1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 - museugranollersciencies.org · d’insectes obtinguts d’excrements de...
Post on 06-Aug-2020
7 Views
Preview:
TRANSCRIPT
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus
pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 111 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Col·labora:
Flaquer C; R. G. Ràfols; X. Puig; E. Guerreri; M. Monti; R. Ruíz-Jarillo i A. Arrizabalaga (2008). Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Pp 22.
Realització de feina de camp: gener 2008 - setembre 2008
Anàlisi de dades : setembre - octubre del 2008
Elaboració de l’informe: novembre del 2008.
Equip de treball Coordinació i planificació: CARLES FLAQUER (Biòleg) Treball de camp: RUTH G. RÀFOLS (biòloga)
CARLES FLAQUER (Biòleg)
XAVIER PUIG (Ambientòleg)
RAMON RUÍZ-JARILLO (Naturalista)
Anàlisi d’excrements de quiròpters: EMILIO GUERRERI (Doctor en Biologia, Consiglio Nazionale delle Ricerche.
Instituto per la Protezione delle Piante (IPP). Napoli.
MAURILIA MONTI (Biòloga). Instituto per la Protezione delle Piante (IPP)
Plànols: XAVIER PUIG (Ambientòleg)
Elaboració de l’informe: CARLES FLAQUER (Biòleg)
Assessorament tècnic i supervisió: ANTONI ARRIZABALAGA I BLANCH (Conservador del Museu de Granollers).
Agraïments: Aquest Treball no s’hagués pogut dur a terme sense la col·laboració de: Enric
Matamoros, Gemma Galimany, Xavier Ferrer, David Gisbert, Francesc Vidal,
Toni Curcó i Xavier Porres.
Índex
1. Resum......................................................................................................... 2
2. Introducció................................................................................................... 3
3. Material i mètodes....................................................................................... 4
3.1. Col·locació i seguiment de caixes ........................................................ 4
3.2. Radioseguiment ................................................................................... 6
3.3. Anàlisi de dieta de P. pygmaeus .......................................................... 8
4. Resultats i anàlisi de dades....................................................................... 12
5. Discussió................................................................................................... 15
6. Bibliografia de consulta ............................................................................. 19
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
1. Resum Entre els anys 2007 a 2009 s’estan fent esforços per tal d’avaluar la capacitat de les poblacions
de ratapinyada pipistrel·la nana (Pipistrellus pygmaeus) com a possible control de la plaga de la
papallona de l’arròs (Chilo supressalis) als arrossars del delta de l’Ebre. Aquests esforços estan
centrats en la combinació de metodologies: mesura d’activitat de cacera dels quiròpters o
ratpenats en arrossars mitjançant detectors d’ultrasons, radioseguiment de quiròpters i anàlisis de
dieta de P. pygmaeus.
Durant la present campanya s’han col·locat 24 caixes en arrossars com a prova pilot i després de
6 mesos el 8% han estat ocupades per quiròpters. Dades molt encoratjadores si es té en compte
que els quiròpters poden tardar anys a ocupar les caixes. Per altra banda s’ha analitzat
genèticament i morfològica la dieta de P. pygmaeus a partir de 20 excrements de P. pygmaeus de
l’agost. Un d’aquests excrements ha donat positiu a presència de C. supressalis. Aquesta és una
tècnica molt nova i els resultats estan supeditats a la sensibilitat dels anàlisis (els quals es preveu
millorar el proper any) però ha permès assegurar que el quiròpter depreda aquesta papallona. La
troballa d’una antena de la papallona en un excrement recol·lectat al Juny també és indicativa de
que P. pygmaeus és un depredador habitual de C. supressalis.
Les dades obtingudes del radioseguiment de 7 femelles evidencien que P. pygmaeus ha estat
més estona caçant a prop de les caixes quan més disponibilitat de papallona han tingut (principi
de setembre). Aquestes dades coincideixen amb la hipòtesi plantejada el 2007 que proposa que
en cas de menjar C. supressalis els quiròpters refugiats en caixes a prop d’arrossar no farien
grans desplaçaments per caçar. En tot cas caldria fer molt més esforç per tenir dades
significatives sobre aquest fet.
Malgrat són dades totalment especulatives, es podria considerar que en períodes d’elevada
activitat de papallona un individu de P. pygmaeus pot depredar 88 papallones per nit. En el pitjor
dels casos, imaginant que C. supressalis només representés el 5% de la dieta de P. pygmaeus,
els quiròpters presents a les caixes de Buda depredarien 19.352 papallones per nit.
2
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
2. Introducció La fauna quiropterològica del delta de l’Ebre és poc rica en espècies però la ratapinyada pipistrella
nana (Pipistrellus pygmaeus) hi és molt abundant (Flaquer i Ruíz-Jarillo 2003). Aquesta espècie
s’està recuperant gràcies a la prohibició de l’ús d’insecticides d’ ampli espectre (p ex. DDT) i a les
campanyes de col·locació de caixes refugi per a quiròpters (Flaquer et al. 2006). P. pygmaeus és
un gran depredador d’insectes que cria al delta, on les femelles s’ajunten a l’estiu formant grans
colònies de cria.
