baciloscopia
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TUBERCULOSISDr. Francisco A. LAJO SOTO
Mycobacterium tuberculosis
• CARACTERÍSTICAS GENERALES
• Orden: Actinomycetales
• Familia: Mycobacteriaceae
• Complejo M. tuberculosis: M. tuberculosis, M. bovis, M. Africanum, M. Microti y M. canetti
• Crecimiento lento (duplicación 15-24 hs)
Criterios de clasificación de las mico bacterias
• 1.- Criterio • Ritmo de crecimiento• Producción de pigmentos en presencia/ ausencia de luz• Tipo de parasitismo celular que determinan• Principales cuadros clínicos que producen• 2.- Criterio • Capacidad de acido resistencia• Presencia de ácidos micolicos (70 – 90 átomos C)• Contenido de adenosina + guanina en el ADN
• Parásitos intracelulares estrictos
– M.leprae Lepra
• Parásitos intracelulares facultativos
– M.tuberculosis
– M.atípicas Lesiones cutáneas o afectaciones tuberculoides
• Saprofitos – De vida libre en agua, suelo, piel, tracto GU.
Clasificación Micobacterias por tipo de parasitismo
Características mico bacterias
• Acido-alcohol resistencia
• Contenido lipidico pared
• Aerobios estrictos
• Lenta multiplicación
• Induccion granulomas
• Resistencia acidos/alcalis
• Pigmentacion
M. tuberculosis
1. Bacilo recto o ligeramente curvo y delgado, solos o agrupado
2. Composición química: 50-60% lípidos, hidrófobos
3. 0.2 a 0.6 x1 a 10 um
4. Requieren de 35°-37°C
5. Crecimiento lento (12-24 hrs a 8 semanas
6. Colonias no pigmentadas o tiñen de coloe beis
7. Aerobios, no esporulados, intracelulares facultativos. Inmoviles, no encapsulados
8. Baja permeabilidad a los colorantes básicos.
– Requieren exposición prolongada al calentamiento para teñirse.
Mycobacterium tuberculosis
• PARED CELULAR: Compleja, Rica lípidos: • Superficie hidrofobica y tenga resistencia a coloraciones y desinfectantes habituales (acido
resistentes)• No tiene membrana citoplasmática externa • La membrana citoplasmática interna, con capa gruesa de peptidoglucano• En membrana anclan proteínas de manosido de fosfatidilinositol y lipoarabinomanano (LAM)• LAM semejante a LPS O antigenicos de otras bacterias• Peptidoglucano forma esqueleto y se une los arabinolactanos (polisacáridos de D arabinosa y
D galactosa)• Residuo terminal de D arabinosa se esterifica : forma ácidos micolicos hidrofobicos a estos se
anclan glucolipidos de superficie (lípidos 60%)• En pared se intercalan proteínas transportadoras y porinas• Proteinas dan carácter antigénico estimulan respuesta inmunitaria
•
Mycobacterium tuberculosis
• Ácidos micólicos de cadena larga (90 átomos de carbono), a su presencia se le atribuye la propiedad de ácido resistencia (BAAR), en la tinción de Ziehl-Neelsen.
• Factor cordon: las cepas virulentas lo poseen el cual inhibe la migración de los leucocitos y causa los granulomas crónicos.
• PROTEÍNAS: Contienen varias proteínas responsables de la reacción a la tuberculina. (PPD) determina exposicion a micobacterium
Estructura pared celular mico bacterias
Factorcordón
Ácidos micólicos
Arabinogalactano
sulfátidos
N-acetil-glucosamín-N-acetilmurámico
trehalosa 6-6`dimicolato
Mycobacterium tuberculosis BACILO ACIDO ALCOHOL RESISTENTE: BAAR
Mycobacterium tuberculosis BACILO ACIDO ALCOHOL RESISTENTE: BAAR
Patogenia
• Intracelular• Partículas Ingresan vía respiratoria, llegan alveolos y son digeridas por
macrófagos• Impide fusión del fago soma con lisosomas • Fago soma se une a vesículas intracelulares y permite la nutrición y
replicación• Macrófagos secretan IL-12 y FNT alfa en respuesta a infección• Aumentan la inflamación al reclutar linfocitos T y NK hacia zona de
macrófagos infectados y los TH-1 ( colaboradores)
Patogenia
• Secretan INF gamma y macrófagos infectados se activan y aumenta fusión entre fago soma y lisosoma y hay destrucción intracelular
• El TNF alfa estimula producción de oxido nítrico y potencia destrucción intracelular
• si están disminuidos o tiene falla en receptores para estas citocinas , mayor probabilidad de hacer la enfermedad
Principales mecanismos destrucción micobacterias
Mycobacterium tuberculosis
• RESISTENCIA• Desecación• Ácidos y álcalis• Antibacterianos como penicilina
• SUCEPTIBILIDAD• Luz solar difusa y directa• Luz ultravioleta• Cloro al 10%• Fenol y sus derivados
COMPLEJO M. tuberculosis
• Retiene el colorante después de la decoloración con ácido y alcohol.
• Ácido alcohol resistentes.
EPIDEMIOLOGÍA. Ser humano es único reservorio natural • OMS: 1.500 millones de personas de infectados (1/3 de
Población mundial) 9 -10 millones de nuevos casos cada año
• Mueren mas de 2 -3 millones de personas cada año • Riesgo elevado en personas sin techo, alcoholicos, drogadictos, etc
• Enfermedad más importante asociada a SIDA
• La mayoría de los casos se encuentran en países pobres y poco desarrollados.
