cerveza artesanal

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CERVEZA ARTESANAL Son cuatro los elementos naturales de la cerveza. El agua, dotadora de vida, cristalina y pura. La cebada malteada, el lúpulo aromatizante y condimento inimitable que le otorga ese sabor amargo. Y la levadura, organismo responsable de la fermentación. Los pasos... El primer paso es el malteo de la cebada, esto consiste en humedecer el grano bajo temperaturas y humedad controlada, y ante la aparición de la germinación se lo seca logrando la solubilización del almidón a la vez que también se procede a su tostado, añadiéndole ese aroma y color característico. Una vez obtenida la malta se procede a su molienda y posterior encuentro con el agua, este proceso que mezcla el agua y la malta molida revolviéndola permanentemente a la vez que es sometida a determinadas temperaturas se llama maceración. Lograda la maceración se filtra la mezcla para obtener un líquido, rico en azúcares y almidones. Este líquido es llevado a una cocción que dura mas de dos horas y durante este paso se le agrega el lúpulo, el cual le dará a la cerveza ese tradicional sabor amargo y un aroma especial. Una vez cocinado este líquido, al cual llamaremos mosto, se procede a su enfriamiento ya que pronto vivirá en él un organismo vivo llamado levadura. Este organismo será el encargado de procesar los azúcares del mosto trasformándolos en alcohol y gas carbónico mediante un proceso fermentativo. La fermentación se lleva a cabo en dos etapas, la primera llamada fermentación primaria donde al cabo de unos 15 días se obtiene una cerveza joven, y la segunda fermentación, llamada fermentación secundaria, es la encargada de madurar la cerveza y asentar su sabor, la fermentación secundaria o maduración, lleva un período de 15 a 20 días. Como paso final, llegamos al filtrado de la cerveza y posterior almacenamiento, ya sea en barriles o en botellas, en el caso de éstas últimas, se deberá realizar un pasteurizado de la cerveza para lograr una conservación natural de hasta 6 meses, si la cerveza es almacenada en barriles, mantendrá viva su levadura y se podrá disfrutar del auténtico y verdadero Chopp!!!. Si deseamos elaborar cerveza de tipo negra o roja, esto se logra realizando una selección especial de distinas maltas. Diego Assadourian Copyright © 2000 Cervecería Viejo Munich. Reservados todos los derechos. Revisado: 01-11-2002 http://www.cervezaartesanal.com/proceso.htm

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Page 1: CERVEZA ARTESANAL

CERVEZA ARTESANAL

Son cuatro los elementos naturales de la cerveza. El agua, dotadora de vida, cristalina y pura. La cebada malteada, el lúpulo aromatizante y condimento inimitable que le otorga ese sabor amargo. Y la levadura, organismo responsable de la fermentación.

Los pasos...

El primer paso es el malteo de la cebada, esto consiste en humedecer el grano bajo temperaturas y humedad controlada, y ante la aparición de la germinación se lo seca logrando la solubilización del almidón a la vez que también se procede a su tostado, añadiéndole ese aroma y color característico.

Una vez obtenida la malta se procede a su molienda y posterior encuentro con el agua, este proceso que mezcla el agua y la malta molida revolviéndola permanentemente a la vez que es sometida a determinadas temperaturas se llama maceración.

Lograda la maceración se filtra la mezcla para obtener un líquido, rico en azúcares y almidones. Este líquido es llevado a una cocción que dura mas de dos horas y durante este paso se le agrega el lúpulo, el cual le dará a la cerveza ese tradicional sabor amargo y un aroma especial.

Una vez cocinado este líquido, al cual llamaremos mosto, se procede a su enfriamiento ya que pronto vivirá en él un organismo vivo llamado levadura. Este organismo será el encargado de procesar los azúcares del mosto trasformándolos en alcohol y gas carbónico mediante un proceso fermentativo.

La fermentación se lleva a cabo en dos etapas, la primera llamada fermentación primaria donde al cabo de unos 15 días se obtiene una cerveza joven, y la segunda fermentación, llamada fermentación secundaria, es la encargada de madurar la cerveza y asentar su sabor, la fermentación secundaria o maduración, lleva un período de 15 a 20 días.

