20 23 33 18 20
Desvestp de Po2 -VEN REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 6.5 2.943920289 0 5 3.399346342 8 0 4.5LR 3 6 0 5 0 3 4 0.5 0 0 3 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 4 4 0 13 3 0 0PFC2 0 0 7 5.5 40.5 4 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
141
Promedio de HCO3- -VEN REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 23 13 11 9.7 9
2.00 20.2 13 10.1 7.8 8 73.00 14.8 11 11.4 10.2 8.7 9
Total H 23 17.5 12 11.4 10.15 9.17 8 9.7 8
LR 4.00 13.9 18 16.2 17.1 16 14.1 14 145.00 16.1 16 6.6 13 16 16.1 15 15 16.2 17 15.9
Total LR 15 17 6.6 14.6 17.1 16 15.1 14 15 16.2 15 15.9
LR-O2 10.00 24 23 17.4 18.6 17.8 18Total LR-O2 24 23 17.4 18.6 17.8 18
PFC1 6.00 13 11 6.9 5.5 67.00 11 9.7 8.3 7.8 8 8.2 9
Total PFC1 13 11 8.3 8.3 6.65 7 8.2 9
PFC2 8.00 18.7 15 16.3 15.5 15.7 16 15.7 14 14 12.59.00 17 12 11.7 4.3 10.6 10
Total PFC2 17 18.7 14 14 9.9 13.2 16 10 15.7 14 14 12.5
Desvestp de HCO3- -VEN REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 2.7 1.061445555 0 0.05 1.347425529 0.2 0 0.9LR 1.1 1.15 0 1.6 0 0.4 1 0.45 0 0 1.25 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.25 1.4 0 1.15 0.65 0 0PFC2 0 0 1.65 2.3 5.6 2.55 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
142
Promedio de % So2C-VEN REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 65.1 17.6 12.1 2.4 4.3
2.00 53.6 30.9 38.8 11.6 3 0.93.00 21.6 36.3 34.8 31 38.8 34
Total H 65.1 37.6 28.27 34.8 34.9 20.83 18 2.4 2.6
LR 4.00 33.7 34 26.9 35.1 52 28 93 435.00 49.8 47.4 41.5 53.8 63 42 89 52 55.6 61 45.9
Total LR 41.75 40.7 41.5 40.35 35.1 58 35 91 52 55.6 52 45.9
LR-O2 10.00 68.5 72.6 57.4 76.8 95.5 73Total LR-O2 68.5 72.6 57.4 76.8 95.5 73
PFC1 6.00 48 27.1 21.7 51.5 367.00 18.4 21.3 23.8 13.6 26 16 28
Total PFC1 48 22.75 21.5 23.8 32.55 31 16 28
PFC2 8.00 58.2 36.6 38.1 32.2 24.6 29 33 57 19 23.39.00 27.1 60.2 12.2 97.3 38.8 20
Total PFC2 27.1 58.2 48.4 25.15 64.75 31.7 29 20 33 57 19 23.3
Desvestp de % So2C-VEN REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 16 7.858046124 0 3.9 12.70599159 15.95 0 1.7LR 8.05 6.7 0 13.45 0 5.8 7.1 1.7 0 0 9.15 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 4.35 0.2 0 18.95 4.9 0 0PFC2 0 0 11.8 12.95 32.55 7.1 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
143
FCT % REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 0 0 0 0 0
2.00 0 0 0 0 0 03.00 0 0 0 0 0 0
Total H 0 0 0 0 0 0 0 0 0
LR 4.00 0 0 0 0 0 0 0 05.00 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Total LR 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
LR-O2 10.00 0 0 0 0 0 0Total LR-O2 0 0 0 0 0 0
PFC1 6.00 0 0.5 2 2 27.00 0 2 2 3 2 2 3 2
Total PFC1 0 1.25 2 3 2 2 3 2
PFC2 8.00 0 2 3 3 4 3 3 2 1.59.00 0 1 1 3 3 2
Total PFC2 0 0 1.5 2 3 3.5 3 2 3 2 1.5
Desvestp de FCT REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0 0 0 0 0 0 0 0LR 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 1 0 0 0 0 0 0PFC2 0 0 1 1 0 1 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
