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GRUPO GRUPO SYMSYM
SYM - Señal y Medida en QuímicaIQMA - Departamento de Química
Universidad Politécnica de Valencia
10 Doctores10 Doctores• 7 PDI• 3 Contratados• 7 PDI• 3 Contratados
7 Becarios Pre-Doctorales7 Becarios Pre-Doctorales
2 Técnicos de Laboratorio2 Técnicos de Laboratorio
PERSONALPERSONAL
• Desde 1991 el grupo está desarrollando investigaciones en el área inmunoanalítica relacionadas con problemáticasmedioambientales, agrícolas y alimentarias
• Además, desarrolla otros proyectos de investigación menoresrelacionados con la calidad de las aguas y del suelo, y sobrela revalorización de residuos
• Todas las actividades están financiadas por diferentesprogramas de investigación competitivos (españoles y europeos) y por la Universidad Politécnica de Valencia
• Finalmente, colabora con diferentes empresas españolas en la solución y desarrollo de aspectos de interés común
GRUPO GRUPO SYM SYM -- PresentaciPresentacióónn
Líneas de investigaciónÁreas de
aplicaciónResultados científicos
(5 últimos años)Inmunoanálisis
• Síntesis de haptenos
• Desarrollo de ELISAs
• Desarrollo de Tiras reactivas
Biosensores
• Inmunosensores en flujo
• Sistemas basados en Micromatrices
BIOMEMS
• Derivatización superficies poliméricas
• Sistemas basados en Discos Compactos
Agricultura
Alimentos
Medioambiente
Proyectos > 15-InvestigaciónCICYT,DGES,GV,UPV, EU
-Transferencia Tecnol.PETRI, PROFIT,…
Publicaciones > 50
Patentes3 Internacionales3 Nacionales
Tesis Doctorales 5 Defendidas 7 En realización
Congresos > 40
GRUPO GRUPO SYMSYM
Título del proyecto Organismo y referencia del proyecto
Estudio de formatos homogéneos-heterogéneosaplicados a sistemas inmunosensores
MCYTRef. BQU2003-02729
Desarrollo de inmunoensayos multirresiduo en soportes interactivos para el screening de plaguicidas en el medio acuático
MCYTRef. BQU2003-02777
Ultrahigh sensitivity spot-waveguide biosensor on a highly integrated chip for simultaneous diagnosis of multiple diseases. SABIO
European UnionFP6-2004-IST-4
Desarrollo de tiras reactivas para el screening de plaguicidas organofosforados en vegetales
FECOAM
Nuevos formatos de inmunoensayo para la determinación de drogas con actividadfarmacológica en alimentos
MECBIO2001-3024
Proyectos de InvestigaciónProyectos de InvestigaciónGRUPO GRUPO SYMSYM
LÍNEAS DE TRABAJO
Síntesis de inmunorreactivosDesarrollo de ensayos (ELISA)
Residuos de contaminantes
• Síntesis de haptenos
• Inmunización
• Obtención anticuerpos
policlonales
• Síntesis de trazadores
y otros inmunorreactivos
• Puesta a punto de ensayos tipo ELISA
• Caracterización ensayos
GRUPO GRUPO SYMSYM
Varias estructuras propuestasVarias estructuras propuestas
ObtenciObtencióón de suerosn de sueros PurificaciPurificacióón de anticuerposn de anticuerpos
UniUnióón a proten a proteíínasnas SSííntesisntesis
DiseDiseñño deo dehaptenoshaptenos
DiseDiseñño de o de competidorescompetidores
MolMoléécula pequecula pequeññaa
INMUNINMUNÓÓGENOSGENOS
((conjugadosconjugados para tapizado y para tapizado y trazadorestrazadores) )
InmunorreactivosPlaguicidas: Atrazina, Carbaril, 3,5,6-tricloro-2-piridinol, Irgarol,
Organofosforados: Diazinón, Fentión, Malatión, Clorpirifos
Cloroacetanilidas: Alacloro, Acetocloro, Metolacloro
Fenoxiácidos: 2,4-D, 2,4,5-TP, 2,4-DB, MCPA
Triclosán
Clorofenoles: Pentaclorofenol, 1-naftol
Trihalometanos
Ésteres ftálicos
AntibióticosTetraciclinas - Oxitetraciclina, clortetraciclina, tetraciclinaSulfonamidas - STZ, SSZ, SMX
GRUPO GRUPO SYMSYM
• Desarrollo de inmunosensores ópticos automatizados
Residuos herbicidas y sulfonamidas
• Desarrollo de tiras reactivas
Residuos organofosforados
• Desarrollo Micromatrices multianalito
en soportes interactivos tipo CD
μELISAS
Ensayos de SNPs y expresión génica
Ensayos para Proteómica
LÍNEAS DE TRABAJO
Desarrollo de Biosensores
Desarrollo de nuevos formatos de ensayo
a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)
ControlAtrazinaCarbaril
a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)
ControlAtrazinaCarbaril
GRUPO GRUPO SYMSYM
ABC
D E FG
H
AHG
FEDC
B
S S SS P PPS SS
A
E
SISTEMA SENSOR
Lum
inis
cenc
ia (u
.e.)