Como paso final, llegamos al filtrado de la cerveza y posterior almacenamiento, ya sea en barriles o en botellas, en el caso de éstas últimas, se deberá realizar un pasteurizado de la cerveza para lograr una conservación natural de hasta 6 meses, si la cerveza es almacenada en barriles, mantendrá viva su levadura y se podrá disfrutar del auténtico y verdadero Chopp!!!.

Si deseamos elaborar cerveza de tipo negra o roja, esto se logra realizando una selección especial de distinas maltas.

Diego AssadourianCopyright © 2000 Cervecería Viejo Munich. Reservados todos los derechos.Revisado: 01-11-2002 http://www.cervezaartesanal.com/proceso.htm

PREPARANDO CERVEZA ARTESANAL

La cerveza se compone básicamente de agua, cebada malteada, lúpulo y levadura.

El agua debe ser perfectamente pura y sin sabores raros. Para tal efecto, no sirven ciertas marcas de aguas embotelladas que se expenden en el mercado. Hay filtros que purifican el agua dejandola completamente insípida como lo exije esta receta.

La malta no es más que cebada germinada y tostada. Para ello, se lavan los granos de cebada, se dejan en remojo hasta que germinan por 8 días para luego secarlos en un horno a 60ºC. En este proceso se liberan los almidones y azúcares que ayudarán a la fermentación de tu cerveza.

El lúpulo es una especie de flor verde que da el sabor amargo característico de la cerveza. En EUA tenía acceso a una gran parra de donde coseché para mis experimentos de entonces. El lúpulo pierde sus cualidades

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pronto, así que es necesario llevarlo a refrigeración lo antes posible para poder utilizarlo. No tengo idea donde conseguir este indispensable ingrediente aquí en Ecuador, así que supongo que deberé viajar para cuando se me terminen mis provisiones. Hay quienes reemplazan el lúpulo por cáscaras de naranja, limón o jengibre. Yo no lo he hecho, así que no podría dar mi opinión, pues el alma de la cerveza es el sabor amargo y su embriagante aroma proveniente del lúpulo.

Por último, la levadura es un hongo responsable de la conversión de los azúcares y almidones en alcohol y dióxido de carbono. La levadura usada para la elaboración de la cerveza también aportará sabor a medida que consume los azúcares.

Proceso:

Se pone a hervir en una olla de acero inoxidable el agua, la malta y el lúpulo durante un par de horas. Esta mezcla se conoce como mosto. Luego se filtra en un lienzo de algodón mientras aún está tibio el mosto, se añade la levadura de cerveza bien diluída en agua y se mezcla. Se deja fermentar por unas 48 horas. Se vuelve a filtrar y luego se embotella para su maduración, si se quiere en este punto se puede adicionar levadura para una segunda fermentación. Aproximadamente a los 6 días ya la cerveza artesanal está lista para su consumo.

Por medio de este proceso, los resultados son diferentes cada vez, dependiendo de cuán tostado se haya dejado el grano de cebada, la cantidad de lúpulo utilizado, incluso, de las temperaturas a las que se llevó la preparación. Es conveniente tomar nota de todos estos datos para dar con la receta personal perfecta. Se pueden experimentar añadiendo aditivos exoticos como nuez moscada y hasta coco rayado, aunque confieso, aún no me he atrevido a tales experimentos. Preparar cerveza artesanal es un pasatiempo apasionante que conlleva paciencia, necesita tiempo, espacio y sobretodo condiciones higiénicas adecuadas para evitar proliferación de microorganimos dañinos.

Conviene saber:

Los utensilios utilizados deben estar perfectamente limpios para evitar proliferación de microorganismos que podrían volver peligroso el mosto.

La adición de lupules de sabor se hace al momento del primer hervor. Los lúpulos de aroma en cambio se añaden al final, pues al ser volátiles, se pierden sus propiedades rápidamente.

Durante la fermentación se da un burbujeo bastante importante debido a la transformación de los azúcares en alcohol. Las cervezas de baja fermentación se conocen como Lager.

Las cervezas rubias son las de aspecto más traslúcido. Las morenas son de sabor más robusto, se deben, entre otros factores, a cuán tostada esté la malta.

Las mejores botellas para envasar las cervezas son las de color oscuro, para evitar que la radiación solar deteriore el contenido.