Estudis previs han demostrat que els quiròpters cacen insectes als arrossars del delta (Flaquer et
al. 2007c). Sembla ser que els quiròpters es desplacen a caçar als arrossars durant un període
concret de l'any. Aquest període coincideix amb l’increment de l’activitat de vol de la papallona de
l’arròs. L’activitat de vol de la papallona i l’activitat de cacera de P. pygmaeus es correlacionen
significativament, la qual cosa permet quasi assegurar que els quiròpters van als arrossars a
alimentar-se de papallona del arròs (Chilo supressalis).
Per confirmar que els quiròpters cacen C. supressalis i valorar el control que poden exercir sobre
la plaga cal estudiar la dieta de P. pygmaeus i intentar extrapolar el nombre de papallones que
capturen per quiròpter i nit. Els estudis de dieta de quiròpters es realitzen identificant trossos
d’insectes obtinguts d’excrements de quiròpters (Mc Aney et al. 1991; Goiti et al. 2003).
Al delta de l’Ebre s’ha pogut comprovar que les caixes refugi afavoreixen la presencia de colònies
de cria de P. pygmaeus (Flaquer et al. 2006). Aquestes caixes serveixen de refugi alternatiu als
arbres de ribera i durant la present campanya se n’han penjat en arrossars per tal de veure si eren
ocupades.
L’objectiu d’aquest estudi és el de demostrar que P. pygmaeus caça Chilo supressalis i intentar
extrapolar el nombre de papallones que poden depredar. A més a més s’estudia el radi d’actuació
dels quiròpters des de la seva caixa per tal de valorar si la col·locació de caixes en arrossars pot
ser una bona eina de control de la plaga.
3
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
3. Material i mètodes 3.1. Col·locació i seguiment de caixes A banda d’una mesura temporal per paliar la manca de refugis
per quiròpters en arbres. Les caixes niu són útils per tal
d’inventariar i estudiar espècies de quiròpters forestals i
ubiqüistes (P. ex. Nyctalus leisleri, Pipistrellus kuhlii, etc.).
El model de caixa pot variar però imprescindiblement ha de
tenir una obertura en forma de fissura de, com a màxim 1,5 cm
(d’altra banda hi entren ocells). El material de construcció de la
caixa també pot ser variable (p. ex. fusta, formigó, etc.).
Les caixes han de trobar-se a un mínim de 3 metres d’alçada i
preferiblement n’hi ha d’haver varies de juntes col·locades en diferents orientacions. D’aquesta
manera s’aconsegueix que els quiròpters puguin trobar la temperatura ideal per criar, aparellar-se
o fins i tot hivernar.
Per tal de refugiar colònies de cria de P. pygmeus s’ha optat per utilitzar caixes de fusta de
senzilla construcció i fàcil revisió (models realitzats per Xavier Porres). Durant l’hivern del 2008
s’han penjat 24 caixes en arrossars de la zona 400 a prop de l’illa de Cort i de la Bassa de les
Olles (taula 1). La revisió de les caixes s’ha realitzat en dues ocasions 17/04/08 i 5/08/08
(realitzades per Xavier Ferrer i David Gisbert).
4
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
nº Caixa X Y ALT OR SUPORT LOCALITZACIÓ 1 306515 4515845 2,5 E Fecsa formigó Carretera fangar 2 306427 4515845 2,5 E Fecsa formigó Carretera fangar 3 306366 4515845 2,5 E Fecsa formigó Carretera fangar 4 306293 4515848 2,5 E Fecsa formigó Carretera fangar 5 306299 4515848 2,5 E Fecsa formigó Carretera fangar 6 306304 4515680 2,5 W Fecsa formigó Camí terra paral.lel caixes 1 a 5 7 306229 4515719 2,5 W Fecsa formigó Camí terra paral.lel caixes 1 a 6 8 306013 4515730 2,5 E Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 9 306013 4515730 2,5 W Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 10 305885 4515638 2,5 E Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 11 305885 4515638 2,5 W Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 12 305756 4515541 2,5 E Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 13 305756 4515541 2,5 W Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 14 305709 4515506 2,5 E Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 15 305709 4515506 2,5 W Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 16 305681 4515486 2,5 E Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 17 305681 4515486 2,5 W Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 18 305541 4515382 2,5 E Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 19 305541 4515382 2,5 W Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 20 305416 4515293 2,5 E Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 21 305416 4515293 2,5 W Fecsa formigó Camí Sèquia Sanitària 22 305100 4515025 2,5 S Fecsa formigó Marge arrossar perpend S.Sanitària23 305139 4514946 2,5 W Fecsa formigó Marge arrossar perpend S.Sanitària24 305183 4514860 2,5 W Fecsa formigó Marge arrossar perpend S.Sanitària
Taula 1.- Caixes penjades en arrossar amb l’objectiu de veure el procés d’ocupació i la seva capacitat de refugiar colònies de cria de P. pygmaeus. ALT= altura de la caixa; OR= orientació de la caixa; SUPORT= tipus de suport on es troba penjada la caixa.
