ARTERITIS VIRAL EQUINAARTERITIS VIRAL EQUINA

Pilar, 6 de mayo de 2011Pilar, 6 de mayo de 2011

MARIA BARRANDEGUYMARIA BARRANDEGUYmbarrandeguy@cnia.inta.gov.armbarrandeguy@cnia.inta.gov.ar

Virus de la Arteritis Viral EquinaFlia: ArteriviridaeGénero: ArterivirusOrder NidoviralesRNA50-70 nmenvuelto

ARTERITIS VIRAL EQUINA ARTERITIS VIRAL EQUINA ““Celulitis infecciosaCelulitis infecciosa”” ““PinkeyePinkeye””

Otros miembros de esta familia: -Virus del síndrome respiratorio y reproductivo del cerdo (PRRSV)-Virus de la fiebre hemorrágica de los simios-Virus lactato dehidrogenasa del ratón (LDV)

Cepa prototipo: Bucyrus aislada en 1953Holyoak, G.R. y col Theriogenology 70, (2008) 403-414

ARTERITIS VIRAL EQUINAARTERITIS VIRAL EQUINA

-Rango de susceptibilidad: miembros de la familia equidae (caballos, asnos, cebras).

-La prevalencia varía de acuerdo a las razas, 70-90% en “standardbred” y 2-3% en “Thoroughbred” en Estados Unidos

-Solo un serotipo reconocido sin embargo las cepas difieren en la severidad de los signos clínicos y el potencial abortigénico

-Dos genotipos, Americano y Europeo (identidad genómica del 85%)

-El virus es rápidamente inactivado por los desinfectantes comunes y detergentes.

ARTERITIS VIRAL EQUINA: EpidemiologARTERITIS VIRAL EQUINA: Epidemiologííaa

Holyoak, G.R. y col Theriogenology 70, (2008) 403-414

ARTERITIS VIRAL EQUINA: TransmisiARTERITIS VIRAL EQUINA: Transmisióónn

Transmisiónvenérea

Infectadopersistente“carrier”seropositivovirus en semen

enfermedad aguda

Infección subclínica

seroconversión

Transmisiónrespiratoria

Transmisiónrespiratoria

Transmisióntransplacentaria

Semen congeladoinfectado

Inseminaciónartificial

Respirtoria

Venérea

Otras secreciones : orina, heces, etc

In-útero

Indirecta: equipos y otros objetos compartidos entre caballos

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: transmisitransmisióónn

Inhalación de virus

multiplicación viral enpulmonesmacrófagos bronquiales linfonódulos regionalesViremia

7-9 díasmultiplicación viral en epitelios particularmente: adrenalestúbulos seminíferostiroides e hígado.

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: PatogeniaPatogenia

Período de incubación: 2 a 14 días (6 a 8 días en la exposición venérea)Duración de la enfermedad: 2 a 9 días

El virus de arteritis viral equina no se aisla de ningún órgano excepto del semen de padrillos a los 28 días post infección

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: patogeniapatogenia ((continuacicontinuacióónn))

Período agudo ( excepcionalmente hasta 28 días post infección respiratoria)

Replicación viral en:

-endotelios vasculares produciendo lesiones en la túnica intima y media-macrófagos estimulando la liberación de mediadores proinflamatorios: IL-1b, IL-6, IL-8 y TNF-α

En los padrillos persistentemente infectados el virus se acantona y multiplica en las glándulas sexuales accesorias

-vesículas seminales-próstata-glándulas bulbouretrales

Holyoak, G.R. y col Theriogenology 70, (2008) 403-414

ARTERITIS VIRAL EQUINA: hallazgos clARTERITIS VIRAL EQUINA: hallazgos clíínicos, de laboratorio y patognicos, de laboratorio y patogéénesis de la nesis de la infecciinfeccióón respiratorian respiratoria

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: signossignos clclíínicosnicos

CarasterísticasClínicas:

Fiebre (41°C)AnorexiaDepresiónLeucopeniaEdema de miembros

escroto (en machos) glándula mamaria (en hembras)

Descarga nasal y ocularConjuntivitisRinitisEdema periorbitalRash cutáneo

Baja mortalidad, sólo descripta en potrillos recién nacidos o de pocas semanas de vida en los que se produce una neumonía o enteritis fulminante

Congestión extravasación de fluídos (edema) Hemorragias

inicialmente en pulmón y posteriormente en todo el organismo

Histológicamente:

panvasculitis generalizada

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: lesioneslesiones

ABORTOABORTO

3 a 10 meses de gestación

Incidencia de hasta el 50% de las hembras preñadas expuestas

Ocurre tardíamente en la fase aguda o tempranamente en la fase de convalescencia

Es el resultado de la infección fetal letal y/o miometritis y dañoplacentario

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: Patogenia, continuaciPatogenia, continuacióónn

La persistencia del virus esta relacionada directa o indirectamente con la testosterona

No se establece el estado de portador en caballos prépuberesinfectados, ni en hembras, ni en machos castrados.

Se elimina el estado de portador con la castración

Suero período agudo y convalesciente

Enfermedadrespiratoria

Aislamientoviral

Abortos

SNFC

ELISA

RT-PCR

IFIVN

Hisopados nasofaríngeos

ARTERITIS VIRAL EQUINA: diagnARTERITIS VIRAL EQUINA: diagnóóstico virolstico virolóógicogico

cultivoscelularesRK 13RFE

VERO

Órganos fetalesPlacenta

Padrilloscarriers(seropositivo)

semen

Prueba biológica: Inseminación artificial en2 yeguas seronegativas

infecciónsubclínica

Semen congelado

Test de

confirmación

ARTERITIS VIRAL EQUINA: diagnARTERITIS VIRAL EQUINA: diagnóóstico diferencialstico diferencial

Con otras enfermedades respiratorias

-EHV-1-EHV-4-Influenza-Virus de la Rhinitis A y B-Adenovirus equino

Con enfermedades anemizantes-AIE-Púrpura hemorrágica-Toxicosis

Con otras causas de aborto infecciosas y no infecciosas

El aborto por virus de AVE se encuentra generalmente autolítico y sin lesionesespecíficas

Brotes respiratorios en centros deportivos: Cancelación de eventos

Abortos

Muerte neonatal

Establecimiento del estado de portador en padrillos

Restricciones para la exportación de animales

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: ImpactoImpacto econeconóómicomico

Cuarentena y control serológico de los equinos que ingresandesde países donde la enfermedad es endémica

Identificación de padrillos portadores

Vacunación de los padrillos anualmente

Control y certificación del semen utilizado en Inseminación Artificial

ARTERITIS VIRAL EQUINA:ARTERITIS VIRAL EQUINA: prevenciprevencióón y controln y control

Vacunas:

A virus vivo modificado (Estados Unidos)

A virus inactivado (Reino Unido)

Legislación para importación de equinos en Argentina :

Machos castrados y hembras: Cuarentena al ingreso con 2 muestrasde suero tomadas con 14 días de intérvalo, negativas o de título estable o decreciente

Machos enteros: Cuarentena al ingreso con 2 muestras de suero tomadas con 14 días de intérvalo, negativas.

Machos enteros seropositivos con certificado de vacunación: cuarentena, prueba biológica en dos hembras seronegativas o estudio virológico en semen.

Semen: prueba biológica o estudio virológico en semen

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: EpizootiologEpizootiologííaa

• Estados Unidos (1984) brote que afectó aproximadamente 40 establecimientos de cría de SPC, Introducción de la vacunación en USA Imposición de severas restricciones al movimiento internacional de equinos

• Estados Unidos (1993) brote de enfermedad respiratoria que comienza en el hipódromo de Arlington, Illinois a mediados de Julio y se propagó durante el mes de Agosto a Churchil Downs en Kentucky, Praire Meadows en Iowa y a Ak-Sar-Ben en Nebraska, en todos los casos asociado al movimiento de caballos desde Illinois.