Los artesanos de cerveza, al igual que los enólogos catadores de vinos, jamás se emborrachan.

http://www.pitonizza.com/receta-de-cerveza-artesanal/

SOCIEDAD ECUATORIANA DE CERVECEROS ARTESANALES

Insumos

Malta Pilsen

Malta básica utilizada en todos los estilos de cerveza.

$ 3,50

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Malta CarameloMalta utilizada para dar color y sabor.

$ 4 x Kilo

Malta MunichMalta utilzada para mejorar el cuerpo y sabor.

$ 4 x Kilo

Malta Chocolate

Malta tostada indicada para cervezas negras. $ 4 x Kilo

Lúpulo Nugget

Lúpulo Argentino de amargor de 12% de alpha ácidos. $ 4,00 x 15 grms

Lúpulo Saaz

Lúpulo Checo de 2,6% alpha ácidos, muy aromático. $ 4,00 x 10 grms

Lúpulo Hallertauer

Lúpulo Alemán de 4,5% alpha ácidos con buen sabor. $ 4,00 x 10 grms

Lúpulo Fuggles

Lúpulo Inglés de 3,5% alpha ácidos $ 4,00 x 10 grms

Lúpulo Kent Golding

Lúpulo Ingles de 4,5% alpha ácidos muy aromatico $ 4,00 x 10 grms

Lúpulo MagnumLúpulo Americano de 6% alpha ácidos usado para amargor

$ 3,00 x 10 grms

Levadura Nottingham Utilizada en cervezas rubias

$ 5,00 x sobre

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Levadura WindsorRecomendada para cervezas rojas y de trigo Weissbier.

$ 5,00 x sobre

Levadura Muntons

Indicada para cervezas oscuras y de trigo Dunkel $ 5,00 x sobre

Irish MossClarificante para mosto

$ 2,00 x sobre

Sulfato de Magnesio

Utilizado para mejorar la calidad del agua y lograr mejores cervezas oscuras.

$ 1,00 x sobre

Isinglass

Colágeno derivado de peces tropicales utilizado para mejorar la calidad de la espuma, tambien mejora la maduracion y clarificacion

$ 2,00 x sobre

Carragenina

Utilizada para evitar la turbidez producida por proteina de la malta

SECRETOS DE LA ELABORACIÓN DE LA CERVEZA ARTESANAL Y/O CASERA

La elaboración de cerveza artesanal es un emprendimiento ideal para quien quiera iniciar su propio proyecto. Aprenda todos los detalles del proceso de producción.

Proceso de elaboración de cerveza artesanal, Tipos de Cerveza, Variedades de Maltas, Cerveza Artesanal, Maceración, Fermentación.

Formulas y cálculos para elaborar cerveza artesanal y/o casera

Equipos necesarios para la elaboración de cerveza artesanal

1. Molino a rodillos2. Quemadores (adecuados a litrajes en CAL/H)

Page 5: CERVEZA ARTESANAL

3. Olla de agua caliente4. Olla de maceración (con falso fondo o filtro retención)5. Olla de hervor6. Bombas de traspaso7. Enfriador contracorriente (Intercambiador de calor) 8. Fermentador9. Llenadora de botellas10. Tapadora de botellass11. Accesorios varios

MATERIALES UTILIZADOS EN EQUIPOS

En lo que se refiere a ollas podemos utilizar de aluminio (bajo costo) pero estas no son recomendables ya que tendremos contaminación del mosto/cerveza. Siendo lo optimo como material el acero inoxidable calidad AISI 304/316. Lo mismo sucede con el material del enfriador (donde lo óptimo es nuevamente el acero inoxidable 304/316).

En cuanto al fermentador podemos hacerlo de plástico (bajo costo) ó acero inoxidable 304/316 donde nuevamente este ultima es el más recomendable por su facilidad de limpieza e impedimento en la incrustación de bacterias e impurezas. No sucediendo lo mismo con el plástico sea la calidad que sea. Afectando nuevamente al producto final (cerveza).

En cuanto a las bombas de traspaso tenemos el mismo inconveniente que antes donde las de plástico u otro son más económicas pero las de acero siguen siendo mejores para tal fin.