EPIDEMIOLOGÍARESERVORIO: Hombre enfermo/Vacas (M. bovis)/Animales
domésticos
• MECANISMO DE TRANSMISIÓN:
• Vía aérea, mediante la inhalación de Núcleos guticulares que contienen los bacilos tuberculosos, suspendidos en el aire, que un enfermo con tuberculosis pulmonar activa expulsó al toser o estornudar.
– Ingestión leche de vacas tuberculosas (M. bovis)– Inoculación accidental (lecheros, personal laboratorio)
• Inoculación accidental (en laboratorios).• Se suelen requerir contactos repetidos y estrechos
Mycobacterium tuberculosis• TUBERCULOSIS
• Es una enfermedad crónica caracterizada por fiebre ligera,
pérdida progresiva de peso, sudoración nocturna, y tos crónica a menudo productiva con expectoración hemoptoica (con sangre).
HISTORIA NATURAL
Macrófago alveolar
Inhalación de M. tuberculosis
VirulenciaCapacidad microbicida
FagocitosisMuerte del baciloNo resp inmune especNo infecciónTuberculina negativa
Multiplicación M. Tb 103-104
Diseminación a ganglios linfáticosRinón, hueso, cerebroRespuesta inmune celularTuberculina positiva (2-12 sem)Formación de granulomas
Destrucción local
Focos latentes
TuberculosisPrimaria progresiva5%
TB postprimariaReactivación 5%
Focos latentesToda la vida
Transmisión TBC vía aérea
Mycobacterium tuberculosis
• EVOLUCIÓN NATURAL
• PRIMOINFECCIÓN• Puerta de entrada: Vía aérea superior• Alvéolos pulmonares• Macrófagos: Evita el fagolisosoma• Inflamación local
• Diseminación: Linfática Ganglios regionales pulmonares• Hemática Todos los tejidos • • Granuloma - Infección latente: 90 - 95%•
Patogénesis de la tuberculosis
Patogénesis de la TBC
•Ac micólicos
•Sulfolípidos
•Proteínas pared
•Lipoarabinomanano
•Fijación a la superficie de los macrófagos alveolares
• Inhibición presentación de Ag a LT
•Modulación producción de citoquinas por LT
• Interferencia en las interacciones fagosoma-lisosoma en macrófago
•Resistencia a los mec. dependientes del O2
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3. Infección secundaria
2. Tuberculina +/Activación macrófagos
(TUBERCULOSIS LATENTE)
1. Infección primaria
Neumonía Linfáticos regionales
Contención/Formación de granuloma
Sangre
Otras localizaciones
Endógena: reactivación Exógena: reinfección
Necrosis y cavitación
TBC: Cuadros clínicos
• Tuberculosis pulmonar:– Primaria:
- Asintomática- Neumonía campos medios o inferiores
– Post-primaria: Neumonía cavitada
• Tuberculosis extrapulmonar:- Pleuritis- Adenitis- TBC osteoarticular- Otras
- TBC miliar- TBC genitourinaria- Meningitis
Mycobacterium tuberculosis
• FORMAS CLÍNICAS:
• Tuberculosis pulmonar primaria • Tuberculosis pulmonar posprimaria• Tuberculosis extrapulmonar:
• Tuberculosis miliar
Mycobacterium tuberculosis
• REACTIVACIÓN:
• 5-10% desarrollan la enfermedad por
• Factores de inmunodepresión.
• Granuloma Necrosis caseosa Propagación
Zona central
BAAR
Linfocitos
Monocitos
Macrófagos
Fibroblastos
Cell. epiteliodes
Diagnóstico
Antecedentes Cuadro Clínico Radiología
Sospecha de Tuberculosis
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
• Diagnóstico presuncional
• Aislamiento e identificación (Diagnóstico definitivo)
• Evaluar la respuesta al tratamiento
• Pruebas de sensibilidad farmacológica
Diagnóstico microbiológico indirecto
• Prueba de la tuberculina o Mantoux
• Test de liberación de interferón-γ (IGRA)
48-72h
MID
EN
IN
MU
NID
AD
CELU
LA
R
Mycobacterium tuberculosis
• DIAGNÓSTICO DE LA INFECCIÓN
• TUBERCULINA
• PPD: Purified protein derivated
• 5 UT (unidades de tuberculina)
• Vía intradérmica, cara anterior del antebrazo
• Pápula: 48-72 horas, > 10 mm es positivo
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
• 1.-) EXAMEN DIRECTO: ZIEHL-NEELSEN: BAAR• 2.-) CULTIVO: Löwestein-Jensen Muestras contaminadas: Esputo• Método de Petrof: Descontaminación con NaOH al 4% Homogenización Centrifugación• Muestras estériles: Líquidos corporales y biopsias de tejido de órganos internos• 3.-) PRUEBAS BIOQUÍMICAS: Identificación • Producción de Niacina• Nitrato reductasa• Catalasa a 68° C
Diagnóstico microbiológico directo
• Tinciones: Especiales que ponen de manifiesto la ácido-alcohol-resistencia (5x103-104 bacterias/ml)
• Cultivo: en medios especiales (10-100 bacterias). Larga incubación.
