pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos · interpretaciÓn e informe •los halos de...

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

(Antibiograma por difusión con discos - CIM/CBM –

Curvas de muerte - PIS/PBS- VBS – Dosaje de Antimicrobianos)

Mirta G. Quinteros

• Influencian decisiones sobre el tratamiento específico individual.

• Orientan tratamiento empírico inicial

• Desarrollo del vademecum hospitalario.

• Estudio de la actividad de nuevos agentes antimicrobianos.

a) Aportes desde la sensibilidad

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

• Resistencias intrínseca: una herramienta útil en laidentificación bacteriana.

• Vigilancia de patrones de resistencia ATB enmicroorganismos patógenos nosocomiales o no, paradetectar emergencia de resistencia

• Aplicación de políticas de control de infecciones.

b) Aportes desde la resistencia

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

Pruebas de Sensibilidad a los

AntimicrobianosINTERPRETACIÓN E INFORME

•Los halos de sensibilidad medidos en mm, se interpretan de acuerdo a

las Normas del CLS o EUCAST, que nos permiten determinar si esa

bacteria es sensible o no a determinado antimicrobiano ensayado.

•Los puntos de corte serán establecidos en las curvas de correlación ,

entre la CIM (ug/ml) y los mm de halo de inhibición observado en la

prueba de difusión en agar con discos, de una determinada bacteria

frente al antimicrobiano ensayado.

INTERPRETACIÓN E INFORME64 –

32 –

16 –

8 –

4 –

2 –

1.0 –

0.5 –

I6

I10

I15

I20

I25

I30

I35

(mm)

MIC

(µ

g/m

l)

Resistante Intermedio Susceptible

Pruebas de Sensibilidad a los

Antimicrobianos

HISTOGRAMAS: Distribución de microorganismos Vs CIM

Pruebas de Sensibilidad a los

Antimicrobianos

El antibiograma Vs Mecanismos de Resistencia

1. Métodos fenotípicos: – Antibiograma por Dilución

– Antibiograma por Difusión

2. Métodos bioquímicos:– Detección de β-lactamasas: resistencia a ampicilina

– Detección de la PBP2a: resistencia a oxacilina

3. Métodos genéticos: – Detección de genes de resistencia, generalmente

mediante técnicas de PCR.

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

Clasificación

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

Antibiograma por difusión

Detección fenotípica:

Resistencia a cefoxitina

1.-Métodos fenotípicos

oxacilina

Antibiograma por dilución:

2.- Métodos bioquímicos

PRODUCCIÓN DE β-LACTAMASAS

Método microbiológico

Método: nitrocefin

Neisseria

gonorrhoeae

Haemohphilus

influenzae

Enterococcus faecalis

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

Meticilino resistencia (latex)

•PLP (+)

2.- Métodos bioquímicos

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

Meticilino resistencia

(PCR)

•mec A (+)

2.- Métodos genéticos

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

1. COL

2. PER34

3. BK2464

4. ANS46

5. HU25

6. HDE288

7. 6588 / 3068 - LP

8. 6592 / 2258 - LP

9. 6595 / 2296 – LP †

10. 6598 / 2502 - TQ

11. 6599 / 2520 – BAL †

12. 6600 / 29948- Hemo

13. Control negativo -

342 bp

162 bp

(mecA)

Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos

RESISTENCIA INTRINSECA Y NATURAL

NATURAL: GRAM (+) : R a polimixina

INTRINSECA:

Bacilos GRAM (-): R a glucopéptidos,eritromicina

Proteae: R a nitrofuranos-polimixina.

Serratia spp: R a polimixina

Enterobacter spp: R a cefalotina

Klebsiella spp: R a ampicilina

Enterococcus spp: R a Cef.1ºG- R de bajo nivel AG.

R a imipenem: S. malthopilia, E.faecium, E.raffinosus

R a vancomicina: E.gallinarum, E.casseliflavus

MLS

(+)

(-)

S. aureus S. epidermidis

E. coli: Comportamiento frente a

IBL

ß-LACTAMASAS PLASMIDICAS

•ß-lactamasas de espectro

extendido (BLEE):

TEMderiv

SHVderiv

PER1-2

CTXMderiv

Citrobacter freundii (AmpC + BLEE)

Curva de muerte

1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:1281:2suero caldo

Microorganismo patógeno

1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:1281:2suero Caldo

valle

Pico

24°C

PIS

48°C

PBS

PODER INHIBITORIO / BACTERICIDA DEL SUERO

Microorganismo patógeno

Resistencia a los antibióticos Amenaza vigente para la Salud pública