18 curso de actualización en el diagnóstico y ... · en su pared fucsina fenicada o auramina y...
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18 Curso de Actualización en el
Diagnóstico y Tratamiento de la
Tuberculosis en el Niño y el
Adulto
2014
Métodos convencionales para el
diagnóstico de la TuberculosisBiol. Susana Balandrano C.
Instituto de Diagnóstico y Referencia
Epidemiológicos
Depto. Bacteriología. Laboratorio de
Micobacterias2014
La tuberculosis es una enfermedad infecciosa, crónica, curable.
Se transmite por vía aérea de un enfermo con Tb pulmonar a una
persona sana.
Tuberculosis
La Tb pulmonar es la forma más común de esta enfermedad; ocurre en más del 80% de los casos.
Tuberculosis
La tuberculosis pulmonar confirmada por baciloscopía es la fuente de infección más frecuente y constituye el objetivo fundamental de las actividades de detección, diagnóstico y tratamiento para el control de la Tuberculosis.
NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis
La confirmación del diagnóstico de la tuberculosis se establece en el laboratorio mediante la observación o el aislamiento e identificación del agente causal en una muestra clínica obtenida del sujeto en estudio.
Diagnóstico
Indicaciones de la Baciloscopia para diagnóstico
Cualquier muestra clínica excepto orina.
A todo sintomático respiratorio sospechoso de tuberculosis.
Contactos sintomáticos de un caso de tuberculosis.
Sospechosos de tuberculosis con manifestaciones clínicas o radiológicas.
Grupos o poblaciones de alto riesgo.
NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis
Ácido alcohol resistencia
Es la propiedad que tienen las micobacterias de captar en su pared fucsina fenicada o auramina y retenerla, aún con la acción decolorante con mezcla de ácido y alcohol.
Se debe al alto contenido de lípidos (ácidos micólicos) que poseen las micobacterias en su pared celular.
Baciloscopía
Reporte de la baciloscopia
Negativo: No se observan bacilos ácido-alcohol resistentes en 100 campos microscópicos.
De 1-9 BAAR: Informar el número de bacilos en 100 campos observados.
Positivo (+): Menos de un bacilo por campo en promedio (de 10 a 99 bacilos), en 100 campos observados.
Positivo (++): De uno a diez bacilos por campo en promedio en 50 campos observados.
Positivo (+++): Más de 10 bacilos por campo en 20 campos observados.
Indicaciones de la Baciloscopia para control del tratamiento
En el TAES se realiza el seguimiento mediante unabaciloscopia mensual.
Confirmación de curación.
En el control de tratamiento como indicador pronóstico desu eficacia en casos TBMDR (mensual).
NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis
Baciloscopía
VENTAJAS
� Simple y poco costosa
� Detecta rápidamente los casos infecciosos.
� Bioseguridad.
� Amplia cobertura.
DESVENTAJAS
� Poca sensibilidad.
� Poca especificidad.
Baciloscopía
LIMITACIONES
� No distingue a M. tuberculosisde otras micobacterias
� Organismos viables de los no viables.
� Bacilos sensibles de los resistentes.
