Soluciones Agilent para Análisis Medioambientales: Electroforesis Capilar Agilent 7100

Análisis de Iones mediante l i t del nuevo sistema de

Electroforesis Capilar 7100. U lt ti Rá idUna alternativa Rápida,Eficaz y Versátil

Nueva Agilent 7100-CE

Fundamentos de la Electroforesis Capilar (CE)

Si-OH Si-O- + H+

-4 2u x 10 (cm /Vs)EOF

Silica

1

2

3

4

pH

1

3 4 5 6 7 8

Flujo Electroosmótico (EOF): j ( )pH’s básico incrementa EOF

- -

- + +--

--

-

ÁNODO

CÁTODO

-

EOF ---

++

+

++

-- - +

++

++

+ÁNODO

CÁTODO-

EOF

++

--

---+

++

++

++

+

+++

+++

+--

---

--

+- - -

pH ÁCIDO

++

pH BÁSICO

+ ++

+

---

---

Nueva Agilent 7100-CEPág. 2

Elevada Eficacia de separación gracias al perfil de flujo plano del EOF

FLUJO IONES FLUJO ELECTROOSMÓTICO (EOF) + FLUJO ELECTROFORÉTICO (EPF)

Fundamentos de la Electroforesis Capilar (CE)FLUJO IONES = FLUJO ELECTROOSMÓTICO (EOF) + FLUJO ELECTROFORÉTICO (EPF)

+ EOF

EOF

EPF

EPF

neutras

+

-

EOF

EOF

EOF

+ÁNODO

EPF

EPF

-CÁTODO

Adicionando [tensoactivos catiónicos]<CCMse podrá invertir sentido EOF

---

EOF

EOF

EPF

EPF

EPF no se detecta-

DETECTOR

-

DETECTOR

Señal

ELECTROFORETOGRAMA

+ -+ -neutras

Adicionando [tensoactivos iónicos] >CCM se podrán también separar las especies neutras (modalidad MEKC)

Tiempo0

Nueva Agilent 7100-CEPág. 3

especies neutras. (modalidad MEKC)

Modalidades, Aplicaciones y Detección UV/VIS Indirecta

S ll M l l Small MoleculesS ll M l l Small Molecules

Modalidades: CZE, MEKC (neutros), CGE (sep. por tamaño), CIEF (sep. por pI), ITP, (preconcentr.)…

Aplicaciones:Small Molecules

Cation /Anion analysisSmall Molecules

Chiral analysisSmall Molecules Polar compounds,

e.g. basic drugs

Small Molecules Natural products in

complex matices

Large Molecules Large Molecules Large Molecules Large MoleculesLarge Molecules Proteins, e.g.

Antibodies

Large Molecules Peptides & peptide

map

Large Molecules xNA and

Oligonucleotides

Large Molecules Molecule interactions

e.g. Protein-DNA

DETECCIÓN UV/VIS INDIRECTA DETECTOR SEÑAL

¿Cómo Detectar por UV/VIS Analitos SIN Cromóforo?

Permite la detección por UV/VIS de analitos que NO absorben. Utiliza un

tampón que absorbe a la long. onda de t b j ( i t l d t t )

X mUA

0 mUA

trabajo (pero sin saturar al detector).

0 mUA

X mUAMuy utilizada para Análisis de

Aniones y Cationes:

Nueva Agilent 7100-CEPág. 4

Análisis de Aniones con Inversor EOF e Identificación Rápida de Aniones con DAD

Tampón Aniones Agilent (p/n:8500-6797) (ajustado a pH:8.2)

10 ppm anionesCap : 50µm/ l efec = 40cm BF

mAU

8

DAD1 A, Sig=350,80 Ref=245,10 (DEMOIONS\ANIONS10.D)

rC

l

H2P

O4S

O4

NO

3

NO

2

F

10

12

Identificación Rápida de Aniones con DAD

Cap.: 50µm/ l.efec.= 40cm -BF3

Temperatura: 40ºCVoltaje: -30KVInyec: 200 mbars·seg

245 nm

i

0

2

4

6

8 Br

RELACIÓN ALTURAS*(en escala normalizada con respecto a

un anión transparente)NO2: 210nm ~ 220 ~ 245/2

min1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5

mAU

1015

DAD1 B, Sig=350,80 Ref=220,10 (DEMOIONS\ANIONS10.D)

15

20

15

NO

3

Br

Cl

H2P

O4S

O4

NO

2

F

NO2 y NO3 absorben a 220nm (el resto no) NO2: 210nm 220 245/2

NO3: 210nm<<220 ~ 245/2Br: 210nm ~60% (220 ~ 245)

Transparentes (Cl,SO4,F, H2PO4,...) 210nm = 220 = 245

220 nm

min1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5

-525

0

5

10

B ( )

2 4 )1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5

mAU

101520

DAD1 C, Sig=350,80 Ref=210,10 (DEMOIONS\ANIONS10.D)

