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ANEXO II: REPORTAJE FOTOGRÁFICO

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ANEXO II: REPORTAJE FOTOGRÁFICO

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DESCRIPCIÓN SISTEMA DE MICROSCOPÍA-MICROFOTOGRAFÍA DIGITAL NIKON.

Microscopio directo Nikon, modelo Eclipse E50i, para técnicas de Campo claro, Contraste de fases y Campo oscuro. Cabezal triocular ergonómico y telescópico. Dotación apta para fases plan Fluor.

Sistema de Microfotografía Digital Nikon, modelo DS-5M-L1. Gobernada a través de monitor-controlador con sistema de captura Networking, compact-flash. Posibilidad de salida RGB a 2º monitor o retroproyector. Posibilidad de subprogramaciones para técnicas de campo claro, fases, DIC o epifluorescencia. Herramientas de trabajo de medida, calibración y otros.

Equipo de microfotografía empleado en el presente informe por GBS

IZASA, S.A. Contacto: Juan Antonio Díaz Molina (Móvil: 625 15 48 74) División Microscopía Óptica Grupo Instrumentación Científica Avda. de la Innovación, s/n Edificio Innova, 1ª planta 41020-Sevilla Tel. 902 20 30 80 Fax. 902 20 30 81

EJERCICIO INTERLABORATORIOS (Febrero 2006): Reportaje fotográfico

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CARACTERÍSTICAS MACRO- Y MICROSCÓPICAS DEL FANGO ACTIVO

LÁMINA 1

■ ENSAYO DE SEDIMENTABILIDAD EN PROBETA (22/II/06)

A B

V10 = 430 mL/L V5 = 560 mL/L

C D

V30 = 280 mL/L V15 = 340 mL/L

A, B, C y D: Ensayo de sedimentabilidad en probeta (22/II/06). Ensayo de sedimentabilidad enprobeta a los 5, 10, 15 y 30 minutos.

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■ ENSAYO DE SEDIMENTABILIDAD EN PROBETA (22/II/06) LÁMINA 2

A B

C

D

A, B, C y D: Ensayo de sedimentabilidad enprobeta (22/II/06). A-C: Ensayo desedimentabilidad en probeta a los 5, 10 y 30minutos. D: Detalle de la presencia demicroflóculos en el clarificado y turbidez. En este caso, el ensayo se ha realizado sobre unaprobeta de mayor sección, la cual minimiza elefecto "pared" y es recomendada en aquellos casosen los que la concentración de sólidos es alta.

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ESTRUCTURA FLOCULAR. LÁMINA 3

A

GBS

B

GBS

C

GBS

Estructura del fango activo. A: Flóculo formado por un núcleo denso y bien cohesionado, puesto demanifiesto mediante la tinción de ferroina. B y C: Aspecto general de dos flóculos de fango activo, con distinto grado de compactación, en los que se observa que el grado de mineralización es inferior respecto al flóculo mostrado en A. 100x, campo claro.

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ESTRUCTURA FLOCULAR. LÁMINA 4

A

GBS

200x

B

GBS

200x

Estructura del fango activo. A y B: Flóculos de fango activo formados por núcleos densos y biencohesionados. En ambos casos, aparecen representantes del grupo de los ciliados sésiles, concretamente del género Vorticella. En B se observan individuos del complejo Vorticella convallaria, agrupados sobre un mismo flóculo, situación ésta que no debe llevar a confundirlos con ciliados peritricos coloniales.200x, contraste de fases.

EJERCICIO INTERLABORATORIOS (Febrero 2006): Reportaje fotográfico

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ESTRUCTURA FLOCULAR. LÁMINA 5

A

GBS

200x

GBS

200x B

Estructura del fango activo*. A y B: Flóculos de fango activo de estructura más abierta y núcleomenos mineralizados que los mostrados en la lámina anterior. En B se observa claramente que el tamañode flóculo es inferior respecto a A y a los de la lámina anterior. La presencia de estos microflóculos hasido recogida en el informe y se ha asociado a la coexistencia en el sistema de flóculos de distintas edades de fango. 200x, contraste de fases. *Siempre que sea posible, se recuerda a los participantes la necesidad de realizar la evaluación del fango (característicasmicroscópicas) a 100x y en campo claro.

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ESTRUCTURA FLOCULAR: DIVERSIDAD BACTERIANA

LÁMINA 6

A 1000x

GBS

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7

GBS

B 1000x Diversidad bacteriana alrededor del contorno del flóculo. A y B: En ambas imágenes se observa una importante diversidad bacteriana alrededor de los dos flóculos, en los que los contornos no estánclaramente definidos. En B, además, se señalan distintas agrupaciones bacterianas, frecuentemente observadas en la presente muestra. 1000x, campo claro. Tinción Gram.

