CUESTIONARIO DE GRAM NEGATIVAS

1. ¿Explique la patogenia de las diferentes variedades de Escherichia coli?

Escherichia coli enterotoxigénica (ECET)

Se parece mucho a V. cholerae, se adhiere a la mucosa del intestino delgado, no la invade, y elabora toxinas que producen diarrea. No hay cambios histológicos en las células de la mucosa y muy poca inflamación. Produce diarrea no sanguinolenta en niños y adultos, sobre todo en países en vías de desarrollo, aunque los desarrollados también se ven afectados.

Escherichia coli enteroinvasiva (ECEI)

Es inmóvil, no fermenta la lactosa. Invade el epitelio intestinal causando diarrea sanguinolenta en niños y adultos. Libera el calcio en grandes cantidades impidiendo la solidificación ósea, produciendo artritis y en algunos casos arterioesclerosis.

Escherichia coli enterohemorrágica o verotoxigénica (ECEH)

La convención internacional de nomenclatura de patógenos ha recomendado el uso de STEC (Shiga Toxin Escherichia coli) para este grupo, debido a que estas bacterias producen una toxina citotóxica para céluas Vero de cultivo de similaridad estructural a la toxina producida por Shigella dysenteriae. Las STEC producen verotoxinas que actúan en el colon. Sus síntomas son: primero colitis hemorrágica, luego síndrome urémico hemolítico (lo anterior más infección del riñón, posible entrada en coma y muerte), y por último, púrpura trombocitopénica trombótica (lo de antes más infección del sistema nervioso central). Esta cepa no fermenta el sorbitol y posee un fago, donde se encuentran codificadas las verotoxinas, también llamadas "Toxinas Shiga", no posee una fimbria formadora de mechones, en vez de esto posee una fimbria polar larga que usa para adherencia.

Escherichia coli enteroagregativa (ECEA)

Los estudios realizados sobre la capacidad adherente de la Escherichia coli a células heterohaploides (HEp-2) muestran que, además de la adherencia localizada, existen otros dos mecanismos: uno llamado difuso, que se produce cuando las bacterias se unen al citoplasma celular, y otro agregativo, que se forma cuando las bacterias se acumulan en forma de empalizada tanto en la superficie celular como en el vidrio de la preparación.130-132

Estudios recientes han definido algunas características de estas cepas, como es el fenómeno de la autoagregación, que está determinado por un plásmido de 55 a 65

mdaltons, que codifica para una fimbria de adherencia, un lipopolisacárido uniforme y una nueva enterotoxina termoestable (TE) denominada toxina enteroagregativa estable (TEAE).133 Se han detectado algunas cepas que elaboran una segunda toxina termolábil antigénicamente relacionada con la hemolisina de Escherichia coli, la cual puede causar necrosis de las microvellosidades, acortamiento de las vellosidades intestinales e infiltración mononuclear de la submucosa. 134

La capacidad de las cepas de Escherichia coli enteroagregativa (ECEAgg) para sobrevivir largo tiempo en el intestino humano y la producción de una o más de las toxinas descritas, pudiera explicar la persistencia de las diarreas por ellas producidas. Se han aislado cepas de ECEAgg en niños con diarrea con sangre, 135, 136 aunque en la actualidad se desconoce si existen diferentes cepas agregativas relacionadas con diarreas persistentes u otras en relación con diarrea con sangre.

Escherichia coli adherencia difusa (ECAD)

Se adhiere a la totalidad de la superficie de las células epiteliales y habitualmente causa enfermedad en niños inmunológicamente no desarrollados o malnutridos. No se ha demostrado que pueda causar diarrea en niños mayores de un año de edad, ni en adultos y ancianos.

2. Realizar un flujograma para la identificación de bacterias Gram negativas.

TINCION GRAM CULTIVO MAC Conkey

Medios de diferenciación

INDOL UREASA

TSI LIA

3. Caso Clínico.

A) Un varón de 70 años fue admitido en el hospital después de padecer extensas quemaduras de tercer grado. Tres días más tarde, tuvo un pico de fiebre, y presentaba pus en los apósitos de un color azul-verdoso. Una tinción de Gram del pus reveló bacilos gramnegativos.