Informe Mensual de Microscopía y Cultivo. InDRE
AÑOAÑOAÑOAÑO
LáminasLáminasLáminasLáminas
evaluadasevaluadasevaluadasevaluadas
LáminasLáminasLáminasLáminas
(+)(+)(+)(+)
FalsasFalsasFalsasFalsas
(+)(+)(+)(+)
ConcordanConcordanConcordanConcordanciaciaciacia
(%)(%)(%)(%)
LáminasLáminasLáminasLáminas
((((----))))
FalsasFalsasFalsasFalsas
((((----))))
ConcordanConcordanConcordanConcordanciaciaciacia
(%)(%)(%)(%)TOTALTOTALTOTALTOTAL
2010 39 476 8 854 150 98.3 30 622 141 99.5 99.3
2011 51 656 11 023 150 98.7 40 633 213 99.5 99.3
2012 64 231 12 312 166 98.7 51 919 215 99.6 99.4
2013 65541 12 801 264 97.9 52 740 246 99.5 99.2
RELECTURA DE LÁMINASDe los LESP´s a los laboratorios locales
CONTROL DE CALIDAD DE BACILOSCOPÍASCONTROL DE CALIDAD DE BACILOSCOPÍASCONTROL DE CALIDAD DE BACILOSCOPÍASCONTROL DE CALIDAD DE BACILOSCOPÍAS
Año
Meses supervisad
os promedio
Total de laminillas recibidas
Total de laminillas revisada
% revisado Positivas Falsas (+)%
Concordancia (+)
Negativas Falsas (-)%
Concordancia (-)
% Concordan
cia total
2009No
disponible11895 9411 79 3370 11 99,6 6041 49 99,3 99,45
2010 10 7589 6622 87 2049 7 99,7 4536 30 99,3 99,4
2011 11 10020 9752 97 2989 5 99,8 6720 38 99,4 99,6
2012 11 9886 7106 72 2107 20 99.05 4951 28 99.4 99.3
2013 5 10285 4034 40 1082 5 99.50 2932 15 99.5 99.5
RELECTURA DE LÁMINASDel InDRE a los LESP´s
Año InstitucionesMicroscopistas
evaluadosAprobados Condicionados Reprobados
No. % No. % No. %
2010*
IMSS 87 69 79 13 15 5 6
PEMEX 2 0 0 2 100 0 0
ISSSTE 32 25 78 5 16 2 6
Total 121 94 78 20 16 7 6
2012**
IMSS 27 24 89 3 11 0 0
PEMEX 0 0 0 0 0 0 0
ISSSTE 15 12 80 3 20 0 0
Total 42 36 86 6 14 0 0
2010*De los 1190 microscopistas evaluados para este año, 121 fueron de otras
instituciones.
2012**De los 1180 microscopistas evaluados para este año, 42 fueron de otras
instituciones.
PERÍODOPERÍODOPERÍODOPERÍODO MICROSMICROSMICROSMICROS----COPISTASCOPISTASCOPISTASCOPISTAS
APROBADOSAPROBADOSAPROBADOSAPROBADOS CONDICIONADOSCONDICIONADOSCONDICIONADOSCONDICIONADOS REPROBADOSREPROBADOSREPROBADOSREPROBADOS
NoNoNoNo %%%% NoNoNoNo %%%% NoNoNoNo %%%%
2007-2008 1107 972 87.80 109 9.85 26 2.35
2009-2010 1069 995 93.08 50 4.68 24 2.25
2012-2013 1138 1007 88.49 110 9.67 21 1.85
PRUEBA DE DESEMPEÑODel InDRE a la Red de Laboratorios
Fuente: Laboratorio de Micobacterias. InDRE
CULTIVO
Mediante esta técnica es posible hacer que los bacilos presentes en una muestra se multipliquen in vitro, hasta formar colonias en un medio sólido, turbidez en uno líquido o hasta que algún sensor incorporado en el medio cambie de color o emita fluorescencia cuando los bacilos consumen O2 o liberan CO2
CULTIVO
Crecimiento lento (división binaria de 18 a 22 horas).
Crece en presencia de oxígeno, a un pH de
6.8 a 7.2.
Características del M. tuberculosis
CULTIVO: método de Petroff
MuestraNaOH 4%
Agitar en vortex
Incubar a 37ºCCentrifugar a 3000 G Neutralizar
Sembrar en medio LJ Incubar a 37ºC
Reporte del cultivo
Negativo: No se observan colonias.
De 1-19 BAAR: Informar el número de colonias.
Positivo (+): De 20 a 100 colonias.
Positivo (++): Más de 100 colonias, sin cubrir toda la superficie del medio.
Positivo (+++): Colonias incontables, crecimiento confluente.
.
Los cultivos positivos tienen que ser identificados para diferenciar M. tuberculosis de micobacterias no tuberculosas (MNT), cuya prevalencia varía de país a país y que son más comunes en pacientes con VIH.
El tratamiento para MNT es totalmente diferente del tratamiento para la TB farmacorresistente.
Es indispensable que todo laboratorio que realice PFS identifique prev iamente el cultivo, para diferenciar M. tuberculosis de MNT.
Identificación
Indicaciones para el cultivo
Pacientes con tres baciloscopias negativas y sospecha clínica y radiológica de Tb.
Tuberculosis extrapulmonar.
Tuberculosis renal o genitourinaria.
Tuberculosis en niños.
Sospecha de Tuberculosis en pacientes VIH / SIDA y/o diabetes descompensada.