5
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
3.2. Radioseguiment El radioseguiment és una metodologia de treball que
permet tenir informació d’ús d’hàbitat i de refugis
utilitzats pels individus marcats. En aquest sentit el
més interessant és marcar varis individus d’una
mateixa espècie durant anys diferents, a poder ser
individus d’una colònia de cria. La informació que
s’obté és de gran valor per a la gestió dels hàbitats de
caça i refugis alternatius (Flaquer et al. 2008).
L’objectiu del present estudi és observar les distàncies a les quals van a caçar les femelles de P.
pygmaeus des de les caixes refugi. A més a més es pretén avaluar si hi ha canvis en el
comportament d’ús d’hàbitat en períodes de molta activitat de C. supressalis respecte períodes de
poca papallona.
El radioseguiment ha estat plantejat en dues tongades diferents, una a principis de setembre (alta
activitat de papallona) i una altra a finals de setembre (baixa activitat de papallona). A principis de
setembre s’han capturat 41 quiròpters de caixes-refugi de l’Illa de Buda (1/09/08). Tots aquests
animals han estat mesurats, sexats, pesats i finalment alliberats. D’aquests se n’han seleccionat
(segons pes i estat de salut) 4 femelles adultes postlactants de ratapinyada pipistrel·la nana
(Pipistrellus pygmaeus). A finals de setembre s’han capturat 10 quiròpters dels quals se n’ha
seleccionat 3 femelles segons pes i estat de salut per tal de radiomarcar-les (taula 2).
Els emissors utilitzats en cap cas han superat el 5,8% del pes dels
animals (0,35 gr. Biotrack, Wareham, UK) i han estat col·locats entre
les escàpoles (imatge) amb cola mèdica. D’aquesta manera els
emissors han caigut al cap de pocs dies d’haver estat col·locats
(rang de 1-10 dies). Durant la present campanya s’ha tingut
problemes amb la capacitat d’adherència de la cola mèdica i per
aquest fet s’ha decidit no marcar més animals i millorar l’esforç de properes campanyes.
6
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
Període d’esforç codi sexe pes 1/09/08 a 7/09/08 093 F 6,3
1/09/08 a 7/09/08 124 F 6,3
1/09/08 a 7/09/08 114 F 6,3
1/09/08 a 7/09/08 141 F 6,1
22/09/08 a 28/09/08 176 F 6,8
22/09/08 a 28/09/08 191 F 6,9
22/09/08 a 28/09/08 112 F 7,2
Taula 2.- Dades dels P. pygmaeus capturats en caixes-refugis de l’illa de Buda i radioseguits. Període d’esforç es refereix als dies en els quals hi ha hagut 2 persones amb 2 cotxes tot terreny buscant i seguint els animals de nit.
En global els animals han estat radioseguits durant 14 nits seguint el mètode del “homing in”
(White i Garrott, 1990) i triangulant. El
seguiment ha estat realitzat per 2 persones
equipades amb receptors (ICOM i TRX-1000,
Wildlife Materials, Carbondale, USA) i antenes
Yagi de 3 elements muntades sobre un tot
terreny (fotografia).
Anàlisi de dades de radioseguiment
Els anàlisi de dades de radioseguiment requereixen d’un mínim d’esforç de 2 o 3 anys. El nombre
d’animals radio-seguits no permet realitzar anàlisis composicionals de selecció d’hàbitat emprant
com a unitat l’individu, tal i com resulta desitjable, pel que únicament s’ha pogut fer una exploració
superficial de les dades per determinar-ne les tendències.
Per realitzar una primera aproximació a l’ús d’hàbitat a partir de les localitzacions obtingudes
mitjançant el radio-seguiment, s’han realitzat uns “buffers” en els quals s’indica les probabilitats
que un punt de la mostra es trobi dins de cadascun dels polígons concèntrics (Arcview - Kernel
anàlisi).
7
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
3.3. Anàlisi de dieta de P. pygmaeus Anàlisi de pes de Chilo supressalis
Per tal de poder extrapolar el nombre de papallones de C. supressalis que és capaç de depredar
un individu de P. pygmaeus s’han pesat un total de 60 papallones. Les pesades s’han realitzat de
10 en 10 amb una balança digital. Del pes de totes les papallones se n’ha fet la mitjana.
