conferencia cnb 2014 (1).pptx

MANEJO DE LÍQUIDOS CORPORALES DESDE EL LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA COMO APOYO DIAGNÓSTICO, DESDE EL PUNTO DE

VISTA MORFOLÓGICO.

Myriam Beatriz Amaya Bernal

Bacterióloga y laboratorista clínico

Licenciada en Ciencias Naturales

Docente posgrado hematooncología

Facultad de medicina

Universidad Militar Nueva Granada

Directora programa de Hematología Morfología Proasecal

Grupo de clasificación Importancia patológica

1. No inflamatorio Trastornos articulares degenerativos, artrosis.

2. Inflamatorio Trastornos inmunitarios, artritis reumatoide, lupus eritematoso, esclerodermia, polimiositis, espondilitis anquilosante, fiebre reumática y artritis de Lyme.

3. Séptico Infección microbiana

4. Hemorrágico Lesión traumática, tumores, hemofilia, otros trastornos de la coagulación.Dosis excesivas de anticoagulante.

Clasificación e importancia patológica de los trastornos articulares

Grupo de clasificación Hallazgos del laboratorio

1. No inflamatorio Líquido claro y amarilloBuena viscocidadLeucocitos < 1000/uLNeutrófilos < 30%

2. Inflamatorio Líquido turbio y amarilloEscasa viscocidadLeucocitos 2000-75000/uLNeutrofilos > 50%

(origen: inducido por cristales)

Liquido turbio o lechosoViscocidad bajaLeucocitos hasta 100 000/uLNeutrofilos < 70%Presencia de cristales

Hallazgos de laboratorio en los trastornos articulares

3. Septico Liquido turbio, amarillo verdosoViscosidad variableLeucocitos 50 000-100 000/uLNeutrofilos > 75%Tinción de Gram y cultivo positivos.

4. Hemorrágico Liquido turbio, rojoViscosidad bajaLeucocitos iguales a los de sangreNeutrófilos iguales a los de sangre

IMPORTANCIA CLÍNICA EN LA INTERPRETACIÓN MORFOLÓGICA DE LOS LIQUIDOS CORPORALES,

DESDE EL PUNTO DE VISTA HEMATOLÓGICO.

El estudio de los líquidos corporales representa ciertos desafíos para el laboratorio: Involucra varias especialidades y requiere conocimiento especializado de cada liquido corporal.

La hematología se ocupa de analizar las células, su aspecto y cristales encontrados y si fuera necesario identificar células anormales correlacionándolas con los hallazgos de patología.

Brindan al médico información crítica para obtener un diagnostico presuntivo.

Líquidos corporales

Líquido Cefalorraquídeo

Serosos Sinoviales (articulaciones)

Se clasifican en

Pleural Pericárdico Peritoneal

Analizar:

– Color– Aspecto– Recuento Celular– Fórmula Diferencial

Recuentos celulares en líquidos corporales

1 Tubo. Pruebas químicas y serológicas. T. ambiente

2 Tubo. Pruebas microbiológicas. T. ambiente

3 Tubo. Recuento celular con EDTA. Refrigerar.

4 Tubo. Citometría de flujo, con el aditivo.

PROCESAR INMEDIATAMENTE.

Muestras

• Estabilizan los leucocitos y los antígenos leucocitarios durante un máximo de 10 días en muestra de sangre.

• Las muestras de liquido requieren ser analizadas en un plazo de 24-48 horas por la degradación natural

Ventajas:

• Más tiempo para llevar a cabo las pruebas, más flexibilidad en el laboratorio.

• Tiempo para transportar las muestras desde/hasta lugares lejanos.

• Reducción de la necesidad de muestreos repetidos.

Transfix

Procedimiento debe ser rápida no más de 30 minutos (leucocitos y globulos rojos se lisan).

• Si el líquido es limpido el recuento se realiza sin diluir• Si es turbio o sanguinolento se realiza dilución.• Su diluyente es solución salina isotónica.• Para recuento de glóbulos blancos solución de Turk.

Con excepción del liquido sinovial.

Procedimiento

Recolección de la muestra

En el caso del líquido sinovial, el procedimiento se conoce como artrocentesis.