• Detección de ácidos nucléicos.
• Detección antígenos.
Profilaxis TBC
• Reservorio:– Diagnóstico precoz de personas enfermas/
aislamiento y tratamiento
– Diagnóstico y sacrificio de ganado infectado
• Población susceptible:– Tratamiento de la tuberculosis latente con
isoniacida
– Vacunación con BCG
COLORACIÓN DE ZIEHL-NEELSEN
BAAR
Tinción de Ziehl-Neelsen
TINCIÓN DE MICOBACTERIAS
• Auramina-Rhodamina
• Fluorocromo
• En micorscopio fluorescen (40x ó 20x)
• Bacilos amarillos o color oro
• Poco más sensible que Ziehl Neelsen
T. Fluorescente Auramina-Rodamina
Mycobacterium tuberculosis
El personal de laboratorio deberá conocer y garantizar la ejecución correcta de:
La obtención de una buena muestra del paciente.
Procesamiento correcto de la baciloscopía (Ziehl-
Neelsen).
La conservación, manejo y envío de muestras para
cultivo.
Transporte rápido y eficiente de las muestras.
Llenado correcto de formatos
Detección
Médico y enfermera de las Unidades de Salud
participantes: búsqueda intencionada de pacientes
entre la población con tos y flema.
Las lesiones causadas por la tuberculosis pulmonar
pueden drenar intermitentemente, es posible que una
muestra sea negativa un día determinado y positiva al
día siguiente.
Procedimiento para la obtención de la muestra
1. Instruya al paciente para que se enjuague la boca con
agua previamente.
2. Indíquele que inspire dos veces profundamente,
conteniendo el aliento durante unos segundos
después de cada aspiración y que exhale lentamente.
3. Pídale que inspire por tercera vez y expulse el aire
vigorosamente. Pídale que inspire una vez más y
luego tosa.
Evaluación de la calidad y el volumen de la muestra
• Para que la calidad de la muestra sea satisfactoria es necesario que contenga material mucoide o mucopurulento.
En condiciones ideales el volumen debe ser de 3 a 5 ml.
Puede aceptarse una cantidad pequeña si la calidad es satisfactoria.
Procesamiento correcto de la baciloscopía (Ziehl-Neelsen)
Las baciloscopías se procesarán siguiendo las indicaciones del
Manual de Técnicas de Laboratorio para el Examen Baciloscópico.
No desechar la muestra, guardarla hasta obtener el resultado.
Cuando la Bk sea (+), además de enviar el resultado al médico
solicitante, avisar al evaluador.
Solicitará al paciente una nueva muestra de expectoración (muestra E)
para ser enviada al laboratorio local o al LESP
ENFERMEDAD TUBERCULOSAMUESTRAS BIOLÓGICAS
• Pulmonar– Expectoración, lavado y cepillado bronquial, aspirado gástrico.
Biopsia pulmonar.
• Extrapulmonar– Líquidos: pleural, cefalorraquídeo, peritoneal, sinovial, etc.
Orina, heces, sangre, médula ósea.
• Cualquier tejido (biopsia o autopsia).
Baciloscopia y cultivo
BACILOSCOPIA EN EXPECTORACIÓN
• Primera evidencia bacteriológica de la enfermedad.
• Se inicia el proceso de confirmación del diagnóstico.
• Ayuda al monitoreo de la respuesta al tratamiento.
BACILOSCOPIA
• Expectoración– Espontánea– Inducida (solución salina 10%)
BACILOSCOPIA EN EXPECTORACIÓN
• Tres muestras
• Días diferentes (consecutivos)
• 5-10 ml
• 1 ml / 6,000 BAAR (50% positiva)
• 1 ml/10,000 BAAR (100% positiva, 3 BAAR)
BACILOSCOPIA EN EXPECTORACIÓN
• CONSIDERACIONES– Proporciona rápidamente elementos para un
diagnóstico presuncional– Baciloscopia positiva, cuadro clínico y radiológico =
Diagnóstico Presuncional.– Baciloscopia negativa no excluye enfermedad.
BACILOSCOPIA EN EXPECTORACIÓN
• LIMITACIONES– Poco sensible (comparada con el cultivo) ya que
requiere de 6,000-10,000 bacilos/ml.– En las formas extrapulmonares y tuberculosis infantil
la sensibilidad es aún menor.– No discrimina bacilos viables de los no viables
BACILOSCOPIA
• Fibrobroncoscopia– Lavado y cepillado bronquial– Baciloscopia positiva en el 34% de los casos de
baciloscopia negativa en expectoración.– Cultivo positivo para M. tb en el 95%
CULTIVO
• Aislamiento
• Identificación
• Confirmación del diagnóstico
• Pruebas de susceptibilidad farmacológica
• Curación
Mycobacterium tuberculosisCULTIVO
• Crecimiento lento,> 7 días• Exigentes: Löwenstein-Jensen, Middlebrook en agar y caldo.• Aerobios estrictos• CO2 al 5%• Temperatura óptima: 37° C• Colonias rugosas, en coliflor, color crema, secas.
MEDIOS DE CULTIVO SÓLIDOS
• Lowenstein Jensen– Huevo, papa y glicerol.– Agar opaco
• 7 H10 y 7 H11– Agar transparente– Glicerol, albúmina
MEDIOS DE CULTIVO 7H 10 y 7H 11
• Ventajas– Las colonias se ven
mejor sobre agar transparente.
