automat microb
Post on 01-Mar-2016
82 Views
Preview:
TRANSCRIPT
-
SISTEMA AUTOMATIZADO PARA MICROBIOLOGA: BD PHOENIX
TM M. Soledad Prat M.
Seccin Bacteriologa
-
TEMARIO
Tecnologa y propsito del Sistema Ventajas y desventajas de Sistemas
automatizados.
Descripcin del Equipo
Identificacin y AST en Bacilos Gram-negativos Identificacin y AST en Cocceas Gram-positivas Experiencia local (ISP)
Encuesta a usuarios Conclusiones
-
VENTAJAS SISTEMAS AUTOMATIZADOS
Uso metodologa estandarizada y validada. Disminucin carga de trabajo para el personal del laboratorio. Disminucin del tiempo de resultados en ID y AST. Resultados ms rpidos para ser aplicados en clnica. Mayor capacidad de Identificacin. Taxa muy amplia Informe de resultados basados en CIM. En AST: Interpretacin de resultados y Control de Calidad
con estndares CLSI - Actualizados.
Fcil manipulacin Manejo de datos a travs de Software*. Concentracin de
informacin y anlisis.
Mayor Bioseguridad y Calidad de la informacin
-
DESVENTAJAS SISTEMAS AUTOMATIZADOS
Costo alto de paneles/ muestra
Excesiva confianza en el sistema pudiendo no detectar errores.
Errores pueden llevar a fallas en tratamiento, (Ej. cultivos mixtos, identificacin equivocada).
Requiere igualmente analizar pruebas bsicas.
Requiere anlisis a cargo de profesional competente.
Puede requerir uso agregado de pruebas complementarias (> costo).
-
SISTEMA AUTOMATIZADO PARA MICROBIOLOGA BD PHOENIX
-
SISTEMA AUTOMATIZADO PARA MICROBIOLOGA BD PHOENIX
-
USO PREVISTO
El Sistema Automatizado para Microbiologa BD Phoenix est diseado para la identificacin (ID)
rpida y la prueba de sensibilidad a antibiticos
(AST) en bacterias de importancia clnica
El sistema Phoenix proporciona resultados rpidos para la mayora de las bacterias aerbicas gram-positivas as como para la mayora de las bacterias aerbicas y anaerbicas facultativas gram-negativas de origen humano.
-
FUNDAMENTOS TECNICOSID
En ID , muchas de las pruebas empleadas en los paneles del Sistema Phoenix son modificaciones
de los mtodos clsicos, bioqumicos
convencionales.
Incluyen pruebas para la fermentacin, oxidacin, degradacin e hidrlisis de diversos
sustratos.
Adems, el Sistema Phoenix utiliza sustratos cromognicos y fluorognicos, as como
sustratos con fuentes de carbono nicas para la
identificacin de los organismos.
-
IDENTIFICACION BACTERIANA (ID)
La produccin de cido se indica por un cambio en el indicador rojo fenol, si la bacteria
utiliza carbohidratos como sustrato.
Los sustratos cromognicos producen un color amarillo por la hidrlisis enzimtica.
Los organismos que utilizan una fuente especfica de carbono reducen el indicador
basado en resazurina.
Existen otros tests que detectan la capacidad del organismo para hidrolizar, degradar,
reducir o utilizar de otro modo un sustrato.
-
FUNDAMENTOS TECNICOSAST
El mtodo AST del Sistema Phoenix es una versin miniaturizada modificada de la tcnica de dilucin
doble de microdilucin en caldo.
Los test de sensibilidad en el Sistema Phoenix se realizan mediante la determinacin del
crecimiento bacteriano en presencia de diversas
concentraciones de antibitico, analizado con la
ayuda del indicador AST .
El mtodo AST del sistema Phoenix es un test de microdilucin que utiliza caldo de cultivo.
-
SUSCEPTIBILIDAD AST
Utiliza un indicador redox para detectar el crecimiento del organismo en presencia de un
antibitico.
Se realizan mediciones continuas de los cambios del indicador, as como la turbidez
bacteriana.
Cada configuracin del panel para AST contiene diversos antibiticos con un amplio
rango de concentraciones de doble dilucin 1:2.
Se utiliza la identificacin del organismo para interpretar los valores CIM de cada antibitico.
-
Velocidad proporcionando Exactitud y Precisin:
ID en promedio de 2-3 hrs, lectura hasta 12 hrs.
Se pueden configurar: Alertas para resultados de pacientes crticos. Alertas para deteccin de mecanismos de resistencia.
Establece reglas de Interpretacin actualizadas de acuerdo al CLSI
Vigentes.
BD Experto: con ms de 500 reglas
- validacin resultados AST
- validacin cruzada de ID & AST
- informes para el clnico.