144
cO2 RBC ART ml/ml REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 14.910716 9.42288 12.882492 7.37 6.30872
2.00 12.74407 9.85905 1.060208 11.616192 2.6733 0.8249043.00 10.993494 9.90528 7.876386 7.038752 7.083776 6.852492
Total H 14.910716 11.868782 9.72907 7.876386 4.04948 10.52748667 4.762896 7.37 3.566812
LR 4.00 10.6597 10.985856 8.9579 8.1003 8.027136 8.765208 4.082176 6.7793285.00 12.465216 9.9696 10.018242 9.136388 9.348912 10.423056 4.553856 7.863388 7.149168 7.618168 6.185172
Total LR 11.562458 10.477728 10.018242 9.047144 8.1003 8.688024 9.594132 4.318016 7.863388 7.149168 7.198748 6.185172
LR-O2 10.00 10.120216 7.136304 6.649884 6.466304 6.835608 6.326944Total LR-O2 10.120216 7.136304 6.649884 6.466304 6.835608 6.326944
PFC1 6.00 7.297238 10.82318 9.703476 9.4202 8.8576687.00 10.194318 8.14653 7.624064 7.6782 7.526512 3.975378 4.55868
Total PFC1 7.297238 10.508749 8.925003 7.624064 8.5492 8.19209 3.975378 4.55868
PFC2 8.00 13.153306 12.816832 11.908848 11.840374 11.472812 11.226654 10.76355 10.185876 10.2879849.00 6.395954 7.52544 5.936736 7.225816
Total PFC2 6.395954 13.153306 10.171136 8.922792 11.840374 11.472812 11.226654 7.225816 10.76355 10.185876 10.287984
Desvestp de cO2 RBC ART REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.875288 0.217330072 0 2.989272 2.48934212 2.089596 0 2.742LR 0.902758 0.508128 0 0.089244 0 0.660888 0.828924 0.23584 0 0 0.41942 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.314431 0.778473 0 0.871 0.665578 0 0PFC2 0 0 2.645696 2.986056 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
145
cO2 PL ART. REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 0.0894 0.1011 0.0588 0.1875 0.2613
2.00 0.0933 0.0708 0.0663 0.078 0 0.33693.00 0.0624 0.0615 0.0612 0.0585 0.0549 0
Total H 0.0894 0.07785 0.0778 0.0612 0.0624 0.0639 0 0.1875 0.2991
LR 4.00 0.0657 0.0621 0.0624 0.0744 0 0.0582 0 05.00 0.0705 0.0732 0.0795 0.0747 0 0.0756 0 0.1 0.0738 0.1 0.0777
Total LR 0.0681 0.06765 0.0795 0.06855 0.0744 0 0.0669 0 0.1 0.0738 0.1 0.0777
LR-O2 10.00 0.0921 0.0732 0.0801 0.0849 0.0864 0Total LR-O2 0.0921 0.0732 0.0801 0.0849 0.0864 0
PFC1 6.00 0.0705 0.0405 0.0612 0.051 07.00 0.0465 0.0333 0.0453 0.0429 0 0.0462 0
Total PFC1 0.0705 0.0435 0.04725 0.0453 0.04695 0 0.0462 0
PFC2 8.00 0.0999 0.0462 0.0609 0.0576 0.0636 0 0.0678 0 0.19.00 0.1296 0.069 0.0669 0.0639
Total PFC2 0.1296 0.0999 0.0576 0.0639 0.0576 0.0636 0 0.0639 0.0678 0 0.1
Desvestp de cO2 PL ART REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.01545 0.016907395 0 0.0039 0.010096534 0.0807 0 0.0378LR 0.0024 0.00555 0 0.00615 0 0.00045 0.0087 0.0009 0 0 0.0159 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.003 0.01395 0 0.00405 0.00375 0 0PFC2 0 0 0.0114 0.003 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