Diagnóstico
NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis
Aporte del cultivo al diagnóstico TB
Baciloscopia - / Cultivo +Baciloscopia +
Cultivo - / diagnóstico por Radiología / clínica / epidemiología
Aporte del cultivo al diagnóstico de tuberculosis
94%
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
90%
100%
Todos los casosTuberculosis
pulmonarTuberculosis pulmonar con cultivo +
Tuberculosis infecciosa
Manual para el diagnóstico de la tuberculosis Cultivo OPS / OMS
Indicaciones para el cultivo
En pacientes en tratamiento, en quienes al segundo mespersiste la baciloscopía positiva.
Para confirmar la curación o fracaso del tratamiento.
Pruebas de identificación y sensibilidad.
Control de tratamiento
NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis
Diagnóstico en pacientes previamente tratados.
Pacientes que al término de la fase intensiva del tratamiento tienen Bk +
Para control bacteriológico de los casos TBMFR (BK mensual y cultivo bimensual)
Previo al inicio del tratamiento en pacientes contacto de un caso de Tb MFR
En casos de reingreso por recaída o fracaso.
En SR con DM descompensada que viven en zonas de alta incidencia de Tb FR
Para confirmar y ampliar los estudios de pacientes identificados con nuevas técnicas (Xpert-TB RIF, biología molecular, etc.).
Para investigaciones epidemiológicas, terapéuticas y bacteriológicas.
Indicaciones para cultivo
NOM-006-SSA2-2013 Para la prevención y control de la tuberculosis
Control de tratamiento en farmacorresistencia
CULTIVO
VENTAJAS
Técnica más sensible que provee un diagnóstico definitivo.
Aumenta significativamente el número de casos confirmados (15-30%).
Puede detectar casos más tempranamente, aún antes de llegar a ser infecciosos.
DESVENTAJAS
� Mayor tiempo para obtener resultados.
� Mas costoso.
� Necesita equipo especial.
� Mayor preparación de personal
� Bioseguridad
Cultivo
Manual para el diagnóstico bacteriologico de la tuberculosis. Normas y guia tecnica. Cultivo. OPS / OMS . 2008.
Fuente: Base de datos LRN de Micobacterias, InDRE.
LöwensteinJensen
31+3 Todos los LESP +INER,HGM y INCMNSZ
MGIT 15Ags.,BC.(x2),Coah.,Chis.,Chih.,Jal.,NL.,Mex.,Pue.,SLP, Ver.,INER, HGM y INCMNSZ
Año Área Recibidas Rechazadas Discordantes
PositivasContaminación Identificación
2010 País 1198 5 75 2 1116
2011 País 1726 5 139 3 1579
2012 País 1588 6 134 1 1447
2013 País 1518 5 127 3 1383
Medio de cultivo
Caminando a la excelencia
Control de Calidad del cultivo
Medio de CultivoAño
2010 2011 2012 2013
Lowenstein Jensen 22942 25541 27830 18 922
Stonebrink 3550 5423 5911 5 515
Total 26492 30964 33741 24 437
Producción de medio de cultivo
AñoNo. de Round
No. de Estados Calidad de Lotes Tipo de medio
Invitados Participantes Adecuado Inadecuado Caseros Comerciales
2011
1 15 12 12 0
Chis, Mex, Gro, Jal, NL,
Sin, Son, Ver.(8)
Ags, Chih, Hgo, Tab.(4)
2 15 10 10 0Chis, Mex,
Gro, NL, Sin, Son, Ver.(7)
Ags, Chih, Qroo.(3)
2012
1 17 15 14 1
Chis. Mex. Gro. Jal. N.L. Sin. Son. Ver
(8)
Ags.Coah. Chih. BC ( Mexicali-
Tijuana). Tab . Q.Roo (7)
2 17 15 15 0
Chis. Mex. Gro. Jal. N.L. Sin. Son. Ver
(8)
Ags.Chih. BC ( Mexicali-
Tijuana). Gto. Hgo. Tab . (7)
2013 1 18 11 10 1
BC (Tijuana), Chis, Gro, Jal, NL, Sin, Son y
Ver (8)
BC (Mexicali), Mex y Oax (3)
Control de Calidad del medio de cultivo
Fuente: Laboratorio de Micobacterias. InDRE
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