L’apartat d’anàlisi de dieta i excrements duta a terme per part del “Instituto
per la Protezione delle Piante” s’ha preferit mantenir-la en el seu idioma
original per tal de no perdre en la
traducció informació que pot ser
d’interès. En tot cas la tècnica es basa en la dissolució
d’excrements de quiròpters (fotografia dreta) en tubs en
alcohol 75% (fotografia esquerre) als quals s’hi realitzen
tractaments per obtenir marcadors de DNA de C. supressalis. També s’ha mirat si els excrements
presentaven parts del cos de C. supressalis (p. ex. antenes).
DNA extraction from Chilo suppressalis and primers design Different part of Chilo supressalis were used, a whole wing, the head, wing nerves, a leg. Samples
of were homogenized with a plastic pestle and treated with Chelex resin/proteinaseK as described
by (Vickerman et al. 2004).
The DNA was amplified with two different set of universal primers, ND2F/ND2Rev and C1-J-
2183/TL2-N-3014 respectively specific for the 28S-D2 region (Campbell et al. 1993) and for the
mitochondrial gene COI (corresponding to nucleotides 2183 to 3014 referred to Drosophila yakuba
mtCOI gene)(Simon et al 1994).
The PCR cycling program for 28S-D2 primers pair was: 3min at 94 °C, followed by 35 cycles of
45s at 94 °C, 1min at 52 °C, 2min at 72°C, and a final extension of 7min at 72°C. For the mtCOI
gene the PCR cycles were the same as described for D2-28S except that the annealing
temperature was lowered to 48°C. All the amplifications were carried out in a 40µl reactions using
4µl of DNA template, 1x buffer (Promega), 0.2 mM of each dNTP, 10 pmol of each primer and 0,6
units of GoTaq DNA polymerase (Promega), and checked on 1% agarose gel stained with etidium
bromide.
8
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
The amplicons were direct sequenced using the ABI Prism BigDye Terminator Cycle Sequencing
Ready ReactionKit (PE Applied Biosystems), on the ABI PRISM 310 DNA Sequencer.
A second region of mtCOI (corresponding to nucleotides 1737 to 2204 referred to Drosophila
yakuba mtCOI gene) from different strains of C. supressalis was recovered from genebank.
Primers specific for C. supressalis 28S and COI were designed with the software Primer-blast at
NCBI (Rozen and Skaletsky 2000). It uses Primer3 to design PCR primers and then submits them
to BLAST search against user-selected database. In this study the database was made of all
Lepidoptera other than C. supressalis known sequences of the same regions. The blast results are
then automatically analyzed to avoid primer pairs that can cause amplification of targets other than
the input template.
The primers chosen are listed below:
On the 28S-D2 region
28S 333F (5’ ATC GAG GTC CTG CCT ATG TG 3’)
28S 434R (5’ GAA CTG ATC ATCGCA GAC AGA G 3’)
On the mtCOI region both the couples of primers annealed in the first 5’ region of the mtCOI. No
region characteristic of C. supressalis was found in the second half of this gene.
COI PPF1 (5’ AAT GGA GCT GGA ACA GGA TG 3’)
COI PPR1d (5’ GAA TTG GAT CTC CAC CAC CA 3’)
COI PPF2a (5’ GCT CAC GCT GGA AGT TCA G 3’)
COI PPR2b (5’ CAG CTA ATA CTG GTA GAG ATA GAA GT 3’)
The length of the amplified product is respectively 99bp, 331bp, and 202bp.
DNA extraction from bats’ droppings Droppings were air dried on filter paper to remove as much ethanol as possible, then placed into
eppendorf tubes containing 150 µl of extraction buffer (10 mM tris HCl pH 8.0, 1 mM EDTA, 1%
Nonidet P-40, 200 µg/ml Proteinase K) vortexed briefly, incubated overnight at 55°C, and 2 h at -
20°C. Samples were then subjected to a second round of lyses by adding 50 µl more of new
prepared extraction buffer, and incubation at 55°C for 2h. Proteinase K was inactivated boiling the
sample 10 minutes, and DNA recovered after centrifugation of 10 minutes at 14.000 rpm. The
pellet containing the dropping debris was utilized for microscopy analysis. Twenty samples were
9
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
analysed, from droppings collected in the peak season of presence of C. supressalis (late
August). Each sample was split in two, and one of the portions was saved for later analysis. As
positive control a small fragment of antenna and of tarsus (same dimension of fragments retrieved
in bats’ droppings) were added to two different faeces samples prior to perform DNA extraction (to
be sure that there aren’t compounds inhibiting the PCR in the faeces). As negative control, DNA
was extracted, with the same protocol described above, from fragments retrieved in bat droppings,
and identified as “not Lepidoptera” specimens by microscopy analysis; they were two legs, a head,
and head with antenna.
PCR screening PCR was carried with the universal primers ND2F/ND2Rev and C1-J- 2183/TL2-N-3014 could
work also with DNA extracted from droppings, in this way we could know both if the DNA was
intact, and if we could use the universal primers. The PCR conditions were the same as described
above.
