Introducción: : Las células stem mesenquimales (MSCs) tienen el potencial de diferenciarse en distintos tejidos mesenquimales incluyendo cartílago, hueso, músculo, tendón y ligamento, lo cual las hace una fuente celular atractiva para el tratamiento de diferentes lesiones en equinos (tendinitis, osteartritis, desmitis, fracturas, OCD, entre otras). Estas células son usualmente obtenidas a partir de médula ósea, pero una nueva fuente interesante de MSCs es el tejido adiposo debido a su gran abundancia y fácil obtención.El objetivo de este trabajo fue aislar MSCs de tejido adiposo equino y probar su potencial de diferenciación in-vitro hacia diferentes linajes celulares, y finalmente inyectarlas en forma intralesional para la regeneración tisular en caballos deportivos.

Material y Método: Se extrajeron alrededor de 10 gramos de tejido adiposo subcutáneo proveniente del cuello o área glútea de 12 caballos de diferente raza, edad y sexo.

En el laboratorio, las muestras fueron procesadas para la obtención de MSCs por digestión enzimática y adherencia al plástico. Se evaluó la viabilidad de las mismas y la calidad de la toma de muestra y procesamiento mediante realización de antibiograma y tipificación de los medios de transporte.

Por otro lado, se realizó la diferenciación adipogénica, neurogénica y osteogénica de las MSCs con diferentes agentes inductores y factores de crecimiento específicos para cada linaje. Una vez transcurrido el tiempo de diferenciación, se fijaron las células con paraformaldehído 4 % para luego colorearlas con Oil Red O y Alizarin Red para evidenciar la presencia de lípidos y depósitos de calcio característicos del tejido adiposo y óseo, respectivamente.Luego de corroborar su potencialidad in-vitro, se implantaron las células indiferenciadas dentro de lesiones tendinosas para que se diferencien y regeneren el tendón dañado.

Resultados: Las MSCs obtenidas a partir de tejido adiposo equino presentaron una buena adherencia a la placa y una viabilidad del 81.2 ± 4.8 %. La morfología de las células es de tipo fibroblastoide, con forma ahusada, característica de MSCs. En todos los casos, los controles microbiológicos dieron ausencia de microorganismos aerobios y anaerobios.Se realizaron los análisis morfológico y citológico de las células una vez transcurridos los 20 días de diferenciación, encontrándose cambios significativos y característicos de tejido adiposo, neuronal y óseo. Las coloraciones avalaron los cambios morfológicos observados.

Conclusiones: El tejido adiposo equino es una fuente de MSCs, las cuales tienen la capacidad de adherirse y proliferar en cultivos en monocapa. Tienen el potencial de diferenciarse a distintos tipos celulares y su capacidad de regenerar lesiones tendinosas, articulares, óseas y otras del caballo deportivo será analizada en el futuro cercano.

“POTENCIAL MULTILINAJE DE CELULAS MADRE

DE TEJIDO ADIPOSO EQUINO”

Benedetti, L.; Cardozo, A.J.; Argibay, P.Instituto de Ciencias Básicas y Medicina Experimental (ICBME) – Hospital Italiano de Buenos Aires

Obtención de la fracción estromal vascular

Células madre

Hueso

Células neuronales

Cartílago

Tendón

Músculo

Tejido adiposo

Tricotomía de zonade extracción

Material de cirugía Inmovilización del animal en la manga

Extracción de la muestra

Muestra en medio de transporte

Oil Red

Alizarin Red

NeuN, GFAPBIII tubulina

Neurofilamento

Adipo

génic

o

Osteogénico

Neurogénico

MSCs equinas

MSCs equinasOil Red (+)

MSCs equinasAlizarín Red (+)

Control positivoOil Red

Control positivo AlizarínRed

Testigo - Alizarín Red (-)

Testigo - Oil Red (-)

Los caballos con tendinitis del flexor digital superficial

que fueron implantados con células madre de tejido adiposo autólogo, no presentaron reacciones adversas luego del implante y actualmente se esta evaluando su evolución vía ecográfica.