- equivalencia antimicrobiana
- deteccin mecanismos de resistencia
BD Phoenix PANELESCuenta con paneles para identificacin y paneles combinados para ID y Susceptibilidad.
-
EQUIPO / PANELES Realiza un mximo de 100 tests de ID y AST , al mismo tiempo, en
paneles combinados .
El panel es una bandeja de poliestireno moldeada sellada y autoinoculante, con 136 micropocillos con reactivos liofilizados.
El panel combinado incluye un lado para ID (51 pocillos) con sustratos liofilizados para la ID de bacterias y un lado para AST (85
pocillos) con concentraciones variables de antibiticos.
Contiene controles interno de crecimiento y controles presencia indicador redox (AST).
Utiliza un indicador redox colorimtrico optimizado para AST. Utiliza indicadores colorimtricos y fluorimtricos para ID. Utiliza caldo AST con ajuste de cationes (ej.: Ca++ y Mg++) para
optimizar el rendimiento de los anlisis de sensibilidad.
-
INSUMOS SISTEMA PHOENIX
CALDO ID, CALDO AST INDICADOR
PANELES ID, AST, ID/AST
PHOENIXSPECNEFELOMETRO
-
INOCULACION PANELES
Los paneles Phoenix se inoculan con una densidad equivalente al patrn 0,5 de McFarland (0,5 y 0,6 es
aceptable).
Las suspensiones deben prepararse slo con el nefelmetro BBL CrystalSpec o BD PhoenixSpec.
Inoculados, los paneles se colocan en el instrumento y se incuban a una temperatura constante de 35 C.
El instrumento analiza los paneles cada 20 minutos hasta un mximo de 16 horas en caso necesario.
No es posible realizar una lectura manual.
-
TIEMPOS MAXIMOS PERMITIDOS
-
PANELES GRAM NEGATIVOS
-
PANELES GRAM -POSITIVOS
-
BD PHOENIX TAXA
Gram NegativosEnterobacterias
No-Fermentadores Otros Bacilos Gram-
Gram Positivos Staphylococcus Enterococcus Bacilos Gram + Streptococcus (48)
152
300
48
GP GN Strepto
-
PRUEBAS SUPLEMENTARIASID
-
BD Phoenix AST
F. Quinolonas: 10 clases Aminoglicsidos: 10 clases Rifamicina: 1 B Lact/Inh B lact: 7 clases B Lactamicos Pen: 7 clases Carbapenemes: 3 clases Cephem: 24 clases Peptido ciclico: 1 Folatos: 3 clases Glicopeptidos 2 clases Ketolidos: 1 Lincosamida: 1
Macrolido: 3 clases Monobactam: 1 Phenicol: 1 Lincosamida: 1 Fusidane: 1 Nitrofurano: 1 Oxazolidinona: 1 Ac. Pseudomnico: 2 clases Quinolonas: 1 Streptogramina: 2 clases Tetraciclina: 2 Otros: 4
-
AST : MIC VERDADERO
Deteccin del verdadero CIM estbasado en al menos 3 dobles consecutivas concentraciones del antimicrobiano.
No hay extrapolacin de la curva de crecimiento. Es el valor que da para la interpretacin.
Dos tecnologas de lectura: Turbidimetra como resultado de la
divisin celular. Cambio colorimetrico del indicador
Redox como resultado del metabolismo.
MIC
0,25
0,5
1,0
2,0
4,0
8,0
16,0
32,0
-
DETECCION MECANISMOS RESISTENCIA
Deteccin de la produccin de BLEE entre especies de Enterobacteriaceae.
Deteccin de la resistencia a la vancomicina en las especies Enterococcus (VRE) y Staphylococcus (VISA y VRSA).
Deteccin de la resistencia a los aminoglicsidos de alto nivel en las especies de Enterococcus y Streptococcus (HLAR);
Deteccin de resistencia a la meticilina en Staphylococos (MRS); Deteccin de la produccin de -lactamasa en las especies de
Staphylococcus (BLACT);
Deteccin de la resistencia a los macrlidos en las especies de Streptococcus (MLSb y MEFF);
La deteccin de la resistencia de alto y bajo nivel a la penicilina en S. pneumoniae (HLPRSP) (LLPRSP).
Confiabilidad y velocidad para pacientes crticos Deteccin de mecanismos de resistencia basados en test especficos o
antimicrobianos probados en el panel.
-
Phoenix MARCADORES RESISTENCIA
-Lactamasa en Staphylococcus (Nitrocephin test) Meticilina Resistencia Staphylococcus
MRS basada en Interpretacin a Oxacilina. mecA predice basado en Cefoxitin
Vancomicina Resistencia Enterococcus y Staphylococcus (basado en CIM a Vancomicina).