146
Promedio de cO2 PFC ART REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 0 0 0 0 0
2.00 0 0 0 0 0 03.00 0 0 0 0 0 0
Total H 0 0 0 0 0 0 0 0 0
LR 4.00 0 0 0 0 0 0 0 05.00 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Total LR 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
LR-O2 10.00 0 0 0 0 0 0Total LR-O2 0 0 0 0 0 0
PFC1 6.00 0 0.034256579 0 0.119763158 07.00 0.086315789 0 0.105197368 0.096026316 0 0 0
Total PFC1 0 0.060286184 0 0.105197368 0.107894737 0 0 0
PFC2 8.00 0 0.099263158 0 0.142421053 0.176947368 0 0 0 0.19.00 0 0.039921053 0 0
Total PFC2 0 0 0.069592105 0 0.142421053 0.176947368 0 0 0 0 0.1
Desvestp de cO2 PFC ART REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0 0 0 0 0 0 0 0LR 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.026029605 0.001078947 0 0.011868421 0.011328947 0 0PFC2 0 0 0.029671053 0.047473684 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
147
cO2 RBC VEN. REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 10.29361 1.88672 1.767326 0.3216 0.507056
2.00 8.25976 3.10545 4.471312 1.492224 0 0.1374843.00 2.518128 3.89136 2.937816 2.32624 2.911552 2
Total H 10.29361 5.388944 2.961177 2.937816 3.398776 2.057034 1 0.3216 0.32227
LR 4.00 3.883588 3.82704 2.52322 3.05721 4 2.561142 7 3.55.00 6.406272 5.08128 4.50441 5.262716 6 4.716264 8 4.3 4.246728 5 3.013794
Total LR 5.14493 4.45416 4.50441 3.892968 3.05721 5 3.638703 7 4.3 4.246728 4.3 3.013794
LR-O2 10.00 7.25141 5.447904 4.153464 5.351424 6.65444 5Total LR-O2 7.25141 5.447904 4.153464 5.351424 6.65444 5
PFC1 6.00 3.79488 2.977748 2.355318 5.10674 37.00 1.947824 1.798146 2.041088 1.09344 2 0.652178 1
Total PFC1 3.79488 2.462786 2.076732 2.041088 3.10009 3 0.652178 1
PFC2 8.00 8.032764 4.806312 4.696968 3.926468 2.933796 3 3.70175 6 2.19.00 2.142526 4.84008 0.784704 1.651148
Total PFC2 2.142526 8.032764 4.823196 2.740836 3.926468 2.933796 3 1.651148 3.70175 6 2.1
Desvestp de cO2 RBC VEN REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 2.870816 0.824724794 0 1.072536 0.614584432 1.053642 0 0.184786LR 1.261342 0.62712 0 1.369748 0 1.007144 1.077561 0.350544 0 0 0.719312 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.514962 0.278586 0 2.00665 0.629264 0 0PFC2 0 0 0.016884 1.956132 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
148
cO2 RBC VEN. REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 10 1.88672 1.767326 0 1
2.00 8.25976 3.10545 4.471312 1.492224 0 03.00 2.518128 3.89136 3 2.32624 2.911552 2
Total H 10 5.388944 2.961176667 3 3.398776 2.057034 1 0 0
LR 4.00 3.883588 3.82704 2.52322 3.05721 4 3 7 3.55.00 6.406272 5.08128 5 5.262716 6 5 8 4.3 4 5 3.013794
Total LR 5.14493 4.45416 5 3.892968 3.05721 5 4 7 4.3 4 4.3 3.013794
LR-O2 10.00 7 5.447904 4 5.351424 6.65444 5Total LR-O2 7 5.447904 4 5.351424 6.65444 5
PFC1 6.00 3.79488 2.977748 2 5.10674 37.00 1.947824 2 2.041088 1.09344 2 1 1
