VACUNAS VIRALES

Liliana Martínez Peralta2014

Logros de los programas de vacunación

• Protección de la población frente a tétanos, difteria, tos ferina y rabia.

• Control de propagación de sarampión, parotiditis, rubéola y varicela-zóster.

• Eliminación de la poliomielitis salvaje en el hemisferio occidental, así como de la viruela en todo el mundo.

INMUNIDAD PROTECTORA

Inmunidad pasivaNatural:

Artificial:

transplacentaria (IgG)por leche (IgA)

seroterapia

Inmunidad activaNatural:

Artificial:

luego de una infección

luego de la vacunación

INMUNIDAD PASIVA

•Inmunoglobulina estándar

HAV y HBV

En infecciones donde la seroprevalencia local es elevada

•Inmunoglobulina hiperinmune

•Anticuerpos monoclonales RSVEnterovirusCMV

HAV y HBVRabiaCMV, V-ZJunín

Vacunación

• Jenner 1796 : Cowpox/Swinepox.

• 1800 obligatoria a niños.

• 1930 último en Reino Unido.

Virus de la viruela

• 1930 último en Reino Unido.

• 1940 último en EEUU.

•1958 programa de la OMS.

• Octubre 1977: último caso (Somalia).

Pasteur: (1822-1895)

Primera vacuna antirábica: 1885

Virus rábico fijo

Pasajeado en conejo

Desecadas a distintos tiempos

Médula espinal de conejo

Varias dosis

Cuándo se puede esperar una vacuna?....

Agente DescubrimientoVacuna

listaLapso de tiempo

Polio 1908 1955 47

Sarampión 1953 1983 30

Hepatitis B 1965 1981 16

Rotavirus 1970 1998 28

Hepatitis A 1973 1995 33

HIV 1983 Ninguna >30

Flint, 2009

Memoria inmunológica

Caso de las islas Faroe (Atlántico Norte):

1781: epidemia desvastadora de sarampión

1846: epidemia de sarampión con 75% de mortalidad.

Sobrevivientes de 1781

Respuesta inmune inicial

Inmunidad protectora

Memoria Inmunológica

AcyCél.

Primo

infección

Reinfección inaparente

Reinfección leve o

inaparente

Reinfección inaparente

Tiempo(Días) Años

Flint, 2009

PREVENCIÓN DE UNA ENFERMEDAD

FINALIDADES DE UNA VACUNA

PERO: LA GRAN MAYORÍA PREVIENEN SIN EVITAR LA INFECCIÓN

Rabia: por largo período de incubación Viruela: hasta 4 días después de la infección

POSTERIOR A INFECCIÓN

Viruela: hasta 4 días después de la infección HBSAg y vacuna: previenen infección

crónica congénita

Rubéola: prevención de inf. Congénitas Polio: comunicable a la comunidad Consecuencias: Deseables No deseables

LARGO PLAZO

HBVPapiloma CANCER

HSV RECURRENCIAS

ANTÍGENOS PROTECTORES

Para Ac:

• Reconocen epitopes conformacionales, que son discontinuos

• No tienen acceso a la mayoría de los sitios funcionales, como:

-sitios de unión a Receptores.-sitios con act. Enz. o de fusión

ANTÍGENOS PROTECTORES

Para Respuesta T:

• Restricción MHC.• Restricción MHC.• Pocos epitopes, mutación.• Duración limitada.• Inmunopatogenia.

REQUERIMIENTOS PARA UNA VACUNA

• Seguridad: efectos colaterales mínimos.

• Inducción de respuesta inmune: 80-95% de la población inmunizada: “ inmunidad de manada”población inmunizada: “ inmunidad de manada”(viruela : 85%, sarampión: 93-95%)

• Efecto prolongado.

• Requerimientos prácticos: costo, estabilidad.

Virus parental

Clonado

Bacteria

Atenuada natural Inactivada A sub unidades Clonado Expresión

Vector vacunal a DNA Proteína

A partículas A subunidadesvirus-símilFlint, 2009

A virus inactivado (Salk)

A virus “vivo y atenuado”

(Sabin)

Flint, 2009

MHCII

CPA

Vacunas a virus inactivado Vacunas a virus atenuado

MHCII

CPA

Generación de respuesta humoral

Replicación viral

Generación de respuesta celular

MHC I

Célula infectada

Generación de respuesta humoral

+

Flint, 2009

TIPOS DE VACUNAS SEGÚN EL MÉTODO DE OBTENCIÓN

A virus inactivado completo A virus atenuado

Poliomielitis, Salk (tipo 1, 2 y 3) Poliomielitis, S abin (tipo 1, 2 y 3)

Influenza Rubéola

Hepatitis A ParotiditisRabia SarampiónRabia Sarampión

Varicela- zósterRotavirus (por reasociación)

SubunidadesFiebre amarillaFiebre Hemorrágica

Hepatitis B (1ra generación)RecombinantesHepatitis B ( 2da y 3ra generación)

Papiloma

VACUNAS ATENUADAS

• Replicación limitada.