– Las pruebas de susceptibilidad son más estables.
• Desventajas– La exposición al calor
o a la luz causa la producción de formaldehído.
– Se requiere una atmósfera de CO2
5-10%
MEDIO DE CULTIVO LÍQUIDO
• 7 H9– Líquido claro libre de huevo.
– Sirve para producir colonias aisladas en medios sólidos para pruebas de identificación y susceptibilidad farmacológica.
CULTIVO EN SISTEMA BACTEC
• Medio de cultivo líquido (7H 12)
• Radiométrico (ácido palmítico + 14C
• Producción de CO2 radioactivo.
• Índice de crecimiento
• Frotis para confirmación del crecimiento y pruebas de sensibilidad farmacológica.
• Crecimiento en 1 a 2 semanas.
CULTIVO ESP
• Medio de cultivo líquido
• Mide la producción de CO2 y consumo de oxígeno.
• Crecimiento en 1-2 semanas
• Pruebas de susceptibilidad farmacológica
• No requiere 14C
• Más barato que BACTEC
PREVENCIÓN Y CONTROL
• Diagnóstico precoz• Tratamiento de los casos• Inmunización: BCG (Bacilo de Calmette-Guérin),
Bacilos de M. bovis vivos avirulentos.
Tuberculosis meníngea y miliar.• Pasteurización de la leche, no consumir leche cruda• Educación sanitaria
Vacuna
• Contraindicaciones de la vacuna BCG
• Prematuridad
• Bajo peso
• Inmunosupresión
• Enfermedades graves de piel
• Tratamiento con esteroides
MICOBACTERIAS NO TUBERCULOSAS
Produce micobacteriosisTienen el antecedente de traumatismo o procedimiento cosmético o estético
• CLASIFICACIÓN DE RUNYON• Grupo I: Fotocromógena. • Crecimiento lento(> 7 dias)• Solo producen pigmento en presencia de la luz. • Mycobacterium kansasii. Enfermedad. Pulmonar indistinguible de la tuberculosis
• Grupo II: Escotocromógena. • Crecimiento lento(> 7 dias)• Desarrollan pigmento en ausencia de la Luz. • Mycobacterium scrofulaceum. Linfadenitis.
• Grupo III: No cromógenas. • Crecimiento lento(> 7 dias)• No desarrollan pigmentos. • Mycobacterium avium-intracellulare. Enfermedad pulmonar Crónica
CLASIFICACION DE RUNYON
• GrupoIV: Fotocromógena. Crecimiento Rápido (< 7 dias)
• Mycobacterium marinum. Enfermedad cutánea: abscesos
• Grupo V: Escotocromógena. Crecimiento Rápido(< 7 dias)
• Mycobacterium acapulcelnse, M. phlei, M. smegmatis
• Grupo VI: No cromógena. Crecimiento Rápido (< 7 dias)
• Mycobacterium fortuitum, Enfermedades cutáneas. M. fallax
MYCOBACTERIAS NO TUBERCULOSAS
.
LEPRA
.
TRATAMIENTO
TUBERCULOSIS
Generalidades
• Diagnosticable, prevenible y curable.
• Múltiples fármacos (tiempo y frecuencia suficiente).
• Múltiples esquemas de tratamiento.
Generalidades
• Esquema más seguro y efectivo en el tiempo más corto.
• Fase inicial es crucial para prevenir fámaco-resistencia.
• Tasa de curación del 95% en tuberculosis Fármacosensible.
Objetivos del Tratamiento
• Erradicar los microorganismos de los ambientes en el huésped.
• Prevenir fármaco-resistencia
Ambientes Básicos del microorganismo
• Extracelular: paredes de la cavidad y necrosis líquida (mayor parte). Isoniacida
• Extracelular: Caseum (bacilos semidormidos) Rifampicina
• Intracelular: (bacilos de crecimiento lento, semidormidos) pH 5.5 Pirazinamida
• Organismos latentes (dormidos)
Determinantes de un tratamiento exitoso
• Adherencia
• Evitar monoterapia
• Evitar fármaco-resistencia
Tratamiento de la TBC: Asociación de fármacos
• Duración del tto. prolongada
• Actividad diferente en las distintas poblaciones bacilares
• Desarrollo resistencias a un solo escalón/Prevenir resistencias
• Antibiograma
Fármacos Esenciales
• Isoniacida
• Rifampicina
• Pirazinamida
• Etambutol
• Estremptomicina
Isoniacida
• 5-15 mg/día (300 mg/día)• Bactericida
– Inhibe la síntesis del ácido micólico• Se absorbe bien por TGI y tiene buena penetración en tejidos• Efectos adversos
– Hepatitis (0.3%-2.3% de acuerdo a la edad) – Neuropatía periférica
• Aumento de la excreción de piridoxina • En el 20% de alcohólicos, desnutridos, diabéticos • Poco común a 5 mg/Kg) • Toxicidad del SNC (raro)
• Interacciones farmacológicas– Aumenta los niveles séricos de carbamacepina y difenilhidatoína
Rifampicina
• 10 mg/Kg/día (600 mg/día)• Inhibición de la RNA polimerasa dependiente de DNA (suprime la
formación de la cadena), bactericida intra y extracelular• TGI, 75% se une a proteínas séricas, buena penetración en tejidos,
pobre en meninges no inflamadas• Intolerancia GI, tiñe orina, lágrimas y sudor de color naranja,
erupciones cutáneas, hepatitis, trombocitopenia, anemia hemolítica, IRA (poco usual a 10 mg/Kg)
• Disminuye la actividad de warfarina, anticonceptivos orales, sulfonilureas, corticoesteroides, digoxina, DFH, barbitúricos, beta bloqueadors, teofilina
Etambutol
• 15-25 mg/Kg día (2.5 g/día)• Bacteriostático• Inhibe la síntesis de arabinogalactan• TGI, se acumula en insuficiencia renal, no penetra bien
en SNC• Neuritis óptica
– Visión borrosa, escotoma central, ceguera a rojo y verde
– 1% con dosis a 15 mg/Kg, mayor si se aumenta la dosis
Pirazinamida