FUENTE: INOXIDABLES VILLA MARIAwww.inoxidablesvm.com.ar

PROCESO DE ELABORACION DE CERVEZA ARTESANAL

El proceso de elaboración de cerveza artesanal consta de una serie de etapas que detallaremos a continuación. Pudiendo variar según receta o maestro cervecero.

MOLIDO DE LA MALTA: Moler la malta preferentemente en molino a rodillos. Moler cantidad necesaria según litros a elaborar.

CALENTAR AGUA DE MACERACION: Calentar el agua para el macerado a una temperatura aproximada de 78°C.

EMPASTE: Mezclar en el macerador la malta molida con el agua previamente calentada. La temperatura de la mezcla se estabiliza en 65°C aproximadamente.

RECIRCULADO: Recircular el mosto, saliendo desde la parte inferior de la olla de maceración y volviendo a ingresar por la parte superior de la misma. Con esto logramos homogeneizar la densidad de la mezcla (mosto) favoreciendo a la extracción de azucares fermentables.

EXTRACCIO/LAVADO: Extraer el mosto y dirigirlo a la olla de hervor. Se incorpora agua a 77°C aproximadamente al macerador a medida que se quita el mosto del mismo. Extrayendo la mayor cantidad de elementos fermentables al lavar el grano, hasta lograr densidad deseada del mosto.

HERVOR: Calentar en olla de hervor hasta lograr ebullición. Mantener por un tiempo aproximado de 60 minutos.

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LUPULADO: agregar el 70% del lúpulo al comenzar el hervor, será el responsable del sabor amargo característico de la cerveza. Al finalizar hervor agregar resto de lúpulo.

ENFRIADO: Enfriar mediante dispositivo contracorriente (intercambiador de calor) enviando mosto frio al fermentador.

ADICION DE LA LEVADURA: Inocular (agregar) levadura al fermentador.

FERMENTACION: se produce dentro de tanque de fermentación. Se logra los perfiles deseados y al mismo tiempo parte del mosto se transformará en alcohol. Se despide CO2 (no permitiendo entrada de aire al interior por poseer trampa de aire.

CLARIFICACION: Purgar tanque de fermentación quitando el excedente de la levadura (decantada). Dejando reposar resto del mosto dentro del fermentador.

ENVASADO: La cerveza denominada “verde” se envasa en botellas o barriles, sellándolas a presión con correspondientes tapas. En su interior se producirá una segunda fermentación. El CO2 liberado producirá la carbonatación de la cerveza.

MADURACION: Tiempo necesario en el cual la cerveza adquiere propiedades deseadas (sabor y aroma).

ETIQUETADO: Etiquetar botellas correspondientes.

http://www.elaboracion-cerveza.com.ar/

CERVEZA ARTESANAL

Los ingredientes básicos en la elaboración de cerveza son: agua, cebada malteada, lúpulo y levadura. Y sus etapas de elaboración: Macerado, Cocción, Enfriado, Fermentación yEnvasado.

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I - MACERADO

Consiste en mezclar los cereales malteados con agua caliente (74ºC) para obtener una papilla caliente (65ºC). En esta etapa del proceso realizamos la conversión del almidón en maltosa (sacarificación) y tiene una duración de 2h.

Preparar agua caliente a 74-78ºC en cantidad suficiente para preparar la papilla del macerador. Hemos de calcular mínimo 3L por cada Kg de cereal o maltas de la receta.

Añadir en el macerador el agua cualiente y el grano molturado de forma simultanea y removiendo con la cuchara. Hay que evitar la formación de grumos. La papilla ha de tener un aspecto fluido pero no ha de evidenciar exceso de agua (una vez preparada, al dejarla reposar en el macerador, el nivel de agua prácticamente no es superior al del grano sediementado) y su temperatura ha de ser 65ºC.

Después de 2h macerado, con el recipiente tapado para minimizar pérdidas de calor, la papilla se habrá vuelto dulce (sacarificación). Podemos comprobar la total conversión del almidón en azúcar mediante la prueba de tintura de yodo: una muestra de líquido de la papilla con unas gotas de yodo. a)Color negro en forma de partículas = existe almidón en el medio. b)Color yodo = conversión total.

La segunda parte de esta etapa se llama ASPERSIÓN: rociamos con agua caliente el bagazo (cereal agotado) extrayedo todo el azúcar transformado durante el macerado, en forma de mosto.