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ESTRUCTURA FLOCULAR: AGREGADOS BACTERIANOS EN LOS CONTORNOS FLOCULARES (I)

LÁMINA 7

A 400x

1000x A

GBS

1000x B

GBS

EJERCICIO INTERLABORATORIOS (Febrero 2006): Reportaje fotográfico

8

Agregados bacterianos próximos a los contornos del flóculo. A y B: Tal y como se recoge en lasimágenes anteriores la diversidad bacteriana en torno al flóculo es alta. Adicionalmente, se observanflóculos en los que la macroestructura es muy reducida, en pro de una microestructura muy diversa y casiúnica constituyente del flóculo, formada por agrupaciones bacterianas que reaccionan de forma distintadependiendo de la tinción aplicada (probablemente por la presencia de distintas sustancias de reserva).Obsérvense colonias de color más anaranjado que destacan entre las bacterias típicamente Gram negativas.En el apartado del presente anexo, destinado a bacterias filamentosas, se presentan resultados de la tinciónde bacterias poli-P.

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ESTRUCTURA FLOCULAR: AGREGADOS BACTERIANOS EN LOS CONTORNOS FLOCULARES (II)

LÁMINA 8

A 400x 1000x A 1000xB

GBS

1000x 1000x C D

GBS

E F

GBS

100x 1000x Agregados bacterianos en los flóculos. A-D y F: Asociaciones bacterianas en los flóculos de fango activo. Algunas deellas con las configuraciones típicas de colonias nitrificantes y otras dispuestas de la forma característica con la queaparecen las colonias de bacterias poli-P. En E se observa un flóculo de fango activo del que sobresalen los agregadosdigitiformes típicos de Zoogloea sp.

GBS

EJERCICIO INTERLABORATORIOS (Febrero 2006): Reportaje fotográfico

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

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PROTOZOOS Y METAZOOS LÁMINA 4

■ FLAGELADOS

B

Coanoflagelados. A: Coanoflagelados en tinción Gram. 1000x, campo claro. B: Coanoflagelados en preparación en vivo. 4000x, contraste de fases. C: Coanoflagelados. Campo claro.

GBS

C

GBS A

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

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LÁMINA 5

■ FLAGELADOS

Pequeños flagelados. A: Pequeño flagelado. Campo claro, 400x. B: Bodo sp. Contraste de fases, 400x.

Carlos Ferrer

A

ZORNOZA

B

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

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LÁMINA 6

■ AMEBAS TESTÁCEAS (II)

Amebas testáceas. A y B: Arcella sp. en vista de perfil. Campo claro. C y D: Arcella sp. en vista oral. 200x y 400x (respectivamente), contraste de fases. Mientras que en C se observa una ameba de colorpardo oscuro, probablemente inactiva, en D puede advertirse el interior de la teca, es decir, el citoplasma.

GBSC

BA

ZORNOZA

D

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

7

LÁMINA 7

■ AMEBAS DESNUDAS

A y B. Amebas desnudas. (A) Contraste de fases, 100x. (B) Contraste de fases, 400x. En A se observa la presencia de pseudópodos.

GBS A

GBS B

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

8

LÁMINA 8

■ CILIADOS BACTERÍVOROS NADADORES*

* Dadas las observaciones realizadas por algunos participantes y nuestra propia experiencia, hemos incluido a Acineria uncinata en el grupo de los nadadores en este anexo fotográfico. No obstante, el cálculo del SBI, siguiendo las indicaciones del Prof. Madoni, ha de realizarse incluyendo a este ciliado en el grupo de los reptantes.

■ CILIADOS REPTANTES BACTERÍVOROS (I)

Ciliados nadadores. (A) Acineria uncinata. en las proximidades de unflóculo de fango activo. 400x, campo claro.

A

B

C

Aspidisca lynceus de perfil. 400x, contraste de fases. Obsérvese la superficie lisade esta especie, distinta a la superficie abombada y con costillas de Aspidiscacostata.

ZORNOZA

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

9

LÁMINA 9

■ CILIADOS REPTANTES BACTERÍVOROS (I)

Ciliados reptantes. (A) Euplotes sp. 400x, contraste de fases. (B) Euplotes patella400x, contraste de fases. La longitud de este organismo es de 90-120 µm, es decir,superior a la de E. affinis y E. moebiusi. No obstante, su identificación de forma precisarequiere de técnicas de impregnación argéntica.

GBS A

ZORNOZA

B

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

10

LÁMINA 10

■ CILIADOS SÉSILES BACTERÍVOROS (I)

B GBS

GBS A

Ciliados sésiles. A: Vorticella sp. 400x, contraste de fases. B: Vorticella sp. engemación. 400x, contraste de fases. C: Vorticella sp. en conjugación (se resalta en lafotografía el microconjugante).

GBS C

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

11

LÁMINA 11

■ CILIADOS SÉSILES BACTERÍVOROS (II)

GBS

ZORNOZA

Ciliados sésiles solitarios. Diversos individuos del Complejo Vorticella convallaria enuna agrupación similar a una colonia (pseudocolonia). 100x, contraste de fases. B:Individuo del complejo Vorticella convallaria. 400x, contraste de fases.

