6ta semana

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*el crecimiento de los microorganismos (curva de crecimiento) *ciclo celular *crecimiento de población *cultivo de microorganismos Primera segunda unidad semana 6 Mg. William Guzmán Sánchez

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microbio logia 6

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  • *el crecimiento de los microorganismos (curva de crecimiento)*ciclo celular *crecimiento de poblacin*cultivo de microorganismosPrimera segunda unidad semana 6Mg. William Guzmn Snchez

  • Crecimiento de MicroorganismosDespus de las reacciones de polimerizacin en las que se fabrican macromolculas a partir de monmeros las bacterias comienzan a crecer y a dividirse por fisin binaria transversal. El tiempo de divisin varia as por ejemplo el E. coli demora 20 minutos en dividirse.

  • Crecimiento de Microorganismos

  • Descripcin a) clula madreb) alargamiento celularc) invaginacin de la pared celulard) formacin de la pared celular transversale) separacion de las 2 clulas nuevasCrecimiento de Microorganismos

  • Crecimiento de Microorganismos

  • El tiempo que una bacteria tarda en convertirse en dos se denomina tiempo de generacin(TG). Por ejemplo, Escherichia colirequiere alrededor de 20 minutos para duplicarse en un caldo nutritivo a 37C.

    Crecimiento de Microorganismos

  • Crecimiento de Microorganismos

  • Crecimiento de Microorganismos

  • Crecimiento de Microorganismos

  • Si un cultivo bacteriano se duplicase una vez cada 20 minutos y continuara multiplicndose sin cesar durante 48 horas, una Escherichia coli producira 2144bacterias.

    Curva de Crecimiento

  • Sin embargo, por fortuna el crecimiento bacteriano es autolimitante. Aun en condiciones ideales la mayora de los cultivos bacterianos se multiplican slo durante 3 a 5 horas.

    Curva de Crecimiento

  • La detencin del crecimiento de algunas bacterias inicia la esporulacin. Esto da como resultado la produccin de esporas metablicamente inertes que son resistentes a los cambios fisicoqumicos.

    Curva de Crecimiento

  • A: Fase de Rezago.Este periodo consiste en la adaptacin de las clulas microbianas a su nuevo ambiente. En esta fase, las clulas microbianas se envuentran empobrecidas en cuanto a metabolitos y enzimas, esto debido a las condiciones desfavorables que representaba el cultivo previo.Por lo anterior, en este lapso de tiempo se forman las enzimas y los metabolitos intermedios hasta alcanzar las concentraciones necesarias para reiniciar el crecimiento.Este periodo se puede prolongar en el caso de que el medio de cultivo previo y las condiciones actuales resulten tan diferentes que las clulas sean genticamente incapaces de sobrevivir, por lo que slo unas cuantas mutantes podrn subsistir, y obviamente se requerir ms tiempo para que stas se multipliquen lo suficiente y sea notorio el aumento de clulas.Curva de Crecimiento

  • C: Fase Exponencial.Como el nombre lo indica, en esta fase las clulas se encuentran en un estado de crecimiento sostenido.Se sintetiza nuevo material celular a una tasa constante, pero ste material es en s cataltico y la masa aumenta de manera exponencial. Lo anterior continua hasta que uno o ms nutrimentos se agoten, o hasta que se acumule tal cantidad de metabolitos txicos que se inhiba el crecimiento. El nutrimento limitante para los organismos aerobios suele ser el oxgeno: cuando la concentracin bacteriana es de aproximadamente 1 x 107 / ml es necesario incrementar el ingreso de oxgeno mediante agitacin o burbujeo; pero cuando la concentracin alcanza 4 o 5 x 109 bacterias por ml, la tasa de difusin de oxgeno no puede satisfacer las demandas aun en un medio aireado, por lo que el crecimiento disminuye progresivamente.Curva de Crecimiento

  • E: Fase Estacionaria Mxima.Como se explic en la descripcin de la fase anterior, ante el agotamiento de nutrimentos en el medio o la acumulacin de metabolitos txicos el crecimiento cesa por completo despus de un periodo de decrecimiento en la tasa de crecimiento, lo cual corresponde a la fase D o de retraso.No obstante, por lo general en esta fase se puede observar recambio celular, lo cual se debe a que, aunque existe una prdida lenta de clulas por muerte, dicha prdida se compensa exactamente por la formacin de nuevas clulas a travs de crecimiento y divisn. As, la cifra de clulas viables se mantiene constante, aunque en realidad en el conteo aumente poco a poco el nmero de clulas, si se cuentan tambin las muertas. Curva de Crecimiento

  • La duracin de esta fase depende de la naturaleza del microorganismo y de las condiciones del medio.F: Fase de Declinacin.Esta fase, tambin conocida como fase de muerte, representa el decremento de clulas debido al aumento progresivo de la tasa de mortalidad, misma que tarde o temprano alcanza un valor sostenido.Por lo general, una vez que la mayora de las clulas ha muerto, la tasa de mortalidad disminuye bruscamente, por lo que un nmero pequeo de sobrevivientes pueden persistir en cultivo por meses o aos. Dicha persistencia puede deberse a que las clulas consiguen crecer gracias a los nutrimientos liberados por las clulas que mueren y se lisan, observndose recambio celular.Curva de Crecimiento

