3. Cmo se adhieren los cortes al portaobjetos? Cuando cortamos al microtomo, obtenemos una tirita con los cortes, pegados por los extremos. Esta tirita se pone flotando sobre la solucin de montaje. El corte se ir extendiendo ligeramente, eliminndose las arrugas y pliegues debidos al corte, pero no se llegar a derretir, porque la temperatura de la gelatina no alcanza el punto de fusin de la parafina. Luego, con un portaobjetos pescamos las muestras. De esta manera obtenemos en un mismo porta varios cortes del mismo bloque o taco de inclusin. Los portaobjetos llevan un tratamiento de limpieza antes de utilizar para permitir mejor la adherencia de los cortes. Por tanto, se lavan antes con agua y jabn y finalmente con agua destilada. Y se guardan con ter y alcohol al 50% en un frasco. 6. Cmo se realiza la crioproteccin de la muestra? Qu estudios realizaras con cortes por criostato? Se basa en deshidratarla antes de proceder a exponerla a sustancias protectoras frente al fro (crioprotectores) y someterla a bajas temperaturas. El sistema de congelacin se utiliza para obtener rpidamente cortes histolgicos durante una ciruga para realizar un diagnstico intraoperatorio por medio de micrtomos de congelacin refrigerados por la expansin de dixido de carbono lquido, o bien para conseguir cortes de tejido con su estructura qumica prcticamente inalterada. Se debe brindar en breve tiempo al cirujano (no mayor de 15-20 minutos), para tomar una decisin en el tratamiento a seguir. 9. En cules de las siguientes tinciones o procesos deben efectuarse cortes por congelacin sin previa fijacin? a) Tincin rojo oleoso. b) Receptores tumorales. c) Impregnacin argntica. d) Preparaciones para. inmunofluorescencia e) Todas menos c.

Si es necesario realizar una biopsia para inmunofluorescencia directa, el tejido no se fija en formol ni se incluye en parafina, sino que se congela y corta, utilizando el criostato.

12. Si a usted le dicen que sus cortes estn mal desparafinados, su conducta a seguir sera la siguiente. a) Se disgustara y no hace caso. b) Revisa las condiciones del Xilol que utiliza en la tincin. c) Revisa su tren de tincin. d) Revisa su parafina del histoquinette. e) Ninguna de las anteriores. Los cortes as obtenidos presentan pequeos pliegues y arrugas que pueden eliminarse si se los flota en agua tibia, debido a la elevada tensin superficial del agua. Luego de ello se recogen sobre delgadas lminas de vidrio llamada portaobjetos, a las cuales se adhieren generalmente a travs de adhesivos como el silane o la poli-L-lisina. Los cortes se secan y luego se los pasa por solventes intermediarios como el xileno, el benceno o el tolueno y se los hidratada en alcoholes de concentracin decreciente hasta llevarlos al agua destilada para su posterior coloracin. El desparafinado permite eliminar el medio de inclusin, la parafina. Sometemos a los "portas" a la accin de agentes que eliminan la parafina y rehidratan los cortes. Este paso hace posible la accin de los colorantes.

Discusin y conclusin Aprendimos a realizar cortes histolgicos en el micrtomo tipo Minot y observamos que es de gran importancia su correcto manejo ya que de no ser as pueden ocurrir accidentes como cortarnos un ejemplo de esto es al inicio cuando se coloca la muestra en el portabloques, ya que si no tenemos el debido cuidado al colocar la muestra podemos cortarnos con la cuchilla que se encuentra abajo. Pudimos darnos cuenta tambin que las muestras al ser cortadas pueden tener varios defectos esto debido a errores anteriores como cuerpos extraos en la parafina, bloques no alineados con la cuchilla, tejidos procesados incompletamente, etc. Por lo tanto debemos poner atencin en cada paso que realizamos. Al final debemos dejar el microtomo desarmado, limpiar y dejar el lugar de trabajo ordenado.

Bibliografa

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