1 4 6 6 4 8

P

IIoTBomccImt Se ha observado en cQlulae microbianas, al igual que

en una gran rsriebd de cdlulae diferentes, la velocidad

del cotabollsmo no viene controlada por la ooncentrac~ibn

do o~emontos nutritivos asequiblos en el entorno celular, sino por lae necesidades instantaneae -segundo a segmdo-

de la dlula, de e~aergia en fonna de ATP. La regulaci6n de una ruta metab6lica puede ocurrir a

divsrsos nivelee, :La velocidad de reaccidn de cada una de

lae reaccione8 enzimSticaa dependera del pH y de las aop

centraoioaes intrmslulares del -trato( S) , o del pm-

ducto(8) y del ooefactor, que eon le9 elementos primarios

para la regulacidn de l a aotividad enzimAtioa.

El segundo nivel del control de las secuencias mets

b d l i c a s s e e f e c t b a traves de l a accibn de enzima8 rep

ladoras. Kwhos eon Lnhibidoms por e l producto finalde la

secuenoir en que actúm. Adenas, algunas enzimas remado-

ras eon activadas o eetimdadas por metabolitos especifi-

cos y a veces por su propio sustrPto. El te rcer n ive l en e l que Be e j e m e l a regulacidn m 2

t a b b l i c a e s a trav6s del oontrol genetic0 de l a velocidad

de s i n t e s i s de l a enzfima. L a velocidad de secuenaia m= tabblica determinada debe depender de l a concentracidn de

la f o m activa de cada enzima en l a secuencia, la oual, a

su vez, e s e l r e d t e d o de un equi l ibr io entre l a veloci-

dad de s h t e s i a y de I= degradacidn. La8 enzimae que se

h a l l a n siempre presentes en cantidades casi constantes en

una determinada c 8 l u l a recibe e l nombre de enzima8 consti-

tutivas, l o s que solaente s intet izan en respuesta a l a prs_

sencia de ciertos susitratos ae llaman enzimas inducidas.

Los genes que eapec5fj.oa.n la d n t e s i s de lae enzimae indu-

'cidae se hallan generalmente bajo represibn, y entran en

juego, es dec i r , erperimentan des-represibn, solamente c c

mo respuesta a la preeencia de un agente inductor.

Una secuencia completa de enzima puede s e r reprimida

o inducida oomo si &ma un grupo, su s l n t e s i s esta codí-

ficada por un gnrpo del genes consecutivos DRA, llamado o=

rbn, que puede ser reprimido o des-reprimido en conjunto.

Otro tipo de repI.esidn e n a i d t i c a , c o r r i e n t e en las

bacterias, es e l que f b o i o n a en l a represidn de enzimas catab6licas. Es una observaalón general de la glucoaa, que

es e l combustible d s directo paxa la mayorfa de las celdas que pueden suprimir la. fonnaci6n de ensimas indíciblee que

u t i l i z a n a alguna otra. mol6cula combustible. La presencia

de glucoes en el mediode cu l t ivo reprime l a ~galactosida-

sa incluso en la presencia de lactoss, A d cuando hay gl-

c o s a disponible o o m ~ combustible, las bacterias prefieren

la ruta catabdl ica &S p r i m i t i v a , e8 d e c i r l a g l u c o l f t i c a

o fementat iva , desco.nectando cualquier otra ruta oats%

lica suministradora de energfa. La represibn e s tambien un reflejo del principio de

economfa c e l u l a r , cuando las enzimas neoesarias para l a b i o s i n t e s i s ya no se :necesita dejan de producirse.

Kuchas enzima6 iJaplicadas en la b ios intes ia ce lu lar

exiben un tipo de respuesta a h i l a r ; por ejemplo, las c&

l n l a a de E. c o l i an d e e a m l l o en un medio ain nin& ami-

nodcido contiene toda13 lae enaimas neoesariae p ~ l r la blz shteeie de l o s 20 amino&cidos escenc idee . Por 01 oontrareo

cuan& e l medio aontione estos amino&cidos, las enzima6 b i b

s intet iesntee oomspondientes fa l tan casi por aompleto.