• Estados Unidos (2000) se produce un brote de enfermedad respiratoria en un prestigioso haras(“Iron Spring Farms”) de Kentucky, USA ocasionado por el ingreso de una yegua “ama”subclínicamente infectada.

• Reino Unido(1993) primer brote de enfermedad. Comenzó en una yegua servida por un padrilloimportado de Europa continental en Octubre de 1992 y se diseminó en el Reino Unido por el uso de semen infectado, del mismo origen.

•Australia (1998) se detectan 22 padrillos seropositivos importados desde Estados Unidosvía Nueva Zelandia de los cuales 12 eran “carriers”.

• España (1992) se registró un brote de enfermedad en un club hípico de Barcelona que afectóel 17% de los equinos residentes en el lugar. El origen de la infección no fue establecido

• Estados Unidos (2006) se produce un brote de enfermedad principalmente abortigénica en Nuevo Mexico.

• Francia 2007 brote de enfermedad respiratorio con numerosos casos

•Argentina (1984 ) Nosetto y col comunican la detección de anticuerpos en un 9,2% (n=250) de equinos de las razas American Trotter y mestizos.E.O. Nosetto, M.E. Etcheverrigaray, G.A. Oliva, E.T Gonzalez, S.A. Samus, Zentralbl Veterinarmed B 31, 526–529 (1984)

•Argentina (1993-1996) Monitoreos serológicos llevados a cabo en unapoblación de aproximadamente 3000 equinos SPC muestran la ausencia de reactores positivos (Barrandeguy y col,1999)

•Argentina (1997) 675 sueros de equinos mestizos obtenidos en el Departamento San Cristobal (Provincia de Santa Fe) resultaron negativospara Arteritis Viral Equina (Occhi y col,1999)

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: AntecedentesAntecedentes en la ARGENTINAen la ARGENTINA

•The first isolation of equine arteritis virus in Argentina. Echeverria y col (2003) Scientific and Technical Reviews 22:3

•Genetic typing of equine arteritis virus isolates from Argentina. Echeverria y col (2007) Virus genes, 35:313-320

•The Equine arteritis virus: a new isolate from the presumable first carrier stallion in Argentina and its genetic relationships among the four reported unique Argentineanstrains. Metz y col (2008) Archives of Virology 153:2111-2115

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: AntecedentesAntecedentes en la ARGENTINAen la ARGENTINA

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: SituaciSituacióónn actual en la ARGENTINAactual en la ARGENTINA

1998 Evento Medidas aplicadas:

Partida de SEMEN importado de Interdicción de 2 harasEuropa POSITIVA a AVE de Salto ubicados en la

Pcia de Buenos Aires

Detección de equinos seropositivos Interdicción del harasen otro haras de Salto

2 padrillos* importados de Brasil hace Interdicción del harasvarios años resultan seropositivos castración de ambos en un relevamiento nacional y uno de ellos reproductoreseliminaba virus en semen.

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: SituaciSituacióónn del del HarasHaras General General LavalleLavalle--TandilTandil

1998/1999/2000 Evento Medidas aplicadas:

2 padrillos* importados de Brasil hace Interdicción del harasvarios años resultan seropositivos Nov’98en un relevamiento nacional y uno de ellos(Cassiano J) eliminaba virus en semen.

•A pesar de las restricciones impuestas este padrillo continuó dando servicio en la temporada 99, fue sacrificado en septiembre del 2000.•Se detectaron 2 nuevos padrillos diseminadores que fueron sacrificados.•La prevalencia serológica en las yeguas del haras es de alrededor del 60%.•Se recomendó realizar un monitoreo serológico en anillo (10 km alrededor del haras) Se muestrearon 330 equinos con resultado negativo.