Resistencia Enterococcus a alto nivel de Aminoglicosidos(Gentamicina 500 mcg/ml and Streptomicina 1000 mcg/ml
MLSb resistencia en Staphylococcus and Streptococcus Automtica si Clindamicina y Eritromicina = R Clasificada manualmente (ind. MLSB or efflux) basada en
D test
-Lactamasa de Espectro Extendido en Enterobacterias.
-
FLUJO DETERMINACION BLEE
-
Informe selectivo:
- alertas en resultados de pacientes crticos
- alertas ante deteccin de mecanismos de resistencia.
- rpido informe de resultados de ID & AST
- rapido informe depende del crecimiento
-Valor verdadero del CIM
ALARMAS EN RESULTADOS DE PACIENTES CRITICOS
-
BACILOS GRAM NEGATIVOS: ID y ASTNcepas
Desempeo AST Observ. Referencia
Bacilos
Gram Neg.
Vibrios
BNF
507
138
57
89,9% T: 2-12
hrs
89,1% T: 4 hrs
84,2% T: 5 hrs
No se
alcanzan
valores
> 90%
OHara et al.
JCM 2006
Enterobacte
rias
ID y AST
231
(31
esp.)
ID: 94,4% EA: 98,7%
CA: 97,7%
VME: 0,38%, ME
0,3%
mE 1,8%
100%
Deteccin
BLEE
Carrol et al.
JCM 2006
Enterobacte
rias
BNF
ID y AST
494
110
98,4%
99,1%
EA: 94,2%
CA: 97,3%
VME: 1,6%, ME 0,6%
mE 1,9%
98,5%
Deteccin
BLEE
Menozzi et al.
JCM 2006
Enterobacte
rias
BNF
ID y AST
163
53
98%
T: 2-12 hrs
P.aer. 100%
Otros 37,5%
CA: 99,5% 95,5%
VME: 0,3% 0,7%
ME : 0,2% 1,3%
mE: 3,2% 4,5%
Referencia
Estndar
CLSI.
Resultados
comparables
Snyder et al.
ASM 2006
(compara con
MSCan)
-
DETECCION DE BLEEN cepas Resultado Resultado Observ. Referencia
E. coli BLEE+
K.pn. BLEE +174
19
Phoenix
E.coli 96%
K.p 89,4%
T: 95,3%
Vitek 2
E.coli 99,4%
K.p 100%
T: 99,5%
Compara Vitek 2 y
Phoenix. Referencia: E-
Test y Difusin CLSI
Trevio et al.
Enfermed.
Infecciosas y
MC. 2009.
E.coli
K.pn y K.
oxytoca
102 Phoenix
S: 96%
(99%)*
E: 81%
(58%)*
Vitek 2
S: 91%
(89%)*
E: 85%
Compara Vitek 2 y
Phoenix. Referencia:
Caracterizacin
enzimtica molecular
*regla adicion. experto
S.Thomson et
al. JCM.2007
Distintas
especies
Enterobact.
BLEE + y -
510 cepas:
BLEE +
:288
Secuenc.
Met.
Fenotpico
319 +
Phoenix
319 + ms 2
K.oxytoca
Hiperpro.K1
S: 100% E:
98,9%
Referencia: Mtodos
fenotpicos y
secuenciacin
Sanguinetti et
al. JCM.2003
E.coli
Klebsiella
spp
74 cepas
clnicas
17 cepas
referen.
Vitek1:
83%
Vitek 2
78%
Phoenix: 89%
E-Test: 94%*
Compara Vitek1 y 2 y
Phoenix. Referencia: E-
Test cepas clin. y
Genotipificac. cepas Ref.
Leverstein et
al. JCM 2002
-
CONCLUSIONES BACILOS GRAM NEGATIVOS
En general se obtienen aceptables resultados en identificacin de Enterobacterias.Mayor dificultad en identificar Enterobacterias menos comunes. AST: en general aceptables resultados ms frecuente mE y ME que EVM .Buena deteccin de BLEE principales en especies deE. coli y Klebsiella spp.
-
BACILOS NO FERMENTADORES: ID y ASTN cepas Desempeo AST Observ. Referencia
ID y AST*
B
lactmicos
amplio
espectro
136 95,6% EA: 94,2%
CA: 93,1%
VME: 0%
ME: 5,2%*
mE: 5,1%*
Dificultad de medir
CIM en B.lact
(cefepime) por
complej. mecanismos
resistencia
Endimiani et
al.
Microbiolgi
ca. 2002
ID 65
clnicas
122
referencia
Phoenix
75% 67%
Vitek 2
61% 42%
MicroScan
75% 57%
No se obtienen
resultados aceptables
Turnbull et
al.