• 15-30 mg/Kg (2 g)• Bactericida en ambiente ácido• TGI, buena penetración en tejidos y SNC• Efectos adversos
– Toxicidad hepática (aumenta los niveles de transaminas séricas y bilirrubinas
– Hiperuricemia • El ácido piranozoico compite con la excreción tubular renal de ácido
úrico – Erupción cutánea – Intolerancia gastrointestinal
Estreptomicina
• 15 mg/Kg/día (1 gr/día)– Dosis acumulada no mayor de 180 g
• Bactericida, inhibición de la síntesis de proteínas (unión a la subunidad ribosomal 30S)
• IM, IV, buena penetración tisular y en SNC
• Ototóxico, nefrotóxico sobre todo en mayores de 60 años
Medicamentos Antituberculosos
Dosis diaria
mg/kg
Dosis intermitentes mg/Kg
Fase intensiva
Fase de Sostén
Fármacos Presentación Niños Adultos Niños Adultos
Dosis total máxima
Combinación fija
Combinación fija
Isoniacida Comprimido
100 mg
10-15 5-10 10-15 800-900 75mg 200 mg
Rifampicina Cápsulas
300 mg
Jarabe 100 mg/5 ml
600 mg 150 mg 150 mg
Pirazinamida Comprimido
500 mg
3 g 400 mg
Combinación de Agentes
• Solo isoniacida (Elevada incidencia de fracaso y recaída).• Isonicida y rifampicina, esencial en todo el tiempo de
tratamiento.• Pirazinamida (en la fase inicial mejora la eficacia de los
regímenes < 9 meses.• Etambutol vs pirazinamida disminuye la efectividad del
tratamiento.
Ventajas de combinaciones fijas
• Favorece la adherencia en adultos
• Evita riesgo de monoterapia encubierta
• Previene el desarrollo de resistencia secundaria.
• Isoniacida, rifampicina, pirazinamida (Rifater, Finateramida)
• Isoniacida, rifampicina (Rifinah)
Monitoreo de Efectos Adversos
• Perfil hepático, ácido úrico, agudeza visual y percepción de colores, química sanguínea, examen general de orina, biometría hemática.
• En niños agudeza visual
• Clínico
• Individualizar
Tratamiento de la Tuberculosis Extrapulmonar
• Igual al de la forma pulmonar excepto:
• Miliar, ósea y meníngea (12 meses)
• Considerar cirugía y esteroides
Tratamiento en Patología Asociada
• Insuficiencia Renal: evitar aminoglucósidos y capreomicina.
• Insuficiencia Hepática: Monitoreo de la función hepática, no hay evidencia de mayor riesgo de hepatotoxicidad.
• Embarazo: I+R+E, (9 meses) + piridoxina.– Estreptomicina contraindicada– No contraindicar la lactancia
Fármacos Secundarios
• Cicloserina• Etionamida• Rifabutina• Rifapentina• Capreomicina• Acido p-aminosalicílico
• Tiacetazona• Clofazimina• Fluoroquinolonas • Macrólidos• Beta lactámicos• Sulfonamidas• Aminoglucósidos
Género Actinomyces
• Flora normal boca y tracto digestivo
• Anaerobio-microaerófilo
• Necesitan medios ricos para crecer
• Incubación 4-10 días
• Bacilos Gram positivos ramificados en ángulos agudos
Género Actinomyces
Colonias en forma de muela “gránulos de azufre”
Filamentos de actinomyces rodeados de arginina y depósitos de fosfato cálcico
Especies de Actinomyces
• A. israelii• A. georgiae• A. gerencseriae• A. meyeri• A. viscosus (animales y hombre)• A. naeslundii• A. odontolyticus….. Hasta 20 o más especies• A. bovis (animales)
Patogenia de la actinomicosis
Flora normal
Alteración de la barrera mucosa
Supuración crónica
• Fistulización• Diseminación por contigüidad• Diseminación hematógena
Criptas amigdalinas, encías, cariesTracto gastrointestinal, tracto genital femenino
Infección de la boca, extracción dental, mala higiene, trauma
Abundantes PMN y escasos gránulos de azufre
Actinomicosis: Formas clínicas1. Cervico-facial
– Hombre adulto– Periodo de incubación
largo– Origen dental unilateral
• Caries profunda• Nódulo de crecimiento
lento poco doloroso en ángulo submandibular
• Múltiples fístulas• Osteomielitis del maxilar
Gránulo de azufre
Actinomicosis: Formas clínicas
2. Torácica: por aspiración. Forma abscesos pulmonares
3. Abdominal: por cirugía o trauma intestinal (Perforaciones, apendicitis)
4. Genital: portadoras de DIU
5. Diseminada: immunodeprimidos
6. Por mordedura humana
Actinomyces viscosus/naeslundi- Caries - Inf. endodónticas- Periimplantitis
Patología oral
Actinomicosis: diagnóstico
• Difícil• Examen directo
– Exudado purulento: localizar el grano de azufre-> tinción de gram
– Biopsia: tinción de HE o Gram• Cultivo
– Medios ricos, incubación en anaerobiosis > 7 días (muestra ideal granos de azufre)
Actinomicosis: tratamiento
• Drenaje quirúrgico del exudado purulento
• Tratamiento antibiótico durante varios meses (penicilina G a dosis altas/TTC)
• Curación: 90% de las formas cervicofaciales
TOMA, MANEJO Y
CONSERVACIÓN DE LA
MUESTRA
TOMA, MANEJO Y
CONSERVACIÓN DE LA
MUESTRA
CENTRO NACIONAL DE VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA Y CONTROL DE ENFERMEDADESINSTITUTO DE DIAGNÓSTICO Y REFERENCIA EPIDEMIOLÓGICOS
La realización de esta Encuesta es de primordial
importancia para el país, porque permitirá conocer la
magnitud del problema y tomar las estrategias necesarias
para su prevención y control.
