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    Ortega Mora, L.M. ; Aguado Martnez, A.; Fernndez Garca, A.; lvarez Garca, G.

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    Ortega Mora, L.M. ; Aguado Martnez, A.; Fernndez Garca, A.; lvarez Garca, G.

    Introduccin

    Neospora caninum es un protozooformador de quistes tisulares pertene-ciente al Phylum Apicomplexa (Dubey etal. 2002). El ciclo biolgico de N. caninumes heteroxeno facultativo. Hasta la fecha,se han identificado dos especies de hos-pedadores definitivos -el perro y el coyote(McAllister et al. 1998; Gondim et al.2004a)- que pueden eliminar ooquistescon sus heces. Los ooquistes esporulanen el ambiente y constituyen la fase

    infectante para los hospedadores inter-mediarios entre los cuales se han descritodiversas especies de ungulados, incluidala bovina (Thilsted & Dubey, 1989). En elhospedador intermediario acontecen dosestadios diferentes del parsito: el taqui-

    zoto, que se multiplica rpidamente endiversos rganos del hospedador durantela fase aguda de la infeccin; y el bradi-zoto que se multiplica lentamente en elinterior de quistes titulares localizadosfundamentalmente en el sistema nerviosocentral y que se socia a la fase crnica dela infeccin.

    En la actualidad, la neosporosis estconsiderada como una de las principalescausas de aborto y fallo reproductivo enel ganado ovino en todo el mundo (Dubeyet al., 2005). En Espaa, las altas tasas

    de prevalencia (Quintanilla-Gozalo et al.,1999) y, sobre todo, la alta prevalencia dela infeccin en fetos abortados (Pereira-Buen et al., 2003) pone de manifiestola gran repercusin econmica de estaparasitosis en nuestro pas.

    Transmisin

    Existen dos modos posibles de trans-misin de la infeccin por N. caninum enel ganado bovino. La transmisin hori-zontal va oral por ingestin de ooquistesesporulados se ha evidenciado a travsde estudios seroepidemiolgicos (Woudaet al., 1999; Dijkstra et al., 2001; Dijkstraet al., 2002; Schares et al., 2002) y hasido demostrada por medio de infeccio-nes experimentales en vacas (De-Marezet al., 1999; Trees et al., 2002; Gondim

    et al., 2004b). Sin embargo, es la trans-misin vertical por el paso de los taqui-zotos desde las madres infectadas a losfetos va transplacentaria la que tiene unamayor importancia epidemiolgica debidoa su alta eficiencia con tasas de infec-

    Neosporosis Bovina: nuevos avancesen el conocimiento de la transmisin

    y el controlL.M. Ortega Mora, A. Aguado Martnez, A. Fernndez Garca, y G. lvarez GarcaGrupo SALUVET.

    Dpto. de Sanidad Animal, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid.XI CONGRESO ANEMBE DE MEDICINA BOVINA

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    cin congnita que oscilan entre el 44%(Bergeron et al., 2000) y el 95% (Davison etal., 1999). Adems, la transmisin verticalpuede darse en gestaciones sucesivas deun mismo animal (Barr et al., 1993) y, a suvez, un animal congnitamente infectadopodr transmitir el parsito a su descen-dencia siendo sta la principal causa del

    mantenimiento de la infeccin en el tiem-po en las explotaciones bovinas (Andersonet al., 2000).

    Las consecuencias de la transmisintransplacentaria en las novillas o vacasgestantes son diferentes en funcin delmomento de la gestacin en las questa tiene lugar. Si la infeccin del fetose produce en el primer trimestre de lagestacin, periodo en el que el feto anno es inmunocompetente, la consecuenciams probable es la muerte fetal (Dubey etal., 1992; Barr et al., 1994; Williams et al.,

    2000; Macaldowie et al., 2004). En cambio,si la infeccin se produce en el segundotercio de la gestacin, cuando el sistemainmune del feto an no es maduro, lasconsecuencias pueden ser el aborto o elnacimiento de terneros congnitamenteinfectados (Quintanilla-Gozalo et al., 2000;Williams et al., 2000; Guy et al., 2001;Innes et al., 2001; M aley et al., 2003).Finalmente, cuando la transmisin se pro-duce en el ltimo tercio de la gestacin,generalmente, se produce el nacimientode terneros sanos pero congnitamenteinfectados (Quintanilla-Gozalo et al., 2000;Williams et al., 2000; Guy et al., 200 1;Innes et al., 2001).