ASM.2002(Compara
varios
Mtodos)
ID
B. cepacia
153 Phoenix
50%
Vitek 2
53%
P: 0,624
No se obtienen
resultados aceptables
Brisse et al.
JCM.2002
(Compara
varios
Mtodos)
-
BNF1
-
Se obtienen buenos resultados en ID en las especies ms frecuentes: Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter
sacaroliticos, S. maltophilia.
Otras especies presentan resultados muy diversos y no siempre aceptables.
En Complejo B. cepacia se aprecia la insatisfactoria capacidad de los sistemas automatizados para identificar
esta especie y por la importancia clnica, se requiere
mtodos de confirmacin fenotpicos y preferentemente
moleculares.
Estudios de AST deben complementarse con mtodos estndares en especies MR con variados mecanismos.
CONCLUSIONES BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES
-
CAPACIDAD DE DETECCION OTRAS RESISTENCIAS
Deteccin Resistencia a Imipenem en Acinetobacter baumannii. Se compara Phoenix, Vitek y Microscan . Solamente Microscan no obtuvo resultados aceptables, los otros sistemas aceptables y comparables. (BMC Infecctions Diseases 2009).
Susceptibilidad de P.aeruginosa ante Beta lactmicos se compara Phoenix, Microscan y Vitek 1 y 2. Se obtuvo en todos los sistemas inaceptables niveles de error con falsa susceptibilidad con TZP e IMI y falsa resistencia con ATM, FEP, CAZ. Comparados como referencia CLSI por difusin y CIM. Se recomienda mtodos alternativos en estos casos.(JCM. 2007).
Inconsistentes resultados con TZP?. Se estudia la capacidad de detectarResistencia a TZP en cepas de E. coli por Phoenix, Microscan, Vitek . Se compara con mtodo referencia Microdilucin en caldo. Estudio de reproducibilidad en 20 das.Cepas resistentes presentaron variabilidad de resultados en el mtodo de referencia y , en mtodos automatizados siendo el Phoenix el que obtuvo resultados ms cercanos al de referencia, CA 74%. (ICAAC, 2005).
-
CARBAPENEMASAS EN ENTEROBACTERIAS
Trabajo sin publicar ( F.Pasteran et al. INEI , C.Malbrn. Argentina). Capacidad del Phoenix para Deteccin Cabapenemasas Clase A, comparado
con Dilucin en agar y la genotipificacin.
Resultados preliminares:CA entre Phoenix y Dil. Agar: IMI: 84%, MEM: 71, ERT.73%
Conclusin: Buena capacidad de deteccin principalmente con ERT. Baja la especificidad ante presencia de CTX-M.
757991788291Esp.
7976791007890Sens.
ERTMEMIMIERTMEMIMI
Dilucin AgarPhoenix75 cepas
-
Staphylococcus y EnterococcusObjetivo N
cepasResultado Resultado Autor
Capacidad
PhoenixStaphylococcus
Enterococcus
ID y AST
Total
424
cepas
Enterococcus
90 cepas
S.aureus
232
Staphyloc.sp
102
ID 100%
ID 100%
ID 98%
EA100% CA 99,3%
Vanco R: 100%
EA98,2% CA 98,8%
VME: 1,7%
EA 96,8% CA 95,7%
VME0,7%, ME 1,7%
y mE: 2,9%
Caroll et al.
JCM. 2006
Comparar
Mtodos IDStpahylococcus
40 especi
es
Compara Vitek 2Phoenix API
Sistemas
automatiz.
Aceptables y
comparables.
API Mejores
resultados
Phoenix: menor
correlacin
S. hominis 75%
S.epidermidis 76%.
Layer et al.
JCM.
2006
Comparar
Mtodos ID y
ASTStpahyloc. yEnterococcus
202
cepas
102 S. aureus
100Enterococ.Compara
Phoenix y Microsacan
ID (ambos):Staphyloc.
100%
Enterococ.
99%
AST (ambos):Staphyloc.
96,9%
Enterococ.
95,2%
Noel et al.
ASM. 2005
-
DETECCION RESISTENCIA EN StaphylococcusAutorResultadoResultadoN cepasObjetivo
Comparar
deteccin
Resist. por
Gen mecA
S.aureus
620 SAMR 448
cepas
SAMS 172
cepas
*uso
cefoxitin
ID Phoenix:
99,8%
ID VItek 2:
99,7%
AST Phoenix
EVM: 0,2%
EM: 0%
AST Vitek 2:
EVM: 0,2%
EM: 0,6%
Junkins et
al. JCM.