Estas, cuya cantidarl IM reduce en presenaia de mu prod-

tos terminales 8on enzima8 represibleu. Aqusllos produotom

terminales metabdlicoe cuya i n t m d u c c i h en un medio de o+

t ivo disminuye espeoificamente l a ooncentncidn de una enzima

se conoae como compresor .

"

Sustratos como la: l a c t o s a cuya introduccidn en M medio

de cultivo especffioo Ir cantidad de una enzima, Be l e con. co oon el nombre do inductor, y eug enzimas correapondientes

se denominan enzima8 induciblos.

Las respuestaa in.dicidae y repreeivas son igualmente

dtilom para las bacter5da; cuando 80 requieren enzima8 para transformar ' u n a mof4cula a l iment ic ia espec í f i ca o para 8% htizar un oonatiiqyente celular necesario, ellas e s k n pr_e aentee, ouando no son neceaarias, se hayan ausentes.

Un gmgo ospeoicrl de moldculas U-6 r o p m s o n a w- dm 8 deoidir orrdndo 80 han da haoer la8 mlisula~ de IO&, q1y) 0od.ifb.n pam mudhas de l a 8 enzimrr hdwibles y z ' . p e

8ibl.a. C a d a raproeor ' b l o q u e a la e h t e e i s & una o pm"

t 0 h . 0 Est08 ~PFOSOBOS m9 OOdiflCd.06 &d í@d qU0 tO&U

l a 8 de& pmtefnae, por DEA cromoebmico; los m e que 00-

dificpa para e l l 0 6 ~d I- -S reguladom~.

S. ha confinnado reciontemante qw las mol&uLs m-

C o ~ O u ; m k m s n k b , lma unidad d. Ynflr8a os definid8

00- la cantidad do r m i l a s r que pmduce un lo$ d.o itismi+ cidn an Ir intansidail del color raul da1 oonrpueeto mila-

szcyodo bajo ciertas Condicionas.

1Gluco:milasa es una enzima e x o - p a r t i d o r e , y r e m u e v e unid.=.i.es suce-

E i v z s de g lucos= , cie t e r m i n a l e s no r e d u c t o r a s d e ICE c&Lcn?r, 2,: r u s t r z t o . La

a c c i 5 n de l a e n z i m a d e c r e c e c u a n d o e s e n c o n t r E d o l o s e n l a c e s -l,Ó, como en

m i l o ? c c t i n ; o g lucogcno .

(en l a prioticst se red.izo a 1 S5 rav/min. Real izar z a uu~pencibn con 5 ml. de soluoidn salina

isotbnico e s t e a a cada tubo y cuantifiaar bacterias/rnl.

Aspergillus niger. 1. Preparar 3 matraoee que contenga 20 ml. de medio da

cultim PDQ 2. Ester i l izar .

3. Inoculas. 4. Incubar 7 dfaa a 2 8 O C

5. Eíacer una mspencibn oon d.. de a@a eeter i l y

dos gota0 de g l ioero l

6. Agitar con perlas de vidrio e s t o r i l

7. Cuantificar e:l # de esporas/ml. en canara de Neubauer. b'

1. Pmp;rror m n;;~traz E. de 250 ml. quo contenga 75 d. de l o s s i g u i e n t e s medios. (composicidn g/ l )

EXPEXEZS!lD A Y B' Y 1 M2 Almidon eoluble - 10.0

(m41 9 0 2 1 .o 1 .O

T p 0 4 0.5 0.5 Una o. 25 0.25 CllL306a 8 .o - ~.

El pH; ' 4.5 ....o H O ~ B

6.5 ..... Bacter ias

EnERmEm?O c El medio 3 se pre~para en relocidn 1 :l de loo rnedioe

uno y dos.

E ) I p E 3 l E F I Q D Colocar 67.5 m l . del medio dos y despues de 18 hs. de

incubacidn se agrega 7.5 ml. de solucidn g lucosa estor i l

d 0.8 $. Inoculacidn e incubaci6n de los matraces.