• Progenie contenida en el sitio inicial de • Progenie contenida en el sitio inicial de replicación, o sólo un ciclo inicial de diseminación.

• Enfermedad inaparente o síntomas leves.

MECANISMO DE ATENUACIÓN PARA VIRUS HUMANOS

Virus patógeno

aislado de un

paciente y cultivado

en células humanas

El virus cultivado

es uilizado para

infectar células de

mono

El virus adquiere

muchas mutaciones

que le permiten

crecer bien en células

de mono

El virus no crece bien

en células humanas y

puede ser un

candidato de vacuna

Flint, 2004

Flint, 2004

Flint, 2004

Flint, 2004

Flint, 2004

Aislar virus patógeno

Clonar genoma

Gen de la proteína que se une a receptor

Gen de virulencia

Genes de proteínas de cápside

Flint, 2004

Aislar gen de virulenciacápside

Mutar gen

de virulencia

Deletear gen

de virulencia

El virus resultante es viable e inmunogénico pero no virulento.

Puede ser usado como vacuna

Sarampión: vacuna inactivada con formol

Destrucción de proteína de fusión

Proteína H: neutralizantes *

Contacto posterior: Inducción de respuesta TH2

Manifestaciones exacerbadas.

RSV: vacuna inactivada con formol (1960) Ac neutralizantes pero sin protección

Contacto posterior: Disbalance Th1-Th2 Disbalance Th1-Th2 Deficiencia CD8 < IgA específica

Manifestaciones exacerbadas.

DESVENTAJAS DEL USO DE VACUNAS ATENUADAS

• Posibilidad de inserción del genoma viral en el celular.

• Reversión a virulencia en el medio ambiente.• Reversión a virulencia en el medio ambiente.

• Contaminación inadvertida con otro virus

• Requerimiento de cadena de frío.

• Puede resultar peligrosa en personas inmunodeprimidas o mujeres embarazadas.

DESVENTAJAS DEL USO DE VACUNAS INACTIVADAS

• Pocos inactivantes autorizados.

• Necesidad de repetir varias dosis de vacunación.

• Habitualmente no consiguen inmunidad de por vida.

• La inmunidad puede ser solamente humoral, sin respuesta de IgA.

• Precaución para evitar la presencia de virus activo residual.

Vacunas Recombinantes

• DNA Recombinante

•Un gen (subunidad)

mRNAVacuna de Hepatitis B

cDNA

Plásmido de expresión

mRNA

HBs Ag

Hepatitis B

levadura

Consiste en una sola cepa de Rotavirus humano atenuado que provee protección contra varias cepas .

Contiene cinco cepas Contiene cinco cepas distintas de virus de reasociación. Se produjo combinando 10 genes de rotavirus bovinos (color verde), con uno de cinco humanos, (otro color).

VECTORESVIRALES

Vaccinia

Gen de TK inactivado (TK-)

Gen de hemaglutinina de virus influenza clonado

Infección con virus

Cepa salvaje de vaccinia TK+

VacciniaCanary pox

Adenovirus npPolio atenuado

Transformación Mediada por DNA

Infección con virus vaccinia

Recombinación homóloga

reemplaza TK+ con TK-

Animales inmunes a infección con influenza

Selección con BdUrSelección con BDur

TK- HA+ TK+ HA-

Virus Vaccinia recombinante TK-con gen de hemaglutinina

Vacunación de hamsters

Flint, 2004

Clonar genes individuales del genoma de virus patogénicos

Probar los virus recombinantes para reactividad de Ac

Antígeno es blanco

Para Ac Para Ac y CTL Para CTL

Probar células infectadas con virus recombinantes para reactividad de CTL

VENTAJAS

•Infecta células humanas

• Mejor presentación antigénica

• Rta de CTL

DESVENTAJAS

•El uso del mismo

Vector para otra vacuna

Rta débil o ausente

Rta inmunopatológica

VACUNAS A DNA

plásmidoCélula del músculo

Gen del Ag

plásmido

Célula del músculo

Expresando el AgGeneración de ACRta CTL

Componentes funcionales de un vector de expresión de una vacuna a ADN

IntronPromotor

Inicia transcripción

Gen codifica para sitio inmunogénico

Sitio multiclonante

Islas CpG

DNA de plásmido

Transcripción

sitio inmunogénico

Sitio multiclonante

Provee un efecto de adyuvante

Gen de resistencia a ATB para selección

Oyalski, 2000

•La preparación de plásmidos en grandes cantidades es sencilla.