Total PFC1 3.79488 2.462786 2 2.041088 3.10009 3 1 1
PFC2 8.00 8.032764 4.806312 5 3.926468 2.933796 3 4 6 2.19.00 2 4.84008 1 2
Total PFC2 2 8.032764 4.823196 3 3.926468 2.933796 3 2 4 6 2.1
Desvestp de cO2 PFC VEN REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0 0 0 0 0 0 0 0LR 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.005799342 0.004315789 0 0.014026316 0.003236842 0 0PFC2 0 0 0.002967105 0.016453947 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
149
cO2 PL VEN REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 0.105 0.06 0.06 0.021 0.039
2.00 0.093 0.075 0.102 0.066 0 0.0123.00 0.054 0.081 0.075 0.072 0.084 0
Total H 0.105 0.0735 0.072 0.075 0.087 0.07 0 0.021 0.026
LR 4.00 0.072 0.06 0.057 0.06 0 0.054 0 0.15.00 0.09 0.096 0.075 0.087 0 0.078 0 0.1 0.09 0.1 0.093
Total LR 0.081 0.078 0.075 0.072 0.06 0 0.066 0 0.1 0.09 0.1 0.093
LR-O2 10.00 0.111 0.12 0.093 0.126 0.246 0Total LR-O2 0.111 0.12 0.093 0.126 0.246 0
PFC1 6.00 0.093 0.075 0.081 0.129 07.00 0.051 0.057 0.066 0.051 0 0.051 0
Total PFC1 0.093 0.063 0.069 0.066 0.09 0 0.051 0
PFC2 8.00 0.099 0.075 0.075 0.069 0.06 0 0.069 0 0.19.00 0.066 0.117 0.042 0.06
Total PFC2 0.066 0.099 0.096 0.059 0.069 0.06 0 0.06 0.069 0 0.1
Desvestp de cO2 PL VEN REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0.0195 0.008831761 0 0.015 0.010198039 0.024 0 0.0135LR 0.009 0.018 0 0.015 0 0.009 0.012 0.0015 0 0 0.009 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.012 0.012 0 0.039 0.009 0 0PFC2 0 0 0.021 0.0165 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
150
cO2 PFC VEN REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 0 0 0 0 0
2.00 0 0 0 0 0 03.00 0 0 0 0 0 0
Total H 0 0 0 0 0 0 0 0 0
LR 4.00 0 0 0 0 0 0 0 05.00 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Total LR 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
LR-O2 10.00 0 0 0 0 0 0Total LR-O2 0 0 0 0 0 0
PFC1 6.00 0 0.006743421 0 0.046394737 07.00 0.018342105 0 0.035605263 0.018342105 0 0 0
Total PFC1 0 0.012542763 0 0.035605263 0.032368421 0 0 0
PFC2 8.00 0 0.026973684 0 0.037223684 0.043157895 0 0 0 09.00 0 0.021039474 0 0
Total PFC2 0 0 0.024006579 0 0.037223684 0.043157895 0 0 0 0 0
Desvestp de cO2 PFC VEN REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 0 0 0 0 0 0 0 0LR 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.005799342 0.004315789 0 0.014026316 0.003236842 0 0PFC2 0 0 0.002967105 0.016453947 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
151
Promedio de D ART -VEN REGISTROGRUPO PERRO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 1.00 4.601504 7.57726 11.113966 7.2149 6.023964
2.00 4.48461 6.7494 -3.446804 10.135968 2 1.012323.00 8.483766 5.99442 4.92477 4.699012 4.143124 4
Total H 4.601504 6.484188 6.773693333 4.92477 0.626104 8.464352667 3 7.2149 3.518142