Inocular 1 d. da esporas con ~123. concentracidn de

I d o 7 esporas/nl. (temperatura ambiente y 115 revtlrnin.) t

D) DETERKIUCIClN DE ACTIVIDAD DE (3wJCOBwLA8b.

. . . . . . ...... I . cywd pah ... L... "" 1. . ... . . . . . . : . . . . . . .

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . , " " . . . . . . . . . . . . . . ". . aog -~ ...

. . . . . . . . . . .

!

I . . ........ . j "" ........ ...... . . . . . . . . . . ~ : " . . . -1 . .

. . . . .. - .. . . . .

. . . .

.

I .

. . . ~. . . . . . . . . . . . . "

. . . . . . . . . ." . . . . . . . . . . -. -. ...... . .

PH

Medio 1.- En éste medio comenzamos a t r a b a j a r c o n un pH elevado, creemas

que fui, debido a que a l someter a p r e s i o n e s y temperaturas elevadas los medios de

c u l t i v o p a r a s u e s t e r i l i z a c i 6 n , se produjeron cambios en los componenhs de l o s - medios ( h i d r o l i s i s ) l o q u e p r o v o c ó a l t e r a c i o n e s en les v a l o r e s d e pH que ya habi=

mas a j u s t a d o . En i s t e c a s o el pH aumentó. Nuestre pH i n i c i a l f u é de 7.2 y cenforme

avanzó el proyecte hubo un descense en l e s v a l o r e s d e pH debido a l a a c t i v i d a d - microbiana o fermentac ión de l a g l u c o s a q u e t e n í a n l o s micreorganismos cem s u s t r z

t e y a1 f i n a l l l e g ó a s e r d e 6.9; se esperaba que e l pH b a j a r a más rápidamente y

l l e g a r a a t e n e r un v a l o r menor que el obtenide pero l o s r e s u l t a d o s no f u e r o n psi

y creemos que se d e b i ó a que e l pH i n i c i a l no era e l adecuado.

Medio 2.- En el medio dos que contenía como mica fuente de carbono almidón

l a s var iac iones en l o s v a l o r e s d e pH en l a s p r i m e r a s e t a p a s , f u e r o n n u l a s , p o s t e -

r iormente se observó una l i g e r a d i s d n u c f h en e l pH, lo que nos indicé el c o d e 2

ze de l a degradac i in de l a g l u c e s a ya l i b : r e p r o v e n i e n t e d e l a h i d r o l i s i s d e l h:

din .

Medio 3.- En éste medio se observ,aron fenimenes m u y i n t e r e s a n t e s , ya que -

ciim c o n s t a n t e d e l pH en l a p r i n e r a e t a p a h a s t a las 15 pr imeras hsras fué debida a

la u t i l i z a c i 6 n d e 1 a : g l u c o s a carno f u e n t e a l i m e n t k i a ; a p a r t i r de é s t e p u n t o les

v a l o r e s e n el pH aumentan muy Ligeramente y pos ter iormente se mantienen censtantes .

P a r e c e s e r q u e d e s p u é s d e l a lectura de 1;n hora 15 cemenzó a a g e t a r s e l a g l u c o s a y

después de c ierto t iempo ,cemenzaron a a c t u a r l as g l u c e a n i l a s a s q u e se encentraban

i n h i b i d a s por l a p r e s e n c i a d e l a g l u c e s a , i s t o ncp prevoca un aumento en e l pH imq

d i a t o . c e s a q u e se observó en las últ imas :Lecturas ya que pudimos ver que el pH ne

v a r i a v a .

Nedio 4.- Es t e medio contenía a lmidón cme fuente de carbono y a l a s 18 h r s

s e le agregó g lucosa , l a r e s p u i s t a d e l o s n i c r o o r g a n i s m o s a éste t r a t a m i e n t o se ob serv5 muy c laramente en l o s v a l o r e s d e pH ya que durante las pr imeras horase1

-

Actividad Enzinatica.-.