    Se han descrito, experimentalmente,otros modos de transmisin de la infeccinen el ganado bovino cuya importancianatural es baja o, en todo caso, se desco-noce. En este sentido, se ha demostradola transmisin del parsito por mediode la ingestin de calostro o leche con-taminada con taquizotos (Uggla et al.,1998; Davison et al., 2001) y la transmi-sin intrauterina en novillas inseminadascon semen contaminado con taquizotos(Serrano et al., 2006).

    Diagnstico

    En el diagnstico de la neosporosis seplantean dos cuestiones principales: porun lado, el diagnstico individual de lainfeccin tanto in vivo como en los fetosabortados lo cual requiere un conoci-miento adecuado de toda la batera deherramientas diagnsticas disponibles ascomo la eleccin de las ms adecuadas en

    cada caso y su correcta interpretacin; porel otro, un abordaje global del diagnstico(diagnstico de rebao) teniendo en cuen-ta las caractersticas epidemiolgicas de lagranja; con el fin de conocer el grado dediseminacin de la infeccin, la implica-

    cin de la misma en los abortos y, sobretodo, para la eleccin de las medidas decontrol ms adecuadas.

    La recogida de datos clnicos y epi-demiolgicos en las explotaciones debesiempre llevarse a cabo puesto que nos

    orienta ante una sospecha de infeccinpor N. caninum o ante la posible parti-cipacin del mismo en los abortos. Sedeben recoger los datos sobre el historialreproductivo y abortivo en el ltimo ao y,en la medida de lo posible, datos sobre lascaractersticas de los abortos (edad fetal,estado del mismo). Una informacin deespecial inters es conocer el patrn depresentacin de los abortos (endmico oepidmico) (Anderson et al., 2000; Schareset al., 2002) que se dan en la explotacinpuesto que, en el caso de que se confir-me el diagnstico de neosporosis, puedeorientar sobre la forma de transmisinpredominante en dicha explotacin y, portanto, sobre la eleccin de las medidas decontrol adecuadas.

    Los datos clnicos y epidemiolgicospueden sugerir la infeccin por N. caninum.o su participacin en los abortos pero el

    diagnstico final debe siempre realizarsemediante el empleo de tcnicas de diag-nstico laboratorial. Actualmente, dispo-nemos de una amplia batera de tcnicaslaboratoriales (revisado en Ortega-Moraet al., 2006). Destacan, por un lado, lastcnicas de diagnstico serolgico, siendo

    la inmunofluorescencia (IFI) y el ensayoinmunoenzimtico (ELISA) las ms comn-mente empleadas, y por otro, las tcnicasde deteccin directa del parsito entre lasque se encuentran la PCR y la inmunohis-toqumica. Por ltimo, el examen histol-gico en bsqueda de lesiones compatiblescon la neosporosis contina siendo unaherramienta imprescindible para el diag-nstico del aborto asociado a N. caninum.

    DIAGNSTICO INDIVIDUAL

    Debe incluir tanto el diagnstico invivo como el examen de los fetos abor-tados.

    - Diagnstico in vivoEl diagnstico indirecto mediante ladeteccin de anticuerpos especficosfrente a N. caninum es la forma msadecuada y eficaz de detectar la

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    infeccin en el animal in vivo, siendola IFI y el ELISA las dos principalestcnicas empleadas. Se debe tener encuenta que los animales crnicamenteinfectados presentan fluctuaciones muyacentuadas en los niveles de anticuer-pos a lo largo del tiempo. As, se sabeque poco antes y poco despus deun aborto las vacas infectadas suelenpresentar niveles elevados de anticuer-pos (Quintanilla-Gozalo et al., 2000),mientras que, en otros momentos de lavida del animal, especialmente despusde un aborto, los niveles de anticuerpospueden bajar considerablemente llegan-do incluso a ser indetectables; en estoscasos podra darse un resultado falsonegativo (Jenkins et al., 2002).