Br

Cl

H2P

O4S

O4

NO

3

NO

2

F

20

25

30

mAU

NO2 , NO3 y Br absorben a 210nm (el resto no)

AnionesÁreas *

220nm/ 245nm

Áreas *

210nm/ 245nm

Transpa- 2 4 3 0

210 nm

min1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5

-50

5

0

5

10

15Transpa

rentes 2.4 3.0

Br 2.3 1.8

NO2 1.1 2.0

NO 1 1 0 2

Nueva Agilent 7100-CEPage 5

NO3 1.1 0.2* Valores utilizando Tampón Aniones Agilent (p/n:8500-6797)

Análisis de Iones

Análisis rápidos en matrices complejas con

Agilent dispone de una amplia gama de Kits, Reactivos y métodos para lograr

fi i l l b t i jmatrices complejas con mínima preparación de

muestra(frecuentemente sólo disolver) Datos tomados de Página 98

mayor eficacia en el laboratorio, por ej. para Aniones, Cationes (incluyendo de

cationes de transición), ácidos orgánicos,…

Nueva Agilent 7100-CEPage 6

(frecuentemente sólo disolver) Datos tomados de Página 98 CE-Primer: P/N 5990-3777EN

Sistema de Electroforesis Capilar Agilent 7100hv

Capilares tipo

Cassette CapilarDetector "Diode-

Array"

tipo“Burbuja”

HV

Carro de viales (termostatizado)

Rellenado Tampón

Desecho Tampón

Nueva Agilent 7100-CEPage 7

Electroforesis Capilar/Masas: CE/MS

+++

+++

++++

++

gas de nebulización

+

+

++

+

++

+

++ +

++++ ++

+

++

+

++

++ ++ +

+

+ ++

++

++

+ ++

+

+++

+

+

+

+

+++

++++

capilar

cámara de

++ + ++ ++

CE/DAD CE/MSBasta cambiar

+ ++ +

+

+cámara delíquidonebulizador

Agilent es el único proveedor para el portafolio completo CE-MS

Los sistemas CE-MS de Agilent ofrecen: • La sensibilidad excepcional del MS.• Sistema de nebulización “conecte y opere“.• La tecnología de nebulización más robusta.

bi d l i id Espectrómetros de Masas

combinada con la conmutación más rápida entre LC- y CE-MS.

A li i l

Agilent Series 6000

Aplicaciones clave:• Análisis de impurezas en fármacos CE-QQQ, CE-QTOF• Estudios metabolómicos CE-QTOF/QqQ• Análisis de proteinas y glicanos CE TOF/QTOF/QqQ

Nueva Agilent 7100-CEPage 8

• Análisis de proteinas y glicanos CE-TOF/QTOF/QqQ

Aportaciones de la Electroforesis Capilar (CE) y Posicionamiento “versus” Cromatografía Iónica en Análisis Medio Ambientales

Electroforesis Capilar Cromatografía IónicaEnorme Flexibilidad y Versatilidad

A áli i d t d ti d lit

Específica para IonesM t i t d b tibl lAnálisis de todo tipo de analitos (iones y

neutros).en todo tipo de matrices.Matriz muestra debe ser compatible con las

columnas (evitar materia orgánica y metales transición).

Bajo coste Coste apreciable:Bajo costeRobusto y Económico capilar sílice fundida

(tubo vacío).

Mínima preparación muestra.

Coste apreciable:Columnas de intercambio iónico y supresoras.

La matriz no debe interferir con las columnas. coste preparación muestra.

Rapidez y Automatización de la Operación:

Cambio entre Aniones y Cationes

Lentitud e intervención Manual: requiere que el usuario cambie las columnas y

fases móviles del cromatógrafo.Cambio entre Aniones y Cationes

automático sin intervención del usuario

Nueva Agilent 7100-CEPage 9

Electroforesis Capilar Agilent 7100

¿Preguntas?Capilar Agilent 7100

¿ g

• CE con la mayor sensibilidad delmercado.

• Único proveedor con el portafolioÚnico proveedor con el portafolio completo CE-MS.

• Único proveedor que ofrece capilares “burbuja”, sistema decapilares burbuja , sistema de rellenado y linealidadexcepcionales.

• La mejor reproducibilidad deLa mejor reproducibilidad de inyección.

Más información en www.agilent.com/chem/ce

http://www.chem.agilent.com/en-US/products/instruments/electrophoresis/Pages/default.aspx

Nueva Agilent 7100-CEPage 10

p g p p g pCE-Primer: P/N 5990-3777EN

Muchas GraciasMuchas Gracias por su Atenciónp

Electroforesis Capilar Agilent 7100Estamos a su disposición en

tel.: 901.11.6890 customercare spain@agilent com www agilent com/chem

Nueva Agilent 7100-CEPage 11

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