PSEUDOMONA AUREGINOSA, producida por una infeccion intrahospitalaria y ataca a pacientes inmunocomprometidos, y que da ese color azul verdoso a su pus por el pigmento azul (PIOCIANINA) que cataliza superoxido y peroxido de hidrogeno y un pigmento verde-amarillento(PIOVERDINA)

B) Un Un varón de 35 años se queja de sudores nocturnos, escalofríos, y fatiga en varios intervalos durante los últimos 2 meses. Estos episodios empezaron cuando viajó a América Latina. Cuando le preguntaron, dijo que los quesos, especialmente las variedades no pasteurizadas, es su comida favorita. En un examen, su temperatura es de 39 ºc, Y el hígado y el bazo son palpables. Tiene un hematócrito del 30 %, Y su recuento de glóbulos blancos es de 5000. En el cultivo de sangre crecieron bacilos gramnegativos pequeños.

Campylobacter es un tipo de bacteria que infecta el tracto gastrointestinal que generalmente se transmite a través de alimentos o agua contaminados. Esto incluye carnes (especialmente el pollo), el agua que se extrae de fuentes contaminadas (riachuelos de la montaña o ríos que están cerca de donde pacen los animales), y leche o productos lácteos que no han sido pasteurizados. Son muy pequeños ademas y solo se obtienen por filtración.

C) Una niña de 7 años presenta diarrea con sangre y fiebre (temperatura de 38°C), pero no presenta náuseas ni vómitos. En agar EMB sólo se observan colonias fermentadoras de la lactosa.

Escherichia coli, es la unica enterobacteria fermentadora de lactosa y ademas presenta DIARREA SANGUINOLENTA Y CON MOCO, a veces es asintomatico y se define mejor en su variación DE ENTEROHEMORRAGICA.

4. Mencione cuales son las principales enterobacterias causantes de cuadros diarreicos en niños menores de 12 años.

Escherichia coli Salmonella Yersinia shigella

5. Mencione cual mecanismo patogénico (como entra al organismo, que causa a nivel intestinal, como sale del organismo y formas de contagio) del Cólera.

Cólera: Es una enfermedad aguda, diarreica, provocada por la bacteria Vibrio cholerae, la cual se manifiesta como una infección intestinal.

Mecanismo patogénico

Penetración vía oral Sobrepasar la barreara gástrica Evitar la eliminación por el peristaltismo intestinal Producir endotoxinas

Causas a nivel intestinal

Dolor abdominal por irritación de la mucosa. Diarrea acuosa con un número elevado de deposiciones (hasta 30 ó 40 en

24 h) Las deposiciones tienen un tono blanquecino con pequeños gránulos. Se

les llama «agua de arroz». Esto es a consecuencia de la liberación de productos de descamación, fragmentos de fibrina y células destruidas. Además, debida a los iones secretados son isotónicas, es decir, con una osmolaridad similar a la del plasma (esto ocurre en las formas más graves): Además de olor fétido.

La diarrea se acompaña con vómito. No causa fiebre (o esta es moderada) debido a que el cuadro se produce

por la enterotoxina y no por el germen.

Formas de contagio

Beber líquidos o comer alimento contaminados con materia fecal ó vómitos que contiene el vibrión colérico.

Por beber agua ó ingerir alimentos contaminados. Las moscas, cucarachas y otros insectos pueden facilitar la transmisión de

la enfermedad. Es poco común la transmisión del cólera directamente de una persona a

otra; por lo tanto, el contacto casual con una persona infectada no constituye un riesgo para contraer la enfermedad.

CUESTIONARIO ANTIBIOGRAMA

1. ¿Cuál es el apoyo al diagnóstico clínico que brinda un antibiograma?

El antibiograma es la prueba microbiológica que se realiza para determinar la sensibilidad de una colonia bacteriana a un antibiótico o grupo de antibióticos, una vez realizado, da la siguiente información:

Grado de sensibilidad de la colonia bacteriana a una determinado antibiótico.

Diferencia de la sensibilidad por parte de la colonia a diferentes antibióticos.

Con esta información, se clasifica el efecto del antibiótico sobre esa determinada colonia en:

Resistente (R)

Intermedio (I)

Sensible (S)

En el ámbito clínico, el estudio sobre la bacteria causante de la infección y sobre el antibiograma es entregado al médico responsable del paciente. Este es quien se encarga de decidir el tipo de antibiótico adecuado, dependiendo de los resultados del antibiograma y de otros factores procedentes del paciente, como por ejemplo una alergia a la penicilina.