Para el análisis hematológico se debe emplear tubo con anticoagulante EDTA y heparinizados, estériles

y al vacío para análisis microbiológico.Mundt LA, Shanahan K. Graff Analisis de orina y de los líquidos corporales. 2ª edición. México: Medica Panamericana; 2011. p 221

Requiere muestra relativamente pequeña. Rápida. No requiere mucha destreza. Brinda buena recuperación celular, sin

destrucción. Recomendación: Agregar una gota de

albúmina del 20 % al 30 %, produce mayor rendimiento celular y menos distorsión, las distorsiones comprenden vacuolas citoplasmáticas, hendiduras nucleares, nucléolos prominentes y agrupaciones celulares que se asemejan a procesos malignos.

Se forma una monocapa y el líquido se absorbe por el papel de filtro secante y produce un área concentrada de células.

Citocentrifugación

Mundt LA, Shanahan K. Graff Analisis de orina y de los líquidos corporales. 2ª edición. México: Medica Panamericana; 2011. p 223

Citospin

Rodríguez S,Villamarín S Líquido Cefalorraquídeo Ed Cont Lab Clín 2006;9:49-56

Si no se dispone de citocentrifuga, se centrífuga en lámina plana, el líquido corporal a 2.500 rpm durante 5 minutos en una centrífuga normal. Se tiñe con colorante de Wright.

Citospin casero

Beatriz amaya

Citospin casero

ASPECTO MACROSCÓPICO

PRUEBA Cristalino Opalescente Sanguinolento Turbio Xantocromic

Leucocitos

Diluciòn para el recuento células

0-200/mm3

Ninguna

200+/mm3

1:2 en solución de Turk

Elevados

Desconocido

No. de cuadrados a contar en el hemocitómetro

9 9 9 9 o 4 9 o 4

Pautas para el recuento de líquidos

Eritrocitos

Dil. recuento celular

0-400/mm3

Ninguna

400+/mm3

Ninguno

Desconocido

Ninguno

Desconocido

Ninguno

6000+/mm3

1:200 con s.s. fisiolog.

No. de cuadrados de la camara

9 9 9 4 5

Pautas para el recuento de líquidos

ASPECTO MACROSCÓPICO

PRUEBA Cristalino Sanguinolento

Opalescente Turbio Xantocrómico

Células contadas x factor de

profundidad x factor de dilución

___________________________________ Área contada /mm3

Fórmula para calcular el No. de células

• Leucocitos/mm3: células contadas x factor de dilución x 10

9 cuadrados

• Eritrocitos/mm3: células contadas x factor de dilución x 10

número de cuadrados contados

Fórmula para leucocitos

LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO

Reconocido por primera vez por Cotugno en 1764.

El LCR circula entre las dos membranas: Aracnoides y Piamadre.

Cantidad:

Adultos = 90 a 150ml Recién nacidos = 10 a 60 ml

Principales funciones:

Lubrica el cerebro y la médula espinal Actua como amortiguador, como medio nutriente

circulante Canal excretor del SNC Metabolismo del SNC

Cristalino Incoloro (turbio indica la presencia de leucocitos) Sanguinolento (indica la presencia de eritrocitos

>de 400/mm3. Por punción traumática o hemorragía del SNC)

Si el primer tubo es sanguinolento y los demás hay aclaramiento punción traumática.

Si todos los tubos son sanguinolentos es una hemorragia subaracnoidea

Cuando el sobrenadante tiene tinte amarillo se denomina xantocromia.

Examén macroscópico

Informar

Opaco, Sanguinolento, Amarillo

Centrifugar e informarAspecto del sobrenadante

(claro,hemolizado,xantocrómico)

LCRASPECTO MACROSCÓPICO

RECUENTOS CELULARESClaro

Rto sin diluirOpaco o sanguinolento

Diluir

Solución de Turk(1:2) o UnopettePara leucocitos (1:20)

Unopette para eritrocitos (1:200)

Informar leucocitos Informar eritrocitosInformar frescos y

crenadosPORTAOBJETO CITOCENTRIFUGADO

Análisis de los líquidos corporales

Importancia clínica del aspecto en el L.C.R.