2009
Comparar
deteccin
VISA en 6
sistemas:
Referencia
Mtodo Microdilucin
T: 129< 1: 60
2 ug/ml:24
4 ug/ml:
36
8 ug/ml:
9
Phoenix, E-
test
Vitek 1 y 2
Microscan
Diluc. Agar,
Difusin,
Screening.
EA: 98%
Menos Vitek1.
Phoenix, E-Test: una
dilucin >
Vitek 2: una dilucin 8ug/ml
para predecir Resist.
mediada por Gen
mecA
Phoenix:
S: 100%
E: 99,2 %
Votta et
al.
ICAAC
2004
-
DETECCION RESISTENCIA ERITRO/CLINDA Streptococcus
Objetivo: Evaluar 4 mtodos su capacidad de deteccin de R mediada por ermB y mefA/E.
ermB (MLSB): Eritromicina R y Clindamicina RInducible: iMLSB o constitutiva cMLSB
mefA/E (M): Eritromicina R y Clindamicina S.
Se estudiaron 59 aislamientos: 31 ermB, 20 mefA/E y 8 negativas. Se evala: doble disco, Microscan, Phoenix y microdilucin caldo. Resultados:
Mtodo difusin: mejor correlacin ermB: 100% (Phoenix: 97%)Microdilucin caldo: mejor correlacin mefA/E: 95%. (Phoenix: 90%).En Phoenix % correlacin para deteccin iMLSB: 100% y para cMLSB 93%.
Sinha et al. Evaluation of Four AST Methods for Detection of Erytromicin andClindamycin Resistance in Streptococci. ICAAC. 2003.
-
AST: Streptococcus pneumoniae
Scott et al. Comparison of BD Phoenix to Vitek 2, MicroScan MICroStrep and E-Test forAntimicrobial Susceptibility Testing of Streptococcus pneumoniae . JCM. 2009, p. 3557- 3561.
311 cepas clnicas.Tiempo :
Phoenix : 12,1 horas Vitek: 9,8 horas
EVM menores en Phoenix (0,3%, con penicilina) comparado con Vitek (2,4%).mE en Phoenix 9,3% y en Vitek 9,6%.Ambos sitemas dan resultados confiables y en menor tiempo que sistemas manuales.
-
COMPARACION FLUJO TRABAJO V/S CAPACIDAD: VITEK 2 Y PHOENIX
Eigner et al. Analysis of the Comparative Workflow and Performance Characteristics of the Vitek 2 and Phoenix Systems. JCM,2005, p.3829-3834.
Estudio realizado con 307 cepas.
Variable Phoenix VitekTiempo:Manipulacin 7 cepas 20,9 +- 1,8 10,6+- 1,0Resultado total cepas 727 +- 162 506 +- 120
ID BNF 100% 100%ID Staphyloccus 97% 97%ID Enterococcus 100 % 100%ID Enterobacteriaceae 96% 98%
AST CA 97% 97%mE 3% 2,8%ME 0,3% 0,2%VME 0,6% 1,7%
-
BNF IDENT LAB. REF.
Total
A. baumannii 211 A. baumannii 196 Sin identif 5 Alcalig. faecalis 3 Bord.bronchisep. 1 Ac. asacarolitico 3 Acinetobacter spp. 3Pseudomonas
aeruginosa 191 P. aeruginosa 189 Sin identif 1 Pseudomonas spp. 1Acinetobacter
asacarolitico 16Acinetobacter
asacarolitico 11 Sin identif 1 Acinetobacter spp. 1 Moraxella spp. 2 Alcalig. faecalis 1Stenotrophomon
as maltophilia 40 S. maltophiliaBurkholeria
cepacia 20 Burkh. cepacia 17 S. maltophilia 1 P.fluorescens 2Alcaligenes
faecalis 7 Alcal. faecalis 4 P. putida 1 B. bronchisep. 2
She. putrefaciens 6 She. putrefaciens 3 P.aeruginosa 1 P. pseudoalcalig. 1P. fluorescens 6 P. fluorescens 3 P.aeruginosa 2 P. putida 1P. putida 10 P. putida 8 P.aeruginosa 1 P. oryzihabitans 1
P. oryzihabitans 4 P. oryzihabitans 2CDC grupo EF 4b 1 Kingella 1
P.pseudoalcalig. 4 P. pseudoalcalig. 1 P. stutzeri 1 Sin Identif 1 P.aeruginosa 1P. stutzeri 4 P. stutzeri 1 Sin Identif 1 P. putida 1 Pseudomonas spp.1P. monteilii 2 Ps. putidaChrys.