  • REQUERIMIENTOS

  • Un medio de cultivo es una solucin acuosa (bien como tal, o bien incorporada a un coloide en estado de gel) en la que estn presentes todas las sustancias necesarias para el crecimiento de un(os) determinado(s) microorganismo(s). Los medios de cultivo se pueden clasificar, en primera instancia, en tres grandes tipos: Cultivo de Microorganismos

  • Cultivo de Microorganismos 1) Medios complejos o indefinidos: su composicin qumica exacta se desconoce, ya que son el producto de realizar infusiones y extractos de materiales naturales complejos:Ejemplos:

    Digeridos crudos de extracto de carne Digeridos de extracto de levadura Digeridos de peptona de carne o de soja Digeridos de casena (de la leche).

  • 2) Medios sintticos o definidos: se obtienen disolviendo en agua destilada cantidades concretas de distintas sustancias qumicas puras, orgnicas y/o inorgnicas. La composicin concreta de un medio sinttico depender de la bacteria que queramos cultivar: lgicamente, un medio definido para una bacteria con grandes capacidades biosintticas ser ms sencillo que el medio definido de otra bacteria con menores posibilidades biosintticas. En la tabla siguiente se dan las composiciones de sendos medios sintticos para dos bacterias diferentes.Cultivo de Microorganismos

  • 3) En tercer lugar, podemos fabricar un tipo de medio mezcla de los anteriores, denominado medio semisinttico: llevan algunas sustancias qumicas cuya naturaleza y cantidad conocemos, junto con sustancias de naturaleza y composicin indefinidas.Cualquiera que sea el tipo de medio, de los tres que acabamos de citar, podemos elaborar dos tipos de versiones, segn su estado aparente:

    medios lquidos (por ejemplo, los dos de la tabla) medios slidos: derivan de los lquidos simplemente aadiendo a la solucin nutritiva un coloide en estado de gel, que solidifica (da consistencia) a esta solucin.

    En los primeros tiempos de la Bacteriologa slo se conoca como sustancia gelificante incorporable a los medios la gelatina. Sin embargo, presenta muchos inconvenientes, ya que funde a 25oC (por encima de esta temperatura el medio se lica), y adems, muchas bacterias presentan gelatinasas que hidrolizan la gelatina.Cultivo de Microorganismos

  • El gelificante ms usado es el agar-agar, extrado de algas rojas (p. ej. Gelidium), del cual existen versiones ms o menos purificadas (las ms puras estn ms enriquecidas en el polisacrido agarosa; son las que se emplean para los medios definidos, con objeto de evitar la introduccin de sustancias "contaminantes" inadvertidas que falseen las interpretaciones sobre el comportamiento nutricional de la bacteria). El agar presenta la gran ventaja de que una vez gelificado, no funde hasta cerca de los 100oC, lo que permite su uso para la inmensa mayora de bacterias, que son mesfilas. Un comportamiento notable del agar es que una vez fundido (a 100C), no gelifica (solidifica) hasta los 45C. En este margen de temperatura hasta el lmite de solidificacin de 45C se dice que el agar est en sobrefusin.Cultivo de Microorganismos

  • Para cultivar ciertas bacterias (sobre todo los quimioautotrofos) se suele recurrir a un gelificante inorgnico, el silicagel o gel de slice.Finalmente, introduciremos otra serie de conceptos relativos a medios de cultivo, que al igual que los anteriores, sern tratados con la suficiente amplitud en las sesiones de clases prcticas:

    Medios selectivos son aquellos que permiten seleccionar un tipo (o unos pocos tipos) de microorganismos. En el laboratorio se emplean mucho medios selectivos slidos que incorporan ciertas sustancias que inhiben el crecimiento de ciertas bacterias, pero permiten el crecimiento de otras. (P. ej. medios que llevan violeta cristal inhiben el crecimiento de bacterias Gram-positivas.

    Medios diferenciales son aquellos que permiten distinguir a simple vista dos o ms tipos de bacterias en funcin de su distinto comportamiento respecto de algn nutriente del medio. Ese comportamiento diferencial se traduce normalmente en un viraje de color de una sustancia indicadora presente en el medio.Cultivo de Microorganismos

  • Ejemplos:

    en el medio EMB (eosina-azul de metileno) ciertos tipos metablicos de bacterias producen cambios de color y precipitacin de sales cuando producen cidos por fermentacin de ciertas fuentes de carbono. El medio llamado agar-sangre lleva un 5% de sangre de caballo o carnero, lo cual revela la capacidad (y el tipo) de hemolisis de ciertas bacterias.Algunos medios son simultneamente selectivos y diferenciales.

    P. ej., el agar de MacConkey, que el alumno manejar en la segunda tanda de prcticas. Se trata de un medio de color rosado y transparente, que posee, entre otras sustancias, lactosa, peptonas, el colorante vital rojo neutro, sales biliares y violeta cristal.Cultivo de Microorganismos