Medie 1 (glucesa) .- En es te medie ya que l a unica fuente de carbono era l a glucosa se

esperaba obtener valores rides de la . ,act ividad de las enzimas gluceamilasas debido

a que en un medio s i n almidón és tas enzimas no son necesar ias , s in embargo nuestras

lecturas nos dieron ciertos valores de actividad de glucoamilasas, que aunque muy

b a j o s , exist ían ; ÓSto quizá se deba a interferencias en las muestras de algunas - sustancias que no se sedimentaron cornp1et;amente a1 centrifugar.

Medie 2 (almidón) .- En es te melio se sbserva una actividad de l a s glucoamilasas como era

de esperarse, con un aumente progresivo h;asta l a lectura de l a hora 10 , después de

l a cual se observa un ligero descense en :La act iddad quizá debido a que en e l me-

dio ya hay glucosa disponible producto de l a h i d r o l i s i s d e l almidrjn. Esta glucosa

presente en e l medio e je rce c ier ta in f luenc ia inhib i tor ia en l a a c t i v i d a d de las - enzimas amilasas no s d l o porque l a actividad de éstas Últimas ya no es t i n d e t e r e

nante para l a subsistencia del micreorganismo s i n o que quizá podría hablarse de una

especie de retreregulación p o r productos :finales siende par supuesto el producto - f i n a l , l a glucosa. Por lo tanto, mientras l a glucosa está presente, l a actividad - de amilasas disminuye y hasta que Ó S t o vuelve a desaparecer del medie per que se - consumi.8, hay una nueva inducción en l a actividad enzimahica, ya que l a Última l e c

tura nos demostró un nuevo y l i g e r o aumento en la actividad de l a s glucoamilasas.

Medio 3 (glucosa-almidin) . - Los datos sbtenidos bajo é:Stas condicianes nutricionales son muy re

presentatives de lo que es l a represión catabolica y l a inducción enzimatica, ya - que & t e medio contenía glucosa y al.nidón, se pudo observar inicialmente una a c t i -

vidad enzimCica extrexadanente baja ( l o que se esperaba era no r e g i s t r a r ninguna

muestra de actividad enzimatica pero parece que pers is t ieron las nis:nas interferel l

c ias ) debido a que ex is t ía g lucosa en e l medio y is ta inhibe parece que a nivel de

1 4 6 6 4 0 t r a n s c r i p c i j n l a síntesis de las enzimas glucearhilasas y además parece que también

hay una i n h i b i c i ó n a n i v e l e n z i m a t i c o d e l a ac t iv idad de las a m i l a s a s . Se mantuviz

r o n c o n s t a n t e s esos n i v e l e s h a s t a la lectura de l a hera 15 en l a cual comienza a - n o t a r s e un l i g e r o aumento en l a a c t i v i d a d d e l a s g lucoami lasas . E s t o n o s i n d i c a - que a l a g o t a r s e l a glucosa d e l medio y no exis t i r o t r a f u e n t e d e c a r b o n o d i s p o n i b l e

además d e l almidón comienzan a i n d u c i r s e l o s necanismos para la s i n t e s i s de énzinas

g lucoami lasas

nos demuestra

nuevamente de

Medio 4

y is tas comienzan a a c t u a r .

L a u l t i m a l e c t u r a q u e se h i z o (diez horas después de l a a n t e r i o r )

un descenso en l a a c t i v i d a d e n z i m a t i c a , d e b i d o quizá a l a predenc ia

g l u c o s a en e l medie como producto de l a degradac ión de l a lmidón.