A

B

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

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LÁMINA 12

■ CILIADOS SÉSILES BACTERÍVOROS (III)

Ciliados sésiles coloniales. A: Epistylis sp. 400x, campo claro. B: Opercularia microdiscum. 400x,contraste de fases. Obsérvese en esta especie el tamaño tan reducido del disco peristomial (1/5 anchocelular). En estas imágenes se observan claramente las diferencias entre los géneros Opercularia y Epistylisen cuanto a la región peristomial.

A

B

ZORNOZA

B

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

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LÁMINA 13

■ CILIADOS SÉSILES BACTERÍVOROS (III)

A

Ciliados sésiles coloniales. A: Opercularia articulata. 100x, contraste de fases. B: Operculariaarticulata. 400x, campo claro. Destaca en este organismo su grueso pedúnculo (10 µm ancho) y eltamaño de sus zooides (90-120 µm longitud).

GBS

GBS B

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

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LÁMINA 14

■ CILIADOS SÉSILES BACTERÍVOROS (IV)

Ciliados sésiles coloniales: A Epistylis chrysemydis. 100x, contraste de fases. Esta especie se caracteriza por presentar zooides de gran tamaño (140-220 µm), doble reborde peristomial y pedúnculo hueco. B: Epistylis plicatilis. 100x, contraste de fases. Esta especie se caracteriza por presentar pedúnculo compacto estriado transversalmente y zooides de 90-160 µm de longitud. El disco peristomial se presenta en un solo disco.

GBS A

GBS B

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

15

LÁMINA 15

■ CILIADOS SÉSILES CARNÍVOROS

■ METAZOOS

Suctores. Probablemente, Acineta sp. 400x, campo claro.

Metazoos. A: Nematodo. 100x, contraste de fases. B: Rotífero. 100x, contraste de fases.

A B GBS GBS

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

16

LÁMINA 16

■ OTRAS OBSERVACIONES

Otros restos en el fango activo. A: Ácaro. 100x, contraste de fases. B: Algas.100x, contraste de fases.

Algas

GBS A

GBS B

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

17

ORGANISMOS FILAMENTOSOS ORGANISMOS FILAMENTOSOS DE OBSERVACIÓN FRECUENTE (I)

LÁMINA 17

Microthrix parvicella en tinción. A: Microthrix parvicella en tinción Gram.Obsérvese que se trata de una reacción Gram + "fuerte", similar a la de Nocardia sp.1000x, campo claro. B: Microthrix parvicella en tinción Neisser. Se trata de unareacción negativa, aunque gránulo positiva. 1000x, campo claro.

A

B

GBS

ZORNOZA

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

18

ORGANISMOS FILAMENTOSOS DE OBSERVACIÓN FRECUENTE (II)

LÁMINA 18

Tipo 0041. A: Tipo 0041 en tinción Gram (reacción negativa). El crecimiento epifítico impide la distinción clara de los filamentos. La similitud morfológica y en cuanto a reactiva a tinciones hacenimprescindible la realización de mediciones para distinguir este morfotipo del 0675. 1000x, campoclaro. B: Tipo 0041 en vivo. Detalle del crecimiento epifítico de este filamento. 400x, contraste defases.

A

C

Microthrix parvicella, Gram + Tipo 0041, Gram -

A

Tipo 0041

B

GBS

GBS

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

19

ORGANISMOS FILAMENTOSOS DE OBSERVACIÓN FRECUENTE (III)

LÁMINA 19

Organismos de observación frecuente. A: Tipo 0675 en preparación "in vivo". 1000x, contraste defases. B: Tipo 0041 en tinción Gram. 1000x, campo claro. Pese a que los reactivos de tinción alteranlas dimensiones "normales" de los microorganismos, obsérvense las diferencias en cuanto a tamaño deestos dos morfotipos (A y B). C: Tipo 021N en tinción Gram (reacción negativa). 1000x, campo claro.

A

B

C GBS

A

ZORNOZA

B

ZORNOZA

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

20

ORGANISMOS FILAMENTOSOS DE OBSERVACIÓN POCO FRECUENTE (II)

LÁMINA 20

GBS

Organismos de observación poco frecuente. A: Nocardia sp. en tinción Gram. 1000x,campo claro. B: Microthrix parvicella y Nocardia sp. en tinción Gram. Campo claro.Entendemos que el color poco convencional de esta foto se debe al equipo de microfotografía(videocámara), en la que el ajuste de los colores puede realizarse de forma manual.

B

A

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EJERCICIO INTERLABORATORIO (Mayo 2005): Anexo fotográfico

21

ORGANISMOS FILAMENTOSOS DE OBSERVACIÓN MUY POCO FRECUENTE (II)

LÁMINA 21

Organismos de observación muy poco frecuente. A: Hyphomicrobium sp. sobresaliendo de laestructura flocular. 1000x, campo claro. B: Tipo 0092 en tinción Neisser (reacción positiva) junto aMicrothrix parvicella. 1000x, campo claro.

AA

ZORNOZA

A

ZORNOZA

B