1 2 3 54 76 8 1091 2 3 54 76 8 109
Figure 1.- PCR products with 28S primers run on 1% agarose gel, stained with ethidium bromide. Lanes 2,3,4,and10: fragments identified as “not Lepidopotera”. Lane 1: Blank sample, without any DNA. Lane 5: DNA template from C. supressalis. Lanes 6,7,8,9: droppings. PCR with C1-J-2183/TL2-N-3014 primers gave very faint bands, in droppings but no signal in “not Lepidoptera” samples (photo not shown).
The specifics couples of primers, 28S 333F/28S 434R, COI PPF1/COI PPR1d, and COI
PPF2a/COI PPR2b, designed on C. supressalis sequences, were the used, on total DNA extracted
from droppings, from fragments of “not Lepidoptera”, and from C. supressalis.
The conditions were the same as described above, except for amplification cycles that were the
following: 3min at 94 °C, followed by 35 cycles of 45s at 94 °C, 45s at 55 °C, 45s at 72°C, and a
final extension of 5min at 72°C. Only DNA from C. supressalis gave the expected bands
To improve the probability of detection of even small and/or few fragments of C. supressalis we
decided to perform a nested PCR, consisting of a first round of amplification with external primers,
10
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
on total DNA as template, followed by a second round with inner primers on the product from the
previous amplification as template. For the 28S region the external primers were ND2F/ND2Rev,
and the inner primers 28S 333F/28S 434R. For the COI the external primers were COI PPF1/COI
PPR1d and the inner primers COI PPF2a/COI PPR2b.
With the external primer pairs the PCR conditions were the same as described above, but the
annealing temperature was set at 55°C, and the number of cycles was 30. One ml of the PCR
product was used as template for the second round of amplification, carried out at the same
conditions, but for 35 cycles. PCR products were run on a 2% agarose gel, stained with ethidium
bromide. To validate the method a number of positive samples were included in the analysis, such
as DNA from C. supressalis, and the DNA from droppings with C. supressalis antenna and tarsus
added. (Fig.2)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 111 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Figure 2. PCR products of nested amplification with 28S primers
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 111 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Figure 3. PCR products of nested amplification with COI primers. Lane 1: fragment identified as “not Lepidopotera”. Lanes 2, 3, 4, 5: bat droppings. Lanes 6,7: droppings with C. supressalis antenna and tarso added. Lanes 8,9, 11: C. supressalis. Lane 10: Blank sample, without any DNA. The white arrow show the 99bp and the 202bp long positive bands.
11
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
4. Resultats i anàlisi de dades La primera revisió de caixes-refugi ha estat negativa mentre que a la segona s’hi ha observat 2
quiròpters, que representen una ocupació d’un 8,33% de les caixes en menys de mig any des de
la seva col·locació. Si ens fixem amb la mitjana de quiròpters que han ocupat les caixes penjades
a l’illla de Buda pel Parc Natural del Delta de l’Ebre (Flaquer et al. 2006) veiem que la mitjana
d’individus per caixa un any després de la seva col·locació no arribava a 6 individus per caixa i no
va ser fins 5 anys després que es va estabilitzar. Durant l’any 2008 s’han hagut de canviar totes
les caixes penjades en arrossar i la població de quiròpters ha tingut una davallada de 71 a 14
indiv./caixa (figura 4).
Figura 4.- Mitjana d’individus de P. pygmaeus comptabilitzats en caixes situades en pals de llum d’arrossars de l’illa de Buda. * Reposició de les caixes (col·locades el 1999) perquè s’havien fet malbé.
Els animals radiomarcats a mitjans de setembre pesaven, de mitjana, un 10% menys dels
capturats a principi de setembre (taula 2; pàg. 7).
El primer any de radioseguiment aporta poques dades però s’observa un patró diferent d’ocupació
de l’espai. Durant la primera setmana de setembre les femelles de P. pygmaeus han tingut una
àrea de caça molt concentrada a l’entorn de les caixes on van ser capturades (figura 5). Per altra
12
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
banda durant la tercera setmana de setembre les femelles es van dispersar més (figura 6). Cal
comentar, però, que amb les femelles radioseguides la 3 setmana de setembre només s’hi han
tingut 36 contactes (s’entenen com animals caçant), mentre la primera setmana de
radioseguiment ha aportat 108 contactes. Aquest fet també mostra que durant la 3 setmana les
femelles es movien més i per això es perdien més fàcilment.
L’anàlisi genètic mitjançant marcadors moleculars de 20 excrements recol·lectats de caixes de
Buda a l’agost ha donat un positiu irrefutable (s’han utilitzat 2 gens diferents). Per altra banda la
troballa d’una antena de C. supressalis en excrements han constatat que P. pygmaeus també
depreda C. supressalis de la segona corba de vol (Juny).