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Calentar hasta 77ºC tantos litros de agua como litros de cerveza queramos elaborar. Usualmente se elaboran 20-23 litros. Añadir unos 2L de agua caliente en el macerador y recircular el mosto hasta que clarifique.

Recirculación: Abrir muy lentamente el grifo del macerador hasta conseguir un pequeño flujo. Recoger el mosto turbio en una jarra y devolverlo al macerador hasta que el mosto se vea claro y brillante. Aproximadamente se han de recircularizar 2-3 litros.

Sin cerrar el grifo del macerador, iniciar la aspersión del grano con el agua caliente (77ºC), recogiendo el mosto en un recipiente de capacidad suficiente o en el caldero. Debemos regar toda la superficie del macerado por igual, intentando mantener una aportación de agua caliente similar a la de mosto que se evacua, de manera que el nivel de agua dentro del macerador sea lo más constante posible.

La aspersión finaliza al obtener el volumen de mosto planificado para nuestra cerveza.

Realizar un primer control de densidad: remover el mosto obtenido para homogeneizarlo, enfriar 80 ml a una temperatura de 20ºC, y realizar la medida con el hidrómetro y la probeta.

II- COCCIÓN

En esta etapa del proceso cervecero procedemos a lupulizar el mosto (darle amargor hirbiendo lúpulo durante 90 min), eliminamos proteinas y partículas que enturbiarían la cerveza y esterilizamos el medio para su posterior fermentación.

Aquí se inicia el Sistema de Elaboración con EXTRACTOS DE MALTA. Preparando un mosto a partir de latas de jarabe de malta disuelto es agua (3kg extracto en 22L dan una Desidad Original de 1045) en lugar de realizar la etapa de macerado.

Poner el mosto a ebullición en el caldero con su tapa y controlar su progreso.

A medida que el mosto se aproxima al punto de ebullición, se va formando una capa espesa de aspecto cremoso y color marrón. Són partículas de cereales arrastradas a la superficie que deben ser retiradas mediante el uso de un colador (desespumado).

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Cuando empieza a hervir vigorosamente añadimos la 1ª cuota de lúpulos correspondiente al amargor y tapamos el caldero. Para un mejor drenaje del lúpulo a la finalización de la etapa, es recomendable la colocación de la bolsa de macerado. En este momento empezamos a contabilizar los 90 minutos que dura la etapa de cocción.

Despué de 75 min. de ebullición, añadimos la 2ª cuota de lúpulos (sabor) y el Irish Moss para favorecer la eliminación de proteinas que darían turbidez a la cerveza.

A los 90 min. de ebullición apagamos el caldero, añadimos la 3ª cuota de lúpulos (aroma), removiendo el mosto, y dejamos reposar 15-30 min. con la tapa puesta para que sedimenten todas las partículas.

Iniciamos la separación del mosto de los conos de lúpulo, recirculando 2L de mosto tal y como realizabamos en el macerado. Una vez obtenemos un mosto libre de partículas, procedemos a recogerlo en el fermentador (previamente esterilizado).

III - ENFRIADO

A partir de este punto, debemos trabajar con el material esterilizado para evitar intrusiones de otros microorganismos que estropeen nuestra cerveza.

Procedemos a enfriar el mosto, mediante un serpentín de acero por el que hacemos pasar agua fría o por inmersión del fermentador en bañera llena de agua.

Con el mosto entre 18º-20ºC procedemos a controlar la densidad para su ajuste final con agua, si fuera necesario disminuir la gravedad o densidad del mosto. (Hay que tener en cuenta que el volumen final de nuestra cerveza también está íntimamente relacionado con el amargor que hemos calculado).

Aireación del mosto: el mosto frío debe agitarse 15min para disolver aire. (La levadura requiere oxigeno para su propagación durante las 12 primeras horas de la fermentación. El resto de la fermentación es anaeróbica).

IV - FERMENTACIÓN

A partir de este punto, debemos trabajar con el material esterilizado para evitar intrusiones de otros microorganismos que estropeen nuestra cerveza. La fermentación la dividiremos en dos fases, la fermentación primaria (donde se produce la conversión de azúcar en etanol) y la fermentación secundaria (para clarificar la levadura y afinar la cerveza antes de su envasado).

