phytophthora palmivora obtenidos en la zona...

Caracterización morfológica y patogénica de aislamientos de Phytophthora palmivora obtenidos en la Zona Norte

Introducción

La Pudrición del cogollo (PC) causada por Phytophthora palmivora havenido incrementándose en los últimos tres años en la Zona Norte deColombia, alcanzando niveles altos de incidencia y severidad en focos.La forma como se manifiesta la enfermedad en las diferentes zonas esvariable, motivo por el cual este estudio tiene como objetivocaracterizar morfológica y patogénicamente los aislamientos de P.palmivora obtenidos de palmas afectadas por esta patología en la ZonaNorte.

Metodología

La caracterización morfológica se realizó mediante la siembra de losaislamientos CPPhZN-01, CPPhZN-02 y CPPhZN-03 en medios de cultivoagar V8 (AV8) y agar zanahoria (AZ) en los cuales se determinó el patróncultural y la tasa de crecimiento. Se realizó la morfometría de losesporangios y las clamidosporas mediante de observaciones almicroscopio de luz.

La patogenicidad in vitro de cada aislamiento se realizó medianteinoculaciones en foliolos inmaduros de palma de aceite con una alícuotade 20 μl de una suspensión de 20.000 zoosporas/ml. En los folíolos semidió la longitud de las lesiones inducidas a las 48, 72 y 96 horasdespués de inoculación (DDI) y se cuantificó las estructuras en la zonade avance en seis campos de observación al microscopio 96 h DDI.

Resultados

En cuanto al patrón cultural los aislamientos CPPhZN-01 y CPPhZN-03presentaron colonias estrelladas en los medios evaluados (Figura 1A), adiferencia del aislamiento CPPhZN-02 el cual mostró un patrónligeramente radiado en el medio AV8 (Figura 1B).

Figura 1. Patrón cultural de las colonias de P. palmivora en AV8 A. Patrón de

CPPhZN-01y CPPhZN-03 . B. Patrón de CPPhZN-02.

A B

Figura 2. Tasa de crecimiento (mm/día) de los aislamientos de P. palmivora en los

medios AZ y AV8.

Aislamiento

Esporangio Papila Pedicelo

Largo

(µm)

Ancho

(µm)L/A

Largo

(µm)

Ancho

(µm)L/A

Largo

(µm)

CPPhZN-01 53,1 ± 7,5 33,2 ± 4,6 1,6 ± 0,2 6,5 ±1,4 7,2 ±1,1 0,9 ±0,2 3,9 ±1,0

CPPhZN-02 55,3 ±8,1 36,9 ± 6,1 1,5 ± 0,1 5,9 ±1,1 7,6 ±1,5 0,8 ±0,1 4,4 ±1,4

CPPhZN-03 65,3 ± 8,3 36,1 ± 4,9 1,8 ± 0,2 5,0 ±1,6 8,5±1,3 0,6 ±0,1 3,9 ± 1,0

Tabla 1. Morfometría de los esporangios de aislamientos de P. palmivora.

n=50

Aislamiento

Clamidospora

Diámetro (µm)

Mínimo Máximo Promedio

CPPhZN-01 22,5 42,5 33,0±4,2

CPPhZN-02 25 45,1 36,2±5,3

CPPhZN-03 25 45,8 33,8±4,2

Tabla 2. Morfometría de las clamidosporas de aislamientos de P. palmivora.

Referencias

• ERWIN, D. C.; RIBEIRO, O. K. 1996. Phythophtora Diseases Wordwide. APS Press. The American Phytopathological Society. St. Paul, Minnesota. 562 p.

• MARTÍNEZ, G.; SARRIA, G. A.; TORRES, G. A.; VARÓN, F. 2010. Phytophthora palmivora es el agente causal de la Pudrición del cogollo de la palma de aceite. Palmas 31 (No. Especial), 334 – 344.

• SARRIA, G. A.; TORRES, G. A.; VELEZ, D.; RODRIGUEZ, J.; NOREÑA, C.; VARÓN, F.; COFFEY, M.; ELLIOTT, M.; MARTINEZ, G. 2008. Caracterización morfológica y molecular de Phytophthora palmivora

agente causal de las lesiones iniciales de la Pudrición del cogollo (PC) de la palma de aceite en Colombia. Fitopatología colombiana 32 (2):39 – 44.

Conclusiones

El crecimiento de los aislamientos fue más rápido en el medio AZ,cubriendo el total de la superficie de la caja Petri 96 horas después de lasiembra, con tasas de crecimiento entre 14 y 21 mm/día (Figura 2).

Predominaron los esporangios ovoides (Figura 3), con promedios delongitud de 57,9 µm, ancho de 35,4 µm y relación largo/ancho de 1,6µm, papilas de 5,8µm de longitud, 6,6µm de ancho y 0,7µm de relaciónlargo/ancho y pedicelo de 4,1 µm de longitud (Tabla 1). Lasclamidosporas presentaron un diámetro que varió entre 24,1µm y44,5µm (Tabla 2), estos valores coinciden con el rango registrado para P.palmivora por Erwin y Ribeiro (1996), Martínez et al., 2010, Sarria et al.,2008.

n=50

A CB

Figura 4. Lesiones inducidas 96 horas después de la inoculación. A. CPPhZN-01. B. CPPhZN-02. C. CPPhZN-03.

CBA

Figura 3. Estructuras de P. palmivora. A y B. Esporangios. C. Clamidospora.

En las inoculaciones in vitro, todos los aislamientos evaluados fueron patogénicos en foliolosinmaduros de palma de aceite, se observaron diferencias en la longitud de la lesión conpromedios entre 17,87 y 45,39 mm (Figuras 4 y 5). Respecto al número de estructurascuantificadas se registraron promedios de 5 esporangios y 1 clamidospora por campomicroscópico, en 120 observaciones por aislamiento (Figura 6).

Figura 5. Longitud de las lesiones inducidas por los aislamientos de P. palmivora.

0

5

10

15

20

25

CPPhZN-01 CPPhZN-02 CPPhZN-03

Ta

sa

de

cre

cim

ien

to (

mm

/dia

s)

Aislamientos

Tasa de crecimiento

AZ AV8

0

10

20

30

40

50

60

48 72 96

Lo

ng

itu

d d

e l

esió

n (

mm

)

Horas después de la inoculación

Virulencia in vitro

CPPhZN-01 CPPhZN-02 CPPhZN-03

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

CPPhZN-01 CPPhZN-02 CPPhZN-03

N°

de e

str

uctu

ras

96

hd

di

Cuantificación de estructuras 96 hddi

Esporangios Clamidosporas

Figura 6. Cuantificación de esporangios y clamidosporas por campo microscópico, 96 hddi.

• Se observaron diferencias entre los aislamientos evaluados tanto en el aspectomorfométrico como patogénico.

• El aislamiento CPPhZN-02 mostró mayor longitud de lesión y mayor producción deesporangios.

Luisa Guzmán Sánchez, Franky Zúñiga Pérez, Francia Varón, Greicy Sarria VillaPrograma de Plagas y Enfermedades –Área Fitopatología, lfguzman@cenipalma.org; gsarria@cenipalma.org;

Corporación Centro de Investigación en Palma de Aceite, Cenipalma