El pes mitjà d’una papallona de Chilo supressalis sense ales és de 0,22 grams (taula 3).
Pesades (n=60) Grms 10 indv P1 (n=10) 0,3318 P2 (n=10) 0,3018 P3 (n=10) 0,2877 P4 (n=10) 0,2481 P5 (n=10) 0,2273 P6 (n=10) 0,1523 mitja 10 0,2581
P sense ales de 10 papallones 0,2269
Taula 3.- Resultat de pesar 60 papallones en 6 pesades i la mitja.
13
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
Figura 5.- “Buffers” en els quals s’indica les probabilitats que un punt de la mostra es trobi dins de cadascun dels polígons concèntrics (Arcview - Kernel anàlisi). Radioseguiment realitzat entre el 1/09/08 a 7/09/08 (taula 2).
Figura 6.- “Buffers” en els quals s’indica les probabilitats que un punt de la mostra es trobi dins de cadascun dels polígons concèntrics (Arcview - Kernel anàlisi). Radioseguiment realitzat entre el 22/09/08 a 28/09/08 (taula 2).
14
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
5. Discussió En general l’ocupació de caixes refugi per quiròpters és molt variable, així en el pitjor dels casos
les caixes tarden anys en ocupar-se (o no s’ocupen mai) i en d’altres casos tarden mesos en ser
ocupades pels primers quiròpters. Normalment el primer dels casos es dona quan hi ha molt refugi
natural disponible (en arbre o cavitats en roca), seria el cas d’un bosc de ribera ben preservat
(Flaquer et al. 2007b i referències allí citades). El segon dels casos és característic de zones amb
poca disponibilitat de refugi i en canvi molt d’aliment, com seria un arrossar amb presencia
d’aiguamolls (Flaquer et al 2006).
Amb l’objectiu de comprovar la possible ocupació de caixes en arrossars, s’han penjat caixes en
arrossars més o menys allunyats de llacunes o rius. Els resultats d’ocupació obtinguts en mig any
(més d’un 8%) són positius. L’ocupació de les caixes acostuma a ser exponencial i és un bon
símptoma que alguns animals les comencin a ocupar dins el primer any de col·locació. En tot cas
caldrà esperar a l’estiu vinent per veure si aquesta ocupació incrementa.
El radioseguiment és, segurament, una de les metodologies d’estudi de quiròpters més complexes
i implica varis anys d’esforç abans d’obtenir resultats significatius. Els resultats, però, són molt
interessants ja que ofereixen dades sobre refugis, vies de pas i zones de caça dels quiròpters
(Flaquer et al. 2008). L’objectiu de radioseguir femelles de P. pygmaeus ha estat el de confirmar
un comportament de caça diferenciat segons els períodes d’activitat de papallona de l’arròs (alta o
baixa). Els resultats evidencien que P. pygmaeus ha estat més estona caçant a prop de les caixes
quan més disponibilitat de papallona han tingut (principi de setembre). Aquesta dada coincideix
amb la hipòtesi plantejada el 2007 que proposa que en cas de menjar C. supressalis els
quiròpters refugiats en caixes a prop d’arrossar no farien grans desplaçaments per caçar (Flaquer
et al. 2007c). Com la major part d’animals, els quiròpters cerquen el balanç energètic òptim. En tot
cas manca esforç de radioseguiment per realitzar en properes campanyes.
A banda de l’ús d’hàbitat el radioseguiment ha servit per confirmar que els quiròpters són capaços
de desplaçar-se varis quilòmetres des de les caixes on es refugien i per tant la col·locació de
caixes allunyades de llacunes no representa un impediment alhora d’utilitzar les llacunes com a
zona de caça (figura 6). Igualment les caixes situades en llacunes poden servir per quiròpters que
vagin a caçar a arrossars.
15
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
L’anàlisi de dieta mitjançant identificació de peces d’insectes trobades en excrements implica un
elevat coneixement d’entomologia ja que els quiròpters masteguen els insectes que cacen
(sobretot els que són una mica grans com el C. supressalis) i en els excrements només hi resten
mandíbules, tarsos i d’altres petites parts dels insectes. A més a més les papallones tenen molta
part tova que incrementa la dificultat de trobar restes de peces en excrements. En aquest sentit la
troballa d’una antena de C. supressalis es pot considerar com a una important evidència de que P.
pygmaeus caça C. supressalis en segona corba de vol (Juny).
Els anàlisi amb marcadors genètics, per altra banda, són més costosos de preparar però un cop
elaborats els marcadors permeten mecanitzar el procés de busca d’insectes concrets en
excrements (en aquest cas C. supressalis). Aquesta metodologia és inèdita en l’estudi de C.
supressalis i per aquest fet cal temps per depurar-la i incrementar la sensibilitat alhora de detectar
els marcadors més adients. Els resultats obtinguts confirmen que P. pygmaeus depreda C.
supressalis a finals d’agost.