Indologenes 6 Chrys. indolog. 3Bergeyella
zoohelcum 3Eliz.
kinkiamening 4 Eliz. kingiamen. 3Sphin.
paucimobilis 1
Myroides spp. 2 Myroides spp. 1Eliz. kingiamening
1Sphin.
paucimobilis 2Sphin. paucimobilis
2
Achromobacter
(distintas
especies) 8
Achromobacter
(distintas especies) 4
Burkholderia
gladioli 1Pseudomonas spp. 1 P. aeruginosa 1 Sin Ident 1
Delftia, Weksella,
Comamonas,
Moraxella 4
Delftia, Weksella,
Comamonas,
Moraxella 4Otras Especies
incorrecta o sin identificar 10Total cepas BNF 557 Correlacin 88,9%
EXPERIENCIA LABORATORIO REFERENCIA ISP (2008-2009)
-
ENTEROBACTERIAS IDENT LAB. REF.
K. pneumoniae
128 K. pneumoniae 127
K. oxytoca 1
E.coli 69
E.coli 68Delftia acidovorans
1
E. cloacae 40 E. cloacae 36 Citrobacter koseri2
K. pneumoniae 1 Citrobacterfreundii 1
S. marcescnes 28S. marcescnes
E. agglomerans 24 E. agglomerans 9 E. cloacae 2 K. pneumoniae 1 Tatumelaphyseos 3
Leclercia adec. 8
Shigella 1
E.aerogenes 3 E.aerogenes 2 K. pneumoniae 1
Salmonella spp. 241 Salmonella spp.
Shigella spp. 5 Shigella spp.
S. odorifera 1 S. odorifera
S. liquefaciens 1 S. liquefaciens
P. mirabilis 6 P. mirabilis
M. morganii 1 P. stuartii
K. oxytoca 2 K. oxytoca
K.ozaenae 3 K.ozaenae
E. gergoviae 1 Enterobacter spp.
C. freundii 2 C. freundii
Hafnia alvei 6 Hafnia alvei
Vibrio parahaemolyticus 1 Vibrio parahaemolyticus
Total cepas 562
96,00%
EXPERIENCIA LABORATORIO REFERENCIA ISP (2008-2009)
-
Especie TOTAL CORRELACIN Error muy grave Error grave Error menor Comentarios
K. pneumoniae
BLEE +128 128 Beta lactamicos
K. pneumoniae
BLEE - 16 16
Beta lactamicos
E. coli BLEE + 46 46 Beta lactamicos
E. coli BLEE - 10 10 Beta lactamicos
P. mirabilis BLEE + 5 4* 1 Recomendacin Experto para BLEE 4
E. cloacae 20 20
S. marcescens 30 28
2 cepas BLEE + , no estandarizado
E. aglomerans 20 20
Salmonella spp. 229 169 60
Susc. Dism. Ciproerror: 26,2%
NA
A. baumannii 177 171 2 4carbapenemeserror: 3,4% IMI: 2, MEM:4
P. aeruginosa 154 143 3 8carbapenemeserror: 7,1% MEM
S. maltophilia 38 26 3* 4* 5** error: 31,7* SXT, ** LEV, CAZ
EXPERIENCIA LABORATORIO REFERENCIA ISP (2008-2009)AST
-
ENCUESTA
No-4 12 horas10 horasTiempo
demora BGN
NoNoMuy poco por
inculo y en
Pseudom.
ASTcon TZB
NoDificultad ID y
AST en BGN
--10 a 12 horas12 horas
promedio
Tiempo
demora C+
MF 0,5 en
escaso
desarrollo
Dificultad CIM
Linezolid en
Enterococcus.
Moderada
Strepto y algunos
Staphy.
Errores con
ID Staph.
saproph.
Dificultad ID y
AST en
Cocceas
En bajos %
confianza y AST:
mecan. Resist.
Hosp.2
No
Hosp. 1
Si , para
resistencias
especficas
Hosp.3
En Cocc.+
da baja
confiabilidad
Uso Tec.
Alternativa
Hosp.4Pregunta
-
CONCLUSIONES EXPERIENCIAPHOENIX
Muy buena correlacin en bacterias ms frecuentes en clnica.
Buena correlacin de resultados CIM en la mayora de AB.
Sistema expertos buen aporte. Es necesario siempre analizar la ID, AST, aspectos
microbiolgicos y de la muestra.
Fcil manipulacin Menor tiempo para obtener resultados. Software permite anlisis de datos
-
Desventajas: Costo paneles
Tamao Equipo Requiere control adecuado de temperatura
ambiente.
Paneles con corta fecha de vencimiento.
CONCLUSIONES EXPERIENCIAPHOENIX
-
CONCLUSIONES VITEK / PHOENIX
Ambos sistemas presentan buen nivel de identificacin en bacterias de importancia clnica.
AST : todos presentan errores mayores y muy mayores similares, con variaciones dependiendo
del agente bacteriano.
Es necesario estar alerta para deteccin de mecanismos de resistencia.