(almidón -glucosa a las 18 h r s . )

L e s r e s u l t a d o s o b t e n i d o s e n éste medie sen muy s i m i l a r e s a les que

inducc ión enz imat ica que se l l e v a n a cabo en las células microbianas por l a i n f l u -

e n c i a d e l t i p o d e f u e n t e de carbono que se l e s u m i n i s t r e ; de ÓSta .anera observa-<-

mos los fenómenos s i g u i e n t e s t E n el medio tres que contenia (g lucosa-almid6n) las

enzimas glucoamilasas estuvieron reprimitlad ya sea a n i v e l g e n e t i c s ( r e p r e s i ó n ca-

t a b o l i c a ) y no se producían o s implemente fueron inhib idas , es d e c i r e s t a b a n p r e -

sentes pero no p o d í a n a c t u a r ; d e c u a l q u i e r nodo s u a c t i v i d a d era extremadanente ba j a y no aument6 s i n o h a s t a d e s p u é s . d e varias h o r a s , cuando ya l a g l u c o s a p r e s e n t e

!

en e l medio s e h a b í a a g o t a d o , sólo h a s t a e n t o n c e s y trás Un per iodo de a d a p t a t i ó n las enzimas glucoamilasas comenzaron a a c t u a r p a u l a t i n a m e n t e .

En e l medio c u a t r o el e f e c t o d e r e p r e s i h c a t a b o l i c a e i n h i b i c i ó n e n z i 4 i

t i c a es muy c l a r o , ya q u e i n i c i a l m e n t e d e b i d o a la presencia de carbón como unica

fuente de carbono se observó l a p r e s e n c i a y a c t i v i d a d d e l as enzimas glucoamilasas

pero, en e l momento en que s e i n t r o d u c e l a g l u c o s a bay una r e p h e s i ó n c a t a b o l i c a de

las enzimas g lucoamilasas , éstas se d e j a n d e s i n t e t i z a r y las ya p r e s e n t e s se ven

inhibidas en SU a c t i v i d a d y comienza a funcionar cas i ih icamente e l mecanism para

l a degradación de la g l u c o s a .

LOS medios n o y d o s n o s s i r v i e r o n p a r a c o n o c e r y darnos una idea de

c i n e t i c a o veloc idad en la degradación de determinado sustrato y poder comparar - e n t r e si el grado de ac t iv idad de l a e n z i m a q u e n o s i n t e r e z a b a b a j o d i s t i n t a s c o z

d i c i e n e s n u t r i c i o n a l e s . E l medio dos sobre t edo es clave ya que marca un patrón de

a c t i v i d a d e n z i m a t i c a o de comporta,niento que presenta este t ipo de microorganismas

en presencia de a lmidón como unica fuente de carbono y que se r e p e t i r í a en les dos

s i g u i e n t e s medios (medio 3 y 4) s i no fuera por las v a r i a c i o n e s q u e c a u s a l a pre-

s e n c i a d e una f u e n t e más a c c e s i b l e d e c a r b o n o como lo es l a g l u c o s a .

E l medio u n o , u n i c a m e n t e r e p r e s e n t a r i a l a ne ac t iv idad de c ier ta enzima

e n a u s e n c i a d e s u s u s t r a t o , a c t i v i d a d q u e e n e l caso de nuestro experimento s i d a

tectarnos pero que posiblemente se deba a razones que ya expusimos.

N u e s t r o s r e s u l t a d o s e n g e n e r a l s 0 n c o h e r e n t e s y l l e v a n c ier ta l ó g i c a , d e

mostrandonas casi c l a r a m e n t e la e x i s t e n c i a d e é s t o s f e n o m e n o s d e r e p r e s i ó n c a t a b i

U c a e inducción enzimática .

Aunque e n r e a l i d a d n u e s t r s r e s u l t a d o s s o n p o c o e x a c t o s y nos cos tÓ t rabs

js i n t e r p r e t a r l o s , c o s a que no se p u e d e l ' o g r a r s i n c o n t a r a n t e s c o n una buena base

t e o r i c a de lo q u e e s t á o c u r r i e n d o ; es d e c i r , f r a n c a m e n t e l o s experimentos que efec

tuanos no nos hubieran serv ido de nada , si no hubieramas sabido l o que esperabamos

obtener . S in embargo, fuó v a s t a n t e i n t e r e s a n t e e i n s t r u c t i v o i r d e s c i f r a n d o y en-

contrando l a s r e s p u e s t a s d e cada uno de los sucesos con los que nos fuimos topan-

d o ; ya que sóla de é s t a ; c a n e r a se a l c a n z a un verdadero conocimiento de los fenÓ@

nos y procesos que ocurr ieron en los microorganismos con l o s que t raba jamos y que

nos interesaba aprender .

