BOLETINde la

Sociedad Argentina de BotánicaNOVIEMBRE 1959VOLUMEN VIII N» 1

INVESTIGACION DE LA ACTIVIDAD ANT1BACTERI ANA

DE PLANTAS DE CORDOBA

Por ELENA GAUTIER 3 y FANY GERBER 30

La historia de los antibióticos presenta numerosas e interesantesreferencias respecto- al conocimiento de la presencia de substancias in¬hibidoras del desarrollo de distintos microorganismos en vegetalessuperiores aun en' épocas muy anteriores al descubrimiento de lapenicilina.

No indicaremos aquí las numerosas citas bibliográficas que seencuentran en la literatura ya que diversos investigadores presentanalgunas de ellas en sus informes y además porque una de nosotras(E. G.) se ha preocupado especialmente de la revisión de literaturaen este campo de investigación (!) con el objeto de orientar las expe¬riencias- que se, han venido realizando, desde hace algunos años, enFanerógamas de Chile.

El primer trabajo realizado en Chile en este sentido fue efec¬tuado en el año 1936 (2) bajo la dirección del Prof. Juan Ibáñez (*) ydel Dr. Enrique Onetto (3), y consistió en el estudio del poder anti¬bacteriano del Drymis 'winteri var. chüensis; los resultados fueronnegativos.

En el año 1949- nuestro Laboratorio inició la investigación desubstancias antibacterianas en distintas plantas de Chile a modo de

3 Químico-Farmacéutico. Prof, de Farmacognosia (Univ. de Chile) contratadapor la Univ. Nac. de Córdoba. *

03 Farmacéutica. Ayudante Mayor de Farmacognosia de la Univ. Nac. de Córdoba.

0) Juan Ibáñez. Prof, de Botánica y de Farmacognosia de la Escuela de Quí¬mica y Farmacia de la( Universidad de Chile.Dr. Enrique Onetto. Prof, de Bacteriología de la Escuela de Química yFarmacia de la Universidad de Chile.

2 BOLETIN DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE BOTANICA

pruebas de eliminación, pruebas que se continuaron con la determi¬nación del espectro antibacteriano en aquellas especies que dieronresultados positivos de interés. La primera de estas investigacionesconstituyó una tesis de uno de nuestros egresados para optar al títulode Químico-Farmacéutico (3). Posteriormente hemos publicado cuatroinformes más, dos de ellos en la Revista Moliniana de Chile en 1955(4, 5) y los otros dos en la Revista de la Academia de Ciencias deCórdoba (República Argentina) a principios de este año gracias a laatención del Prof. Hunziker (6,7).

Al hacerme cargo de la Cátedra de Farmacognosia de la Univ.Nac. de Córdoba aparte de la organización del trabajo docente pla¬

neamos una serie de pequeños trabajos científicos entre los cualesestá el (pie presentamos en este momento.

Como teníamos conocimiento que ya se había iniciado el estudiode plantas argentinas con respecto a su poder antibacteriano nos co¬

municamos con el Dr. Cercos y su colaborador Dr. Rodríguez Berrettapara informarnos sobre el estado de sus investigaciones en este sen¬

tido. Su contestación fue favorable para nosotros ya que supimosque el tema estaba lejos de estar agotado y aún más que seríamuy útil su continuación y la investigación especial de las especiesque a ellos les hubieran resultado interesantes. .

Parece que en Argentina, aparte del trabajo publicado porCercos y Rodríguez en 1953 en la Revista Idia (8) se encontraría sóloel de Cercos sobre “Actividad antimicrobiana de la vinalina, alcaloidedel vinal (Prosopis ruscifolia)” publicado en la Revista. Argentinade Agronomía, en 1951 (9).

El presente informe tiene por objeto dar a conocer las investi¬gaciones efectuadas en plantas de Córdoba como un pequeño aportea la investigación de substancias de carácter antibiótico en la florafanerogámica mundial y como trabajo inicial de una serie que segu¬

ramente se realizará en la Cátedra de Farmacognosia de la Univer¬sidad Nacional de Córdoba.