• El DNA es muy estable, por lo tanto facilita

VACUNAS A DNA

• El DNA es muy estable, por lo tanto facilita su conservación y transporte.

• mezcla de plásmidos que codifiquen para distintas proteínas del mismo o distintos virus produciendo una vacuna de amplio espectro.

VACUNAS A DNA

• El plásmido no replica y produce sólo la/s proteína/s de interés.

• El plásmido no tiene contenido proteico entonces no desencadena una rta inmune contra sí mismo. contra sí mismo.

• Desencadena una rta inmune celular y humoral, rta de CTL de largo duración.

• No requiere adyuvantes.

Problemas potenciales

• Posibilidad de integración del plásmido dentro del

VACUNAS A DNA

• Posibilidad de integración del plásmido dentro del genoma del huesped, llevando a la mutagénesis insercional.

• Inducción de rta autoinmune (por ej: Ac patogénicos anti-DNA).

• Inducción de tolerancia inmunológica.

FACTORES QUE FAVORECEN EL CONTROL Y ERRADICACIÓN DE UN AGENTE INFECCIOSO

MEDIANTE VACUNACIÓN PREVENTIVA

• El virus tiene como único huésped al hombre.El virus tiene como único huésped al hombre.El virus tiene como único huésped al hombre.El virus tiene como único huésped al hombre.

• Existe un número pequeño de cepas animales.Existe un número pequeño de cepas animales.Existe un número pequeño de cepas animales.Existe un número pequeño de cepas animales.

• No se producen casos subclínicos o de portadores No se producen casos subclínicos o de portadores No se producen casos subclínicos o de portadores No se producen casos subclínicos o de portadores crónicos.crónicos.crónicos.crónicos.

• El virus puede inducir respuesta humoral y celular y El virus puede inducir respuesta humoral y celular y El virus puede inducir respuesta humoral y celular y El virus puede inducir respuesta humoral y celular y • El virus puede inducir respuesta humoral y celular y El virus puede inducir respuesta humoral y celular y El virus puede inducir respuesta humoral y celular y El virus puede inducir respuesta humoral y celular y tiene un solo serotipo.tiene un solo serotipo.tiene un solo serotipo.tiene un solo serotipo.

• El genoma viral no se integra en el celular.El genoma viral no se integra en el celular.El genoma viral no se integra en el celular.El genoma viral no se integra en el celular.

• No se observan casos de formación de tumores por la No se observan casos de formación de tumores por la No se observan casos de formación de tumores por la No se observan casos de formación de tumores por la vacunación.vacunación.vacunación.vacunación.

• Se puede controlar el éxito de la vacunación por un solo Se puede controlar el éxito de la vacunación por un solo Se puede controlar el éxito de la vacunación por un solo Se puede controlar el éxito de la vacunación por un solo marcador.marcador.marcador.marcador.

Calendario vacunal para los primeros dos años de vida

Edad BCG Hepatitis B Neumococo Quíntuple Cuádruple o Sabin Triple viral Influenza Hepatitis A

(meses) HB conjugado DTP-HB-Hib Quíntuple OPV SRP

0 Unica dosis 1era dosis

2 1ra dosis 1ra dosis 1ra dosis

4 2da dosis 2da dosis 2da dosis4 2da dosis 2da dosis 2da dosis

6 3ra dosis 3ra dosis

12 Refuerzo 1ra dosis Dosis anual Unica dosis

15-18 1er refuerzo 4ta dosis

24

Calendario vacunalEdad Hepatitis B Sabin Triple viral Influenza Triple bact. Triple bact. Doble bact. VPH Doble viral

HB OPV SRP celular DTP acelular Dtpa dT SR

5-6 añosRefuerzo 2da dosis 2do refuerzo

11 años Iniciar o Iniciar o 3 dosis

completar completar (mujeres)

Adultos Iniciar o Iniciar o

completar completarRefuerzo

Refuerzo

completar completar

Embarazo Dosis anual Refuerzo

Puerperio Dosis anual Iniciar o

completar

Personal Iniciar o Iniciar o

de salud completar completar

* Personal de salud que atiende niños menores a 1 año.

Refuerzo

Dosis anual Unica dosis*

Vacunas de zonas de riesgo

• Fiebre amarilla (atenuada): residentes o viajeros a zonas de riesgo.

1era dosis:18 meses, luego cada 10 años.1era dosis:18 meses, luego cada 10 años.

• Fiebre hemorrágica argentina (atenuada): residentes o trabajadores con riesgo ocupacional en zonas de riesgo.

Unica dosis a partir de los 15 años.