Son una buena alternativa para la prctica clnica (tiempo, estandarizacin, alertas, sistemas de
experto, etc.)
-
CONCLUSIONES VITEK / PHOENIX
No se puede desechar mtodos tradicionales.
Resultados siempre deben ser analizados por profesionales competentes relacionando ID y AST.
Al seleccionar el equipo: tener claro sus limitaciones y el objetivo para el laboratorio y
relacionarse con los clnicos para una mayor
utilidad de los resultados.
Los grupos de usuarios de los distintos sistemas deberan solicitar la incorporacin de paneles AST
con antimicrobianos de acuerdo a la realidad local.
-
MUCHAS GRACIAS
Gracias por la colaboracin
Dr. Leonardo Chanqueo
TM. Carlos Rodo
TM Dina Concha
TM:, Natacha Garrido, Arturo Briones y Pablo Saavedra
-
BGN:Publicaciones revisadas1. OHara Caroline. Evaluation of tehe Phoenix 100 ID/AST Systema and NID Panel for
Identificaction of Enterobacteriaceae, Vibrionaceae, and Commonly IsolatedNonenteric Gram Negative Bacilli. JCM. 2006, p. 928-933.
2. Carrol et al. Evaluation of the Phoenix Automated Microbiology Microbiology Systemfor Identification and Antimicrobial Susceptibility Testing of Enterobacteriaceae. JCM. 2006, 44(10): 3506-3509.
3. Menozzi et al.Two Center Collaborative Evaluation of Performance of the BD Phoenix Automated Microbiology System for identificaction and Antimicrobial SusceptibilityTesting of Gram Negative Bacteria. JCM. 2006, p: 2085 4094.
4. Snyder et al. Comparative Study of Identificaction and Antimicrobial SusceptibilityTesting of Enterobacteriaceae and Non Fermentative Gram negative Organisms withthe Phoenix Automated microbiology and Microscan. Meeting ASM. 2006.
5. Brasso et al. Variabiity in Vitro Susceptibility Test Results for E.coli Isolates andPiperacilin/Tazobactam Using Comercial and Reference AST Methods. ICAAC. 2005
6. .Turner et al. Detection of Gram Negative Bacterial Resistance to FluoroquinoloneAgents in the Phoenix Automated Microbiolgy System. ASM. 1999.
7. Salomon et al. Assessment of the Phoenix Automated Microbiology System in theIdentificaction of a Variety of Gram Negative Bacilli. Clinical microbiology andInfections Diseases. 2000.
-
BNF: Publicaciones revisadas
1. Endimiani et al. Identificcation and Antimicrobial Susceptibility Testing of clinical Isolatesof Nonfermenting Gram Negative Bacteria by the Phoenix Automates microbiologySystem. Microbiologica. 2002, (25): 323- 329.
2. Turnbull et al. Side by Side Evaluation of Dade Microscan Walkaway 96, BD Phoenix and BioMerieux Vitek 2 for Identificaction Testing of a Challenge and Routine Set ofNonfermentative and Miscellaneous Gran Negative Clinical Isolates. Meeting ASM. 2002.
3. Brisse et al. Comparative Evaluation of the Phoenix and Vitek Automated Instruments forIdentificaction of Isolates of the Burkholderia cepacia Complex. JCM. 2002, p.1743-1748.
4. Kulah et al. Detecting imipenem resistance in Acinetobacter baumannii by automatedsystem (Phoenix, Microscan, Vitek 2), high error rates with Microscan. BMC InfectionsDiseases 2009.
5. Juretschko et al. Accuracies of B-Lactam Susceptibility Test Results for P. aeruginosawith Four Automated System( Phoenix, Microscan, Vitek, 1 y 2)JCM.2007,p: 1339-1342.
6. Turng et al. Comparative Studies of Antibiotic Susceptibility of S. maltophilia withTrimethoprim/sulfonamethoxazole Using Different Testing Methodologies. Clinicalmicrobiology and Infections Diseases. 1999.