• Convencional

Cámara de Neubauer

• Contadores celulares electrónicos

• Citometría de flujo

Métodos para recuentos celulares

Recuento normal:

• Leucocitos de 0 a 5/mm3

• Eritrocitos 0/mm3

• Si es sanguinolento se determina un leucocito

por 500 a 900 eritrocitos.

Todos los recuentos deben realizarsen de

inmediato, máximo en una hora, debido a que en

este tiempo se produce la lisis celular, a las dos

horas hay 40 % de leucocitos lisados.

De no procesar las muestras de inmediato se

recomienda refrigerar las muestras para

conservarlas.

Recuentos celulares

Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 183

Cálculo de células/uL

Conteo de leucocitos

Para realizar corrección por contaminación de sangre, se

debe tener en cuenta que por cada 500 a 900 eritrocitos hay

1 leucocito.

Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 183 184

MONOCITOS

LINFOCITOS

Recuento absoluto (cel/uL) por citometría de flujo en LCR

Cortesia Dr. Alejandro

Se realiza coloración de Wright rápida: 40 segundos colorante de Wright

1 min buffer

Para observar:

Incremento número de leucocitos: Pleocitosis con mayor porcentaje de neutrófilos en caso de meningitis bacteriana.

Se pueden ver bacterias intracelular o extracelular (con una semana de antibiótico, el diferencial vuelve a ser normal: linfocitos y monocitos)

Los linfocitos en meningitis viral, están aumentados pueden ser reactivos, se debe diferenciar de las fases leucémicas.

Las fases más tardías de las meningitis virales se observa más monocitos y macrófagos que linfocitos.

Se puede observar eritrofagocitosis.

LCR anormales

Células predominantes en el líquido cefalorraquídeo

Tipo de célula Importancia clínica principal Hallazgos microscópicos

Linfocitos NormalMeningitis viral, tuberculosa y micótica.Esclerosis múltiple

Pueden encontrarse todos los estadios de desarrollo

Neutrófilos Meningitis bacterianaCasos tempranos de meningitis viral, tuberculosa y micótica.Hemorragia cerebral

Los gránulos pueden ser menos prominentes que en sangreLas células se desintegran con rapidez

Monocitos NormalMeningitis viral, tuberculosa y micótica.Esclerosis múltiple

Se encuentran mezclados con linfocitos

Macrófagos Eritrocitos en el liquido espinalMedios de contraste

Pueden contener eritrocitos fagocitados que aparecen como vacuolas vacías o células fantasma, granulos de hemosiderina y cristales de hematoidina

Formas blásticas Leucemia aguda Linfoblastos, mieloblastos o monoblastos

Células de linfoma Linfomas diseminados Se asemejan a linfocitos con núcleos hendidos

Plasmocitos Esclerosis múltipleReacciones linfocíticas

Se observan formas tradicionales y clásicas

Células de epéndimo y fusiformes Procedimientos diagnósticos Se observan en grupos con núcleos y paredes celulares bien diferenciadas

Células malignas Carcinomas metástasicosCarcinoma primario del sistema nervioso central.

Se observan en grupos con fusión de los bordes celulares y los núcleos

• Células normales:

- Linfocitos y monocitos (en los adultos la célula predominante son linfocitos (70% linfocitos, 30% monocitos), en niños se invierte.

• Células anormales:

-Los neutrófilos no son normales en LCR-Los recuentos aumentados de neutrófilos indican bacterias.-Recuentos aumentados de linfocitos: Meningitis viral-Eosinófilos y basófilos como reacción contra cuerpos extraños (valvulas) o reacción alérgica.-Cuando se observan normoblastos punción inadecuada, contaminación con médula ósea.

Recuento diferencial

What can I expect?

• More than 5 cells/mm3 (90-100% of the cases);

• Presence of neutrophils (0-100% of the cases). Neutrophils are seen in CSF when Koch bacillus antigens reach the CSF space, after release from a tuberculous granuloma or abscess. Immediately after this migration to the CSF, neutrophils percentage in the cytological profile may reach almost 100%. Thereafter, the immune system rapidly implements.