Page 10: CERVEZA ARTESANAL

Aquí se inicia el Sistema de Elaboración con KITS de CERVEZA. Preparando un mosto lupulizado a partir de latas de jarabe concentrado que disolvemos en agua (3kg extracto en 22L dan una Desidad Original de 1045) en lugar de realizar las etapas de macerado y cocción.

Añadir la levadura y remover. (La levadura puede rehidratarse previamente, Ver Téc mejora kits). A las 12-24 h podremos apreciar los primeros signos de actividad. Nunca cerrar herméticamente el recipiente de fermentación.

La fermentación “Ale” se realiza entre 18o y 25o C, con una duración aproximada de 5-7 días según la Tª. Se caracteriza por la formación de una capa de espuma en la superficie.La fermentación “Lager” se realiza entre 7o y 12o C, con una duración aproximada de 4-5 días. También levaduras afloran a la superficie pero en menor intensidad y duración.

Daremos por finalizada la fermentación primaria “Ale” cuando la capa superficial de levadura prácticamente haya desaparecido o la densidad del mosto se aproxime a 1.015. (ver secuencia de fotos)

Daremos por finalizada la fermentación primaria “Lager” al desaparecer las levaduras superficiales o 5º día. La densidad del mosto suele ser más elevada, sobre los 1.020.

Sifonar (tubo de silicona y tubo-U) la cerveza desde el fermentador hasta el bag-in-box para proceder a iniciar la fermentación secundaria y completar la clarificación del mosto (sedimentación de la levadura). Para ello colocamos el fermentador en un nivel superior al cubitainer. Introducimos en el fermentador el tubo-U evitando remover la levadura depositada en el fondo. Nos situamos a un nivel inferior que el fermentador y aspiramos por la goma de silicona para iniciar el flujo (sifonado) y procedemos a llenar el bag-in-box.

En la fermentación secundaria hemos de evitar el contacto de la cerveza con el oxigeno. Por ello tapamos el bag-in-box con el tapón de goma horadado al que previamente hemos insertado el borboteador.

La fermentación secundaria “Ale” se realiza preferentemente a baja Tª (12o C), con una duración aproximada de 5-7 dias, es decir cuando el mosto esta claro y se aprecia el poso de levadura en el fondo. La densidad final será menor que 1.010.

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La fermentación secundaria “Lager” se denomina Lager o guarda. Debe realizase a baja Tª (0-7o C), con una duración mínima de un mes. Durante este tiempo la levadura lager afina los sabores de la cerveza, metabolizando el diacetilo.

V - ENVASADO Y ACONDICIONADO

En esta etapa introducimos la cerveza en el envase para que genere el gas y desarrolle plenamente sus sabores antes de ser consumida..

Las cervezas que han sido bien conservadas (por debajo de 20ºC) desarrollan todo su potencial aromático (maduración) a los 2-6 meses dependiendo del tipo de cerveza (mayor grado alcoholico más tiempo de maduración requieren). No tienen caducidad, a partir de un año se nota su envejecimiento en la excesiva gasificación y su sabor seco.

Finalizada la fermentación secundaria y con la levadura sedimentada, transferir la cerveza a botellas o un barril de presión. (Sifonar: Tubo-U, tubo de silicona y tubo con válvula).

Es recomendable llenar bien las botellas para evitar que quede una gran cantidad de aire en la parte superior que pueda oxidar la cerveza. Se recomienda llenarla hasta 3 cm por debajo del borde.

Adicionar el azúcar (priming) para gasificar la cerveza en las botellas: añadir extracto de malta o azúcar a razón de una cucharada de postre rasa (2-3gr) por cada ½ litro de cerveza.

Poner las chapas a las botellas. Finalmente conservar en un lugar cálido 15-25ºC durante 1 a 2 semanas, para acondicionar o gasificar la cerveza antes de almacenarla o proceder a consumirla.

Cálculo del grado alcohólico de la cerveza: es la diferencia entre las densidades o gravedad del mosto como consecuencia de la conversión de azúcar (disuelto produce aumento de la densidad del agua que es aprox. 1000 gr/L) en alcohol (casi no produce variación en la densidad del agua), dividido por una constante (7,4).