La participación del laboratorio en la Encuesta
es vital y crucial para llevarlo a cabo.
Su buena actuación permitirá la obtención de resultados
oportunos y confiables durante la investigación.
La obtención de una buena muestra del paciente.
Procesamiento correcto de la baciloscopía (Ziehl-
Neelsen).
La conservación, manejo y envío de muestras para
cultivo.
Transporte rápido y eficiente de las muestras.
Llenado correcto de formatos
El personal de laboratorio deberá conocer y garantizar la ejecución correcta de:
Médico y enfermera de las Unidades de Salud
participantes: búsqueda intencionada de
pacientes entre la población con tos y flema.
Las lesiones causadas por la tuberculosis
pulmonar pueden drenar intermitentemente, es
posible que una muestra sea negativa un día
determinado y positiva al día siguiente.
Detección
Número de muestras
Para realizar el diagnóstico deben recogerse tres muestras del siguiente modo:
1a.1a.
80%80%
2a.2a.
10%10%
3a.3a.
5%5%
Para asegurar que los resultados sean
confiables es preciso asegurar que la toma de
muestra y el traslado al laboratorio sea el
adecuado.
Obtención de una buena muestra de expectoración
Dar al paciente instrucciones claras para obtener una buena muestra.
Bioseguridad: Cuando el paciente tose Manejo de la muestra
Los pacientes deben producir la muestra al aire libre y no en locales con poca ventilación como los baños.
Toma de muestra
Una buena muestra de expectoración es la que
proviene del árbol bronquial obtenida después de un
esfuerzo de tos y no la que se obtiene de faringe o por
aspiración de secreciones nasales o saliva.
La muestra
1. Instruya al paciente para que se enjuague la boca con
agua previamente.
2. Indíquele que inspire dos veces profundamente,
conteniendo el aliento durante unos segundos después
de cada aspiración y que exhale lentamente.
3. Pídale que inspire por tercera vez y expulse el aire
vigorosamente. Pídale que inspire una vez más y luego
tosa.
Procedimiento para la obtención de la muestra
4. Indique al paciente que sostenga el envase de la
muestra cerca de los labios y que escupa en el
después de que haya generado una tos productiva.
5. Si la muestra es insuficiente, aliente al paciente a
que tosa de nuevo hasta obtener una muestra
satisfactoria.
6. Demuestre al paciente como cerrar bien el envase .
Procedimiento para la obtención de la muestra
7. Rotúlelo claramente.
8. Lávese las manos con agua y jabón.
9. Entregue al paciente un nuevo envase y asegúrese que entienda
que debe recoger una nueva muestra del mismo modo, tan pronto
como se despierte por la mañana.
10. Indique al paciente que traiga la muestra al centro de salud o al
laboratorio.
Procedimiento para la obtención de la muestra
Para que la calidad de la muestra sea satisfactoria es necesario que contenga material mucoide o mucopurulento.
En condiciones ideales el volumen debe ser de 3 a 5 ml.
Puede aceptarse una cantidad pequeña si la calidad es satisfactoria.
Evaluación de la calidad y el volumen de la muestra
Purulento
Mucoide
Saliva o expectoración inducida
Hemoptisis
Calidad de la muestra
Las baciloscopías se procesarán siguiendo las indicaciones del
Manual de Técnicas de Laboratorio para el Examen Baciloscópico.
No desechar la muestra, guardarla hasta obtener el resultado.
Cuando la Bk sea (+), además de enviar el resultado al médico
solicitante, avisar al evaluador.
Procesamiento correcto de la baciloscopía (Ziehl-Neelsen)
Cumple las condiciones para participar en la Encuesta,
el entrevistador se encargará de obtener sus datos para
llenar el cuestionario.
Solicitará al paciente una nueva muestra de
expectoración (muestra E) para ser enviada al
laboratorio local o al LESP.
Si el paciente es Bk (+)
El laboratorio no la procesará, pero se encargará del
manejo, conservación y envío de la muestra para
hacerla llegar al LESP en las condiciones
adecuadas para su procesamiento para
baciloscopía, cultivo y prueba de sensibilidad.