Bacteriana Viral Tuberculosa Micótica

Recuento de leucocitos

Elevado Elevado Elevado Elevado

Neutrófilos presentes

Linfocitos presentes

Linfocitos y monocitos presentes

Pruebas adicionales

Coloración de Gram y pruebas de antígenos bacterianos positivas

Prueba de tinta china positiva con Cryptococcus neoformansPrueba inmunológica positiva para C. neoformans

Principales resultados de laboratorio para el diagnóstico diferencial de meningitis

Linfocitos y monocitos (100x) Linfocitos (100x)

Células normales en LCR

Células normales en LCR con distorsión por

la citocentrifugación

Neutrófilos vacuolados (100x)Neutrófilos con núcleos

picnóticos (100x)

Células normales en LCR con distorsión por la citocentrifugación

Eosinófilos LCR con distorsión por la citocentrifugación

• Células del epéndimo y plexo coroideo normales. Deben diferenciarse de células malignas.

• Pueden verse siderofagos.• En pacientes con LLA o LMA monocítica pueden infiltrar SNC.• Pacientes con mieloma múltiple se puede encontrar plasmocitos.• Células metastásicas de otros tumores sólidos como cánceres de

mama, pulmón, tracto gastrointestinal y melanoma.

Análisis diferencial

Células de plexo coroideo. Bordes bien delimitados (100x)

Células del epéndimo(100x)

Células normales en LCR de recubrimiento de tejido

• LCR sanguinolento• Dímero D positivo• Observar: Macrófagos, eritrofagocitosis , gránulos de

hemosiderina.

Cuándo sospechar de una hemorragia intracraneal

Macrófagos aumentados (100x) Macrófagos con eritrofagocitosis(100x)

Macrófagos con pigmento de hemosiderina (100x)

Células anormales en LCR

Aumento de linfocitos y monocitos (100x)

Contaminación con M.O. Normoblastos (100x)

Células anormales hematopoyéticas en LCR

Incidencia en niños:• LMA 5- 30% m4 y M5• LLA 3 a 5%

-Principalmente son los de células T y los B maduros.

-Recientes estudios reportan papel importante de la IL15 para células precursores B

Infiltración a SNC:

Presencia de blastos

>10%Williams, Mark T.S. et al. (2014) Interleukin-15 enhances cellular proliferation and up-regulates CNS homing molecules in pre-B acute lymphoblastic leukemia. Blood , 123 (20). pp. 3116-3127. ISSN 0006-4971 (doi:10.1182/blood-2013-05-499970 )

Compromiso del SNC por leucemias

Linfoblastos (100x)

Monoblastos (100x)Mieloblastos (100x)

Linfoblastos en recaida (100x)

Células malignas de origen hemático

Células de Burkitt (100x) Células de linfoma (100x)

Células malignas de origen hemático

Glioblastomas

Células tumorales metastásicas (100x)

Células tumorales (100x)

Células malignas de origen no hemático

LÍQUIDOS SEROSOS

Actúan como lubricante entre las membranas del órgano y la bolsa en que se aloja (están en pequeñas cantidades).

Líquidos serosos

Pleural Pericárdico Peritoneal

Se clasifican en

• Es un ultrafiltrado del plasma.• La producción y la reabsorción están sujetas a

las presiones coloidales e hidrostáticas.• Se reabsorbe por los capilares linfáticos.

Formación del líquido seroso

Tubos para análisis citobioquímico de líquidos serosos

La acumulación de una cantidad grande de líquido en una cavidad se denomina derrame.

Se subdividen en trasudados y exudados• Los trasudados indican desarrollo morbido (ICC).• Los exudados indican trastornos con infecciones

bacterianas, virales, procesos malignos, embolia pulmonar y LES sistémico.

Trasudado y Exudado

1. Aumento de la presión hidrostática capilar

Insuficiencia cardiaca congestiva

Retención de sal y de liquido.