==> Alcohol = (O.G.-F.G.) / 7.4 = (1045-1008) / 7.4 = 37 / 7.4 = 5.0 % alch en Vol.

http://www.cervezas.info/envasado.htm

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EXTRACCION DE ADN

Soluciones necesarias: Buffer de lisis (50 mM de Tris HCl, 50 mM EDTA ph 8, 1% de SDS y 50 mM de NaCl), Proteinasa K (10 mg/ml), NaCl ( 5 M), TE 1X ph. 8 (autoclavado), Etanol o isopropanol absolutos a -20 ºC y opcionalmente RNasa A (10 mg/ml).

1. Colocar una pequeña muestra de tejido (unos 20 mg) en un Eppendorf de 1.5 o 2 ml.2. Opcional: Enjuagar brevemente con agua destilada.3. Agregar 500 ul de buffer de lisis y 10 ul de proteinasa K.4. Incubar a 55ºC, preferentemente con agitación, por un mínimo de 2 horas o hasta toda la noche.5. Opcional: una hora antes de finalizar, agregar 5 ul de RNasa A.6. Centrifugar al máximo (por ej., 15.000 rpm) por 15 min.7. Pipetear 500 ul del sobrenadante a un tubo limpio. Evitar acarrear la fracción sólida del fondo, así como la capa superficial oleosa (si existiese).8. Agregar 300 ul de cloruro de sodio, agitar brevemente y centrifugar al máximo por 15 min.9. Pipetear 500-600 ul del sobrenadante a un tubo limpio. Agregar igual volumen de isopropanol a -20ºC o el doble de volumen de etanol a -20ºC. Agitar lentamente primero, luego mezclar completamente.10. Opcional: para recuperar mayor cantidad de ADN, colocar a -20ºC por dos horas o toda la noche.11. Centrifugar al máximo por 15 min. Descartar todo el líquido sobrenadante con cuidado de no tirar el pellet.12. Lavar breve y cuidadosamente con unos 750 ul de etanol 70º , evitando perder o disgregar el pellet.13. Descartar el alcohol. Secar en estufa a 37ºC (lleva unas dos horas).14. Resuspender en 100 ul 1xTE. Agitar, y opcionalmente incubar a 55ºC por 2 horas (o menos).15. Guardar a -20ºC.http://evolucion.fcien.edu.uy/Protocolosbasicos.pdf

MaterialesVasos de precipidos o vasitos de plático.Tubos de ensayoUn cuchilloPalitos de pinchosUna batidoraProductos

Cebolla grandes frescasKiwisAgua destiladaDetergente lavavajillasSalZumo de piña o de papayaAlcohol de 96º muy frío

Realización práctica

1.- Cortamos la zona central de la cebolla en dados2.- En un vaso de agua echamos 3 cucharaditas de detergente lavavajillas y una de sal y añadimos agua destilada hasta llenar el vaso.3.- Mezclamos esta solución con los trozos de cebolla4.- Licúamos el conjunto, con la batidora, a velocidad máxima durante 30 segundos5.- Filtramos el líquido obtenido con un filtro de café.6.- Llenamos un cuarto de un tubo de ensayo con la disolución filtrada.Añade otro tanto de zumo de piña y mezclamos bien.7.- Añadimos un volumen de alcohol muy frío equivalente al del filtrado, cuidadosamente, haciéndolo resbalar por las paredes del vaso para que forme una capa sobre el filtrado.8.- Dejamos reposar durante 2 ó 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos capas. A continuación introducimos la varilla y extraemos una maraña de fibras blancas de ADN.

PrecaucionesCuando añadas el alcohol frío debes hacerlo de forma que resbale por las paredes del tubo para que forme una capa sobre el filtrado. Puedes utilizar la varilla de vidrio o una cucharilla para ayudarte.

Page 13: CERVEZA ARTESANAL

Explicación científica

ADN en la interfase agua-alcohol

La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.

La solución de lavavajillas y sal ayudada por la acción de la licuadora es capaz de romper la pared celular y las membranas plasmática y nuclear.

Los zumos de piña y papaya contienen un enzima, la papaína, que contribuye a eliminar las proteínas que puedan contaminar el ADN.

El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua.