2. ¿Cuáles son los factores a tener en cuenta antes de elegir el tratamiento antimicrobiano?

Factores:

a) Farmacocinética:

Absorción

Distribución

Eliminación

Indices: Cmax, T1/2, ABC

b) Farmacología intracelular:

Cociente I/E

Significado

c) Fármaco dinamia:

Mecanismo de acción

Bacteriostáticos y Bactericidas

Concentraciones sub-inhibitorias

Efecto post-antibiótico: EPA y PALE

Cociente inhibitorio: Cmax/ CMI, ABC/CIM

Actividad bactericida C ó T dependiente

Puntos de corte (Break-points)

d) Categorías clínicas:

Efecto de la farmacodinamia

Efecto de las dosis

Efecto de las características Ab: EPA, T ½

e) Paciente:

Mecanismos de defensa…….Inmunidad

Localización de la infección

Características especiales: edad, alergia, farmacocinética

3. Explique el fundamento del antibiograma E-Test.

Técnica cuantitativa en placa que permite obtener una lectura directa de CMI en ug/ml empleando tiras plásticas impregnadas en concentraciones crecientes de antibiótico indicadas en una escala graduada sobre la propia tira.

Resulta un método ideal para estudiar cualquier tipo de microorganismo, aerobio, incluyendo aquellos llamados “fastidiosos” o los que tengan requerimientos especiales para crecer.

El microorganismo a investigar se inocula en una placa y sobre ella se deposita la tira de antibiótico/antibióticos a ensayar. Tras la incubación se observa la placa y se valora la zona de inhibición, de forma elíptica, alrededor de cada tira. La CMI se lee directamente observando el punto más bajo de la elipse que presente crecimiento.

4. ¿Qué importancia clínica tiene el antibiograma?

El Primer objetivo del antibiograma es le de medir la sensibilidad de una cepa bacteriana que se sospecha es la responsable de una infección a uno o varios antibióticos. En efecto, la sensibilidad in vitro es uno de los requisitos previos para la eficacia in vivo de un tratamiento antibiótico. El antibiograma sirve, en primer lugar, para orientar las decisiones terapéuticas individuales.

El segundo objetivo del antibiograma es el de seguir la evolución de las resistencias de las bacterias. Gracias a este seguimiento epidemiológico, a escala de un servicio, un centro de atención médica, una región o un país, es como puede adaptarse ciertas decisiones sanitarias, como el establecimiento de programas de prevención en los hospitales.

Establecer esta responsabilidad exige una colaboración entre el bacteriólogo y el clínico. En efecto, en ciertas circunstancias, el microbiólogo no podrá determinar con certeza que el aislamiento de una bacteria exige un antibiograma, sin los datos clínicos que le aporta el médico. Por ejemplo, una bacteria no patógena puede ser responsable de la infección de un enfermo inmunodeprimido o en un lugar determinado del organismo. La presencia de signos clínicos puede ser también determinante para un antibiograma (por ejemplo: la infección urinaria por un número reducido de gérmenes).

5. Explique 4 posibles causas de error en el procesamiento o lectura del antibiograma.

Por mala medición de los halos de inhibición.

Por desconocimiento de los mecanismos resistencias.

Por desconocimiento de las reacciones cruzadas correspondientes.

Por el uso de diversos medios de cultivos no adecuados.

6. ¿Cuáles serían los antibióticos a los que enfrentaría una cepa de Streptococcus pneumoniae?

Vanconicina

Rifampicina

Cefotaxima

Cefriaxoma

Cefuroxima

Tetraciclina

Cotrimoxazol

Penicilina

Lincomicina

Clindamicina

Ciprofloxacina

Eritromicina

Cloranfenicol

7. ¿Cuáles serían los antibióticos a los que enfrentaría una cepa de Escherichia coli?

Aminoglucósidos Gentamicina Amicacina Tobramicina

Sulfas Trimetoprina Sulfametoxazol

Cefalosporinas Cefalexina Cefazolina Cefalotina

Cefradina Cefaclor Ceftriaxona

Penicilina Ampicilina

Fluroquinolonas Ciprofloxacino Norfloxacino

Tetraciclinas Doxiciclina Minociclina Tetraciclina