Las plantas han sido recolectadas en su gran mayoría en el.período de la floración en Córdoba y sus alrededores por las autorasdel presente trabajo y por los Profesores Armando Hunziker (8) yJ. A. Caro (4). La clasificación botánica ha sido efectuada por elProf. Hunziker.

O Armando Hunziker, Ingeniero Agrónomo. Profesor de Botánica dé lá Escuela dePharmacia y Bioquímica de la Univ. Nac. de Córdoba.

(*) J. A. Caro. Prof. Adjunto de la Cátedra de Botánica de la Escuela de Far¬macia y Bioquímica de la Univ. Nac. de Córdoba .

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TéCNICA.

Hemos empleado la técnica de Carlson y Douglas (10) con lige¬ras modificaciones. Después de su recolección las plantas se guardaronen un refrigerador hasta el momento de usarlas.

De la parte aérea (conjunto de tallo, hojas y flores) de cadauna de ellas se prepararon cinco extractos dejando en maceración yen refrigerador durante 24 a 48 horas porciones del producto molidoen ácido sulfúrico diluido al 1,5 %, solución buffer de pH 4, solu¬ción buffer de pH 9, sol. de cloruro de sodio al 0,9 % y éter respec¬tivamente. Se usó un volumen de reactivo correspondiente a los gra¬mos de planta fresca molida. En algunos casos hubo que agregarmayor cantidad. Se separaron los extractos por presión del productomolido mediante una varilla de vidrio y el extracto ácido se neutra¬lizó con solución de soda al 4 %. El uso de estos diferentes reactivostiene por objeto extraer mayor número de componentes de los vege¬tales algunos de los cuales pudieran tener carácter antibiótico.

La prueba antibacteriana se realizó en placas de agar nutritivosembradas con cultivos de 24 horas en caldo de Micrococcus pyogenesaureus y Escherichia coli (°). Los extractos se colocaron en orificiosde 6 mm de diámetro practicados mediante un sacabocados en el agarsembrado. Las placas se incubaron durante 24 horas en estufa de cul¬tivo a 37?.

Los resultados positivos fueron interpretados expresando el diá¬metro de inhibición en mm.

RESULTADOS.

El cuadro adjunto contiene los resultados de las experienciasrealizadas.

De cincuenta y dos plantas diferentes estudiadas, veintinuevepresentaron actividad antibacteriana frente a uno o a los dos orga¬nismos de prueba en uno o más de los extractos preparados.

Consideramos de cierto interés la actividad de Malvastrum co-romandelidnum (L.) Carche recolectada en Devoto (Provincia deCórdoba), cuyos extractos en solución buffer de pH 4. soluciónbuffer de pH 9, solución de cloruro de sodio al 0,9 % y en éter,inhibieron francamente el desarrollo de Micrococcus pyogenes aureus.El extracto etéreo inhibió además el desarrollo de Escherichia coli.

Las dos especies de Convolvuláceas estudiadas, Ipomea digitataL. e Ipomea bona-nox L. fueron activas frente a Micrococcus pyoge¬nes aureus en los extractos preparados con solución buffer de pH 9,con solución de cloruro de sodio al 0.9 % y con éter.

(“5 Las cepas bacterianas fueron proporcionadas por los Dres. Hugo Cónsoli yDomingo Palazzo.

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Salvia lorentzii Gris, recolectada en Saldan el M de mayo de1958, presentó actividad antibacteriana frente a Micrococcus pyogenesaureus en los distintos extractos preparados de ella excepto en el ex¬tracto en ácido sulfúrico al 1,5 %.

Heimia salicifolia (II.B.K.) Link, de Saldan, inhibió parcial¬mente el desarrollo del Micrococcus pyogenes aureus en los cuatro ex¬tractos estudiados.

Los extractos etéreos de Plumbago roeridea Kth., de Salpichroaoriganifolia (Lam.) Thell, de Carlos Paz, ele Lyciuni cestroidcs Schleeht,de Eupatorium sp. recolectado en Villa Allende, de Eupatorium vis-cidum Hook, et Arn. y de Tagetes minuta L. presentaron actividadfrente a los dos organismos de prueba.