LR 4.00 6.769812 7.160916 6.44008 5.05749 4 6.208266 -3 3.25.00 6.039444 4.86552 5.518332 3.861372 3 5.704392 -3 3.6 2.88624 2.6 3.156078
Total LR 6.404628 6.013218 5.518332 5.150726 5.05749 3 5.956329 -3 3.6 2.88624 2.9 3.156078
LR-O2 10.00 2.849906 1.6416 2.48352 1.07378 0.021568 1Total LR-O2 2.849906 1.6416 2.48352 1.07378 0.021568 1
PFC1 6.00 3.479858 7.838445158 7.386621 4.308828421 67.00 8.309967684 6.393737 5.631868105 6.654344211 5 3.433308 3
Total PFC1 3.479858 8.074206421 6.890179 5.631868105 5.481586316 6 3.433308 3
PFC2 8.00 5.121442 8.054009474 7.29003 8.007703368 8.676405474 8 7.138284 4 8.29.00 4.317028 2.656241579 5.207143 5.627121
Total PFC2 4.317028 5.121442 5.355125526 6.248586 8.007703368 8.676405474 8 5.627121 7.138284 4 8.2
Desvestp de D ART -VEN REGISTROGRUPO -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12H 0 1.999578 0.646420008 0 4.072908 3.081545382 0.931254 0 2.505822LR 0.365184 1.147698 0 1.289354 0 0.354806 0.251937 0.115304 0 0 0.292992 0LR-O2 0 0 0 0 0 0PFC1 0 0.235761263 0.496442263 0 1.172757895 0.039156105 0 0PFC2 0 0 2.698883947 1.041443737 0 0 0 0 0 0 0
IM-2004-I-12
152
ANEXO 4. GRAFICAS DE QUÍMICA Y TEMPERATURA.
IM-2004-I-12
153
ALB
0.5
1
1.5
2
2.5
3
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
g/d
lH LR PFC1 PFC2 LR-O2
GLOB
0.7
1.2
1.7
2.2
2.7
3.2
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
gr /
dl
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
IM-2004-I-12
154
PROT
1.5
2
2.5
3
3.5
4
4.5
5
5.5
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
g/d
lH LR PFC1 PFC2 LR-O2
RELACION A/G
-0.4
-0.2
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
1.8
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
RE
LA
CIO
N
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
IM-2004-I-12
155
COL
-20
30
80
130
180
230
-2 0 2 4 6 8 10 12
REGISTRO
mg
/dl
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
LDH
-900
100
1100
2100
3100
4100
5100
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00REGISTRO
U/l
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
IM-2004-I-12
156
FA
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
-2 0 2 4 6 8 10 12REGISTRO
U/l
H LR PFC1 PFC2
GGT
8
10
12
14
16
18
20
22
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00REGISTRO
U/l
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
c
IM-2004-I-12
157
ALT
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
-2 0 2 4 6 8 10 12REGISTRO
U/l
H LR PFC2 LR-O2
AST
0
200
400
600
800
1000
1200
-2.00 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
REGISTRO
U/l
H LR PFC1 PFC2 LR-O2
IM-2004-I-12
158
TEMPERATURA
28
30
32
34
36
38
40
42
-2 0 2 4 6 8 10 12
REGISTRO
°c
H LR PFC1 PFC2
IM-2004-I-12
159
ANEXO 5. FOTOS DURANTE EL PROCEDIMIENTO
IM-2004-I-12
160
1. INCISIÓN PARTE SUPERIOR CUELLO.
2. DISECCIÓN.
3. EXPOSICIÓN DE LA ARTERIA CARÓTIDA.
IM-2004-I-12
161
4. FIJACIÓN DE YELCO
VENA RADIAL.
5. FIJACIÓN CATÉTER VENA YUGULAR.
(Y ARTERIA CARÓTIDA).