2. Disminución de la presión oncótica

Sindromé nefrótico

Cirrosis hepática

Desnutrición

Enteropatía perdedora de proteínas

3. Aumento de la permeabilidad capilar

Infecciones microbianas

Inflamaciones de las membranas

Procesos malignos

4. Obstrucción linfática

Tumores malignos, linfomas

Infección en inflamación

Lesión del conducto torácico

Causas patológicas de derrames

• El recuento celular debe hacerse preferiblemente en cámara de Neubauer, debido a que los equipos pueden sufrir daños por los detritos celulares.

• Para lisar los glóbulos rojos se emplea soluciones de Oxalato de amonio: 1:100 o de ácido acético 1:20

Recuento

Trasudado y Exudado

Se dividen en:

-Exudado: Se producen por situaciones que afectan directamente las membranas de una cavidad particular como las infecciones y los procesos malignos. Se examinan Alteraciones microbiológicas y citológicas.

-Trasudado: Se producen en respuesta al cambio de la presión hidrostática, creada por insufiencia cárdiaca congestiva o la hipoproteinemia asociada con síndrome nefrótico.

Diferenciación por el laboratorio de trasudados y exudados

Trasudado Exudado

Aspecto Claro

< 1 000/ uL > 1 000/ uL

Coagulación espontánea

No Posible

ASPECTO MACROSCOPICO (COLOR, CLARIDAD)

RECUENTOS CELULARES

PORTAOBJETO CITOCENTRIFUGADO

Leucocitos

Solución de Turk (1:2)O Unopette para leucocitos (1:20)

Eritrocitos

Directo o Unopette paraEritrocitos (1:200)

Realizar coloración de Wrigth a fin de observar claramente la morfología celular.

Leucocitos segmentados

Busqueda de Bacterias

Realizar coloración de Gram enEl portaobjeto citocentrifugado

Informe de los resultados

Análisis celular

Normal

Linfocito:Histiocitos y monocitosCélulas mesoteliales

LÍQUIDOS SEROSOS(PLEURAL, PERITONEAL, PERICÁRDICO, ASCÍTICO)

Características Trasudados Exudados

Gravedad específica <1.016 >1.016

Proteínas <3.0g/dL >3.0g/dL

Lactato deshidrogenasa <200Ul >200Ul

Leucocitos <1.000/mm3 (el monocito es la células predominante)

>1.000/mm3

Relación de proteínas del líquido: suero

<0.5 >0.5

Relación de lactato deshidrogenasa del líquido: suero

<0.6 >0.6

Color Claro del color de la paja

Turbio y amarillo, ámbar o macroscopicamente sanguinolento en la observación microscopica.

Volumen Muy grande

Otros marcadores inmunológicos

Se obtiene de la cavidad pleural, ubicada entre la membrana pleural

parietal que reviste la pared del torax y la membrana pleural visceral

que recubre los pulmones. Pueden dar lugar a trasudado o exudado.

El volumen normal del liquido en la cavidad es de 4,0 - 12,7 mL

LÍQUIDO PLEURAL

Diferenciación entre derrame pleural quiloso y seudoquiloso

Derrame quiloso Derrame seudoquiloso

Causa ¨Pérdida del conducto torácico Inflamación crónica

Aspecto Lechoso y blanco Lechoso tinte verde

Leucocitos Sobre todo linfocitos Células mixtas

Cristales Ausentes Presentes

Proteína y deshidrogenasa láctica (DL) en liquido pleural

Relación líquido: suero de proteínas > 0,5Relación líquido: suero de DL > 0,6DL en líquido > 2/3 del valor superior normal en suero

Cualquier positivono si

Trasudado Exudado

GlucosaADALeucocitos y diferencialAmilasapH

Algoritmo para la composición del líquido pleural

ADA>40U/L Lecucocitos y diferencialLinfocitosis

Tuberculosis

>300/uLGranulocitosis

Infección bacteriana

Aspecto

Sanguinolento Lechoso

Hematocrito Triglicéridos

LÍQUIDO NORMAL:

• Color amarillo claro• Aspecto límpido

LÍQUIDOS ANORMALES:

• Líquido turbio indica proceso infeccioso.• Líquido sanguinolento resultado de un traumatismo o proceso

maligno.• Líquido lechoso indica derrame quiloso en la cavidad toráxica.

