histología tinción (histology staining)

Histología

Tinción

M. Rojas

¿Qué es la tinción?

• Consiste en aplicar un colorante especial para resaltar ciertos componentes del tejido, tanto intra como extracelulares.

• Se unen a determinados componentes según distintos criterios: – pH (colorantes ácidos/colorantes básicos)– Anticuerpos específicos – Afinidad a determinados componentes

ColorantesTinción Se usa con

frecuencia paraNúcleo Citoplasma Eritrocitos Fibras

colágenasTiñe específicamente

Hematoxilina Tinción general junto a Eosina

Azul ----- ----- ----- Ácidos nucleicos (azul), RER (azul)

Eosina Tinción general junto a Hematoxilina

----- Rosa Anaranjado/rojo

Rosa Fibras elásticas (rosa), fibras reticulares (rosa)

Azul de toluidina (colorante metacromático)

Tinción general Azul Azul Azul Azul Gránulos de mastocitos (púrpura)

Tricrómica de Gomori

Tejidos conjuntivo y muscular

Gris/azul Rojo Rojo Verde Fibras musculares (rojo)

Tricrómica de Masson

Tejido conjuntivo Negro Rojo/rosa Rojo Azul/verde Cartílago (azul/verde), fibras musculares (rojo)

Tricrómica de Mallory

Tejido Conjuntivo Rojo Rojo pálido Anaranjado Azul intenso

Queratina (anaranjado), cartílago (azul), matriz ósea (azul intenso), fibras musculares (rojo)

ColorantesTinción Se usa con

frecuencia paraNúcleo Citoplasma Eritrocitos Fibras

colágenasTiñe específicamente

Weigert para elastina

Fibras elásticas Azul/negro ----- ----- ----- Fibras elásticas (azul/negro)

Azan de Heidenhain (azocarmín + azul de anilina)

Distinción entre las células y los componentes extracelulares

Rojo/púrpura

Rosa Rojo Azul Fibras musculares (rojo), cartílago y matriz ósea (azul intenso)

Impregnación argéntica

Fibras reticulares y fibras nerviosas

----- ----- ----- ----- Fibras reticulares (pardo/negro), fibras nerviosas (pardo/negro)

Wright Células de la sangre

Azulado/púrpura

Azulado/gris

Rojo/rosa ----- Gránulos de neutrófilos (púrpura/rosa), gránulos de eosinófilos (rojo brillante/anaranjado), gránulos de basófilos (púrpura intenso/violeta), gránulos de plaquetas (rojo/púrpura)

Orceína Fibras elásticas Azul intenso

----- Rojo brillante

Rosa Fibras elásticas (pardo oscuro), gránulos de mastocitos (púrpura), músculo liso (azul claro)

PAS (ácido peryódico-reactivo de Schiff)

Membrana basal, detección de carbohidratos

Azul ----- ----- Rosa Glucógeno y otros carbohidratos (magenta)

Colorantes ácidos y básicos

• Un colorante ácido es aquel que se une preferentemente a compuestos ácidos (catiónicos). Dichos compuestos presentan acidofilia (afinidad al colorante ácido).

• Un colorante básico se une preferentemente a compuestos básicos (aniónicos). Dichos compuestos presentan basofilia (afinidad al colorante básico).

Tinción de Rutina (H-E)• La tinción de rutina consta de

dos colorantes: hematoxilina y eosina. Teñir es un proceso que involucra el tratamiento de la muestra en una serie de pasos para obtener contraste de los componentes intra y extracelulares.

• La eosina es un colorante ácido, mientras que la hematoxilina es un colorante básico.

Tráquea (corte transversal). H-E

Azul de Toluidina

• Corte de riñón• Al centro, glomérulo

dentro de cápsula de Bowman

• Rodeado de túbulos renales de distinto tipo.

Tricrómica de Gomori

• Corte de músculo esquelético

• En rojo, los núcleos; azul, las fibras musculares (corte transversal)

• Paciente con distrofia muscular de Duchenne

Tricrómica de Masson• Corte de riñón• A la izquierda,

glomérulo dentro de cápsula de Bowman

• Rodeado de túbulos renales de distinto tipo.

• Se aprecia el tejido conjuntivo entre los túbulos (azul)

Tricrómica de Mallori

• Unión músculo tendinosa.

• Tendón, arriba a la izquierda. Músculo, abajo a la derecha.

Weigert para elastina

• Corte de arteria muscular (transversal)

• Entre la túnica media y adventicia, destacan fibras elásticas (onduladas)

Azan

• Tráquea de gato• Epitelio

pseudoestratificado ciliado, y tejido conjuntivo subyacente.

Impregnación argéntica

• Tejido linfático• Se aprecian las fibras

reticulares teñidas de pardo/negro

Wright

• Frotis de sangre• Se aprecian

eritrocitos, plaquetas, neutrófilos y linfocitos.

Orceína

• Fibrocartílago de pabellón auricular

• Se aprecian en rosa las fibras elásticas, alrededor de los condrocitos (células de cartílago).

PAS

• Corte de riñón• Al centro, glomérulo

dentro de cápsula de Bowman

• Rodeado de túbulos renales de distinto tipo.

• Se aprecia en rosa las membranas basales

Para el estudiante• Maneje al menos 4-5 tipos de tinción distintas. Se recomienda

– H-E– Azul de Toluidina– PAS– Tricrómicas– Weigert u Orceína

• Estudie el método de preparación de una muestra antes y durante la tinción. Puede encontrarlo en los libros recomendados (sitio web: www.booksmedicos.org)