    Otra cuestin importante es la correctaclasificacin de una muestra de suero

    como seropositiva o seronegativa. Eneste sentido, aunque un estudio recien-te interlaboratorial mostr un nivel deconcordancia elevado entre las tcnicasserolgicas ms comnmente emplea-das en Europa (von Blumroder et al.,2004), en ocasiones, se detectan dis-crepancias entre las principales tcnicasde ELISA en la correcta clasificacin desueros cercanos al punto de corte. Enestos casos se recomienda repetir elanlisis a las pocas semanas o emplearuna tcnica serolgica confirmatoriacomo el inmunoblot (lvarez-Garca et

    al., 2003; Bartels et al., 2006). Diversosautores aconsejan el empleo de dife-rentes puntos de corte en funcin de laedad de los animales y el propsito delanlisis (Atkinson et al., 2000; lvarez-Garca et al., 2003).

    Por ltimo, cabe destacar la adaptacinreciente de ELISAs indirectos para suempleo en muestras de leche individualobtenindose, en general, concordan-cias muy buenas con los resultadosen muestras de suero (Bjorkman et al.1997, Schares et al. 2004). Adems, elempleo de muestras de leche presentauna serie de ventajas frente al empleode muestras de suero como son quela recogida de la muestra no resultainvasiva y minimiza el manejo de losanimales.

    - Diagnstico en el feto abortadoPara un diagnstico adecuado de lainfeccin por N. caninum en el fetoabortado se recomienda el envo allaboratorio del feto entero con la pla-centa materna. Si esto no es posible,se deben enviar las muestras de cere-

    bro, corazn e hgado para el examenhistolgico y la PCR, y muestras de losfluidos fetales torcico o abdominalpara la serologa. La recogida y envode las muestras se debe realizar loms rpidamente posible despus de laexpulsin del feto para evitar la autolisisde los tejidos.

    El diagnstico debe comenzar con elexamen macroscpico del feto quepuede aportarnos informacin sobresu edad y permitir la identificacinde lesiones macroscpicas que, aunque

    poco frecuentes, pueden estar asocia-das a la infeccin por N. caninum. Entrelas lesiones observables destaca la pre-sencia de focos blanquecinos en ms-culo esqueltico y corazn y focos deplidos a oscuros en el cerebro (Dubey

    & Lindsay, 1996; Anderson et al., 2000).El diagnstico de la infeccin se debecompletar mediante el examen histo-lgico de cerebro, corazn e hgadoy la deteccin del parsito mediantePCR. En cuanto a la serologa fetal unresultado positivo mediante IFI, ELISA oinmunoblot confirmara la infeccin delfeto (Otter et al., 1997; Sondgen et al.,2001), sin embargo, no puede tomarsecomo tcnica exclusiva para el diag-nstico de la infeccin en el feto ya quediversos factores, tales como un falloen la inmunocompetencia del feto o laautolisis y consiguiente degradacin delas inmunoglobulinas, pueden arrojarfalsos negativos (Wouda et al., 1997).Adems, la serologa fetal slo es til enfetos abortados a partir del quinto mesde gestacin, fecha a partir de la cualson inmunocompetentes.

    DIAGNSTICO DE REBAO

    Una vez demostrada la presencia de N.caninum en la explotacin, es convenienterealizar un estudio seroepidemiolgico paraconocer la implicacin del parsito en losabortos (Thurmond and Hietala 1995; Sager etal., 200 1; Hall et al., 2005). Para ello, se debecalcular la razn de seropositividad en vacasabortadas y no abortadas. En las explotacio-nes en las que N. caninum es agente causalde los abortos, la razn de seropositividad enlas vacas abortadas ser significativamente

    mayor que en las vacas no abortadas. Unavez confirmada la implicacin de N. caninumen la produccin de abortos y en vistas a laeleccin de las medidas de control ms ade-cuadas, resulta importante conocer el patrnde abortos as como la forma de transmisin