CÓMO EXTRAER ADN DE CUALQUIER COSA VIVIENTE

Sólo sigue estos tres sencillos pasos:

Alcohol

Detergente

eNzimas (ablandador de carne)

Primero necesitas encontrar algo que contenga ADN. Ya que el ADN es el plano de instrucciones para la vida, cualquier cosa viviente contiene ADN.

Para este experimento preferimos usar arvejas (guisantes) verdes.

Pero también hay montones de otras fuentes de ADN, como por ejemplo:

Espinacas Hígado de pollo Cebollas Brócoli

Pon en una licuadora:

Page 14: CERVEZA ARTESANAL

Tu fuente de ADN (más o menos 100 ml o 1/2 de taza de arvejas )

Un pellizco grande de sal de mesa (menos de un ml o 1/8 de cucharadita)

Agua fría. El doble de la cantidad de tu fuente de ADN (más o menos 200 ml o 1 de taza)

Licua todo a alta velocidad por 15 segundos.

El licuado separa las células de las arvejas unas de otras, por lo que ahora tienes una muy diluida sopa de células de arvejas . Debido a que este paso es un revoltijo, ciertas fuentes de ADN no deben ser usadas

Y ahora, sigue estos tres pasos:

1. Vierte tu sopa de células de arvejas a través de un colador dentro de otro contenedor (como una taza medidora por ejemplo).

¿Cuánta sopa de arvejas tienes? Añade como 1/6 de esa cantidad de detergente líquido (más o menos 30 ml o dos cucharadas soperas) y mézclalo. Deja reposar la mezcla entre 5 y 10 minutos.

Vierte la mezcla en tubos de ensayo u en otros contenedores pequeños de vidrio, cada uno como 1/3 lleno.

Prueba usar uno de estos detergentes o el que sea que tengas a mano.

¿Por qué estoy usando detergente?

2. Añade un pellizquito de enzima a cada tubo de ensayo y agítalo suavemente. iSe cuidadoso! Si lo agitas demasiado fuerte romperás en ADN haciéndolo más difícil de ver.

Usa ablandador de carne como enzima. Si no puedes encontrar ablandador, intenta usar jugo de piña o solución limpiadora para lentes de contacto.

¿Qué es una enzima?

3. Ladea tu tubo de ensayo y lentamente vierte el alcohol (isopropílico al 70-95% o alcohol etílico) sobre la pared del tubo de manera que forme una capa sobre la mezcla de arvejas. Sigue virtiendo hasta que tengas en el tubo aproximadamente la misma cantidad de alcohol que de mezcla de arvejas.

Page 15: CERVEZA ARTESANAL

El ADN se elevará desde la mezcla de arvejas hasta la capa de alcohol. Puedes usar un palito de madera u otro tipo de gancho para arrastrar el ADN que está en el alcohol.

¿Qué es esa cosa pegajosa?

El alcohol es menos denso que el agua, por lo que flota en la parte superior. Debido a que se formaron dos capas separadas, toda la grasa y proteína que rompimos en los dos primeros pasos y el ADN tiene que decir: "¿Mmmmm... a que capa debería de ir?"

Esto es algo así como buscar en una recámara el lugar más confortable para sentarse. Alguien escogerá el sillón, otros quizás escojan la mecedora.

En este caso, la proteína y la grasa irán al fondo, que es la capa acuosa, donde se sienten más confortables, mientras que el ADN prefiere la capa superior, el alcohol.

El ADN es una larga y pegajosa molécula a la que le gusta formar grumos.

Experimenta con otras fuentes de ADN. ¿Qué fuentes producen más ADN?, ¿Cómo puedes compararlas entre si?

Experimenta con distintos tipos de jabones y detergentes. ¿El jabón en polvo funciona tan bien como el detergente líquido? ¿y que hay del shampoo y el jabón líquido para el cuerpo?Trata de saltarte alguno de los pasos o simplemente cámbialos. Te hemos dicho que necesitas realizar cada paso, pero ¿es cierto? Averígualo por ti mismo. Intenta cambiar la cantidad de alguno de los ingredientes utilizados.¿Solamente las cosas vivas contienen ADN? Intenta extraer ADN de cosas que pienses que no deberían de tener ADN.

http://www.jpimentel.com/ciencias_experimentales/pagwebciencias/pagweb/la_ciencia_a_tu_alcance_II/quimica/Experiencias_quimica_extraccion_de_adn.htm