Synandrospadix vermitoxicum Gris, (hoja), Brassica campes-tris L., Bapistrum rugosum (L). All., Caesalpinia gilliesii Wall, exHook., Euphorbia acerensis Boris, Chiropetalum argentine-use Skotts-berg, Sphaeralcea cordobensis Krapov., Conium maculatum L., Helio-iropium nicotianaefoUum Poiret, Salvia gilliesii Benth., Leonuros si-biricus L., Salpichroa origanifolia (Lam.) Thell de Saldan, Zinniaperuviana L. de Carlos Paz y de Villa Allende, Eupatorium sp. deSaldán, Bidens triplinervia var. macrantha (Wedd.) Sherff., Baccha-ris flabellata Ilook. et Arn., Baccharis pingraea D. C., Vernonia ru-bricaulis var. australis Hieron., Vernonia nud,iflora Lessing y Conyzabonaricnsis (L.) Cronquist presentaron actividad frente a uno de losdos organismos de prueba en uno o en dos de los extractos preparados.

La revisión del cuadro permite observar que algunas de estasespecies recolectadas en distintos lugares o en distintas épocas del añohan dado resultados algo discordantes (posibles fenómenos de varia¬ción estacional).

Algunas de las plantas estudiadas por nosotras lian sido estu¬diadas también por Cercos y Rodríguez (8) pero no es posible haceruna comparación de los resultados ya que los trabajos han sido rea¬lizados en diferentes condiciones. Dichas plantas son las siguientes:Synandrospadix vermitoxicum (Gris.), Cassia aphylla Cav., Sphae¬ralcea bonariensis (Cav.) Gris. Heimia salicifolia (II.B.K.) Link, Lip-pia tnrbinata Gris, y Salpichroa origanifolia.

AG PADECI M I E X T O S

Manifestamos nuestros •mayores agradecimientos al Profesor Ar¬mando Hunziker por la clasificación botánica de las especies estu¬diadas y por la recolección de algunas de 'ellas, al Profesor Dr. J. A.Caro por su colaboración en la recolección y clasificación de algunas

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de las plantas, al Dr. Domingo Palazzo y al Dr. Hugo Cónsoli por lascepas bacterianas suministradas.

BIBLIOGRAFIA

1 — Gautier, E. Sobre investigación de substancias de carácter antibiótico enFanerógamas (Trabajo no publicado).

2 — Fincheira Parada, Elena. Drymis winteri y poder bactericida de las infu¬siones de su corteza. Tesis de Químico-Farmacéutico, Universidad de Chi¬le, 1936.

3 — Muñoz, R., Santiago. Contribución al estudio de antibióticos en vegetalessuperiores, Tesis para optar al título de Químico-Farmacéutico de la Uni¬versidad de Chile, 1949.

i • :4 — Gautier, E. Investigación de la actividad antibacteriana de 50 plantas de

Chile, Moliniana, 1:113, 1955.

5 — Gautier, E. y M. Ammazzini. Espectro antibacteriano parcial de Rapistrumrugosum (L.) All. Moliniana 1:159, 1955.

6 — Gautier, E. Estudio de la actividad antibacteriana de plantas de Chile IIBol. Acad. Ciencias 40:209, 1958.

7 — Gautier, E. y M. Olivares. Espectro antibacteriano parcial de Physalis pe¬ruviana. Bol. Acad. Nac. Ciencias 40:2, 1958.

8 — Cercos, A. P. y Héctor T. Rodríguez Berretta. Acción antimicrobiana de.algunas Fanerógamas argentinas. Idia, 69:1; 1953.

9 — Cercos, A. P. Actividad antimicrobiana de la vinalina, alcaloide del vinal(Prosopis ruscifolia Griseb.) Rev. Arg. Agronomía 18:200, 1951.