    Control

    Explotacin infectadaExplotacin no infectada

    Control de la transmisin

    vertical

    Control de la transmisin

    horizontal

    Seguimiento estado serolgico Reposicin con animales negativos Control de la transmisin horizontal(perros)

    Control de los perros en la explotacin Evitar contaminacin de piensos,agua de bebida y pastos por ooquistesprocedentes de heces de perros

    Retirada inmediata de placenta, restosde fudos etales y etos abortados

    1er OBJETIVO: Reducir el nmero de reporductoras positivas

    Tasa de abortos alta

    Seroprevalencia baja

    Eliminacin de todoslos animales positivos

    Seroprevalencia alta

    Eliminacin gradual yselectiva de animalesseropositivos

    - Vacas con antecedentes de abortos- Vacas con terneros seropositivos- Transerencia de embriones en vacas seropositivas de alto valor gentico

    2 OBJETIVO: Evitar entrada de nuevos casos

    CONTROL DE LA REPOSICIN: Interna: Terneros con serologa precalostralnegativa de madres seronegativas Externa: Serologa negativa

    Figura 1. Medidas para el control de la neosporosis en las explotaciones bovinas.

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    predominante de la infeccin en la explo-tacin. Para ello, los tres mtodos princi-pales que se emplean son la determinacinde la odds ratio (ndice que compara laseropositividad en vacas abortadas y noabortadas), la asociacin entre la serologaprecalostral y maternal y la determinacinde la avidez de los anticuerpos mediante

    ELISA de avidez. En general un patrn deaborto endmico con una transmisinpredominantemente vertical estar aso-ciado a una odds ratio cercana a 2, unaasociacin positiva entre la serologa delas madres y su descendencia y una avidezalta de los anticuerpos en la mayora de losanimales infectados de la explotacin. Sinembargo, un patrn de aborto epidmicocon una transmisin predominantementehorizontal estar asociado a una oddsratio significativamente superior a 2, unaausencia de asociacin entre la serologade las madres y su descendencia y una

    avidez predominantemente baja de losanticuerpos (Thurmond and Hietala 1995;Schares et al., 2002; Dijkstra et al., 2002;Dijkstra et al., 2003; Aguado-Martnez etal., 2005).

    Por ltimo, cabe sealar que en losltimos aos se han desarrollado ELISAspara su empleo en muestras de tanquede leche. Estos estudios han reveladoque estos ELISAs tan slo son tiles enexplotaciones con seroprevalencias intra-rebao del 10-15 % (Bartels et al., 2005),por lo que este tipo de muestra no seraadecuado para descartar la infeccin enun rebao aunque s como herramienta deseguimiento serolgico en los programasde control de la neosporosis (Varcasia etal., 2006).

    Control

    En muchos pases, N. caninum es con-siderada la principal causa de abortos(Dubey et al., 2005). La eleccin de lasmedidas de control ms adecuadas encada pas, regin e incluso en cada explo-tacin vara en funcin de su situacin

    seroepidemiolgica, de ah la necesidad deun diagnstico de rebao adecuado. En lafigura 1 se detalla esquemticamente lospasos a seguir para el control de la infec-cin por N. caninum en las explotacionesbovinas.

    A continuacin, se describen las opcio-nes de control de las que disponemos en laactualidad.

    MEDIDAS HIGINICAS

    - Control de la poblacin canina

    La presencia de perros en las explo-taciones bovinas es considerada unfactor de riesgo asociado a la neos-porosis bovina (Par et al., 1998;Schares et al., 2003). Igualmente, se

    ha encontrado una asociacin entrela densidad de perros en un reay la seropositividad en el ganadobovino de esa regin sealndoseque, incluso, los perros ajenos a unagranja pueden constituir un riesgode infeccin para el ganado (Schareset aL., 2003).

    Debido a todo ello y, aunque el ries-go de transmisin horizontal de N.caninum es bajo, se debe prevenir enla medida de lo posible el acceso delos perros al pasto, pienso y agua delos animales.