Examen macroscópico

Correlación entre el aspecto del líquido pleural y las enfermedades

Examen microscópico

Recuento celular en derrame pleural

CÉLULAS NORMALES:

• Linfocitos • Monohistiocitos (macrofagos). Pueden ser

siderofagos.• Células mesoteliales (son revestimiento de las

cavidades corporales, aspecto huevo frito o citoplasma basofilo)

CÉLULAS AUMENTADAS (ANORMALES???)

• Se observan Eosinófilos más del 10%• puede asociarse con traumatismo que produce la

presencia de aire o sangre (neumotórax y hemotórax). si están aumentados son por reacciones alérgicas.

• Basófilos

• Los neutrofilos investigar bacterias • De lupus LE• Células malignas• Células mesoteliales

Strasinger SK, Di Lorenzo MS. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5ª edición. Buenos aires: Medica Panamericana; 2010. p 231- 232

Células mesoteliales (100x)

Células LE (100x)

Líquido pleural (100x)

Células normales de líquido pleural

Células mesoteliales (100x)

Células reactivas en proceso infeccioso de líquido pleural

Líquido pleural con células mesoteliales(100x)

Plasmocitos en paciente con tuberculosis (100x)

Características de las células malignas1. Aumento de la relación núcleo citoplasma (N:C).Cuanto mayor es la relación, menor es la diferenciación de las células.2. Cromatina nuclear distribuida en forma irregular3. Variación en el tamaño y la forma de los núcleos4. Aumento del número y el tamaño de los nucléolos5. Nucléolos hipercrómicos6. Células gigantes y multinucleadas7. Amoldamiento nuclear8. Amoldamiento citoplasmático (comunidad de bordes)9. Citoplasma vacuolado, producción de mucina10. Agrupación celular, fagocitosis

Líquido pleural con células

tumorales(100x)

Células tumorales en líquido pleural

Líquido pleural con adenocarcinoma (100x)

Células pobremente diferenciadas de adenocarcinoma (100x) Células de carcinoma metastásico(100x)

Proporciona un método para obtención de células e información microbiológica del tracto respiratorio inferior. La infusión de solución fisiológica por el broncoscopio se mezcla con los contenidos bronquiales y se aspira para el examen celular y el cultivo.

Es útil en pacientes inmunocomprometidos en enfermedad pulmonar intersticial y sospecha de hemorragia alveolar.

Se ha constituido como prueba diagnostica para Pneumocystis carinii.

Lavado broncoalveolar

• Color y claridad de la muestra.• Recuento celular y diferencial• Recuento de leucocitos se realiza mediante dilución

unopette.

Células del epitelio bronquial (100x)

Presencia de macrófagos y linfocitos normales (100x)

Células normales de lavado broncoalveolar

Lavado broncoalveolar (100x) Lavado broncoalveolar con eosinófilos (100x)

Lavado broncoalveolar con pigmento (100x)

Lavado broncoalveolar con células mesoteliales (100x)

Células normales de lavado broncoalveolar

Lavado broncoalveolar con Pnemocystis carinii (100x)

Células de infección en lavado broncoalveolar

Recuento diferencialCélulas Significado clínico

Macrófagos (56-80 %) Contiene material fagocitado

Linfocitos (1 al 15 % ) Enfermedad pulmonar intersticialReacciones a fármacos.Linfomas pulmonares.Infecciones no bacterianas.

Neutrófilos: Valor normal menos del 3%

Elevados: Tabaquismo , bronconeumonía, exposición a toxinas y daño alveolar difuso

Eosinófilos 1-2 % Aumentados: asma, enfermedad pulmonar inducida por fármacos, infecciones parasitarias, micobacterianas o micóticas, neumonía eosinofílica

Eritrocitos: Hemorragia alveolar durante las 1ras 24 h si están fagocitados sugieren hemorragia alveolar en 48 h.Macrófagos de hemosiderina incidan hemorragia alveolar en menos de 48 h.

Relación CD4 CD8 normal Tuberculosis.Procesos malignos

Relación CD4 CD8 elevada Sarcoidosis o trastorno del tejido conectivo.