Requerimientos oficialesRequerimientos oficiales Sistema de vigilancia activo: Para la inscripción de potrillos en los registros del Stud Book Argentino, Sociedad Rural Argentina y Fomento Equino se deberá acreditar el estado sanitario “NEGATIVO a AVE”, de los reproductores machos, utilizando la prueba de virus-neutralización. (Res SENASA 434/01 y 617/2005)

ARTERITIS VIRAL EQUINA: ARTERITIS VIRAL EQUINA: programa de vigilancia en programa de vigilancia en

padrillos registradospadrillos registradosVissani, A.*, Iglesias M**., Echeverría M.G.***, Tordoya, S.*, La Torre J.**, Metz,

G.***, Becerra, L.*, Serena, S.***, Olguin Perglione, C.* y Barrandeguy, M*.

*Instituto de Virología, CICV, INTA-Castelar, **CEVAN CONICET. –***Cátedra de Virología, Facultad de Ciencias Veterinarias UNLP

virusequinos@cnia.inta.gov.ar

Positivo: dilución (1:4 inicial) que inhibe completamente el efecto citopático de 100 DICT 50% de virus de AVE (ARVAC)

PROCESAMIENTO DE MUESTRAS

RESULTADOSRESULTADOSMUESTRAS SEROPOSITIVAS A AVE/TOTAL ANALIZADAS

* Silla Frances, Silla Belga, Hannoveriano, Holstein, Appaloosa, American Trotter, Westfalen, Sangersheide

RAZA 2005 2006 2007 2008 TOTALCRIOLLO 0/385 0/437 0/186 0/115 0/1123

SANGRE PURA DE CARRERA (SPC) 7/252 2/190 10/545 8/365 27/1352ARABE 0/61 0/35 0/65 1/44 1/205

POLO ARGENTINO 0/147 0/177 0/185 1/208 1/717PASO PERUANO 0/93 0/83 0/32 0/39 0/247

CUARTO DE MILLA 0/15 0/69 0/16 0/13 0/113SILLA ARGENTINA 0/84 0/156 0/109 2/80 2/429

PERCHERON 0/19 0/30 0/6 0/24 0/79OTRAS * 0/152 0/185 0/139 0/91 0/567TOTAL 7/1208 2/1362 10/1283 12/979 31/4832

Seroprevalencia de AVE en equinos de importación y exportación seropositivos a AVE.

(Año 2007).

En el Laboratorio de Virus Equinos del INTA se prueban aproximadamente 5000 muestrasprovenientes de equinos de todas las razas por año. El porcentaje de animales positivos es muy bajo (no mayor del 1%) y en todos los casos se tratade animales importados o pertenencientes a razas de salto de determinados establecimientos de nuestro país en los que en años atrás se detectó la infección, la que fue controlada bajocoordinación del SENASA.

No se ha detectado la infección en equinos nativos de razas de Polo, Sangre Pura de Carrera, criollos, árabes, cuarto de milla y otros.

No se ha detectado la infección relacionada con casos de abortos, ni con enfermedadrespiratoria

María Barrandeguy

31/3/10 VAE en feto abortado15/4/10 VAE en semen importado

Arteritis Viral EquinaArteritis Viral Equina--Brote 2010Brote 2010

INTA EXPONE 15-17 de abril, 2011

Marcos Juárez, Córdoba, Argentina

Maria Maria BarrandeguyBarrandeguyLaboratorio de Virus Equinos

Instituto de VirologíaCICV y A – INTA – Argentinambarrandeguy@cnia.inta.gov.ar

Arteritis Viral Equina: Arteritis Viral Equina: Ocurrencia mundial en la Ocurrencia mundial en la úúltima dltima déécadacada

•

USA 2006

Francia 2007

Dinamarca 2007

Bélgica 2009

Reino Unido 2010

Irlanda 2010

Argentina 2010

19981998-- 2003:2003: Alta prevalencia (46%) de anticuerpos circunscripta a 2 establecimientos de cría de caballos de salto.