.

Respecto. a l a i n e x a c t i t u d d e n u e s t r o s r e s u l t a d o s , e s t o s s e pueden a t r i b u i r a

muchos de los problemas con que nos enfrentamos durante e l d e s a r r o l l o d e l p r o y e c t o .

l o s p r i c i p a l e s p r o b l e m a s f u e r o n ; Que la a g i t a c i ó n de los : ledios de cul t ivo no f u é

l a adecuada, ya que l a s encubadoras y l o s a g i t a d o r e s c o n q u e t r e a j a m o s no al can-

zaban a efectuar l a s revoluciones por minuto que se r e q u e r í a n y por l o tanto;.la a:

r e a c i ó n no f u é s u f i c i e n t e p a r a un crecimients optimo de microorganismos.

Debido a l a f a l t a d e d i s p o n i b i l i d a d d e m a t e r i a l , l a s ultimas muestras que trz C a o s no se pudieron hacer por duplicado.

La d e f i c i e n c i a en l a s maquinas centrifugadoras creernos que jugó un papel im-

portante en las d e s v i a c i m e s de nues t ros resul tados , ya que a l no obtener una cen-

t r i f u g a c i ó n adecuada de nuestras muestras hubo p a r t i c u l a s q u e i n t e r f i r i e r o n e l l a s

lecturas f o t o c o l o r i m e t r i c a s y n o s d i e r o n v a r i a c i o n e s s i g n i f i c a t i v a s . ,.

Uno de los problemas más grandes que surg ieron y q u e d e f i n i t i v a +

mente inf luyeron en l a c a l i d a d d e n u e s t r o p r o y e c t o f u é gne p o r a s a r e s d e l d e s t i n o ,

nuestro tubos que contenían los e x t r a c t o s e n z i m a t i c o s p r o v e n i e n t e s d e A s p e r g i l l u s

n i g e r , los encontramos volteados en e l r e f r i g e r a d o r , y nos f u é i m p o s i b l e t r a t a r ék

tas muestras, es par eso que los r e s u l t a d o s , c o m e n t a r i o s y conc lus ioaes que apare -

cen en &te reporte ' corresponden Únicament,e a l o s datos o b t e n i d o s d e B a c i l l u s s u b -

t i l i s .

En real idad nos enfentratms c3n muchos proble~nas !nis r e t r a s a r o n

en e l t raba jo de l aborator io pero que ne vale l a pena mencionar, porque creernos q

que & t e t ipo de pkoblenas no inf luyeron en los r e s u l t a d o s o b t e n i d o s .

E:; .:22, Co!Y;ILTS EL I(03ZLO 3EL OF‘ERO!; ‘ROFIJZ;TO i O3 IbIOXO3?

5 s un mddelo h i p o t 6 t i c o que d e c c r i b e la r e p ~ l r x i d n d e la s f n t c s i s

p r o t e i c a p r o p o r c i o n a n d o un rnecanrsrno de l a i n d u c c i b r , c o o r d i n a d a , bacn:!o en

que una cecuanc ia de enzirms puede s e r i n d u c i d a , corno gru.-o, p o r un ~ 6 1 0 - i n 2 u c t o r . .ki p r e j e m p l o los B - c a l a c t o d i d o s i n d u c e n c o o r d i n a d m e n t e un g r ~

yo de 3 p r o t e f n a s , la B - g a l e c t o s i d a s a , l a E-calactosido-perrneasa 9 la B - t i o - & ~ l ~ c t 6 s i ~ o - e c e t i l - t r a n s f e r a s a , c o d i f i c a d a p o r t r e s g e n e s z, y y a , r e s y e c -