El present estudi té com a objectiu principal confirmar la presència de la papallona de l’arròs en la
dieta de P. pygmaeus i aquest fet s’ha aconseguit amb les dues metodologies esmentades.
Considerant que una papallona aporta més energia que un dípter, la confirmació de presència de
C. supressalis en la dieta dels quiròpters dona credibilitat a la hipòtesi que fa referència a que P.
pygmaeus caça en aiguamolls i rius tot l’any a excepció de quan apareix la papallona en l’arrossar
(Flaquer et al. 2007c).
La baixa aparició de papallona en la mostra analitzada (5%) pot ser deguda a que els quiròpters
no capturin massa papallona o a una baixa sensibilitat dels anàlisis (més probable, en ser una
tècnica complicada i nova). La millora d’aquests anàlisi es pot realitzar canviant els mètodes
d’extracció de DNA (utilitzant columnes purificades o resines) i/o canviant les condicions dels PCR
(aplicant diferents taq polimerasses, diferent cicles). Sigui com sigui seria molt interessant poder
tenir excrements de P. pygmaeus que hagi menjat, amb tota seguretat, C. supressalis (això es pot
fer mantenint un animal en captivitat en un ambient ple papallona).
Malgrat són dades totalment especulatives i donada la dificultat d’extrapolar la quantitat de
papallones de l’arròs que poden depredar les poblacions de P. pygmaeus del delta de l’Ebre s’ha
mirat de relacionar el pes mig d’una papallona amb els requeriments de menjar (en pes) dels
16
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
quiròpters. S’estima que donada l’elevada despesa energètica que implica volar i al seu ràpid
metabolisme, un quiròpter és capaç de menjar insectes per l’equivalent a un terç del seu propi pes
cada nit (Ober, 2008). En el cas de P. pygmaeus serien 2 grams d’aliment per nit. Si es considera
que un individu de C. supressalis pesa 0,2 gr. (taula 4) es podria considerar que en períodes
d’elevada activitat de papallona un individu de P. pygmaeus podria depredar 88 papallones per nit.
Així, per exemple els 4391 P. pygmaeus presents en les caixes-refugi col·locades a l’illa de Buda
depredarien un total de 387.043 papallones de l’arròs per nit. En el pitjor dels casos, si C.
supressalis només representés el 5% de la dieta de P. pygmaeus, els quiròpters presents a les
caixes de Buda igualment depredarien 19.352 papallones per nit.
Cal tenir en compte que hi ha estudis (p. ex. Cleveland et al. 2006 i Ober 2008) que donen valors
econòmics a la presència d’aquests quiròpters i, per exemple, consideren que els productors de
cotó del sud de Texas s’estalvien fins a 741.000 dòlars l’any gràcies a la presència dels
quiròpters. A aquestes dades econòmiques caldria sumar-hi l’avantatge mèdica i social que
implica la reducció d’insecticides en zones de conreus extensius.
Després de dos anys d’investigació utilitzant 3 metodologies d’estudi: 1) mesura d’activitat de
cacera de quiròpters amb detectors d’ultrasons, 2) anàlisi de dieta de quiròpters i 3)
radioseguiment; es pot afirmar que P. pygmaeus està exercint un control sobre la població de C.
supressalis. A partir d’aquesta premissa caldrà treballar per tal de saber fins a quin punt els
quiròpters poden ser un control biològic de la plaga. En aquest sentit és interessant observar que
la davallada de població de quiròpters dels arrossars de l’illa de Buda, causada per la reposició de
caixes del 2008, s’ha vist reflexada en un increment de la població de papallona a Buda que ha
implicat necessitat de tractament amb insecticides (dades de l’ADV de les Terres de l’Ebre).
Aquest seria un primer indici de l’interès que pot tenir la col·locació de caixes per afavorir les
poblacions de quiròpters i reduir el nivell de plaga de C. supressalis.
De cara a properes campanyes caldria culminar la fase de radioseguiment i ús d’hàbitat de P.
pygmaeus i penjar caixes en noves zones on s’hagi detectat elevada activitat de papallona. La
penjada de caixes hauria d’anar coordinada amb els agricultors que mostrin més interès pel
projecte.
Després de veure el comportament dels quiròpters resseguint les línies d’arbres de l’illa de Buda i
d’acord amb bibliografia especialitzada (Bach i Limpens 2002) seria de gran interès incrementar la
17
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
mobilitat dels quiròpters pels arrossars plantant línies d’arbres o arbusts (mín. 2m) en alguns
marges de pistes i carreteres. Aquesta tasca es podria coordinar amb el Parc Natural del Delta de
l’Ebre.
Figura 7.- Els puntes de fletxa en blanc intens marquen les vies de pas dels quiròpters seguint arbres i arbusts plantats al marge de pistes i carreteres.