IM-2004-I-12
162
ANEXO 6. TABLA DE ANESTESIA, CANTIDADES PARA HEMODILUCIÓN.
20 mg XILACINE50 mg KETAMINA
MIN MAX MIN MAX 100% HEMACEL PFC 1 4 25 40 70 40% (20%) (80%)
mg / Kg. mg / Kg. mg / Kg. mg / Kg. ml / Kg.
DOSIS/PESO1,350 0.07 0.27 0.68 1.08 1,350 94.50 37.80 7.56 30.241,375 0.07 0.28 0.69 1.10 1,375 96.25 38.50 7.70 30.801,400 0.07 0.28 0.70 1.12 1,400 98.00 39.20 7.84 31.361,425 0.07 0.29 0.71 1.14 1,425 99.75 39.90 7.98 31.921,450 0.07 0.29 0.73 1.16 1,450 101.50 40.60 8.12 32.481,475 0.07 0.30 0.74 1.18 1,475 103.25 41.30 8.26 33.041,500 0.08 0.30 0.75 1.20 1,500 105.00 42.00 8.40 33.601,525 0.08 0.31 0.76 1.22 1,525 106.75 42.70 8.54 34.161,550 0.08 0.31 0.78 1.24 1,550 108.50 43.40 8.68 34.721,575 0.08 0.32 0.79 1.26 1,575 110.25 44.10 8.82 35.281,600 0.08 0.32 0.80 1.28 1,600 112.00 44.80 8.96 35.841,625 0.08 0.33 0.81 1.30 1,625 113.75 45.50 9.10 36.401,650 0.08 0.33 0.83 1.32 1,650 115.50 46.20 9.24 36.961,675 0.08 0.34 0.84 1.34 1,675 117.25 46.90 9.38 37.521,700 0.09 0.34 0.85 1.36 1,700 119.00 47.60 9.52 38.081,725 0.09 0.35 0.86 1.38 1,725 120.75 48.30 9.66 38.641,750 0.09 0.35 0.88 1.40 1,750 122.50 49.00 9.80 39.201,775 0.09 0.36 0.89 1.42 1,775 124.25 49.70 9.94 39.761,800 0.09 0.36 0.90 1.44 1,800 126.00 50.40 10.08 40.321,825 0.09 0.37 0.91 1.46 1,825 127.75 51.10 10.22 40.881,850 0.09 0.37 0.93 1.48 1,850 129.50 51.80 10.36 41.441,875 0.09 0.38 0.94 1.50 1,875 131.25 52.50 10.50 42.001,900 0.10 0.38 0.95 1.52 1,900 133.00 53.20 10.64 42.561,925 0.10 0.39 0.96 1.54 1,925 134.75 53.90 10.78 43.121,950 0.10 0.39 0.98 1.56 1,950 136.50 54.60 10.92 43.681,975 0.10 0.40 0.99 1.58 1,975 138.25 55.30 11.06 44.242,000 0.10 0.40 1.00 1.60 2,000 140.00 56.00 11.20 44.802,025 0.10 0.41 1.01 1.62 2,025 141.75 56.70 11.34 45.362,050 0.10 0.41 1.03 1.64 2,050 143.50 57.40 11.48 45.922,075 0.10 0.42 1.04 1.66 2,075 145.25 58.10 11.62 46.482,100 0.11 0.42 1.05 1.68 2,100 147.00 58.80 11.76 47.042,125 0.11 0.43 1.06 1.70 2,125 148.75 59.50 11.90 47.602,150 0.11 0.43 1.08 1.72 2,150 150.50 60.20 12.04 48.162,175 0.11 0.44 1.09 1.74 2,175 152.25 60.90 12.18 48.722,200 0.11 0.44 1.10 1.76 2,200 154.00 61.60 12.32 49.282,225 0.11 0.45 1.11 1.78 2,225 155.75 62.30 12.46 49.842,250 0.11 0.45 1.13 1.80 2,250 157.50 63.00 12.60 50.402,275 0.11 0.46 1.14 