10 — Carlson, Tí. J„ and II. C. Douglas. Screening methods lor determining an¬tibiotic activity cf higher plants. J. B:.ct. 55:235, 1948.

ACTIVIDAD ANTIBACTERIAL DE PLANTAS DE CÓRDOBA

E XTRACT OSFAMILIA Fecha y lugar de

recolecciónSO4H2 al 1,5 %;Buffer i»H 4,0 Buffer pH 9,0|Sol.CINa, 0,9% 1

j Micr. I Esch. ¡ Micr. | Esch. | Micr. | Esch. ¡ Micr. | Esch.Las cifras indican en mms. el diámetro de inhibición deí

EtéreoMicr. I Escli.desarrollo

científicoNombre

AraceaeSynandrospadix vermitoxicum (Gris.)

(hoja)Synandrospadix vermitoxicum (Gris.)

(fruto)Synandrospadix vermitoxicum (Gris.)

I ill2-V-58 CórdobaI I

I

i(p.*subt.) IChenopodiaceae

Kochia scoparia SchraderAmaran thaceae

Bravulinea australis (Gris.) Schinz.St. Hil.

29-III-58 Córdoba

29-III-58 Carlos PazRanuneulaceae

Clematis denticulata SprengelCruciferae

Brassica campestris L.Rapistrum rugosum (L.) All0Rapistrum rugosum (L.) All.Sisymbrium officinale L.

LeguminosaeCassia aphylla Cav.Cassia morongii BrittonCaesalpinia gilliesii Wall, ex Hook

EuphorbiaceaeEuphorbia acerensis Boiss.Chiropetalum argentinense Skottsberg

MalvaceaeMalvastrum coromandelianum (L.)

GarckeMalvastrum coromandelianum (L.)

Garcke

16-XI-58 SaldanI

i 93-V-58 Devoto19-XI-57 Córdoba26-XI-5? Córdoba16-XI-58 Saldan

¡ i 20i 23 I i 22

14-IV-58 Córdoba14-IV-58 Córdoba ‘

16-XI-58 Saldán 12

29-III-58 Córdoba16-XI-58 Saldán

i 11i Í2

29-IH-58 Córdoba i 9 i 9

i 15- Ii 15 Î 27 ¡ 1113-V-58 Devoto I 17

Esch.: Escherichia coli.Micr.: Micrococcus pyogenes aureus1., Inhibición total del desarrollo; i. Inhibición parcial del desarrollo; —, ausencia de inhibición del desarrollo.0 Esta especie fué estudiada también frente a Salmonella typhi y a Micrococcus pyogenes citrus habiéndosec btenido inhibición total de 16 mm. con S. typhi y ausencia de inhibición con Micr. pyogenes citrus.

ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DE PLANTAS DE CÓRDOBA

EXTRACTOSFAMILIA

1,5 4 Buffer pH 4,0 Buffer pH <),(j Sol.CINa, 0,9ÿMicr. I Esch. ' Micr. | Esch. ' Micr. ¡ Esch. ' Micr. | Esch. '

Las cifras indican en inms. el diámetro de inhibición del desarrollo

Fecha y lugar derecolección

SO4H2 al EtéreoN o m b r e científico Micr. I Esch.

Malvastrum coromandelianum (L.)Garcke

Abutilón molle (Ort.) S\veetAbutilón molle (Ort.) SweetSida spinosa L.Sida spinosa L.Sida rhombifolia L.Sphaeralcea bonariensis (Cav.) Gris.Sphaeralceá bonariensis (Cav.) Gris.Spbaeralcea cordobensis Krapov.

LythraceaeHeimia salicifolia (H.B.K.) LinkHeimia salicifolia (H.B.K.) Link

UmbeliferaeConium maculatum L.

PlumbaginaeeacPlumbago coerulea Kth.

ConvolvulaceaeIpomoea digitata L.Ipomoea bona-nox L.

BoraginaceaeHeliotropium nicctianaefolium Poiret.