Cada muestra, para ser enviada, debe ser rotulada con los siguientes datos:
No. de serie* : BCIII04-219ANo. de serie* : BCIII04-219A
Juan López RamírezJuan López Ramírez36 años Sexo M36 años Sexo MExpectoraciónExpectoraciónMuestra: AMuestra: AJurisdicción III Jurisdicción III Estado BCEstado BCCSU 4CSU 425-09-200625-09-2006
Número de serie: abreviatura del estado, con números romanos el número de la
jurisdicción, con números arábigos el número de laboratorio- el número de muestra
registrado en el laboratorio local y la letra “A” o “E” de la muestra. BCIII04-219A.
La conservación, manejo y envío de muestras para cultivo
Todos los formatos de cada paciente serán identificados con el mismo número de serie, que permita evitar duplicidades y mantener el control de las muestras y documentos en todo momento.Se deberán de llenar los siguientes formatos:
1. Forma “Solicitud e informe de resultado del examen bacteriológico” para el envío de muestra de expectoración2. Formato de custodia de muestra
Las muestras deben ser enviadas al laboratorio lo antes posible, después de su obtención.
MUCHAS GRACIASY BUENA SUERTE
ENVÍO DE MUESTRAS DEL LABORATORIO
PARA BK
MANEJO Y CONSERVACIÓN
Si no puede evitarse que el traslado se retrase, las
muestras deberán mantenerse en refrigeración.
La posibilidad de encontrar M. tuberculosis depende
de la rapidez y seguridad con que llegue la muestra al
laboratorio.
Exposición al calor excesivo
Exposición a la luz solar directa
Derrame del contenido del envase
Para el transporte de la muestra debe evitarse:
M en C. Armando Mtz.
Insumos necesarios para el embalaje de la muestraInsumos necesarios para el embalaje de la muestra
• FrascoFrasco para muestrapara muestra
• EtiquetaEtiqueta
• Bolsas de plásticoBolsas de plástico
• LigasLigas
• Caja de unicelCaja de unicel
• RefrigeranteRefrigerante
• Tira de temperaturaTira de temperatura
• Caja cartónCaja cartón
• Etiquetas y formatosEtiquetas y formatos
ENVIO DE MUESTRAS DEL LAB. LOCAL AL LESP
Cada muestra deberá estar bien cerrada y para su envío deberá introducirse en
una bolsa de plástico, cerrándola con una liga.
Posteriormente se colocará, en forma vertical, dentro de una caja de unicel.
Se Introducirá un refrigerante congelado al lado de la muestra, sin tener
contacto con ella.
Se pegará y activará una tira de temperatura en la pared interna de la caja de
unicel.
Transporte de la muestra
TIRA DE TIEMPO Y TEMPERATURA
Rellenar la caja con material de soporte (papel, periódico, etc.) para evitar el
movimiento y derrames. Tapar la hielera, asegurándola con cinta adhesiva.
Introducir la caja de unicel dentro de la caja de cartón.
Los formatos de solicitud de baciloscopía de cada muestra y el de custodia de
muestra deberán ir en un sobre pegado por fuera de la hielera, pero dentro de la
caja de cartón.
Transporte de la muestra
Díptico e instructivo de embalajeDíptico e instructivo de embalaje
Calidad de la muestra!!!!!!!!!!!
Envío de la muestra
Cada envase debe ir acompañado de la correspondiente
solicitud de examen e información necesaria.
Cada hielera debe llevar además, el formato de custodia
de muestra.
AMBOS FORMATOS NUNCA DEBEN IR DENTRO DE LA
BOLSA DONDE VA LA MUESTRA. SE COLOCAN EN
UN SOBRE Y SE PEGAN POR FUERA DE LA
HIELERA.
La caja de cartón deberá ser rotulada con dos etiquetas:
1. Con los datos del Laboratorio remitente. 2. Con los datos del Laboratorio Estatal de Salud Pública.
RemitenteRemitente
QFB. GUADALUPE MACIAS REYESQFB. GUADALUPE MACIAS REYESCENTRO DE SALUD DE CIUDAD JUÁREZ, CHIHUAHUACENTRO DE SALUD DE CIUDAD JUÁREZ, CHIHUAHUAC. ABASOLO NO. 65 COL. HUERTASC. ABASOLO NO. 65 COL. HUERTASCD. JUÁREZ, CHIH.CD. JUÁREZ, CHIH.01 614 411-37-66/33-15/63-0501 614 411-37-66/33-15/63-05FAX 411-37-66 Y 411-33-15 CP. 31000FAX 411-37-66 Y 411-33-15 CP. 31000
DestinatarioDestinatario
QFB. IMELDA MACHADO MUÑOZQFB. IMELDA MACHADO MUÑOZLABORATORIO ESTATAL DE SALUD PÚBLICA DE LABORATORIO ESTATAL DE SALUD PÚBLICA DE SCHIHUAHUASCHIHUAHUAC. JIMENEZ NO. 4203 COL.C. JIMENEZ NO. 4203 COL.CUARTELES CHIHUAHUA, CHIH.CUARTELES CHIHUAHUA, CHIH.01 614 411-37-66/33-15/63-0501 614 411-37-66/33-15/63-05FAX 411-37-66 Y 411-33-15 CP. 31440FAX 411-37-66 Y 411-33-15 CP. 31440
Etiquetado de la cajaEtiquetado de la caja
Debe usarse el medio de envío que garantice mayor rapidez y confianza de entrega
De ser posible confirmar con el LESP la llegada de la muestra.