1.82 2,275 159.25 63.70 12.74 50.962,300 0.12 0.46 1.15 1.84 2,300 161.00 64.40 12.88 51.522,325 0.12 0.47 1.16 1.86 2,325 162.75 65.10 13.02 52.082,350 0.12 0.47 1.18 1.88 2,350 164.50 65.80 13.16 52.642,375 0.12 0.48 1.19 1.90 2,375 166.25 66.50 13.30 53.202,400 0.12 0.48 1.20 1.92 2,400 168.00 67.20 13.44 53.762,425 0.12 0.49 1.21 1.94 2,425 169.75 67.90 13.58 54.322,450 0.12 0.49 1.23 1.96 2,450 171.50 68.60 13.72 54.882,475 0.12 0.50 1.24 1.98 2,475 173.25 69.30 13.86 55.442,500 0.13 0.50 1.25 2.00 2,500 175.00 70.00 14.00 56.002,525 0.13 0.51 1.26 2.02 2,525 176.75 70.70 14.14 56.562,550 0.13 0.51 1.28 2.04 2,550 178.50 71.40 14.28 57.122,575 0.13 0.52 1.29 2.06 2,575 180.25 72.10 14.42 57.682,600 0.13 0.52 1.30 2.08 2,600 182.00 72.80 14.56 58.242,625 0.13 0.53 1.31 2.10 2,625 183.75 73.50 14.70 58.802,650 0.13 0.53 1.33 2.12 2,650 185.50 74.20 14.84 59.362,675 0.13 0.54 1.34 2.14 2,675 187.25 74.90 14.98 59.922,700 0.14 0.54 1.35 2.16 2,700 189.00 75.60 15.12 60.482,725 0.14 0.55 1.36 2.18 2,725 190.75 76.30 15.26 61.042,750 0.14 0.55 1.38 2.20 2,750 192.50 77.00 15.40 61.602,775 0.14 0.56 1.39 2.22 2,775 194.25 77.70 15.54 62.162,800 0.14 0.56 1.40 2.24 2,800 196.00 78.40 15.68 62.722,825 0.14 0.57 1.41 2.26 2,825 197.75 79.10 15.82 63.282,850 0.14 0.57 1.43 2.28 2,850 199.50 79.80 15.96 63.842,875 0.14 0.58 1.44 2.30 2,875 201.25 80.50 16.10 64.402,900 0.15 0.58 1.45 2.32 2,900 203.00 81.20 16.24 64.962,925 0.15 0.59 1.46 2.34 2,925 204.75 81.90 16.38 65.522,950 0.15 0.59 1.48 2.36 2,950 206.50 82.60 16.52 66.082,975 0.15 0.60 1.49 2.38 2,975 208.25 83.30 16.66 66.643,000 0.15 0.60 1.50 2.40 3,000 210.00 84.00 16.80 67.20
en ml de xilacina en ml de ketamina
1 ml SETON =1 ml KETAMINA HCL=
ANESTESIA
DESCRIPCION
INFUSIÓN (40% VOL.)VOLEMIAXILACINE KETAMINAPESO EN Kg.PESO en Kg.
HEMODILUCION
EVALUACION DE EFICACIA Y SEGURIDAD DE HEMOSUSTITUTOS BASADOS EN PFC-OC
IM-2004-I-12
163
ANEXO 7. FORMATO PARA REGISTRO DE EXPERIMENTOS.
REF HORA EVENTO
EVALUACION DE EFICACIA Y SEGURIDAD DE HEMOSUSTITUTOS BASADOS EN PFC-OC
EXP. Nº
Fecha _________________________Lugar _________________________
Sujeto __________________________Nº___ Caja ___ Sexo___ Peso ______
TIPO DE EXPERIMENTO ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
ASISTENTES
EXPERIMENTO
MATERIALES