20032003--2010:2010: Evidencias de ausencia de circulación viral.

Arteritis Viral Equina: Arteritis Viral Equina: Antecedentes en ArgentinaAntecedentes en Argentina

VigilanciaVigilancia y y prevenciprevencióónn

Certificación anual de padrillos de todas las razas registradasen Sociedad Rural, Fomento Equino y Stud Book Argentino previoa la temporada de servicios

Cuarentena de importación (doble prueba serológica)

Describir las consecuencias de la reciente reintroducción del virus de Arteritis Viral en Argentina.

Origen de la infección

Consecuencias clínicas

Diseminación de la infección

Impacto sobre la industria equina

ObjetivosObjetivos

• 7, 9 y 22: abortos en yeguas • 23 un potrillo abortado es remitido al INTA• 31 INTA comunica al SENASA el hallazgo de Arteritis Viral Equina en un feto abortado• 31 interdicción y cuarentena del establecimiento

• 3 el virus se aisló de un potrillo muerto (45 días).• 5 Alta prevalencia (98%) de la infección en las yeguas.• 14 :el virus se aisló de semen importado de Holanda.

• 7 Notificación a la OIESe prohibió el movimiento de caballos en el

ámbito de la provincia de Buenos AiresAlerta sanitario en todo el país.

Arteritis Viral Equina en ArgentinaArteritis Viral Equina en Argentina--20102010

Secuencia de eventos en el Secuencia de eventos en el establecimiento (caso establecimiento (caso ííndice)ndice)

Mar

zoA

bril

May

o

Tres yeguas de salto fueron inseminadas con semen importadoinfectivo el 7 y 27 de enero y el 5 de febrero de 2010.

Estos animales fueron reubicados en el potrero de las yeguasSPC preñadas inmediatamente despues de la inseminación.

Las pérdidas embrionarias, los abortos alrededor de los 5-6 meses de gestación y las yeguas previamente preñadas que se encontraron “vacías” alcanzaron al 50% de los animales

En la raza SPC no se utiliza la inseminaciEn la raza SPC no se utiliza la inseminacióón artificial.n artificial.Por quPor quéé los abortos ocurrieron en yeguas SPC prelos abortos ocurrieron en yeguas SPC preññadas?adas?

Focos primarios (vFocos primarios (víía semen infectado) a semen infectado)

Arteritis Viral Equina en ArgentinaArteritis Viral Equina en Argentina--20102010

AI: n=297/120 (81%)

Signos clínicos

AI: n=19/69

(13%)

AI: n=25/99(5%)

AI: n=16/38

(16%)

Focos secundariosFocos secundarios

Arteritis Viral EquinaArteritis Viral Equina--20102010

6/141(4%)

7/10(70%)

56/97(58%)

4/212(2%)

42/227(19%)

19/47(40%)

Seroprevalencia en caballos de salto 8% (286/3.772). No se detectaron animales seropositivos en caballos SPC, Arabes, Polo Argentino y criollos (n=10.050).

Seroprevalencia en caballos de salto 8% (286/3.772). No se detectaron animales seropositivos en caballos SPC, Arabes, Polo Argentino y criollos (n=10.050).

Estudio de poblaciones equinas con nexo epidemiológico con los focos primarios: 13.822 caballos

Estudio de poblaciones equinas con nexo epidemiológico con los focos primarios: 13.822 caballos

3/20(15%)

Se analizaron 125 fetos equinos abortados remitidos al laboratorio en este período