El LESP se encargará de enviar la muestra al INDRE.
Transporte de la muestra Transporte de la muestra
Abra la caja de entrega cuidadosamente y
verifique si contiene envases de muestras
rotos o con rajaduras.
Estos deberán esterilizarse en una autoclave
sin procesarlos y habrá que solicitar una
nueva muestra.
Recepción de las muestras en el LESP
Recepción de las muestras en el LESP
Verificar:
Que las muestras hayan sido rotuladas adecuadamente,
con números de identificación individuales, y que estos
correspondan a los números que figuran en la lista adjunta.
Que haya llegado también la información adicional
necesaria (los 2 formatos).
La calidad y volumen de la muestra.
RECUERDE:
El éxito de esta ENCUESTA depende de la
adecuada conservación de las muestras así
como su transporte rápido y eficiente.
Mycobacterium leprae
CARACTERÍSTICAS
• BAAR, 1-8 µm x 0,3-0,5 µm de ancho
• Bacilo descrito por Hansen en 1873
• Produce la lepra
• No se cultiva en medios de cultivo artificiales, solo en modelos animales (armadillos, cojín plantar de ratón).
Mycobacterium leprae
LEPRA: Es una enfermedad infectocontagiosa crónica que afecta Fundamentalmente a la piel y a los nervios periféricos.
Puede invadir cualquier órgano excepto SNC. Abundante en mucosa de la orofaringe, piel especialmente zonas frías como orejas, dorso de los dedos, codos, etc
y los troncos nerviosos periféricos
EPIDEMIOLOGÍA
Mycobacterium leprae
Distribución mundialOMS existen aproximadamente
10 y 12 millones de enfermos en el mundo.Asia 62%, África 34%
América 3% y el resto del mundo 1%
RESERVORIO: Hombre
MECANISMO DE TRANSMISIÓN: DIRECTO: Vía aérea, por tiempo prolongado Contacto íntimo piel a piel (familiares)
PERÍODO DE INCUBACIÓN: 3-7 AÑOS
Una vez traspasada la barrera mucosa o cutánea los bacilos se propagan fundamentalmente por vía nerviosa. Las células de Schwann de los nervios periféricos fagocitan
los bacilos y se movilizan, permitiendo el desplazamiento bacilar. Puede haber diseminación por vía linfática,
hasta los ganglios linfáticos y también diseminación hematógena (LL)
PATOGENIA
Mycobacterium leprae
Mycobacterium leprae
FORMAS CLÍNICAS
1) Lesiones tipo mácula o pápulaeritematosas, asimétricas
2) Disminución de la sensibilidad cutánea
3) No hay bacilos en las lesiones
4) Reacción de Mitsuda (+)
LEPRA TUBERCULOIDE
FORMAS CLÍNICAS
Mycobacterium leprae
1)Lesiones cutáneas nodulares simétricas.
2) Afectación de los troncos nerviosos, perdida sensorial bilateral y simétrica.Lesiones hipoestesicas y anestesicas.
3) SI hay bacilos en las lesiones
4) Reacción de Mitsuda (-)
LEPRA LEPROMATOSA
Mycobacterium leprae
Toma de muestra: linfaExamen directo: Coloracion de Ziehl- NeelsenM. leprae NO SE CULTIVA
DIAGNÓSTICO
1) Criterios clínico cutaneos2) Criterios clínico neurológicos3) Bacteriología
4) Prueba de la lepromina5) Biopsia de piel: Anatomía patológica
GLOBIS
Mycobacterium leprae
PREVENCIÓN Y CONTROL
• Detección precoz• Tratamiento sistemático de los casos para minimizar las fuentes de contagio
• Vigilancia de los contactos• Educación sanitaria del enfermo, grupo familiar y población en general.
MICOBACTERIAS NO TUBERCULOSAS
MICOBACTERIAS NO TUBERCULOSAS
Produce micobacteriosisTienen el antecedente de traumatismo o procedimiento cosmético o estético
Grupo I: Fotocromógena. Crecimiento lento(> 7 dias)Solo producen pigmento en presencia de la luz. Mycobacterium kansasii. Enfermedad. Pulmonar indistinguible de la tuberculosis
CLASIFICACIÓN DE RUNYON
Grupo II: Escotocromógena. Crecimiento lento(> 7 dias)Desarrollan pigmento en ausencia de la Luz. Mycobacterium scrofulaceum. Linfadenitis.
Grupo III: No cromógenas. Crecimiento lento(> 7 dias) No desarrollan pigmentos. Mycobacterium avium-intracellulare. Enfermedad pulmonar Crónica
GrupoIV: Fotocromógena. Crecimiento Rápido (< 7 dias)Mycobacterium marinum. Enfermedad cutánea: abscesos
Grupo V: Escotocromógena. Crecimiento Rápido(< 7 dias)Mycobacterium acapulcelnse, M. phlei, M. smegmatis
Grupo VI: No cromógena. Crecimiento Rápido (< 7 dias)Mycobacterium fortuitum, Enfermedades cutáneas. M. fallax
CLASIFICACIÓN DE RUNYON
¡GRACIAS POR SU ATENCIÓN!