tiempo
1. Competición2. Captura3. Lavado4. Revelado5. Regeneración
ETAPAS
GRUPO GRUPO SYMSYM
Analito I50 Límite de detección
Rango dinámico
Carbaryl 0,12 0,016 0,04 - 0,85
Atrazina 0,05 0,007 0,01 - 0,23
Irgarol 1051 0,05 0,010 0,02 - 0,16
3,5,6-Tricloro-2-piridinol 0,13 0,021 0,04 - 0,50
Glifosato 0,18 0,021 0,05 - 1,00
Pentaclorofenol 19,0 1,3 3,7 - 82,0
Sulfatiazol 3,2 0,11 0,4 - 24,0
SENSIBILIDAD DE LOS INMUNOSENSORES (µg/L)SENSIBILIDAD DE LOS INMUNOSENSORES (µg/L)
GRUPO GRUPO SYMSYM
Analito Matriz Nivel de adición
Recuperación media (%)
Carbaryl AguaMiel
1 µg/L0,5 mg/kg
104113
Atrazina Agua rio 12 µg/L 98
Irgarol 1051 Agua mar 0,5 µg/L 104
3,5,6-Tricloro-2-piridinol Agua lagoAgua mar
0,5 µg/L0,5 µg/L
95
Glifosato AguaSuelo
0,75 µg/L 60 µg/kg
107103
Pentaclorofenol Agua 50 µg/L 109
Sulfatiazol Agua 50 µg/L 103
APLICACIÓN DE LOS INMUNOSENSORESAPLICACIÓN DE LOS INMUNOSENSORESGRUPO GRUPO SYMSYM
ACTUALMENTE: 20-25 min/ensayo
REDUCCIÓN DE TIEMPOS DE ENSAYO (1- 5 min/ensayo)
Aumento de la capacidad de trabajo de los sensores Aumento de la capacidad de trabajo de los sensores
• Regeneración del inmunosensor• Marcaje de haptenos con fluoróforos
Aspectos a resolverAspectos a resolver
Nuevo formato de ensayo Homogéneo-Heterogéneo
Materiales de acceso restringido (RAM)
Procedimiento general de marcaje
Hapteno
Hapteno-COOH + H2N-TGCAGACACAACTA-F*
Oligonucleótido marcado (fluoróforo)
GRUPO GRUPO SYMSYM
MICROMATRICES MULTIANALITO EN SOPORTES INTERACTIVOS PARA
ANÁLISIS DE RESIDUOS DE PLAGUICIDAS
MICROMATRICES MULTIANALITO EN SOPORTES INTERACTIVOS PARA
ANÁLISIS DE RESIDUOS DE PLAGUICIDAS
GRUPO GRUPO SYMSYM
BlancoTestigo
Resultado
100 µm200 µm
4. Resultado4. Resultado
MICROMICRO--ELISA ARRAYELISA ARRAY
1. Ordenación espacial conjugados1. Ordenación espacial conjugados 3. Lavado y adición del trazador3. Lavado y adición del trazador2. Adición muestra y anticuerpos específicos2. Adición muestra y anticuerpos específicos
CD
Conjugados de hapteno
Analitos
Anticuerpos específicos
Trazador
GRUPO GRUPO SYMSYM
LÍNEAS DE TRABAJO
Derivatización química de superficies como soportes para
anclaje de bio-receptores
BIOMEMS
• Modificación química superficial de polimetilmetacrilato (PMMA)
• Modificación química superficial de policarbonato (PC)
• Anclaje covalente de proteínas y oligonucleótidos sobre superficies poliméricas modificadas
• Modificación química superficial de óxido de silicio y nitruro de silicio para anclaje covalente de proteínas
GRUPO GRUPO SYMSYM
SLOT-WAVEGUIDE
Variación del índicede refracción 3 veces mayor que en las ondas guiadasconvencionales
Ultrahigh sensitivity Slot-wAveguide BIOsensor (SABIO)on a highly integrated chip for
simultaneous diagnosis ofmultiple diseases
Ultrahigh sensitivity Slot-wAveguide BIOsensor (SABIO)on a highly integrated chip for
simultaneous diagnosis ofmultiple diseases
UPV (NTC-SYM)
Universidad Politécnica de ValenciaCamino de Vera s/n, Valencia. C.P. - 46022
e-mail: ciqma@upv.eshttp://www.upv.es/iqma
GRUPO GRUPO SYMSYM
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