    - Eliminacin segura de los fetos abor-tados y tejidos placentariosLa eliminacin de ooquistes con lasheces de los perros despus de laingestin de tejidos bovinos infecta-dos con N. caninum ha sido demos-

    trado en diversas ocasiones (McAlIister et al., 1998; Dijkstra et aL.,2001; Gondim et al., 2004). Por estarazn, con el fin de disminuir elriesgo de infeccin en el hospedadordefinitivo, los fetos abortados, pla-centas y otros tejidos bovinos debenser eliminados de forma segura loms rpidamente posible. Por otrolado, la transmisin horizontal poringestin de calostro contaminadofue demostrada en una ocasin porlo que, como medida de precaucin,se debe evitar, igualmente, el accesodel ganado a tejidos potencialmenteinfecciosos.

    - Control de roedoresLa infeccin natural por N. caninumha sido detectada en ratas y ratonesmediante serologa (Huang et al.,2004) y PCR (Hughes et al., 2006).Aunque se desconoce su implicacinen la epidemiologa del parsito, losroedores podran constituir un reser-vorio de la infeccin para el hospe-dador definitivo, por ello, se deberanaplicar medidas regulares de controlde los roedores en las explotaciones

    bovinas.

    MANEJO DE LA REPRODUCCIN

    - Transferencia de embriones a vacasseronegativasLa transferencia de embriones dehembras infectadas a no infectadaspuede ser una medida adecuada deprevencin de la transmisin trans-placentaria sobre todo en el caso dereproductoras de alto valor gentico(Baillargeon et al., 2001; Campero etal., 2003).

    - Inseminacin artificial de hembrasseropositivas con semen de toros deaptitud crnicaUn estudio llevado a cabo en Espaasugiere que la inseminacin de vacas

    infectadas de aptitud lctea consemen de toros de carne reduce elriesgo de aborto (Lpez-Gatius et al.,2005). Este hecho requiere de msestudios para su confirmacin.

    MEDIDAS DE SACRIFICIO Y REPOSI-CIN SELECTIVAS

    Existen diversas estrategias de eliminacinms o menos selectivas de los anima-les seropositivos que, en combinacin,con otras medidas, van encaminadas a lareduccin/eliminacin de la infeccin enlas explotaciones.

    La seleccin de una estrategia u otradepende de la seroprevalencia en la gran- ja. As se puede optar desde el sacrificiode todos los animales seropositivos dela explotacin hasta la eliminacin tanslo de las reproductoras con terneros

    seropositivos o de las vacas abortadas ola exclusin de las terneras seropositivaspara la reposicin.

    INMUNOPROFILAXIS

    Hasta el momento slo se ha comer-cializado una vacuna basada en el empleode taquizotos inactivados. Sin embargo, laeficacia de la misma es de baja a mode-rada. En un estudio de campo en NuevaZelanda dicha vacuna proporcion pro-teccin tan slo en dos de cinco granjascon una eficacia muy variable y en otroestudio se obtuvo una eficacia media del46% aunque se observ un ligero efectonegativo en seis de las 25 granjas estudia-das (Romero el al., 2004).

    En la actualidad, el desarrollo de vacu-nas frente a la neosporosis es un campoen el que se est trabajando intensamente.Los nuevos estudios deberan centrarse enel desarrollo de nuevas formulaciones queno slo sean seguras y eficaces frente alaborto y la transmisin vertical sino tam-bin que permitan la diferenciacin entreanimales vacunados e infectados medianteel empleo de una tcnica diagnstica sen-

    cilla. Este ltimo punto es muy importanteporque la falta de discriminacin entreanimales vacunados e infectados impide elseguimiento del estatus de la infeccin y,por tanto, la continuidad en la aplicacinde las medidas de control.

    QUIMIOTERAPIA

    En la actualidad el tratamiento qui-mioterpico no es factible por la falta defrmacos realmente eficaces y econmica-mente rentables.

    Sin embargo, diversos estudios enfases iniciales sugieren que el tratamientoquimioterpico podra constituir, a largoplazo, una opcin real para el control de laneosporosis (Kritzner et al., 2002; Gottsteinet al., 2005).

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    Referencias

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