Arteritis viral equinaArteritis viral equina--20102010

1 de enero 30 de junio

Datos adicionales

no se detectó el virus

Análisis filogenético parcial de los virus aislados

Bucyrus ///CACCTAC GCGGTCCCAG TTGCTGAGGT CCTGGAACAG GCGCATGGAC CGTACAGTGT GCTGTTTGAT GACAT///ARVAC ///CACCTAC GCGGTCCCAG TTGCTGAGGT CCTGGAACAG GCGCATGGAC CGTACGGTGT GCTGTTTGGT GACGT///WA97 ///CACCTAC TCTGTCCCAG TTTCCACAGT TTTGGAGCAG GCTCATGGGC CGTACAGTGT GCTGTTTGAT GACAT///DK99_1 ///AACCTAC TCTGTCCCAG TTTCCACAGT TTTGGAGCAG GCCCATGGGC CGTACAGTGT GCTGTTTGAT GACAT///E6632/10 ///CACCTAC TCTGTCCCAG TTTCCACAGT TTTGGAGCAG GCTCATGGGC CGTACAGTGT GCTGTTTGAT GACAT///E6682/10 ///CACCTAC TCTGTCCCAG TTTCCACAGT TTTGGAGCAG GCTCATGGGC CGTACAGTGT GCTGTTTGAT GACAT///E6810/10 ///CACCTAC TCTGTCCCAG TTTCCACAGT TTTGGAGCAG GCTCATGGGC CGTACAGTGT GCTGTTTGAT GACAT///

99 98

99 100

EUROPEAN SUBGROUP-1

EUROPEAN SUBGROUP-2

NORTH AMERICAN GROUP

Stadejek et al. 1999. Journal of General Virology 80, 691-699

STRAIN ACC N°ARVAC EU586275Bucyrus GU732198KY63 U81014AZ87 U38593S-113 AF099833F17 EF492555F10 EF492548F19 EF492557F25 EF492563DK97-5 AF247543DK99-1 AF247548DK99-2 AF247549S3685 GQ903794S3854 GQ903803S4333 GQ903804S4445 GQ903808F6 EF492544S4222 GQ903863S6 AY453344S1368 AF0998848J25-941109-3 AY956603WA97 AF065825F27 GU189247M405 GQ903901F59 GU189279LP01 DQ435439LP02/R DQ435440LP02/C DQ435441LP02/P DQ435442LT-LP-ARG EU622859F15 EF492553F22 EF492560F55 GU189275

Arteritis Viral EquinaArteritis Viral Equina--20102010

518 bp

Interrupción del movimiento de caballos durante 30 días.

Pérdidas debido a abortos, muertes fetales y de potrillos.

Gastos adicionales de monitoreo y vigilancia en todo el país.

Conflictos comerciales con Holanda.

Padrillos que contrajeron la infección.

Necesidad de implementar la vacunación.

Cierre temporario de la exportación.

Pérdida potencial de mercados para caballos seropositivos.

Arteritis Viral EquinaArteritis Viral Equina--2010: Consecuencias2010: Consecuencias

La infección activa fue controlada

Programa de vacunación voluntaria de padrillosseronegativos con registro y supervisión oficial desde el 13 de julio de 2010

Se estudia la implementación de un sistema de vigilancia activa (SENASA-INTA)

SituaciSituacióón actualn actual

Enero 2010, IA con semen infectivo

Abortos en el 50 % de las yeguas

Transmisión respiratoria

Padrillo infectado “carrier” en Holanda

Semen congelado colectado en noviembre de 2007 importado en

2009

Arteritis Viral EquinaArteritis Viral Equina--20102010Resumen/ConclusionesResumen/Conclusiones

Participaron Participaron

INTA F. Fernandez, S. Duffy, K. Trono, C. Olguin Perglione, S. TordoyaS. Miño, L. Becerra, A. Vissani.

Haras Ojos VerdesM. Cordoba.

Gluck Equine Research Center, Kentucky, USA.P. Timoney.

Facultad de Ciencias Veterinarias de La Plata G. Echeverria, G. Metz, M. Serena, T. Gonzalez, M. Silvestrini,S. Corva

Muchas gracias por su atención…