t ivzrnccte en la s e c u e n c i z d e l genoma 3e E. c o 1 . i . : ; i e n d o p r e c i e a s e n t e C s t e - m i c r o s i s t e n 3 l a b a s e d e e s t u d i o d e Jacob y Konod, e c t o s g e n e s e s t r u c t u r a l e s

r e p d z d o s por e l mismo g e n r e g u l z d o r , f u e l o cue llamaron operdn l a c . For - lo t a t o d e f i n i e r o n a l oper6n como un g r u p o d e g e n e s e s t r u c t u r a l e s f u n c i o n -

nalrnente re lFacionsdos, que en e l mapa c r o m o s 6 x i c o s e hallan s i t u a d o s e l uno

c e r c a ?tl o t r o , y q u e Fuc2r-n s e r p u e s t o s a f u n c i o n a r o impedidos coordinadk

mente L o r los mismos l o c i r e c u l a d o r e s .

c a t a b o l i t o d e r i v a d o de e l l a rebaja l a c n n t i d a d d e kl.';I'c i n t r a c e l u l a r , e s i m -

p o r t a n t e s e 5 a l a r como a f e c t z e s t a r e l a c i d n e l f u n c i o n a m i e n t o y l a e c o n o d a

c e l u l a r .

E l AWc e s u n m e t a b o l i t o cl?.ve para l a t r a n s c r i p c i 6 n d e t o d o s l o s

o p e r o n e s que son i n h i a i d o c p o r e l c a t a b o l i s m 0 g l u c 6 s i c o . Aunque s e descono-

c e l a forma en que e l c a t c b o l i t o d e r i v a 3 0 de l a g l u c o s a c o n t r o l a e l n i v e l - d e AMPc en l a c 6 l u l a , s e supone que l a i n h i b i c i d n puede o c u r r i r e n e l raso

de ATF a AWc s o b r e l a a d e n i l c i c l a s a o sobre l a enz ima que in terv iene en e l

paso de kMPc a AXP a c e l e r a n d o l a d e , ~ a d a c i b n .

Sin embargo su papel e s e s p e c i f i c o a Tesar de que no pronueve d i r -

r e c t a m e n t e la s € n t c s i s de Rflkm, s i n o que o p e r a p o r u n i 6 n de l a p r o t e i n a ac-

t i v a d o r a d e l g e n d e l c a t a b o l i t o (FAC).

PAC n o d i e n e i n f l u e n c i a s o b r e l a t r a n s c r i ~ c i b n m i e n t r a s no s e l i g u e

a e l l a a l ARPc; s d l o e n t o n c e s demanda la capacidad para e n l a z e r c e 2 l u c a r e s

bien e s p e c i f i c o s d e l DNA y, produciendo de e s t a menerk, aurnenta 1% rdpidez

de t r a n s c r i p c i 6 n d e operonas s e n s i b l e s a l a Glucosa , de nodo que l a s rnutacio

ne6 q u e b l o q u e a n s u f u n c i o n a m i e n t o g e n e r a n c d l u l a s a u e so3 E i m u l t h e a m e n t e - i n c a p a c e s d e u t i l i z a r un número c o n s i d e r a b l e d e a z u c a r t s d i f e r e n t e s .

Cuando e x i s t e , e n t o n c e s , un a ~ ~ m e n t o en l a t r a n s c r i p c i d n ( e n vez de

i n h i b i r l e ) p o r e l componente c e l u l a r , :;e denomina c o n t r o l F o s i t i v o .

3e c i e r t a m a n e r s F o d r i a m o s r e l a c i o n a r l a d e f i n i c i d n a n t e r i o r para

arnbos, pues an ambos c a s o s r e s u l t a q u e e l AKFc se r e l a c i o n a c o n l a r e g u l ~ c i 6 n

de l a e x r r e s i d n d e los genes . S in embargo l a l i t e r a t u r a e s p e c i f i c a que e l - Xli!Pc e s un s e w 3 0 mensa jero de l a acc idn hormond, en l o s t e j i d o s m i m a l e s - mientras que en l as b a c t e r i a s par t i c ipa como menza jcro en l a r c g u l x i 6 n de -

l a t r z n s c r i p c i d n d e los o p e r o n e s r e p r i m i b l e s por g l u c o s a .