Relación CD4 CD8 baja Neumonitis por hipersensibilidad a la silicosis o fármacos.Infección por HIV

Células cilíndricas ciliadas del epitelio bronquial (4 al 17 %)

Pneumocystis carinii, Toxoplasma gondii, Strongiloides, Histoplasma capsulatum entre otros

Epitelio bronquial Células de epitelio plano

• Sólo una cantidad pequeña de 10- 50 ml de líquido se encuentra en membranas serosas pericárdicas.

• Los derrames son el resultado de cambios en la permeabilidad debido a una infección (pericarditis), procesos malignos y traumatismos productores de exudado.

• Los resultados del trasudado pueden ser producto de trastornos metabólicos como uremia, hipotiridismo y autoinmunitarios.

LÍQUIDO PERICÁRDICO

Los derrames macroscópicos sanguinolentos se asocian con perforación cardiaca accidental y uso incorrecto de anticoagulantes.

Derrame pericárdico maligno (100x)

Biochemical analysis of pericardial effusions.LD – lactate dehydrogenase; SEAG – serum effusion albumin gradient; ADA - adenosine deaminase.

Liquido pericárdico con infección (100x)

Líquido pericárdico con infección

• La acumulación de líquido entre las membranas del peritoneo, se conoce como ascitis.

• Suele denominarse como liquido ascítico en lugar de liquido peritoneal.

• Los trastornos hepáticos como la cirrosis son causa frecuente de trasudados, mientras la peritonitis y las enfermedades malignas son más frecuentes de líquidos exudativos.

• El lavado peritoneal es una prueba sensible para la detección de hemorragia intrabdominal en caso de traumatismo cerrados.

LÍQUIDO PERITONEAL

• Es importante tener en cuenta que recuentos de eritrocitos mayores a 100.000 /ul , son indicativos de traumatismo cerrado.

• Los recuentos de leucocitos normales son menores de 350 cel/ul y aumenta en peritonitis bacteriana y cirrosis.

• Si son más de 250 celulas y más del 50 % son neutrofilos: infección bacteriana; linfocitos: tuberculosis.

Examen microscópico

Células de origen infeccioso

Células de levadura (100x) Liquido peritoneal con bacterias en neutrófilos(100x)

Liquido peritoneal con células vacuoladas (100x)

Liquido peritoneal con macrófago (100x)

Células de origen infeccioso

Células malignas líquido peritoneal

Células de carcinoma (100x)Adenocarcinoma de próstata

(100x)

Células de carcinoma(100x) Liquido peritoneal infiltración linfoide(100x)

Liquido peritoneal con hemorragía

Diagnostic peritoneal lavage (DPL) is a highly accurate test for evaluating intraperitonealhemorrhage or a ruptured hollow viscus.

InterpretationA positive DPL in an adult classically requires one of thefollowing results: 10 ml gross blood on initial aspiration,> 500/mm3 white blood cells (WBC), > 100,000/mm3 redblood cells (RBC), or the presence of enteric/vegetable

LÍQUIDO SINOVIAL

• El líquido de las articulaciones se denomina liquido sinovial, es una sustancia viscosa, muscinosa, que lubrica la mayoría de las articulaciones.

• Cuando se halla en grandes cantidades es un proceso morbido de la articulación.

Líquido sinovial

ARTICULACIÓN NORMAL (ADAPTED FROM KOGAN 2010)

Articulación sinovial

1. Tubo heparinizado estéril para la tinción de gram y los cultivos.

2. Tubo con heparina o EDTA para recuento celular. Sino se procesa se debe refrigerar.

3. Tubo sin anticoagulante para otras pruebas.

4. Tubo con fluoruro de Na para el analisis de la glucosa.

Si la muestra es muy viscosa agregar 0.05mL de ac. hialurónico a 0.5 mL de liq. e incubarlo a 37°C durante 5 minutos.

Muestras

• Color: Amarillo claro

• Aspecto: Límpido

• Viscocidad: Semejante a la clara de huevo. Contiene polímeros de ácido. hialurónico.