VerbenaceaeLippia turbinata Gris.Verbena peruviana (L.) Britton

LabiataeSalvia gilliesii Benth.Leonoras sibiricus L. •

Salvia lorentzri Gris.Salvia lorentzii Gris.Stachys arvensis L.

SolanaceaeSalpichroa origanifolia (Lam.) Thell.Salpichroa origanifolia (Lam.) Thell.Solanum pygmaeum Cav.

18-XI-58 Córdoba29-111-58 Carlos Paz3-V-58 Saldán

29-III-58 Carlos Paz3-V-58 Saldán

16-XI-58 Saldán22-IV-58 Villa Allende '

18-XI-58 Córdoba3-V-58 Saldán i 10

29 III 58 Córdoba16-XI-58 Saldán i 13 1 i 15 i IB i 14

:16-XI-58 Saldán i 10

29-III-58 Carlos Paz 130 : I 15|

29-III-58 Carlos Paz3-IV-58 Saldán

i 10 Ii 12 J

i 10 I 21)

I 13i 13I I

16-XI-58 Saldán

29-III-58 Carlos Paz16-XI-58 Saldán

i 10 j

22-IV-58 Pan de Azúcar3-V-58 Saldán3-V-58 Saldán

16-XI-58 Saldán16-XI-58 Saldán

I 27i 16; 12125 !i 12 I i 17 i 16

I

I29-III-58 Carlos Paz16-XI-58 Saldán

2-V-58 Devoto

i 15 ! I 13

J I 9 I 12

ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DE PLANTAS DE CÓRDOBA

EXTRA CTOSSO* al 1,5% Rutter pH 4,0 [Buffer pH 9,0 Sol.CINa, 0,9%

Micr. I Esch. j Micr. | fcsch. | Micr. | Esch. J Micr. | Esch. ¡Las cifras indican en nuns, el diámetro de inhibición del

FAMILIA Fecha y lugar derecolección

EtéreoMicr. I Esch.desarrollo

Nombre científico

Nicotiana glauca GrahamNicotiana longiflora Cav.Lycium cestroides SchlechtCestrum parqui L’Héritier

BignoniaceaeDolichandra eynanchoides Chain.

CompositacSchkuhria pinnata var. abrotanoides

(Roth). CabreraParthenium hysterophorus L.Parthenium hysterophorus L.Zinnia peruviana L.Zinnia peruviana L.Eupatorium sp.Eupatorium sp.Eupatorium sp.Eupatorium viscidum Hook, et Arn.Verbesina encelioides (Cay.) Benth.

et Hook ex GrayVerbesina encelioides (Cav.) Benth.

et Hook ex GrayVerbesina encelioides (Cav.) Benth.

et Hook ex GrayBidens pilosa L.Bidens pilosa L.Bidens triplinervia var. macrantha

(Weed) Sherff.Grindelia braehystephana Gris.Baccharis flabellata Hook et Arn.Baccharis pingraea D. C.Vernonia rubricaulis var. australis

Hieron.Vernonia nudiflora LessingConyza bonariensis (L.) Cronquist.Tagetes minuta L.

3-V-58 Saldan16-XI-58 Saldan16-XI-58 Saldan1G-XI-58 Saldan

i 10 i 10

16-XI-58 Saldan

29-III-58 Carlos Paz29-111-58 Carlos Paz16-XI-58 Saldan29-III-58 Carlos Paz

22-IV-58 Villa Allende29-III-58 Carlos Paz22-IV-58 Villa Allende.

3-V-58 Saldán22-IV-58 Pan de Azúcar

i_9i 10 i 12

I 12 i 10i 10i 121 i 10

29-III-58 Carlos Paz

3-V-58 Devoto

18-XI-58 Devoto29-III-58 Carlos Paz

3-V-58 Saldán

Í.2-IV-58 Pan de Azúcar29-III-58 Carlos Paz

12-IV-58 Pan de Azúcar2-V-58 Devoto

I 11

I 15I 12 I 11

2-V-58 Devoto16-XI-58 Saldán

2-V-58 Devoto3-V-58 Saldán

I 15i 10i 10I 13 1 13