En e u c a r i o t e s c u a n d o el AEiF'c s e h a l l a a c o n c e n t r a c i o n e s e l e v z d a s , - las c e l u l a s asumen un e s t a d o de i n a c t i v i d a d que s e c a r a c t e r i z a F o r bajos n i -

v e l e 3 de t r a n s p o r t e a c t i v o d e n u t r i e n t e s h a c i a e l l a s por una dcgr: :dacidn ra8

??ida de 5cic?os g a s o s y p r o t e i n a s , y p o r b a j o s n i v e l e s d e s i n t e s i s d e R!!A. - Por e l c o n t r s r i o , s i e l n i v e l d e AEFc e s b a j o a u g e n t r : la nbrorc idn de azucs -

res, s e a c e l e r a n las r e a c c i o n e s de s i n t e s i s y s e r e t a r d a n l o s I ' rocesos d e g r 2

d a n t e s t a l e s como l a cornbustidn de gra:szs. Todos e s t o s e f e c t o s d i v e r s o s p o s i

b l e m e n t e s e a un reflejo d e l h e c h o d e q*le l a s c o n c e n t r a c i o n e s e l e v e d a s de Al<Fc

e z t i n u l z n 12 E c t i v i d z d d e una d i v e r s i d . 3 d de cnzirnzs f o s f o r i l z d a s ( c i n a s a S ) y

e n z i m a s c o r r e s p o n d i e n t e s esten f o s f o r i l s d a s o no.

1~1.:;'~ pronueve 12 f o r m a c i d n d e m i c r o t ú b u l o s e n c g l u l a s e p i t e l i a l e c . - iG?c r e c i b e el nombre de segundo rnenEa5ex-o pornile transmite y zm.nlifica en - e l i n t e r i o r de l a c 6 l u l a las s e 3 a l e s q u f r n i c a s q u e l e l l e s a n a traves de l a -- e m c r e m e t i a n t e 12s hormonas, que eon :Los p r i m e r o s mensajeros.

S1 AkPc s e proc?uce apartir del ATP por una e n c i m a l o c a l i z a d a e n lz - n e n b r a n a c e l u l a r , 12 a d e n i l a t o - c i c l a s a , , ? n t i c i n z en 12 t r a n s n i s i O n s i n s g t i c :

d e l r i c t e x n e r v i o c o , f u n c i o n ? , r e g u l a n d o 12 d i v i c i 6 n c e l u l a r .

B1,AMPc desemFe3a un importante papel como mensajero parz detener - I

la reFr ridn de catabolito en cdlulac Frocaribticas, gracias a su capacidad

de unirse a la proteina FAC, la'cual asu vez, s t une a un locus especifico

de la región del operador , iniciando as5 la transcripcidn y sfntesis enzims

tica de las rutas metabblicas.

For lo tanto es posible que el AMFc funcione controlando el ciclo

celular de l o s euczriotes por su uni6.n a proteinas (reductoras) receptoras e 2

pecificas que asu vez, modulan la trxnscripcibn de ciertas genes de la cro-

matinq y alternativamente puede funcilonar activando a una protefna quinasa

tal corno la que reeula muchas onzimas, la cual, a BU vez, puede llevar a ca

bo de la fosforilaci6n de alguna protefna controladora de la velocidad de - repliczcidn o de trznscripcibn.

Así Icre,wlecibn de la expresidn gcn6tica en los eucariotes es m5.s

compleja. Las celulas eucariotas no tiene operones simples.

cdv-0 J. M . , Mnk; Beudaoion o f Biosyrlthytio Pathway8 - in Baoteria & Fungi. bual Review of Biochemistry; pp. 40, 943-948 , 1971

Wintsih, W. #icrobial bmi~osss.

PP. 273.

c