Valores normales del líquido sinovial

Volumen < 3,5 mL

Color Incoloro a amarillo pálido

Claridad Claro

Viscocidad Capaz de formar un filamento de 4-6 cm de largo

<200 celulas/uL

Neutrófilos < 25% del diferencial

Cristales Ausentes

Al liquido sivovial se le agrega solución de ácido acético al 2-5% formandose un coágulo sólido rodeado por líquido claro cuando es normal.

• La prueba se informa:

Buena: coágulo sólido

Regular: coágulo blando

Baja: coágulo friable

Mala: sin coágulo

Prueba de Ropes o coágulo de mucina

• El recuento total de leucocitos es el que se realiza con mayor frecuencia. Puede utilizarse contadores celulares automatizados o en cámara.

• Raras veces se solicitan recuentos de eritrocitos si hay que lisarlos se utiliza S.S. hipotónica al (0.3%) o suluc. S.S. con saponina.

• Para prevenir la desintegración celular los recuentos debe realizarse lo más pronto posible o la muestra debe refrigerarse.

• Para disminuir la viscosidad es necesario agregar una pizca de hialuronidasa a 0,5 ml del liquido y se incuba a 37 °C por 5 minutos.

Recuentos celulares

CÉLULAS NORMALES:

• Linfocitos• Monohistiocitos• Células sinoviales (tapizan la cavidad se asemejan a las

mesoteliales en menores cantidades.

CÉLULAS ANORMALES:

• Células LE • Neutrofilos en inflamaciones agudas y busqueda de

bacterias, cel de Reiter, cel RA.

• Menos de 200 cel/ulLse consideran normales.• Los neutrófilos se encuentran en menos del 25 % y los

linfocitos menos de 15%

Artritis séptica

Cambio en las articulaciones en paciente con derrames

Causas:

Trastornos metabólicos, disminución de la excrecion renal, degeneración del cartílago o del hueso e inyecciones de medicamentos de corticosteroides en una articulación.

Cristales de los líquidos sinoviales

Tipos:

• Urato monosodico (ácido úrico) metabolismo alterado de las purinas. Aparecen en la gota son grandes tienen forma de aguja.

• Pirofosfato de calcio, en seudogota artritis degenerativa (produce calcificación del cartílago y aumento concentraciones de Ca en suero) intracelulares y pequeños (forma de baston).

• Colesterol asociados con inflamación crónica.

Oxalatos de Ca. pacientes sometidos a dialisis renal.

Cristales en los líquidos sinoviales

ASPECTO MACROSCOPICO (COLOR, CLARIDAD)

AGREGAR HIALURONIDASA

RECUENTOS CELULARES

PORTAOBJETO CITOCENTRIFUGADO

Eritrocitos

Directo o Unopette paraEritrocitos (1:200)

Leucocitos

Solución de Turk (1:2)O Unopette para leucocitos (1:20)

Si la dilución es necesaria, dilución base sobre RCN. Diluir a 100-200 por mm3

Normal

Linfocito:Histiocitos y monocitos

Células sinoviales

Leucocitos segmentados

Busqueda de Bacterias

Realizar coloración de Gram enEl portaobjeto citocentrifugado

Informe de los resultados

Cristales (observados con luzPolarizada para confirmar)

Busqueda de celulas LE

Informar células LEObservadas en

portaobjetocitocentrifugado

1.Urato monosódico (similar a agujas)2.Pirofosfato de calcio(romboide)3.Colesterol (borde conMuescas)

LÍQUIDOS SINOVIALES (ARTICULARES)

• Se debe evaluar inicialmente el color, aspecto y turbidez de los líquidos corporales. El LCR y el liquido sinovial por lo general son claros. Los líquidos serosos son algo amarillentos.

• Si bien los contadores celulares automáticos continúan mejorando, la mayoría de los recuentos celulares se hacen aún manualmente en la cámara de Neubauer.

• Las pruebas que normalmente se realizan en todos los líquidos serosos incluyen el aspecto y la diferenciación entre exudado y trasudado.

• Los recuentos celulares diferenciales se realizan con coloración de Wright, se deben examinar leucocitos normales y anormales.

• Es importante analizar correctamente la morfología tanto de células normales como anormales mediante la citocentrifugación.

CONCLUSIONES

GRACIAS

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