7. Hejna et al. Comparison of Phoenix and Vitek Automated Susceptibility Testing forPerformance with A. baumannii complex and P. aeruginosa isolates. Clinicalmicrobiology and Infections Diseases. 1999
-
DETECCION BLEEPublicaciones revisadas
1. Trevio et al. Comparacin entre las pruebas para la deteccin de beta-lactamasasespectro extendido de los sitemas Vitek 2 y Phoenix. Enfermedades Infecciosas y Microbiologa Clnica, 2009: 27(10): 566-570.2. Thomson et al. Comparation of Phoenix and Vitek 2 Extended Spectrum B-LactamaseDetection Test for Analysis of Escherichia coli and Klebsiella Isolates wuith wellCharacterized B- Lactamases.JCM. 2007.p: 2380-2384.3.Sanguinetti et al. Characterization of Clinical Isolates of Enterobacteriaceae from Italyby the BD Phoenix Extended Spectrum B-Lactamases Detection Method. JCM, 2003, p. 1463-1468.4.Leverstein et al. Evaluation of E-Test ESBL and the BD phoenix, Vitek 1 y 2, Automated Instruments for detection of Extended Spectrum B-Lactamases in Multiresistant E.coli y Klebsiella spp. JCM, 2002, p.3703-3711.5. Gross et al. The importance of ESBL Screening Test in Rapid Automated AntimicrobialSusceptibility Testing (AST). ICAAC.20016. Turng et al. An evaluation of the Phoenix Automated Microbiolgy Sysem for Extended Spectrum Lactamase Detection. Society Microbiology .Los Angeles. 2000.7.Brisse et al. Evaluation of the Phoenix Automated Microbiology Systemfor DetectionExtended Spectrum Beta Lactamase Producing E. coli and Klebsiella and CiprofloxacinResistant Acinetobacter and Pseudomoans aeruginosa European Clinical Isolates. ICAAC, 2000.
-
STAPHYLOCOCCUS Y ENTEROCOCCUS
.
D. Junkins et al, BD Phoenix and Vitek 2 Detection of mec A mediated Resistance in Staphylococcus aureus with Cefoxitin. JCM, 2009 p. 2879-2882. Spanu et al. Identification of methicilin-resistant isolates Staphylococcus aureus andcoagulase-negative Staphylococci responsible for blood stream infections with Phoenix system. Diagnostic Microbiolgy and infections Diseases.2004, (48)p.221-227M. Swenson et al. Accuracy of Comercial and Reference Susceptibility Testing Methodsfor Detecting Vancomycin-Intermediated Staphylococuus aureus . JCM, 2009 p. 2013-2017M. Votta et al. Evaluation of Cefoxitin MIC Results as a Predictor ofmecA-mediated Resistance with Staphylococcus aureus inthe Phoenix Automated Microbiology System. ICAAC 2004.C. Carroll et al. Evaluation of the BD Phoenix Automated Microbiology System foridentificaction and Antimicrobial Susceptibility Testing of Staphylococcus andEnterococcus. JCM, 2006, p. 2072-2077.F. Layer et al. Comparative Study Using various Methods for Identificaction ofStaphylococcus Species in Clinical Specimens. JCM, 2006, p.2824-2830Noel et al. Clinical Evaluation Comparing the BD Phoenix Automated Microbiology Systemwith the Microscan for Identificaction and Antimicrobial Susceptibility Testing ofStaphylococcus aureus and Enterococcus species. ASM.2005.Webster et al. Methicilin resistant S. aureus with reduced susceptibility to vancomycin in Canad. Diagnostic Microbiology and Infections Diseases. 2006.
.
-
PUBLICACIONES REVISADAS Sinha et al. Evaluation of Four AST Methods for Detection of Erytromicin and ClindamycinResistance in Streptococci. ICAAC. 2003.Scott et al. Comparison of BD Phoenix to Vitek 2, MicroScan MICroStrep and E-Test forAntimicrobial Susceptibility Testing of Streptococcus pneumoniae . JCM. 2009, p. 3557-3561.Eigner et al. Analysis of the Comparative Workflow and Performance Characteristics of the Vitek 2 and Phoenix Systems. JCM,2005, p.3829-3834.Gross et al. Comparison of Phoenix to Vitek 2 Antimicrobial Susceptibility Test Performance with a Diverse Group of bacteria which are Found in Clinical Microbiology Labs. ClinicalMicrobiology and Ifections Diseases. 2002.Junkins et al. Comparison of BD Phoenix AP Workflow with Vitek 2. JCM.2010.Fahr et al. Antimicrobial Susceptibility Testing for Ten Fluoroquinolones Using the BD Phoenix Automated Microbiology System. Clinical Microbiology and Infections Diseases. 2002.Reuben et al. Preliminary Evaluation and Overview of Phoenix a New Automated ID/AST System. Clinical Microbiology and Infections Diseases 1999.Reuben et al. A Performance Evaluation of Phoenix Automated Microbiology System in detecting resistance to Linezolid , Azitromycin, Claritromycin, and Quinupristin.dalfopristinamong Staphylococcal and Enterocococcal isolates. ICAAC. 2000. Hong et al. Detection of Vancomycin Resistance in Enterococci with the Phoenix System. Clinical Microbiology and Infections Diseases. 2002.Hejna et al. Detectionof High Level Aminoglycoside Resistance HLAR, in Enterococci withthe Phoenix Automated Microbiolgy System. Clinical Microbiology and Infections Diseases. 2000
top related