18
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
6. Bibliografia de consulta Bach, L i Limpens, H. (2002). Bats and landscape planning in Germany. European Bat Research
Conference, Le Havre, France (August 2002). Irish bat Conference, Navan, Ireland (May
2003) c/o Lothar Bach, Freilandforschung, zool. Gutachten, Bremen,Germany.
Barrientos J. A. (1988). Bases para un curso práctico de entomología. Asociación Española de
Entomología, Barcelona: 3-75.
Campbell B.C., Steffen-Campbell J.D., Werren J.H. (1993) Insect Mol. Biol. 2: 237-255.
Chinery M. (1977). Guía de campo de los insectos de España y de Europa. Omega, Barcelona: 5-
402.
Cleveland, C. J., M. Betke, P. Frederico, et al. (2006). Economic value of the pest control service
provided by Brazilian free-tailed bats in south-central Texas. Frontiers in Ecology and the
Environment 4:238-243.
Flaquer, C. i R. Ruíz-Jarillo. 2003. Primers pasos en l’estudi de presència i utilització de l’habitat
per part dels quiròpters al Parc natural del Delta de l’Ebre. Soldó: 20 pàg. 9.
Flaquer C., R. Jarillo, i A. Arrizabalaga. (2004). Aportación de nuevas citas a la fauna
quiropterológica de Cataluña. Galemys 16(2): 39-55
Flaquer C., I. Torre and R. Ruíz-Jarillo. (2006). The value of bat boxes in the conservation of
Pipistrellus pygmaeus in wetland rice paddys. Biol. Conserv.128: 223-230.
Flaquer, C., Torre, I., and Arrizabalaga, A. (2007a). Comparison of sampling methods for inventory
of bat communities. Journal of Mammalogy. 88 (2): 526-533.
Flaquer C., Torre, I., Arrizabalaga, A. (2007b). Selección de refugios, gestión forestal y
conservación de los quirópteros forestales. En: Camprodon, J., Plana, E. (Eds.),
Conservación de la biodiversidad y gestión forestal: su aplicación en la fauna vertebrada,
Edicions de la Universitat de Barcelona.
Flaquer C., Ràfols R. G., Puig X., i A. Arrizabalaga (2007c). Proposta per a l’estudi de la
ratapinyada nana (P. pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (C.
supressalis) al delta de l’Ebre. Encàrrec del Departament d’Agricultura Alimentació i Acció
Rural, i de l’Agrupació de defensa Vegetal de l’Arròs i altres cultius del delta de l’Ebre. Pp.
22.
Flaquer, C., Puig-Montserrat, X., Burgas A., i D. Russo (2008). Habitat selection by Geoffroy’s bats
(Myotis emarginatus) in a rural Mediterranean landscape: implications for conservation.
Acta Chiropterologica 10 (1) 61-67.
19
Seguiment de l’estudi de la ratapinyada nana (Pipistrellus pygmaeus) com a control de la plaga de la papallona de l’arròs (Chilo supressalis) al delta de l’Ebre. Any 2008.
Goiti U., P. Vecin., I. Garin., M. Saloña i J. R. Aihartza. 2003 .Diet and prey selection in kuhl’s
pipistrelle Pipistrellus kuhlii (Chiroptera: Vespertilionidae) in south-western Europe. Acta
Chiropterologica: 48(4) 457-468.
Hill, D. A. and F. Greenaway (2005). "Effectiveness of an acoustic lure for surveying bats in British
woodlands." Mammal Review 35(1): 116-122.
McAney C., Shiel C., Sullivan C. and Fairley J. (1991). The analysis of bat droppings. Mammal
Society, London, pp. 48
Ober H. K. (2008). Insect Pest Managment Services Provided by Bats. Document WEC245,
Wildlife Ecology and Conservation Department, Florida Cooperative Extension Service,
Institute of Food and Agricultural Sciences, University of Florida. http://edis.ifas.ufl.edu.
Palomo, L. J., J.G. Gisbert i J. Blanco. (2007). Atlas de los Mamíferos Terrestres de España.
Madrid. Pp. 564.
Puig. X (2008). Propuesta de protocolos para el monitoreo de murciélagos en España. Ministerio
de Medio ambiente i Sociedad Española para la Conservación y Estudio de los Mamíferos
(SECEM). Inédito. Pp. 72
Rozen S., Skaletsky H.J. (2000) In: Krawetz S, Misener S (eds) Bioinformatics Methods and
Protocols: Methods in Molecular Biology.Humana Press, Totowa, NJ, pp 365-386.
Simon C., Frati F., Bechenbach A., Crespi B., Liu H., Flok P. (1994) Ann. Entomol. Soc. Am. 87:
651-701.
Vickerman D.B., Hoddle M.S., Triapitsyn S., Stothamer R. (2004). Biological Control 31:338-345.
White, G. C., and R. A., Garrot. 1990. Analysis of wildlife radio-tracking data. London. Academic
Press.
20
top related